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葛根素对慢性脑缺血大鼠海马CA1区NGF表达的影响
目的:观察葛根素对慢性脑缺血大鼠海马CA1区NGF表达的影响.方法:将84只体重在200 ~ 300 g的健康雄性大鼠,其中随机挑选20只,分成2个亚组,分别为30 d(1月组)空白组和90 d(3月组)空白组(正常对照),其余64只大鼠使用永久性双侧颈总动脉结扎法制作慢性脑缺血模型并随机又分成3个组,分别为模型组、雌二醇组和葛根素治疗组,每组又分别分成30 d(1月组)和90 d(3月组)2亚组.雌二醇组使用雌二醇ip治疗大鼠慢性脑缺血(1 mg·kg-1 ·d-1);葛根素治疗组使用葛根素灌服治疗大鼠( 50 mg· kg-1·d-1);相同剂量的生理盐水用于模型组大鼠.各组分别在30,90 d后处死.用免疫组化方法观察大鼠海马CA1区神经生长因子(NGF)的表达,应用显微图像分析系统进行分析.结果:30 d模型组,雌二醇组、葛根素组与正常组比较,海马CAl区可见NGF的表达明显升高(P<0.05);雌二醇组、葛根素组与模型组比NGF的表达明显升高(P<0.05).90 d(3月组)模型组、雌二醇、葛根素组大鼠海马CAl区NGF的表达与正常组比较NGF的表达上调(P<0.05),与90 d模型组比较,雌二醇大鼠海马CAl区NGF的表达无显著性差异,葛根素组大鼠海马CAl区的NGF表达明显上调(P<0.05).结论:葛根素可能通过上调NGF水平,发挥对脑缺血神经元的保护作用.
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芒果苷联合葛根素对自发性高血压大鼠心脏炎性损伤的协同保护作用
目的:观察芒果苷联合葛根素对自发性高血压大鼠(spontaneous hypertensive rats,SHR)心肌炎性损伤的协同保护作用,为高血压病心肌炎性损伤的临床防治提供实验依据.方法:以8只正常血压大鼠(normal blood pressure rat,WKY)为空白组A,72只10周龄SHR大鼠随机分为模型组B,苯那普利(10 mg· kg-1·d 1)组C,芒果苷单用(20 mg· kg-1·d-1)组D,葛根素单用组E(20 mg· kg-1·d-1),芒果苷(20 mg·kg-1·d-1)+葛根素片(10 mg·kg-1·d-1)组F,芒果苷(20 mg·kg-1·d-1)+葛根素片(20 mg· kg-1·d-1)组G,芒果苷(20 mg· kg-1·d-1)+葛根素片(40 mg·kg-1·d-1)组H,芒果苷(10 mg·kg-1·d-1)+葛根素片(20 mg· kg-1·d-1)组Ⅰ,芒果苷(40 mg· kg-1·d-1)+葛根素片(20 mg·kg-1·d-1)组J.每天10 mL·kg-1连续灌胃,灌胃给药2个月后停药,取材前禁食12h.用显微镜观察大鼠心肌组织病理形态结构,免疫组化法检测大鼠心肌组织白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达,酶联免疫法检测SHR心肌组织IL-6,IL-10,TNF-α水平.结果:各组大鼠心脏组织均未见明显病理形态学改变;免疫组化和酶联免疫结果显示,与模型组比较,各组给药大鼠心肌组织IL-6,IL-10,TNF-o含量均有不同程度下降(P <0.05,P<0.01).结论:芒果苷联合葛根素对自发性高血压大鼠心脏组织病理形态学无显著影响;但可下调大鼠心脏组织异常升高的炎症因子IL-6,IL-10,TNF-α水平,具有一定的协同增效作用.
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微细化工艺制备的葛根微粉抗氧化抗凝血及其体内吸收动力学研究
目的:探讨葛根微粉在药效和体内吸收动力学的特点,为微细化工艺在中药中的正确应用提供实验依据.方法:以凝血时间和脑中MDA的含量,来观察葛根微粉的药效.给大鼠灌胃葛根微粉,通过用HPLC测定血浆中葛根素的浓度,研究其在大鼠体内的吸收动力学过程.结果:中剂量的葛根微粉显著延长小鼠的出凝血时间.大中小剂量(1.2,0.6,0.3g·kg-1)的微粉均可以显著降低脑中MDA的含量.灌胃葛根微粉后,血中葛根素达峰时间为0.344±0.085h,峰浓度为2.23±0.32μg·mL-1.结论:葛根制成微粉后灌胃,在大鼠体内释放和吸收较快,并在一定程度上保持了原有的活性.
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HPLC测定康尔肤胶囊中葛根素的含量
目的:采用HPLC对处方中主要成分葛根素进行含量测定.方法:采用高效液相色谱法,以Kromasil C(18)(4.6 mm×250 mm,5 μm)为分析柱,流动相甲醇-水(27:73),流速1 mL·min(-1),检测波长250 nm,柱温室温.结果:葛根素回归方程Y=93 128X+92 301(r=0.9995,n=6),葛根素在0.06~0.18 μg线性关系良好;方法的平均回收率为100.53%,精密度RSU 1.41%.结论:该方法操作简便、快速、准确、灵敏,适用于康尔肤胶囊的质量控制.
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HPLC-DAD同时测定心通口服液中4种成分
目的:建立同时测定心通口服液中葛根素、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、柚皮苷及淫羊藿苷含量的方法.方法:采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,柱温30℃,检测波长λ1=250 nm(检测葛根素),λ2 =260 nm(检测毛蕊异黄酮葡萄糖苷),λ3=283 nm(检测柚皮苷),λ4=270 nm(检测淫羊藿苷).结果:葛根素、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、柚皮苷及淫羊藿苷的线性范围分别为0.441~11.0,0.031 2~0.780,0.186~4.66,0.134~3.47 μg,平均加样回收率分别为98.53%,98.03%,98.64%,99.16%.结论:方法操作简便,快速,重复性好,可作为该产品质量控制的方法.
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新型LC/LC-UV系统建立血浆中葛根素测定方法
建立用新型LC/LC-UV系统测定血浆中葛根素浓度的方法,用于葛根素人体或动物的药代动力学研究.方法 LC1色谱柱FRO-XB C18(4.6 mm×30 mm,20 μm,ANAX),流动相20 mmol·L -醋酸铵水溶液-乙腈( 75:25),流速为1.0mL·min-1;中央处理体系温度为40℃,LC2系统中分析色谱柱为AC-XB C18(4.6 mm×300 mm i.d,5 μm,ANAX),流动相为20 mmol·L-1醋酸铵水溶液(用甲酸凋pH到3.8)-乙腈(86:14),流速为1.2 mL· min-1,检测波长为248 nm.目标物从LC1转移到LC2聚焦流速为1.0 mL·min-1,目标物转移窗口为1.66~2.20 min;定量环为200 μL,样品用15%三氯醋酸预处理.结果 葛根素在0.020~4.50 mg·L-1线性关系良好,平均相关系数为0.9994,低定量浓度为0.015 mg·L-1.日内RSD <3%(n=6),日间RSD均<5%(n=18),准确度在100.3%~102.6%之间.结论 基于新型LC/LC-UV系统的葛根素测定方法操作步骤少、准确性与精密度良好、自动化程度高,适合于葛根素血药浓度测定及动力学研究.
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HPLC法快速测定通脉颗粒中葛根素和阿魏酸
目的:建立同时测定通脉颗粒中葛根素和阿魏酸含量的快速分析方法.方法:采用HPLC-UV法,选择KinetexC18柱(3 mm×50 mm,2.6μm)为分析柱,以10%乙睛-1%醋酸(54:46)为流动相,流速0.6 mL·min-1,313 nm检测波长下同时检测葛根素和阿魏酸.结果:在此分析条件下,葛根素和阿魏酸的保留时间分别为5.7,7.6 min,与阴性样品对照具有特异性,一次分析可在10 min内完成.葛根素线性范围在10-100 mg·L-1,r=0.9997;阿魏酸线性范围在0.05-0.5 mg·L-1,r=0.999 3 ;葛根素和阿魏酸的平均加样回收率分别达到(98.1±1.4)%,(103.7±1.7)%.结论:该方法快速、灵敏、准确、精密,可以为通脉颗粒剂的质量控制提供快速的含量测定方法.
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活血养阴颗粒质量标准研究
目的:建立活血养阴颗粒的质量标准.方法:采用薄层色谱法对活血养阴颗粒中的葛根、益母草进行定性鉴别;采用HPLC对制剂中葛根素进行了含量测定,高效液相色谱条件Alltima C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-3%磷酸溶液(26 74),流速1.0 mL·min-1,检测波长250 nm,柱温35℃,以外标法计算含量.结果:TLC色谱中能检出葛根、益母草;高效液相色谱测定葛根素在0.041 8~1.002 2μg呈良好的线性关系,r = 0.999 9,平均回收率99.4%,RSD 1.4%(n=6).结论:该法可准确地进行定性、定量,可有效地控制活血养阴颗粒的质量.
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整体柱HPLC同时测定白葛胶囊中4种有效成分
目的:建立一种同时快速测定白葛胶囊中葛根素、大豆苷元、欧前胡素及异欧前胡素含量的方法.方法:采用C18整体柱(4.6mm × 50 mm,2μm),甲醇(A)-0.1%冰醋酸(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min -1,检测波长254 nm,进样体积5μL,柱温30℃.结果:在建立的色谱条件下,4种有效成分可获得良好的分离,且各自在一定的浓度范围内线性关系良好(r >0.9995),方法回收率在95% ~ 105%.结论:所建立的方法简便、快速、可靠,可用于白葛胶囊中多种成分的快速检测.
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HPLC测定葛根饮片中5个成分的含量
目的:建立HPLC测定葛根饮片中3’-羟基葛根素、葛根素、3’-甲氧基葛根素、大豆苷元-8-C-芹菜糖-(1→6)葡萄糖苷和大豆苷5个成分含量的方法.方法:采用Zorbax C18色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5 μm),以甲醇-0.02%磷酸(25∶75)为流动相,检测波长250 nm.结果:方法学考察合格,并测定了12批葛根饮片中5个成分的含量.结论:该方法简便、快速、准确度高,可作为葛根饮片的质量标准.
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HPLC同时测定安渴胶囊中马钱苷和葛根素的含量
目的:建立同时测定安渴胶囊中马钱苷和葛根素含量的高效液相色谱法.方法:色谱柱为Aglient Eclipse XDBC18柱,流动相乙腈-水(12:88),检测波长240,250 mm,流速1.0 mL·min-1.结果:马钱苷进样量在0.31~2.175 μg与峰面积积分值呈良好的线性关系,葛根素进样量在0.164~1.148 μg与峰面积积分值呈良好的线性关系.马钱苷平均回收率为100.39%,RSD 0.72%(n=6);葛根素平均回收率为97.99%,RSD l.98%(n=6).结论:高效液相色谱法简便可行、专属性强、重复性好,可较好地控制安渴胶囊的质量.
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HPLC同时测定不同产地葛根中6种主要异黄酮类成分的含量
目的:建立同时测定葛根药材中6种主要异黄酮类成分含量的HPLC方法.方法:采用RP-HPLC法,Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)柱;流动相:甲醇-0.1%枸橼酸溶液,梯度洗脱;流速1.0 mL· min-1,柱温30℃,检测波长250 nm.结果:3’-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、染料木苷、芒柄花苷、大豆苷元的线性范围分别为76.2~1 016,65.8 ~1 316,85.6 ~1712,49.98 ~499.8,21.94 ~219.4,48.5 ~485 ng,相关系数(R2)均大于0.999 6,6种成分的平均加样回收率分别为99.73%(RSD 0.6%),100.48% (RSD 1.11%),100.37% (RSD 0.79%),100.28%(RSD 1.07%),99.96% (RSD 1.22%),97.36%(RSD 1.59%).结论:方法简便快速,重复性良好,结果准确可靠,可用于葛根药材中6种主要异黄酮类成分的含量测定.
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HPLC测定粉葛饮片中3种黄酮类成分的含量
目的:建立HPLC同时测定粉葛饮片中葛根素、大豆苷元-8-C-芹菜糖-(1→6)葡萄糖苷和大豆苷3种黄酮类成分含量的方法.方法:采用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.02%磷酸(25∶75)为流动相,检测波长250 nm.结果:精密度、稳定性和重复性合格,3个成分的线性范围分别为0.123 ~0.737,0.024 9~0.150,0.021 7 ~0.130 μg,3个成分的平均回收率分别为99.4%,99.0%,99.1%,测定了4批粉葛饮片中3个成分的含量.结论:该方法简便、快速、准确度高,可为粉葛饮片的质量控制提供参考依据.
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HPLC测定柴银口服液中葛根素的含量
目的:建立HPLC法测定柴银口服液中葛根素的含量.方法:Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相甲醇-水(25∶75),流速1.0 mL· min-1,检测波长250 nm,柱温30℃.结果:在本试验条件下,葛根素与其他色谱峰分离良好,在0.020 64 ~0.825 6 μg与峰面积线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率100.44%,RSDl.45%(n=6).结论:方法简便快速、专属性强、灵敏度高、重复性好,可用于柴银口服液的质量控制方法.
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六经头痛片质量标准
目的:研究六经头痛片以提高其质量标准.方法:采用薄层色谱法对制剂中白芷、葛根进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定制剂中葛根素含量,岛津C18柱(4.6 mm×250mm,5μm),流速1 mL·min-,流动相甲醇-0.025 mol·L-1磷酸溶液(20∶ 80),柱温30℃,检测波长250 nm.结果:在薄层色谱中均可检出白芷、葛根的特征斑点;葛根素在0.042 ~0.378 μg线性关系良好(r =0.999 9),回收率98.368%(RSD 1.87%).结论:方法简便可行、重复性好,能有效控制该制剂的质量.
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清平片中黄酮类成分定量分析
目的:建立清平片中黄酮类成分槲皮素、葛根素、芦丁的含量测定方法,为清平片质量控制研究提供参考.方法:超声提取方法处理样品,采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.05%三氟乙酸进行梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,柱温30℃,检测波长247 nm.结果:葛根素在0.003 6~0.114 0 g·L-1(r=0.999 8),芦丁在0.003 3 ~0.105 0 g·L-1(r=0.999 6),槲皮素在0.003 2 ~0.102 0 g·L-1(r =0.9997)呈良好的线性关系,葛根素,芦丁,槲皮素平均回收率分别为99.60%,99.86%,99.94%,RSD分别为0.4%,0.3%,0.2%.结论:该方法快速、简便、重复性好,稳定,可控,可用于清平片黄酮类成分的含量测定.
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HPLC同时测定葛根芩连微丸中葛根素、甘草苷、黄芩苷、盐酸小檗碱的含量
目的:建立同时测定葛根芩连微丸中葛根素、甘草苷、黄芩苷、盐酸小檗碱含量的方法.方法:采用RP-HPLC方法,色谱柱为Kromasil-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相选用甲醇-磷酸盐缓冲液系统,梯度系统,流速1.0 mL·min-1,检测波长275 nm.结果:4个成分的方法学考察均合格,阴性供试品无干扰.结论:该方法方便、准确、专属性强,可作为葛根芩连微丸质量控制的进一步补充.
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益阴消渴滴丸中葛根素溶出度研究
目的:研究益阴消渴滴丸中葛根素体外溶出度.方法:采用转蓝法,水为溶出介质,转速100 r·min(-1).以葛根素为指标,考察滴丸在不同时间的累积溶出度,同时与原剂型益阴消渴胶囊比较.结果:葛根素在88.4~2 210μg与峰面积具有良好的线性关系(r=0.999 9),滴丸中葛根素在10 min时累积溶出率达到88.47%,胶囊剂10 min时累积溶出率仅为0.25%,120 min时为87.43%.结论:益阴消渴滴丸可提高难溶性有效成分葛根素的溶出度.
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心安宁胶囊质量标准研究
目的:研究心安宁胶囊的质量标准,以提高其质量标准.方法:建立了葛根和丹参的薄层鉴别方法,并采用高效液相色谱法( HPLC)测定方中葛根及丹参酚酸B含量,色谱条件为C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相为甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶ 10∶3∶59);流量1.0 mL· min-;柱温室温;检测波长250 nm.结果:采用HPLC方法检测图谱清晰,简便准确,专属性强,重复性好,葛根素0.004~0.163 μg线性关系良好(r=0.999 8),丹参酚酸B含量在0.144.~1.44 μg线性关系良好(r=0.999 9),葛根素、丹参酚酸B的平均回收率为97.69%,102.76%,RSD别为1.10%,1.34%.结论:薄层色谱法图谱清晰,简便准确,专属性强,重复性好,可有效地控制心安宁胶囊质量.
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菊葛天麻颗粒质量标准研究
目的:建立菊葛天麻颗粒的质量标准.方法:采用薄层色谱进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定方中葛根素含量.结果:确立了制剂中葛根、菊花、当归、天麻的鉴别方法,通过方法学系统考察和样品含量测定,建立了本制剂中葛根素的含量测定方法,测得3批样品中葛根素的质量分数为8.10,7.72,8.74mg·g-1,其葛根素的线性范围为19.95 ~ 159.6 μg,回归方程y=224 765.8X+ 79 379.77(r=1.000).平均回收率为97.50%,RSD 1.45%.结论:本实验建立的鉴别和含量测定方法简便、准确、重复性好,适用于本品质量的控制.