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正交试验法优选乌骨藤的提取工艺研究
目的 优选乌骨藤的提取工艺.方法 采用正交试验,对加水量、提取时间、提取次数进行考察,以乌骨藤中绿原酸含量作为评价指标,优化乌骨藤的佳提取工艺.结果 通过正交试验考察,乌骨藤提取的佳工艺为:加8倍量水提取3次,每次提取1h.结论 优选的乌骨藤提取工艺重现性良好,稳定可行.
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通关藤新甙B的提取及体外抗肿瘤活性研究
目的 研究乌骨藤中的有效成分通关藤新甙B提取分离工艺,并对其进行系统的体外抗肿瘤活性研究.方法 及结果采用硅胶柱分离的方法,从乌骨藤中提取分离通关藤新甙B,经HPLC测定,得到含量达到99.16%的产品,收率1.75%,含量达到90.2%的产品,收率为5.8%;采用MTT法,测试通关藤新甙B对人胃癌SGC-7901细胞,人慢性髓原白血病K562细胞、人肝癌Bel-7402细胞,人肝癌SMMC-7721细胞、低分化胃腺癌BGC-823、低分化胃癌MKN-45、恶性黑色素瘤A375、结肠腺癌LoVo、直肠腺癌HR-8348、人卵巢癌HO-8910细胞的体外抗肿瘤活性.结论 通关藤新甙B对人胃癌SGC-7901等10株癌细胞具有较强的体外抑制活性,其活性超过消癌平注射液和乌骨藤甾体总甙,是消癌平注射液中的主要成分和有效成分,开发潜力巨大.
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乌骨藤及其制剂的研究进展
目的本文从乌骨藤的化学成分、药理、临床作用及其制剂等方面进行了综述,阐述了乌骨藤在治疗癌症、平喘、降压、调节机体免疫等方面的机制和作用.
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乌骨藤超临界萃取油的气相色谱-质谱联用分析
目的 分析乌骨藤超临界萃取挥发油的化学组成.方法 采用超临界二氧化碳萃取技术提取乌骨藤中的挥发油,用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析其化学组成.结果 在乌骨藤超临界萃取物中共鉴定出31种物质,占挥发油总量的81.00％.其中,含量高的组分有二十四烷、油酸、油酸乙酯、亚油酸、二十八烷和亚油酸乙酯.结论 采用超临界二氧化碳萃取技术制备乌骨藤挥发油中含有抗氧化、免疫调节和抗肿瘤的有效成分,与乌骨藤的药理活性相一致.该研究为开发利用乌骨藤资源提供了科学依据.
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民族药乌骨藤抗肿瘤药理活性及机制研究进展
乌骨藤为一种常用民族药.近年来,在基源、化学成分、药理和临床应用等方面人们对其进行了广泛而大量的研究,尤其在抗肿瘤方面乌骨藤有着很好的开发前景.文章就乌骨藤抗肿瘤药理活性及机制研究进展进行综述,以期为进一步研究乌骨藤和开发抗肿瘤创新药物提供依据.
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乌骨藤提取物抑制慢性髓性白血病(K562)细胞增殖
目的 提取乌骨藤中抗肿瘤成分,探讨其对慢性髓性白血病K562 细胞增殖的抑制作用及机制.方法 设计乌骨藤提取物浓度梯度、时间梯度干扰K562 细胞增殖,通过显微镜观察细胞形态、MTT 法检测增殖抑制率.结果 随着浓度和时间梯度的递增,K562 细胞增殖速度及细胞形态受到了明显的影响.结论 乌骨藤提取物对慢性髓性白血病(K562)细胞增殖有明显的抑制作用.
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乌骨藤对裸鼠胶质瘤作用的实验研究
目的:观察乌骨藤对裸鼠皮下胶质瘤的抑制效应.方法:建立裸鼠胶质瘤移植模型,随机分为5组,每组10只,空白对照组(生理盐水组)、乌骨藤组、莪术组、猫爪草组和阳性对照组(替莫唑胺组).观察裸鼠的生存状况,计算肿瘤体积,计算肿瘤抑制率.结果:给药治疗后,抑瘤率乌骨藤组38.3％、莪术组41.7％、猫爪草组34.2％,增殖率乌骨藤组58.4％、莪术组57.2％、猫爪草组60.7％,乌骨藤抗肿瘤效果介于莪术和猫爪草之间,但各组中药在抗胶质瘤方面无明显差异(P＞0.05).各组裸鼠体重组间比较,差异无显著性意义(P＞0.01).结论:乌骨藤对裸鼠皮下胶质瘤的有显著的抑制作用.
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乌骨藤总皂苷的提取工艺研究
目的:优化乌骨藤总皂苷的提取工艺,建立乌骨藤总皂苷的含量测定方法.方法:采用L9(3(4))正交试验,以总皂苷含量为评价指标,确定总皂苷的提取工艺,并采用香草醛-高氯酸比色法,测定总皂苷的含量.结果:佳提取工艺为70%乙醇6倍量,回流提取3次,每次2h;总皂苷的浓度在0.032mg/mL-0.32mg/mL范围内呈良好的线性关系,回收率为98.73%,RSD:1.21%.结论:确定的工艺稳定可行,适合工业化生产;建立的含量测定方法简便、快速、重现性好,为乌骨藤的新药开发奠定了基础.
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乌骨藤多糖的提取工艺研究
目的:优化乌骨藤多糖的提取工艺,建立乌骨藤多糖的含量测定方法.方法:采用L_9(3)~4正交试验,以多糖含量为评价指标,确定多糖的提取工艺,并采用苯酚-硫酸法,测定多糖的含量.结果:佳提取工艺为100℃.加水8倍量提取3次,每次1h;葡萄糖的浓度在0.004～0.014 ms/mL范围内呈良好的线性关系,回收率为99.72%,RSD:O.63%.结论:确定的工艺稳定可行,适合工业化生产;建立的含量测定方法简便、快速、重现性好,为乌骨藤的新药开发奠定基础.
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乌骨藤辨考
目的:弄清中药乌骨藤的基原.方法:查阅文献并整理考证.结果:乌骨藤存在严重的同名异物现象,文献记载作乌骨藤用的有通光散Marsdenia tenacissima及白叶瓜馥木Fissistigma glaucescens等多种,而药用记载早见于<滇南本草>,历代诸家对乌骨藤的功效看法一致.结论:乌骨藤应为萝藦科植物通光散Marsdenia tenacissima.
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乌骨藤提取物通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制黑色素瘤细胞的活力并诱导细胞凋亡
目的:探究乌骨藤提取物(Marsdenia tenacissima extract,MTE)对黑色素瘤细胞活力及凋亡的作用及机制.方法:用不同浓度(0、50、100和200 mg/L)MTE处理小鼠皮肤黑色素瘤B16-F10细胞24 h或不同浓度MTE处理不同时间(0、24、48、72和96 h),MTT法检测细胞活力.流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞增殖、凋亡和PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白的表达,同时检测通路激动剂胰岛素样生长因子1(IGF-1)处理细胞后p-PI3K及细胞增殖和凋亡相关蛋白的表达.结果:根据预实验结果,选择MTE作用时间为72 h.MTE浓度为100 mg/L和200 mg/L时能明显抑制B16-F10细胞活力及增殖相关蛋白Ki67和PCNA的表达,并且还可诱导B16-F10细胞凋亡,提高凋亡相关蛋白cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的蛋白水平;同时,MTE还可显著降低p-PI3K、p-AKT和mTOR的蛋白水平;此外,激动剂IGF-1可明显减弱MTE抑制细胞活力及诱导细胞凋亡的作用.结论:MTE可通过下调PI3 K/AKT/mTOR通路活性抑制黑色素瘤细胞活力,诱导细胞凋亡.
关键词： 乌骨藤 黑色素瘤 细胞活力 细胞凋亡 PI3K/AKT/mTOR信号通路 -
乌骨藤药材中绿原酸的含量测定研究
目的 建立RP-HPLC测定乌骨藤药材中绿原酸含量的方法.方法 采用C18柱,流动相:乙腈-0.4%磷酸(10:90),流速:1.0mL/min,检测波长:327nm.结果 绿原酸在0.126～0.840μg的范围内线性关系良好,相关系数为0.9996;平均回收率为98.13%;RSD为1.13%.结论 本方法简便快速,分离度好,结果准确可靠.
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消癌平治疗晚期消化道肿瘤的护理
消癌平为中药乌骨藤提取物的商品名,含有多粉、生物碱和皂苷等有效成分,有明显抗肿瘤活性.临床应用于肝癌、胃癌、食管癌等消化道肿瘤的治疗,具有疗效好、毒性低的特点,可提高患者机体免疫力,改善晚期肿瘤患者的生存质量,延长生存周期[1].
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乌骨藤制剂诱导人肝癌细胞Bel-7402凋亡的实验研究
目的:探讨乌骨藤制剂对人肝癌细胞Bel-7402株的影响并初步探讨其机制.方法:分别用不同浓度的乌骨藤制剂处理人肝癌细胞Bel-7402,未经药物处理的细胞为阴性对照组,采用MTT法检测肝癌Bel-7402细胞增殖、流式细胞术检测人肝癌细胞Bel-7402的凋亡情况以及p53蛋白的表达.结果:不同浓度的乌骨藤制剂(10mg/ml,20mg/ml,40mg/ml)处理肝癌Bel-7402细胞后,其增殖受到抑制,作用24h的抑制率分别为11.57％、21.09％、31.27％,48h的抑制率为27.55％、35.95％、45.13％,随着药物浓度的增加(20mg/ml,40mg/ml,80mg/ml)细胞凋亡显著增加,凋亡率分别为(12.2±0.67)％、(17.4±0.69)％、(22.9±1.38)％,而p53蛋白的表达也随着药物浓度的增加而增加.结论:乌骨藤制剂能够抑制人肝癌细胞的增殖,诱导其凋亡,作用机制可能与激活p53基因有关.
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HPLC法同时测定乌骨藤中通关藤苷A和D的含量
目的:建立测定乌骨藤药材中通关藤苷A和D含量的HPLC方法,并对不同产地药材进行测定.方法:采用Agilent TC-C18色谱柱(150mm× 4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.05％磷酸(37∶63),流速1.0 mL·min-1,检测波长210 nm,柱温25 ℃,进样量10 μL.结果:通关藤苷A和D的线性范围分别为3.0390 ～7.0910 μg(r=0.9997)和2.4651 ～5.7519 μg(r=0.9991),平均回收率(n=6)分别为99.7％(RSD =2.6％)、99.4％(RSD=2.5％).结论:本法准确,重复性好,专属性强,可控制药材的质量.且不同产地药材含有的2个成分的含量有一定差异性,其中云南含量高,可指导临床用药.
