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黑蒜提取液对大鼠缺血再灌注的保护作用及机制研究
目的:观察黑蒜提取液对大鼠心肌缺血再灌注(MRI)的干预作用,并探讨其作用的可能机制.方法:将20只Wistar大鼠随机分为假手术组、MRI组、黑蒜低、高剂量治疗组,分别给予0.9％氯化钠溶液及黑蒜提取液处理,实验结束后处死大鼠并腹主动脉抽血,检测大鼠心肌人髓过氧化物酶(MPO)活性,血清脂质氧化丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学法检测心肌细胞B淋巴细胞瘤2基因Bcl-2和Bcl-2相关X蛋白Bax蛋白表达水平的影响.结果:黑蒜提取液能够降低大鼠心肌MPO、血清MDA活性,提高血清SOD活力,减少大鼠心肌细胞凋亡(P＜0.05,P＜0.01),升高Bax的表达,降低Bcl-2表达.结论:黑蒜提取液能够增加对大鼠MRI的保护作用,其作用机制可能与减轻中性粒细胞(PMN)浸润,抑制脂质过氧化,提高抗氧化能力,通过升高Bax、降低Bcl-2表达减少心肌细胞凋亡有关.
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黑蒜提取液对结肠癌Ht-29移植瘤的放射增敏研究
目的:探讨黑蒜提取液对结肠癌Ht-29移植瘤辐射增敏作用及可能机制.方法:建立结肠癌Ht-29皮下移植瘤模型,对4组移植瘤模型分别给予0.9％氯化钠溶液(对照组)、60Co γ射线照射(照射组)、黑蒜提取液(黑蒜组)及黑蒜提取液联合60Co γ射线照射(黑蒜+照射组)的处理,实验结束后摘取眼球取血后脱臼处死小鼠.剥离瘤体,计算肿瘤生长抑制率;ELISA法检测血清中血管内皮生长因子(VEGF);免疫组织化学法检测肿瘤组织中丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)蛋白的表达变化;蛋白质印迹法检测Akt、pAkt蛋白的表达.结果:与对照组、照射组、黑蒜组相比,黑蒜提取液联合60Coγ射线可显著抑制结肠癌Ht-29移植瘤的生长,降低VEGF、Akt及pAkt蛋白表达.结论:黑蒜提取液能够增加结肠癌Ht-29移植瘤辐射敏感性,其作用机制可能与下调Akt、pAkt蛋白表达及VEGF从而降低其放射抵抗有关.
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黑蒜提取液对恶性黑色素瘤B16细胞增殖与凋亡影响及其机制的研究
目的:探讨黑蒜提取液(aged black garlic extract,ABGE)对恶性黑色素瘤B16细胞增殖与凋亡影响.方法:MTT法测定黑蒜提取液对黑色素瘤B16细胞株生长抑制率,Hoechst荧光染色观察细胞凋亡及形态的变化,蛋白免疫印迹技术对经不同浓度黑蒜提取液处理后的B16细胞中Akt、PTEN、P-Akt蛋白进行检测,Realtime-PCR检测Bcl-2、Bax的表达情况.结果:黑蒜提取液对黑色素瘤B16细胞株有生长抑制作用及促凋亡作用,经不同浓度黑蒜提取液处理后的B16细胞中Akt、P-Akt蛋白的表达明显低于空白对照组,而PTEN的表达则显著上调,Realtime-PCR检测实验各组Bcl-2 mRNA表达均较空白对照组降低,Bax蛋白表达随黑蒜提取液浓度增加逐渐增强.结论:黑蒜提取液可抑制恶性黑色素瘤B16细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与调控癌基因及凋亡基因表达有关.
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探索黑蒜提取液在肝癌放射治疗防护作用的机制
目的:探讨黑蒜提取液(ABGE)对肝癌放射治疗防护的作用,观察这一机制是否通过抑制炎性复合体的活化而实现.方法:建立人肝癌小鼠移植瘤模型,将30只荷瘤小鼠随机分为空白对照组、照射组、黑蒜+照射组,分别给予0.9％氯化钠溶液、射线照射及黑蒜提取液联合射线照射的处理,5Gy进行照射,照射后7、14、21d处死实验动物,分离出移植瘤.检测小鼠外周血白细胞计数及活化血小板百分比;Western Blot检测炎性复合体Nlrp1和Nlrp3的表达情况;ELISA检测炎性复合体效应因子IL-1 β和IL-18在小鼠外周血血清中的浓度变化.结果:照射组的小鼠外周血中白细胞计数及活化血小板百分比于7d后降低,14d重,随后逐渐减轻.Western Blot检测黑蒜+照射组Nlrp1和Nlrp3蛋白表达量与空白对照组比明显升高,但低于照射组;ELISA结果显示,照射后14d,IL-1β浓度在照射组及黑蒜+照射组中高于同期空白对照组,随后表达量下降.结论:半致死剂量射线照射小鼠后,黑蒜提取液抑制炎性复合体的活化,抑制局部炎性反应,促进血象修复,从而达到放射防护的作用.
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黑蒜提取液抑制胰腺癌Panc-1小鼠移植瘤的转移能力及分子机制
目的:探讨黑蒜提取液(ABGE)对荷瘤小鼠Panc-1细胞在体内的生长以及转移能力的影响,并初步探讨其分子机制.方法:分别建立胰腺癌Panc-1小鼠皮下移植瘤模型以及转移瘤模型,将40只小鼠随机分为空白对照组,黑蒜低,高剂量组、阳性对照组4组,分别给予0.9％氯化钠溶液,黑蒜提取液组0.4、0.8mL(相当于生药8.0、16.0g/kg),阳性环磷酰胺,2周后摘取眼球血脱臼处死小鼠,剥离瘤体称重,计算肿瘤生长抑制率以及转移抑制率;免疫组化检测肿瘤组织Smad4以及TGF-β1的表达.结果:腹腔注射黑蒜提取液可显著抑制小鼠Panc-1细胞移植瘤生长及肺转移的发生率,肿瘤抑制率可高达63.6％ (P＜0.01),而肺转移抑制率可高达63.5％ (P＜0.01).且黑蒜高剂量抑制Panc-1细胞转移作用优于阳性对照组;免疫组化可检测发现:黑蒜提取液组Panc-1细胞胞质中TGF-β1褐黄色颗粒较空白对照组少见,而Smad4胞浆着黄色则较空白对照组多见.结论:腹腔注射黑蒜提取液可显著抑制小鼠Panc-1细胞移植瘤生长及肺转移的发生率,上调荷Panc-1小鼠移植瘤中Smad4的表达并下调TGF-β 1的表达,与TGF-β1/Smad4信号通路密切相关,以上可能是黑蒜提取液抑制胰腺癌Panc-1细胞生长和转移的重要作用机制.
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黑蒜提取液对荷H22小鼠移植瘤MVD及VEGF表达影响
目的:观察黑蒜提取液对荷H22小鼠移植瘤MVD及VEGF表达影响.方法:建立荷H22小鼠皮下移植瘤模型,对4组移植瘤模型分别给予生理盐水、低剂量(20mg/ml)黑蒜提取液,中剂量(50mg/ml)黑蒜提取液及高剂量(100mg/ml)黑蒜提取液处理,2周后脱臼处死小鼠.剥离瘤体,免疫组织化学法检测MVD、VEGF表达.结果:黑蒜提取液能够降低荷H22小鼠移植瘤MVD、VEGF表达.结论:黑蒜提取液可通过调控肿瘤组织MVD、VEGF发挥抗血管生成作用.
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黑蒜提取液对胰腺癌Panc-1细胞生长与抗氧化分子机制的实验研究
目的 探讨黑蒜提取液(aged black garlic extract,ABGE)对Panc-1细胞生长与抗氧化能力的影响.方法 将不同浓度的ABGE(0.2、1.0、1.8 mg/ml)作用于Panc-1细胞,采用CCK-8法分别于24h、48 h、72 h测定Panc-1细胞株的生长能力;RT-PCR检测ABGE干预后Panc-1细胞VEGFmRNA以及MMP-9mRNA表达变化;ELISA法检测Panc-1细胞上清液中相关蛋白VEGF、SOD的表达情况.结果 CCK-8结果显示,黑蒜提取液对Panc-1细胞株的生长活性具有明显的抑制作用,且具有时间剂量依赖关系;RT-PCR结果显示,黑蒜提取液能明显地上调VEGFmRNA以及下调MMP-9mRNA的表达;ELISA法结果显示,随黑蒜提取液浓度的增加,Panc-1细胞上清液中VEGF蛋白的表达水平下降、SOD蛋白表达增加.结论 黑蒜提取液能显著抑制Panc-1细胞的生长能力,其抗氧化能力可能是与下调VEGF蛋白表达、MMP-9以及上调SOD表达有关.
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黑蒜提取液对宫颈癌HeLa细胞移植瘤辐射增敏及保护机制研究
目的:观察黑蒜提取液对宫颈癌HeLa细胞移植瘤辐射增敏及保护机制.方法:通过构建宫颈癌HeLa细胞小鼠皮下移植瘤模型,并将其随机分成4组,空白对照组、γ照射组、黑蒜组、黑蒜+γ照射组.将其分别用生理盐水、γ射线照射、黑蒜提取液、黑蒜提取液联合γ射线照射来进行处理,然后对各组移植瘤生长的速度进行观察.实验完成后,将参与实验的小鼠处死,除去瘤体后,称量小鼠的体质量,通过计算得到肿瘤生长抑制率.称量胸腺和脾脏质量,计算胸腺指数与脾脏指数.计算Con A诱导的小鼠脾淋巴细胞刺激指数、外周血白细胞计数个数.通过紫外分光光度计法检测各组小鼠血清中超氧化物歧化酶(superoxide orgotein dismutase,SOD)及过氧化氢酶(catalase,CAT)的活力变化.结果:与γ照射组及空白对照组比较,黑蒜提取液+γ照射组小鼠移植瘤生长速度得到有效抑制(P＜0.05);与空白对照组比较,γ照射组胸腺及脾脏指数明显降低,黑蒜组及黑蒜+γ照射组胸腺及脾脏指数升高(P＜0.05),与γ照射组比较,黑蒜+γ照射组及黑蒜组小鼠胸腺及脾脏指数升高(P＜0.05);γ照射组淋巴细胞刺激指数(1.257 2±0.238 0),黑蒜提取液+γ照射组淋巴细胞刺激指数(1.826 1±0.301),可见黑蒜提取液可显著促进脾淋巴细胞增殖反应;与空白对照组比较,γ照射组小鼠SOD及CAT活力值、白细胞计数呈现下降趋势,黑蒜+γ照射组及黑蒜组小鼠SOD及CAT活力值、白细胞计数呈现上升趋势(P＜0.05),与γ照射组比较,黑蒜+γ照射组及黑蒜组小鼠SOD及CAT活力值、白细胞计数呈现上升趋势(P＜0.05).结论:黑蒜提取液对HeLa细胞移植瘤具有辐射增敏作用,通过增强免疫功能,提高外周血白细胞计数和机体抗氧化能力,以提高对机体的辐射保护作用.
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黑蒜提取液对结肠癌Ht-29小鼠移植瘤的放射增敏效应及辐射保护机制研究
目的 探讨黑蒜提取液(Aged Black Garlic Extract-ABGE)对60Coγ线照射结肠癌Ht-29小鼠移植瘤的放射增敏及辐射保护作用,并初步探讨其分子机制.方法 建立结肠癌Ht-29小鼠皮下移植瘤模型,将40只荷瘤小鼠随机分为4组,空白对照组,γ照射组,黑蒜组,黑蒜+γ照射组.分别给予生理盐水、γ射线照射、黑蒜提取液及黑蒜提取液联合γ射线照射的处理,观察各组移植瘤生长速度和各治疗组移植瘤生长延迟时间.实验结束后摘取眼球取血后脱臼处死小鼠,剥离瘤体称重,计算肿瘤生长抑制率；Realtime-PCR检测Bcl-2、Bax、Caspase-9的表达情况.外周血白细胞计数,紫外分光光度计法检测各组小鼠血清中SOD及CAT的活力变化.结果 黑蒜提取液联合γ线照射对结肠癌Ht-29小鼠移植瘤有生长抑制作用,可延迟肿瘤生长时间,提高放疗增敏比,并且能够下调移植瘤组织中Bcl-2,上调Bax,提高Caspase-9蛋白表达(P＜0.05).黑蒜提取液可提高小鼠的外周血白细胞总数,增加红细胞超氧化物歧化酶SOD及CAT的活力.结论 黑蒜提取液可通过下调Bcl-2上调bax及活化Caspase-9蛋白的表达提高γ射线对结肠癌Ht-29小鼠移植瘤放射敏感性,并通过提高外周血白细胞计数和机体抗氧化能力提高对机的辐射保护作用.
