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糖尿病肾病辨证分型与肾功能及血清Ⅳ胶原相关性研究
糖尿病肾病是糖尿病典型的微血管并发症和重要的死因之一.近年来,随着糖尿病在全世界范围内增加,糖尿病肾病的发生率也在迅速增长;而且糖尿病肾病患者从出现微量白蛋白到临床糖尿病肾病,到出现肾功能损害,直至终末期尿毒症,呈不断进展趋势.
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多器官功能障碍综合征大鼠肾组织细胞外基质损伤
目的 检测Ⅳ型胶原及基质金属蛋白酶-9在多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠肾组织及血清中变化,探讨细胞外基质的破坏与MODS肾功能衰竭的关系.方法 实验在三峡大学医学院实验中心完成.将40只成年雄性SD大鼠(随机数字表法)分为健康对照组(8只)、MODS模型组(32只),模型组又分为造模后6、12、24、48h不同时点,每组8只.采用“二次打击”即眼球失血加腹腔注射脂多糖(LPS)制备MODS模型:大鼠左眼球取血2 ml/100g,在放血4h后予无菌腹腔注射 LPS 5 mg/kg.对照组予以腹腔注射等量的生理盐水,造模完成后在不同的时相点搜集标本.血生化检测各组血清肌酐(Cr)及尿素氮( BUN)的变化；光镜及电镜观察肾组织的形态及超微结构变化；酶联免疫吸附试验( ELISA)法检测血清中Ⅳ型胶原及MMP-9的浓度变化；western印迹技术测定肾组织中Ⅳ型胶原及MMP-9的蛋白水平.组间比较采用单因素方差分析(SNK法).结果 (1)与对照组相比,MODS组各个时点肾功能损害较为明显,Cr及BUN均明显增高(P＜0.05).(2)光镜下对照组肾组织结构无改变；MODS组肾组织损伤较重.电镜下对照组肾组织基底膜胶原纤维连续完整,MODS组肾组织基底膜水肿、胶原纤维分布缺损明显.(3)与对照组比较,造模后6～48h,MODS组大鼠血清中MMP-9水平均明显增高,于造模后12 h达到高峰(P＜0.05).造模后血清Ⅳ型胶原的质量浓度各组均高于对照组,6～12 h组升高不明显(P＞0.05),24～48 h显著高于对照组(P＜0.01).(4)造模后肾组织MMP-9的浓度6～ 12h比对照组明显增加(P＜0.01),24h达到高峰(P＜0.01),随后48h下降.造模后各组肾组织Ⅳ型胶原的质量浓度均较对照组明显降低(P＜0.05).结论 细胞外基质的破坏是引起MODS肾损伤的一个重要因素,可能成为MODS早期肾功能损害的诊疗和干预靶点.
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茵栀黄注射液联合西药治疗自身免疫性肝炎随机平行对照研究
[目的]观察茵栀黄注射液联合西药治疗自身免疫性肝炎疗效.[方法]使用随机平行对照方法,将30例门诊患者按抛硬币法简单随机分为两组.对照组15例强的松,20mg/次,2次/d.硫唑嘌呤,50mg/次,2次/d.治疗组15例茵栀黄注射液10mL+ 10％葡萄糖250mL,2次/d,静滴;西药治疗同对照组.连续治疗90d为1疗程.观测临床症状、层黏蛋白、Ⅳ胶原、透明质酸、Ⅲ型前胶原蛋白肽、不良反应.治疗1疗程,判定疗效.[结果]治疗组显效8例,有效5例,无效2例,总有效率88.67％.对照组显效4例,有效4例,无效7例,总有效率53.33％.治疗组疗效优于对照组(P＜0.05).肝纤维指标两组均有改善(P＜0.01),治疗组改善优于对照组(P＜0.01).[结论]茵栀黄注射液联合西药治疗自身免疫性肝炎疗效满意,无严重不良反应,值得推广.
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儿童Alport综合征30例肾脏和皮肤IV胶原分布特点
目的 通过分析30例Alport综合征(AS)患儿肾脏和皮肤Ⅳ胶原分布特点,探讨Ⅳ胶原分布与临床表型的关系.方法 对30例Alport综合征患儿资料进行总结,并分析肾组织穿刺和皮肤活检中肾脏和皮肤Ⅳ胶原分布特点,总结不同的Ⅳ型胶原α链分布方式与临床表型的相关关系.结果 30例患儿中29例表现为肾脏和(或)皮肤Ⅳ胶原α链分布异常,1例正常.其中24例(占80.0%)为X连锁显性遗传性AS(XDAS).男20例,女4例;5例(占16.7%)为常染色体隐件遗传性AS(ARAS).XDAS组患儿1例临床表现为孤立性血尿型(4.2%),6例为血尿合并蛋白尿型(25.0%),16例为肾病综合征型(66.7%),1例为肾功能不全型(4.1%);平均尿蛋白定量男1.74 g/24h,女0.83g/24 h;3例发现高频听力减退均为男性,男性患儿病情明显重于女性.ARAS组患儿5例均表现为血尿合并蛋白尿型;平均尿蛋白定量0.62 g/24 h;未发现眼耳损害.结论 XDAS患儿病情重,病程进展快,不同性别在病情严重程度上存在明显的差异;ARAS患儿病情相对较轻.Alport综合征的Ⅳ型胶原α链分布与临床表型密切相关.肾脏和皮肤Ⅳ胶原免疫荧光检测是目前诊断Alport综合征的有效手段,对判断疾病严重程度和远期预后都有重要意义.
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胃癌组织中Ⅳ型胶原的表达意义及相关性研究
目的探讨胃癌组织中Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)含量变化与胃癌患者血清含量的相关性及临床意义.方法应用放射免疫技术测定21例胃癌患者胃切除标本组织和血清中Ⅳ-C的含量以及20例健康者(对照组)血清ⅣC含量.结果胃癌患者血清中Ⅳ-C含量明显高于对照组(P＜0.05);胃癌组织中Ⅳ-C含量明显高于6cm以远的正常胃组织(P＜0.05);胃癌组织与血清中Ⅳ-C含量升高呈正相关(P＜0.05).结论胃癌组织中不同部位的Ⅳ-C含量变化与胃癌患者血清中ⅣC含量及胃癌细胞的生物学活性密切相关,动态观察血清Ⅳ-C含量对判断胃癌病情、预后及手术根治效果具有一定的参考价值.
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肝豆状核变性患者肾脏纤维化相关指标的分析
目的:研究肝豆状核变性(HLD)患者血清转化生长因子β1(TGF-β1)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ胶原(Ⅳ-C)、抗肾小球基底膜抗体(AGBM)和抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)水平及其对诊断HLD患者肾脏纤维化的意义.方法:210例HLD患者和40名正常对照者,使用化学发光法检测血清PCⅢ和Ⅳ-C水平;使用ELISA检测TGF-β1、AGBM和ANCA水平.按尿常规检查是否正常,将210例HLD患者中的149例分为尿常规检查正常组(61例)和尿常规检查异常组(88例);在各组之间进行血清TGF-β1、PCⅢ和Ⅳ-C水平比较.结果:HLD患者TGF-β1、PCⅢ和Ⅳ-C水平均显著高于正常对照组;AGBM水平显著低于正常对照组;ANCA水平与正常对照组区别没有统计学意义.尿常规检查异常组与尿常规检查正常组血清TGF-β1、PCⅢ和Ⅳ-C水平差异没有统计学意义.结论::HLD患者存在肾脏纤维化,其肾脏纤维化与AGBM或ANCA相关性自身免疫性肾损害无关联.
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血清Ⅳ型胶原在肝纤维化诊断中的价值
目的观察血清Ⅳ型胶原含量在健康人群、急性肝炎、慢性肝炎及肝纤维患者中的变化,评价Ⅳ型胶原对肝纤维化的诊断价值.方法采用放射免疫法测定血清Ⅳ型胶原含量.结果慢性肝炎及肝纤维化患者血清Ⅳ型胶原含量增高.与正常对照组比较,差异有显著性(P<0.05).结论Ⅳ胶原是判断肝纤维化程度的较好指标.联合测定慢性肝炎、肝纤维化患者血清Ⅳ型胶原含量具有一定价值.
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肝炎后肝硬化患者血清总胆汁酸及肝纤维化指标与child-pugh分级关系
ml、527.00±157.29ng/ml,Ⅳ-C分别为238.05±36.68ng/ml、355.63±27.43ng/ml、493.97±109.58ng/ml,B超积分分别为10.70±3.76分、13.10±3.50分、14.50±3.12分.随肝硬化肝功能受损程度加重,各指标数值逐渐增加,差异有显著性意义(P＜0.05),且TBA、Ⅳ-C、HA、B超积分诸项指标相互均有相关性(P＜0.05).结论:四项指标相互间具有相关性,是判断肝炎后肝硬化严重程度的有用指标.
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慢性肝炎检测指标的研究进展
肝炎是一种严重危害人类健康的疾病,我国是肝炎的高发区,目前全国约有乙型肝炎病毒携带者1.3亿人,慢性肝炎患者约2300万,居传染病第3位,中医药在肝炎的治疗方面有独特的优势.因此,肝炎的治疗及治疗后疗效的评价成为国内外学者广泛关注的课题,本文就中药治疗肝炎的疗效以及所采用的主要观测指标的进展进行综述.
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探讨联合检测血清HA、LN、PCⅢ、CIV对早期肝硬化诊断的临床价值
目的探讨血清HA、Ⅲ、PCⅢ、CIV联合检测对早期肝硬化诊断的临床价值.方法随机选择临床确诊早期肝硬化(A组)40例和慢性肝炎患者(B组)20例,抽静脉血用RIA法检测其血清HA、Ⅲ、PCⅢ、CⅣ;肝穿刺活检,病理检查.结果A组经肝组织病理检查确诊为早期肝硬化只有22(22/40)例.(B组)血清HA、LN、PCⅢ、CⅣ检测值的均数在轻、中、重度慢性肝炎患者中,呈明显的上升趋势;A组血清HA、LN、PCⅢ、CIV检测值的均数明显比B组的高;A组经肝组织病理检查确诊为早期肝硬化血清HA、LN、PCⅢ、CIV检测值的均数明显比病理检查确诊为非早期肝硬化患者的高;彼此比较,差异显著(P＜0.05).结论联合检测血清HA、LN、PCⅢ、CIV是早期肝硬化较为可靠的非损伤性诊断手段之一.
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促肝细胞生长素对中、重度慢性乙型肝炎及肝炎肝硬化患者血清Ⅳ胶原的影响
肝纤维化诊治是近年来的一个热点,多年来已有大量的临床资料报道关于促肝细胞生长素对各型病毒性肝炎受损肝组织细胞再生和恢复肝功能的作用,而对其抗纤维化的作用也已被证明[1].目前临床检测肝纤维化的指标相当多,而诊断肝纤维化的金指标仍是肝组织活检的病理诊断[2].
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来氟米特干预肾小球系膜细胞Smad2的表达及Ⅳ型胶原分泌的体外研究
目的 观察来氟米特(leflunomide,LEF)在转化生长因子β1 (TGF-β1)刺激大鼠肾小球系膜细胞(GMC)表达Smad2及Ⅳ型胶原(ColⅣ)过程中发挥的作用.方法 建立体外培养大鼠肾小球系膜细胞模型,经鉴定后第7代用于实验.按照对大鼠肾小球系膜细胞模型处理方式不同,实验分4组,对照组(只加培养液),TGF-β1组(TGF-β1 5 ng/ml),LEF-1组(LEF 5 ng/ml+TGF-β1 5 ng/ml)和LEF-2组(LEF 50 ng/ml+TGF-β1 5 ng/ml).分别于15min、30min、1h、2h和6h收集标本,用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法测定细胞培养上清液的ColⅣ胶原蛋白表达量的变化.用间接免疫荧光法检测各组磷酸化Smad2 (P-Smad2)蛋白表达的变化；采用荧光半定量RT-PCR法检测各组Smad2 mRNA表达的变化.结果 在各时间点,TGF-β1刺激组ColⅣ分泌量高于对照组(P＜0.05),LEF各组Ⅳ胶原分泌低于TGF-β1 (P ＜0.05).对照组P-Smad2蛋白有少量的表达；TGF-β1组表达升高,有统计学意义(P＜0.05),与TGF-β1组相比,两LEF组P-Smad2表达下降,有统计学意义(P＜0.05).肾小球系膜细胞中,TGF-β1组Smad2 mRNA表达高于对照组.LEF-1组和LEF-2组Smad2 mRNA表达水平低于TGF-β1组(P＜0.01).但两LEF组间比较无统计学意义(P＞0.05).LEF干预作用有时间性,随时间延长,其LEF干预作用逐渐减弱.结论 经TGF-β1刺激后,体外培养的大鼠肾小球系膜细胞磷酸化-Smad2表达及Ⅳ胶原分泌增加,来氟米特可降低Smad2表达和Ⅳ胶原分泌水平,减轻细胞外基质(ECM)的沉积,为来氟米特的肾脏保护作用提供实验依据.
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膀胱癌组织自体荧光特征分析及其机制研究
目的:分析膀胱癌组织自体荧光光谱特征及其与正常组织的差异;探讨大鼠膀胱正常组织和癌组织中Ⅳ胶原和组织蛋白酶B的表达差异和相关性.方法:采集了47例膀胱癌组织和47例正常组织的自体荧光光谱,分析其荧光光谱差异及其特征.用免疫组化染色的方法检测正常组、膀胱癌组各25例组织标本中Ⅳ胶原和组织蛋白酶B的表达,比较各组间差异,并进行相关性分析,同时检查组织蛋白酶Bm RNA的表达状况.结果:94标本共采集了300～800 nm波长范围的癌组织和正常组织自体荧光光谱,发现正常组织的荧光强度在任意波长下均高于癌组织,正常组织的峰强度明显高于癌组织(P＜0 .05) .免疫组化染色显示正常组、癌组中的基底膜均有Ⅳ胶原表达,但膀胱癌组织中表达减少,与正常膀胱组织组比较,差异有显著性(P＜0 .05) .组织蛋白酶B在膀胱癌组织中表达较正常膀胱组织表达增加,差异有显著性( P＜0 .05) .结论:膀胱正常组织、癌组织的自体荧光光谱特征存在差异;在膀胱正常组织及癌组织中,大鼠膀胱癌组织中Ⅳ胶原表达减少;大鼠膀胱癌组织中组织蛋白酶B表达增加,可能导致两组组织的自体荧光差异的原因之一.
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尿α1-微球蛋白与血清层粘连蛋白和Ⅳ胶原检测对糖尿病早期肾损伤的预警价值
目的：探讨尿中α1-微球蛋白（α1-MG）、血清层粘连蛋白（LN）、Ⅳ胶原（ⅣC）检测对糖尿病早期肾损伤的预警价值。方法将糖尿病患者分为2组：尿蛋白定性阴性的患者（DM1组）66例；尿蛋白定性阳性患者（DM2组）48例。同时纳入健康体检人群30例作为健康对照组。分别采用免疫比浊法测定尿α1-MG，采用化学发光法测定血清LN和ⅣC，同时测定血清尿素（U-rea）和肌酐（Cr）。结果 DM1组尿α1-MG和血清LN、ⅣC水平均明显高于健康对照组，差异有统计学意义（P＜0．01），说明该3项指标在糖尿病早期肾损伤时即发生变化，其敏感性明显高于血清Urea、Cr和尿蛋白定性检测。α1-MG、LN和ⅣC的ROC曲线下面积分别为0．756、0．742、0．735，表明三者均为诊断早期肾损伤的敏感指标。结论尿α1-MG与血清LN、ⅣC 的检测可作为糖尿病早期肾损伤的预警指标，对糖尿病早期肾损伤的临床诊断有重要价值。
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相对静息期的增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中Ⅳ型胶原的分布及表达
目的:了解Ⅳ型胶原在相对静息期增生性瘢痕、瘢痕疙瘩中的表达与作用.方法:利用免疫组化的方法检测Ⅳ型胶原在瘢痕中的分布及表达.结果:在所有的病理性瘢痕标本中均有Ⅳ型胶原的表达,在增生性瘢痕中的表达强于而且多于瘢痕疙瘩中的表达.表达区域在瘢痕表皮的基底膜层、血管和皮肤附件的周围.与凋亡相关基因的表达几乎一致.结论:提示我们Ⅳ型胶原与相对静息期增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的转归有着重要的关系.
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基质金属蛋白酶与Ⅳ型胶原在成釉细胞瘤的表达
目的:探讨基质金属蛋白酶和Ⅳ型胶原与成釉细胞瘤复发、侵袭的关系.方法:采用免疫组织化学LABC方法检测28 例成釉细胞瘤组织中MMP-2、TIMP-2和Ⅳ型胶原的表达,并用RT-PCR方法检测MMP-2、TIMP-2和MT1-MMP在20 例成釉细胞瘤的表达.结果:MMP-2、TIMP-2和Ⅳ型胶原蛋白在成釉细胞瘤的阳性表达率分别为92.9%、75.0%和42.9%,Ⅳ型胶原阳性着色部位均位于基底膜及部分肿瘤细胞的胞质,MMP-2和TIMP-2阳性着色部位均位于细胞质,分布于瘤组织各层;复发性成釉细胞瘤Ⅳ型胶原的阳性表达率明显低于原发性成釉细胞瘤(P<0.01).MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2的mRNA在成釉细胞瘤组织中均有表达,复发性成釉细胞瘤的TIMP-2、MT1-MMP相对含量均显著高于原发性成釉细胞瘤(P<0.01).结论:基质金属蛋白酶MT1-MMP表达增加和Ⅳ型胶原在基底膜表达缺失与成釉细胞瘤的复发密切相关,MMP-2活性增加和基底膜Ⅳ型胶原降解增多可能是成釉细胞瘤局部侵袭的机制之一.
