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凹土玉米芯垫料提取物对细胞毒性的研究
目的:研究凹土玉米芯垫料对细胞毒性作用.方法:将凹土玉米芯,玉米秸,普通刨花垫料物质的丙酮提取物分别加到H22-H2D8细胞中培养,测定每个培养孔细胞的总蛋白量,计算细胞的半数致死量(LD50)；MTT法检测不同垫料丙酮提取物对H22-H2D8细胞增殖率的影响,用6级毒性分类法进行毒性分级.结果:普通刨花垫料LD50＜3 g·L-1,玉米秸垫料LD50＜20 g·L-1,凹土玉米芯垫料LD50＞40 g·L-1.在垫料提取物浓度为10 g·L-1时,普通刨花的细胞毒性5级,玉米秸的细胞毒性为2级,凹土玉米芯的细胞毒性为1级；凹土玉米芯垫料组细胞增殖率显著高于玉米秸组和普通刨花组(P＜0.01).结论:普通刨花的细胞毒性大,凹土玉米芯的细胞毒性小,玉米秸、普通刨花垫料物质均有较大的细胞毒性,其毒性显著高于凹土玉米芯.
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过敏性结膜炎变应原检查
过敏性结膜炎是一种反复发作、双眼发生的变应性眼病,多见于儿童及青少年[1].我们将本院1996年8月至1999年8月在我科就诊的23例过敏性结膜炎青少年患者资料进行总结,旨在探讨过敏性结膜炎的常见变应原,分析引发过敏性结膜炎的变应原种类.1.资料与方法:(1)对象:1996年8月至1999年8月因典型眼部症状就诊于我院变态反应门诊的青少年患者23例,均根据文献[1]方法确诊为过敏性结膜炎.其中男性15例,女性8例.年龄4～18岁,平均10.48岁.4岁1例,8～14岁12例,15～18岁10例.病程0.5～12.0年,平均3.94年.(2)方法:采用皮内试验确定变应原类别.检测18类气传变应原:室内尘土、垫料、枕垫料、多价兽毛、多价羽毛、春季花粉Ⅰ组、春季花粉Ⅱ组、夏秋季花粉、螨、烟、昆虫、蟑螂、蒿属花粉、床垫料、豚草花粉、多价真菌Ⅰ组、多价真菌Ⅱ组、多价真菌Ⅲ组,其中有些变应原为单价,有些则为多价.全部抗原均由中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院提供.皮试浓度:除蒿属、豚草花粉为1:1 000外,余均为1:100.注射量:皮内注射变应原0.02～0.03 ml,15 min后观察速发反应,24h后观察迟发反应.结果判断:皮试风团＞0.5cm者为阳性反应.
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凹土玉米芯垫料对KM小鼠安全性影响的研究
目的 观察非专业加工制作的普通刨花垫料、玉米秸垫料和凹土玉米芯垫料对KM小鼠体质量、血液生化指标、脏器病理组织学变化等的影响.方法 KM小鼠80只,随机分为4组,每组20只,雌雄各半,分别使用普通刨花、玉米秸和凹土玉米芯垫料,对照组不使用垫料,在相同饲养环境下饲养4周后,观察相应指标.结果 凹土玉米芯组、玉米秸组与普通刨花组比较,小鼠体质量无显著性差异,P ＞0.05;普通刨花组雄性小鼠在第3周时体质量明显减低,与凹土玉米芯组比较有显著性差异,P＜0.05.与凹土玉米芯组比较,普通刨花垫料组雌性、雄性小鼠的乳酸脱氢酶含量均有显著性升高,乙醇脱氢酶有显著性降低.普通刨花组小鼠与凹土玉米芯组小鼠比较谷丙转氨酶含量显著升高,玉米秸垫料组小鼠与凹土玉米芯组小鼠比较谷丙转氨酶升高.各组KM小鼠大体观察及解剖观察均未见异常,镜下观察组织切片,肺、心脏、肝、脾、胰腺、肾、膀胱、睾丸、卵巢均未见有意义的病理改变.结论 凹土玉米芯垫料对小鼠的体质量及生化指标的影响较小,是实验动物接触性长期使用比较理想的垫料.
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凹土玉米芯垫料对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶系的影响
目的 观察凹土玉米芯垫料对大鼠肝脏细胞色素P450(CytP450)、细胞色素b5(Cytb5)含量及大鼠肝微粒体CYP1 A2和CYP2E1活性的影响.方法 将SD大鼠随机分为普通刨花组、玉米秸组、凹土玉米芯组和对照组,饲养30 d、60 d、90 d时测定大鼠肝脏微粒体CytP450、Cytb5的含量和CYP1 A2,CYP2E1活性.结果 60-90 d时普通刨花组、玉米秸组与空白对照组之间CytP450含量有显著性差异(P＜0.05),凹土玉米芯组与对照组之间没有显著性差异(P＞0.05)；肝微粒体Cytb5含量、CYP1 A2、CYP2E1活性各组均没有明显差异(P＞0.05).结论 凹土玉米芯对大鼠肝脏细胞微粒体CytP450、Cytb5、CYP1A2和CYP2E1没有诱导或抑制作用,普通刨花组对大鼠肝CytP450有较强的诱导作用,玉米秸也有不同程度的诱导作用,但低于普通刨花的诱导作用.
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比较工作状态下杨木刨花与玉米芯垫料的物理性状
目的 比较在工作状态下两种玉米芯(大颗粒和小颗粒)和杨木刨花垫料的物理性状,以探讨更有利于大、小鼠饲养的实验动物垫料.方法 在国标GB 14925-2010环境标准范围内,在鼠盒内添加同体积垫料,通过吸水试验、干燥试验、保温试验、粉末率测定,比较两种玉米芯(大颗粒和小颗粒)和杨木刨花3种材料的物理性状.结果 鼠盒内垫入相同体积的垫料以杨木刨花质量轻;大颗粒玉米芯吸水率为高,其次为小颗粒玉米芯,杨木刨花吸水性低;杨木刨花的干燥速度明显快于玉米芯,两种玉米芯垫料干燥速度相对较慢;杨木刨花的保温性能优于玉米芯,但粉末率高于玉米芯.结论 不同材质和规格的垫料其物理性状参数不同,有其优势也有不足之处.在日常饲养工作中,选用哪种垫料,需结合实验室的具体需求综合考虑.
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我国实验动物垫料质量控制的研究
目的 对北京地区大量使用的不同材质、不同产地的实验动物垫料进行研究,了解不同材质垫料有害物质水平,为实验动物垫料地方标准的制定提供参考.方法 按照现行方法,对垫料原材料进行物理特性、化学污染物及微生物污染物水平检测.结果 若依据《GB 14924.2-2001实验动物配合饲料卫生标准》的规定,各产地的玉米芯垫料及刨花垫料都符合对重金属、有机磷、有机氯农药及其它有机农药污染的要求,而微生物污染,都有不同程度的超标.结论 本实验结果可作为制定实验动物垫料地方标准的参考.
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三种SPF小鼠垫料的比较
目的 对杨木刨花、纸屑、玉米芯的物理性状、微生物含量及毒性等进行比较,寻找适合作为SPF小鼠垫料的材料.方法 通过吸水试验、干燥试验、隔热试验、保温试验、适应性观察、微生物检测、粉末率测定、急性毒性试验、饥饿试验,比较小鼠对3种材料的适合性及安全性.结果 3种垫料吸水性和保湿性较好,差异不显著；保温性和隔热性能玉米芯优于杨木刨花和纸屑；小鼠对3种垫料的适应性均较好；3种垫料对小鼠均无毒性；粉末率玉米芯和纸屑为零；玉米芯中无可维持小鼠生命的营养,优于其他两种垫料.结论 玉米芯在所有检测项目中均符合垫料标准,是一种较理想的SPF小鼠垫料.
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四种实验动物垫料物理性状及动物适应性研究
目的 对松木刨花、枫木刨花、稻草、纸皮4种材料的物理性状及动物适应性进行比较,以寻找更有利于动物生长、发育、繁殖的新型实验动物垫料.方法 通过吸水试验、干燥快慢试验、升温试验、降温试验及动物适应性观察,比较了松木刨花、枫木刨花、稻草、纸皮4种垫料材料的不同物理特性.结果 枫木刨花保温性能好,有利于动物环境的保持;而且具有来源广、价格低、易保存等优点,可以作为产业化推广发展.
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实验动物垫料质量标准控制指标的探讨
垫料能吸附水分及动物的排泄物,维持笼内和动物本身的清洁卫生,是能影响实验数据和动物健康的关键环境因子[1].应用适宜的垫料对实验动物标准化和保证实验动物质量有着重要作用.本文就实验动物垫料的原材料选择、质量控制指标及其灭菌与存储几个方面进行探讨.
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啮齿类实验动物垫料质量评估的研究
实验动物垫料(Laboratory animal bedding)是影响实验动物健康、动物实验结果和动物福利的国际公认的重要环境之一.本文就啮齿类实验动物垫料种类和性能、垫料标准化等质量控制和评价的相关问题进行探讨.为实验动物垫料的研究、开发和标准化的研究提供了理论基础和重要参考.
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啮齿类实验动物垫料的研究进展
实验动物垫料是实验动物饲养过程中非常重要的环境因素,直接影响实验动物的质量、动物福利及实验结果.本文就啮齿类实验动物垫料的种类、质量控制、物理性状、应用以及对啮齿类实验动物和动物实验的影响等方面进行了论述和总结,特别介绍了各种垫料的优缺点,对实际应用中选择和使用实验动物垫料提供了参考依据,有利于啮齿类实验动物垫料的研发和完善实验动物垫料国家标准等相关工作的开展.
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多种沙门氏菌分离培养基效果比较及在实验动物和垫料检测中的应用
目的 改进实验动物沙门氏菌分离培养方法,建立垫料中沙门氏菌检测方法.方法 参考国内外沙门氏菌检测方法,用不同分离培养基对沙门氏菌、大肠杆菌和变形杆菌进行培养.选用佳筛选效果培养基对动物肠道和垫料样品进行检测.结果 BPW预增菌、MKTTn选择性增菌转种XLT4培养基分离沙门氏菌的效果优于其他培养基,在1015份动物样品中检测出3份沙门氏菌阳性,能够检测出垫料中1CFU/g的沙门氏菌.结论 改进的沙门氏菌分离培养方法检出率高于现有国标方法,结果准确,可用于实验动物沙门氏菌及垫料的检测.
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三种垫料的生物学安全性评价
目的 观察杨木、玉米芯、松木三种垫料物质对大、小鼠体质量、血生化、脏器及脏器系数的影响.方法 昆明小鼠60只,雌雄各半,随机分为3组,每组20只,分别使用杨木、玉米芯、松木垫料.Wistar大鼠60只,雌雄各半,随机分为三组,每组20只.分别使用杨木、玉米芯、松木垫料.动物饲养4周后取血测定血生化指标ALT、TP、ALP、LDH、T-SOD、ADH,处死测定脏器重量计算脏器系数.结果1)体质量结果:与杨木组比较,松木组雄性小鼠的体质量有显著性的降低,P＜0.001.与玉米芯组比较,松木组雄性大鼠自第三周开始体质量降低,P＜0.05.2)血生化结果:小鼠:与杨木组比较,玉米芯组雄性谷丙转氨酶有极显著性升高,P ＜0.001；松木组雌性乳酸脱氢酶有显著性降低,P＜0.01；松木组和玉米芯组雌性小鼠活力乙醇脱氢酶有显著性降低,P＜0.001,P＜0.05.大鼠:松木组雄性乙醇脱氢酶与杨木组比较有显著性升高,P＜0.01.3)脏器重量结果:小鼠:与杨木组比较,松木组雄性肝有极显著性降低,P＜0.01,脑有显著性降低,P＜0.05,肾有显著性升高,P＜0.05；玉米芯组雄性动物肾有显著性升高,P ＜0.05,肾上腺有显著性降低,P＜0.05,睾丸有显著性升高,P＜0.05.大鼠:玉米芯组肝脏与杨木组和松木组比较有显著性升高P ＜0.001,P＜0.05；松木组肾脏和脑与杨木组比较有极显著性升高,P＜0.01,P＜0.01；松木组前列腺与玉米芯组比较有显著性升高,P＜0.05,与杨木组比较有极显著性升高,P＜0.01.4)脏器系数结果:小鼠:与杨木组比较,松木组雄性肝脏、脑系数有显著性降低,P＜0.01,P ＜0.05,松木组和玉米芯组雌性肾脏、雄性睾丸系数有显著性升高,P＜0.01.大鼠:玉米芯组雄性肝脏与杨木组比较有极显著性增大,P＜0.001.结论 杨木垫料是较好的小鼠实验动物垫料,玉米芯垫料可作为备选产品,松木垫料应慎用.
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玉米秸垫料饲养SD大鼠的安全性评价
目的 观察玉米秸垫料用于饲养SD大鼠的安全性.方法 将SD大鼠随机分为玉米秸垫料组、对照组,饲养6个月,测定其血液生化指标,观察实质脏器组织切片.结果 玉米秸垫料对SD大鼠的8种血液生化指标影响不显著(P＞0.05),组织切片观察未见有意义的病理改变.结论 玉米秸垫料在实际应用中是安全的.
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3个不同细胞株用于垫料毒性实验的效果比较
目的选择一种比较敏感的细胞用以进行垫料物质的细胞毒性研究.方法将不同浓度的垫料物质丙酮提取物分别加入体外培养的小鼠成纤维细胞、小鼠H22-H2D8细胞株和小鼠S180-S2D9细胞,孵育72 h后用考马斯亮蓝法测定总蛋白,计算细胞存活率,比较3种细胞对不同垫料丙酮提取物的细胞毒性反应.结果在1～40mg/ml浓度范围,H22-H2D8对各种垫料物质细胞毒性反应敏感.结论 H22-H2D8细胞可作为垫料物质细胞毒性研究的细胞株.
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玉米秸作为大鼠垫料对其生长发育及繁殖性能的影响
目的对比观察不同原料制成的垫料对SD大鼠繁殖性能及其仔鼠生长发育的影响,探讨以玉米秸为原料制作实验动物新型垫料的可行性.方法测定使用玉米秸、卫生纸、刨花三种垫料时SD大鼠的繁殖性能指标及仔鼠体重变化,并进行比较分析.结果出生仔数、初生窝重、初生重三个指标三组间比较差异无显著性(P＞0.05);离乳率三组间差异有显著性(P＜0.05),玉米秸组与卫生纸组差异有极显著性(P＜0.01),玉米秸组高,为99.79%;三组之间胎次间隔差异有显著性(P＜0.05),玉米秸组为31.41 d;仔鼠生长发育指标,三组之间比较,差异无显著性(P＞0.05).结论玉米秸作为垫料时,SD大鼠能保持较高的繁殖性能,可以作为大鼠垫料使用.
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实验动物垫料毒性安全评价进展
垫料(Laboratory animal bedding)是影响实验动物健康与实验结果的重要因素之一.目前使用的垫料主要有刨花(shaving)、锯末(sawdust)、玉米芯(corncob)、再生纸(recycled-paper)、秸秆(straws)、果壳(hulls)及其他纤维类材料(plant fiber and other)等.本文从实验动物垫料原材料毒性、抽提物毒性、以及垫料对实验动物生长繁殖的影响几个方面进行了分析,认为杨木和玉米芯是比较理想的垫料原料.
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GLP规范对实验动物饲料垫料及饮水质量监测的要求
GLP(Good Laboratory Practice)规范是保证药品安全性评价的国际性准则,世界许多国家先后发布了GLP规范[1],我国于1993年由国家科委以16号委主任令发布试行规定,1999年由国家药品监督管理局局长14号发布了修订版[2].它不仅对进行动物实验所需的硬件条件如动物实验设施、动物用品供应设备、用于感染等特殊实验设施及隔离设施,还从软件方面如动物饲养设施的维护管理、实验动物的饲养管理、实验动物一般状况的观察、濒死动物及动物尸体的检查处理等通过标准操作规程(SOP)做出了明确的规定.其中对实验动物的饲料和饮水虽然提出定期监测,但对具体监测项目涉及的比较少.本文就这一问题结合国内外情况进行讨论.
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实验动物垫料的标准化
垫料与实验动物关系密切,是对实验动物产生直接作用和影响的环境因素.本文从实验动物垫料的种类和消毒、垫料质量控制与评价体系的建立、垫料的商品化等方面的问题进行探讨.为实验动物垫料的研发和完善实验动物国家标准提供重要参考依据.
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垫料对实验动物福利的影响
1 垫料质量对实验动物健康的影响(1)垫料宜无粉尘或少粉尘,如粉尘较多,动物活动时,粉尘就会四处飞扬,动物易患呼吸道和皮肤疾病.(2)如垫料含有芳香类、挥发类、酚类等化学物质,都会给动物健康带来危害.有报道说,雪松制成的垫料,因其散发的芳香烃类物质可诱发肝脏微粒体酶类和细胞毒性,并增加癌症的发病率.(3)如果垫料原材料受到严重的化学污染或被有毒有害物质、微生物、寄生虫污染过,动物感染疾病的概率就会大大增加.
