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基于蛋白芯片对不同方法预处理疫苗的抗原性评价
目的 分别对4种疫苗(A群脑膜炎球菌多糖疫苗、吸附白喉破伤风联合疫苗、麻疹减毒活疫苗、炭疽芽孢杆菌疫苗株裂解液)进行不同的预处理,使其能作为抗原检测所诱导的抗体.方法 分别用饱和碳酸钠溶液、重铬酸钾与稀盐酸混合液、80%乙醇处理A群脑膜炎球菌多糖疫苗,用饱和碳酸钠溶液、重铬酸钾与稀盐酸混合液处理吸附白破联合疫苗和麻疹减毒活疫苗,PAGE纯化炭疽杆菌疫苗株裂解液中的抗原,以蛋白芯片比较其抗原性.结果 比较了不同方法预处理4种疫苗的效果,初步验证了所处理的疫苗具有良好的抗原性.结论 运用恰当的处理方法对疫苗进行预处理,可使其在检测相应抗体时表现出良好的抗原性,为以疫苗作为抗原检测相应抗体打下了基础.
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贝氏考克斯体毒力与毒力相关蛋白芯片的研制
目的:构建贝氏考克斯体毒力与毒力相关蛋白芯片.方法:根据贝氏考克斯体全基因组序列,筛选出约160个编码毒力及毒力相关蛋白的基因,采用PCR扩增基因片段,将获得的基因片段与pET32a表达载体连接,然后将该重组质粒转化大肠杆菌并使目的基因表达,采用Ni-NTA亲和层析柱纯化表达的目的重组蛋白.将纯化的重组蛋白点在醛基化玻片上制备蛋白芯片.结果:由贝氏考克斯体104个重组蛋白构建毒力与毒力相关蛋白芯片,通过荧光扫描仪分析蛋白芯片与贝氏考克斯体感染的小鼠血清反应,发现10个重组蛋白与该血清反应为强阳性.结论:所制备的毒力与毒力相关蛋白芯片具有贝氏考克斯体特异性,可用于贝氏考克斯体感染患者血清的检测.
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结核分枝杆菌抗原蛋白38×103抗原表位预测及其蛋白片段抗原性研究
目的 筛选出一种结核分枝杆菌(MTB)特异性诊断标志物.方法 对MTB重组蛋白抗原38×103的基因组序列进行生物信息学分析及抗原表位预测,原核表达38×103基因序列121～182和238～374位氨基酸蛋白片段,分别命名为T38和P38重组蛋白;采用蛋白芯片对T38和P38重组蛋白进行抗原性检测.结果 经蛋白芯片检测94例阳性和128例阴性样本,结果显示,P38重组蛋白在结核病检测中的敏感性为81.9%,特异性为80.5%,但是T38重组蛋白特异性不佳.结论 生物信息学预测38×103基因抗原表位,为寻找有价值的抗原靶点提供了参考;重组蛋白片段P38在结核病诊断中具有潜在应用价值,可作为联合诊断的备选抗原之一.
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纤连蛋白的分段表达及与乙肝表面抗原相互作用研究
目的:克隆纤连蛋白(fibronectin)各功能区域基因,在大肠杆菌中表达以筛选与HBsAg相互作用的区域.方法:将纤连蛋白分成7个片段,设计引物,利用RT-PCR从HepG2.2.15中扩增出相应的PCR产物,连接到表达载体pGEX4T-1中,用IPTG诱导目的蛋白在E.coli中表达,通过Western印迹分析对表达产物进行鉴定.融合蛋白纯化后制备蛋白芯片,与HBsAg杂交,筛选纤连蛋白中与HBsAg相互作用的区域.结果:经RT-PCR从HepG2.2.15中扩增到各结构域片段的cDNA,序列分析均正确;SDS-PAGE分析表明,各结构域片段的可溶性表达产物均占细菌可溶性蛋白的10%以上;Western印迹分析提示,诱导表达产物可与GST单抗发生特异性反应.经制备蛋白芯片并杂交,发现片段FN1、FN2信号强.结论:成功地表达了纤连蛋白各片段,蛋白芯片杂交结果显示纤连蛋白可能是通过Ⅱ型肝素结合区及其羰基端(c端)与HBsAg相互作用.
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不同试剂盒检测SARS-CoV抗体的方法学评价
目的:通过对ELISA方法和蛋白芯片法测定SARS-CoV抗体的方法学比较,探讨不同SARS试剂盒在辅助诊断非典型肺炎的临床应用价值.方法:同时用两种ELISA试剂盒检测 135 名SARS康复患者及 500 名健康献血者的SARS-CoV抗体,并随机选取 48 例小汤山医院确诊SARS康复期患者血清采用蛋白芯片法进行SARS多抗原蛋白测定.结果:重复性实验,两种ELISA试剂盒的批内变异系数分别为6.06%、10.5%;批间变异系数分别为6.57%、11.3%.相关性实验结果显示两试剂盒有良好的相关性(R2=0.9 456),且无显著性差异(P>0.05).48 例 SARS 康复患者血清用 ELISA 方法测定 34 例为阳性, 用蛋白芯片法 35 例阳性, 阳性率分别为 70.83%、 70.83%、 72.9%.结论:ELISA方法具有较好的重复性,两ELISA试剂盒之间有很好的相关;相比之下,蛋白芯片法灵敏度较高,优于ELISA方法.
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蛋白芯片与自身免疫性疾病
自身免疫性疾病是以体内存在多种针对自身抗原成分的自身抗体为特征的一类疾病.对抗原抗体及其反应系统的深入研究不仅有助于揭示本类疾病的病因和病理过程,而且对于临床诊断具有非常重要的作用.同时,随着生命科学研究进入21世纪,基因序列数据及蛋白序列数据也正以前所未有的速度增长.怎样研究和利用这些信息推进对自身免疫性疾病的认识已成为目前倍受关注的问题.
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肿瘤标志物蛋白芯片检测在消化系统肿瘤诊断中的应用价值
目的：探讨肿瘤标志物蛋白芯片检测在消化系统肿瘤诊断中的应用价值。方法选取2013年1月～2013年12月佛山南海经济开发区人民医院官窑分院接受消化道恶性肿瘤治疗的患者108例作为实验组，选取同期在佛山南海经济开发区人民医院官窑分院接受治疗的住院患者85例作为良性疾病组，同时选取108例身体状况良好的作为对照组。通过蛋白芯片对患者空腹前的腹内静脉血的血清中肿瘤标志物进行测量，比较各组的阳性率以及几种常见的肿瘤标志物在肿瘤组和对照组中的阳性均值。结果在使用C-12芯片对各组的阴性、阳性的例数进行统计，肿瘤组的阳性率为77.78%，明显大于良性疾病组和对照组的阳性率，差异有显著统计学意义（P＜0.001）。另外根据肿瘤组和对照组的部分单项TM阳性均值的检测结果显示，肿瘤组通过蛋白芯片检测出来的单项TM阳性均值普遍偏大。结论通过肿瘤标志物蛋白芯片检测消化系统肿瘤患者，具有和其他人不同的检测效果，适应于对于消化道肿瘤患者的检测，具有很高的应用价值。
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多肿瘤标志物蛋白芯片诊断肺癌指标的筛查及应用
目的 探讨多指标联合诊断肺癌的价值及组合.方法 采用蛋白芯片法检测12项肿瘤标志物;术前肺癌组126例,对照组 120例.结果 经SPSS软件的多元逐步回归法处理,12项指标中筛得肺癌联合诊断有价值的指标为CEA,NSE和铁蛋白.经组合判别的诊断效率较单项指标高.结论 CEA,NSE和铁蛋白是肺癌联合诊断的理想指标.
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肿瘤标志物蛋白芯片法联合检测在结直癌诊断价值分析
目的：探讨结直肠恶性肿瘤患者多种肿瘤标志物蛋白芯片检查的诊断价值。方法选择131例结直肠恶性肿瘤患者和62例消化道良性疾病患者血清中的12种常用肿瘤标志物使用蛋白芯片进行联检分析，比较其阳性率。结果恶性肿瘤组阳性率明显高于良性疾病组和体检对照组（P <0.001）。恶性肿瘤组 cea 、ca199、ca242、ca153、ca125和 ferritin 的阳性率明显高于良性疾病组和体检对照组（P <0.05）。结论多种肿瘤标志物蛋白芯片检查对结直肠恶性肿瘤的早期诊断具有较高的价值。
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今日生物技术
2002年生物技术领域生机勃勃,无论在国际还是在国内新的发现不胜枚举,新的成果日新月异.诺贝尔奖得主的功绩更显得光彩夺目.
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蛋白芯片检测在儿童结核病诊断中的应用研究
目的 应用结核分枝杆菌蛋白芯片检测儿童血清,初步评价其在儿童结核病诊断中的临床应用价值.方法 入选临床诊断结核病患儿42例,肺部其他疾病患儿及体检患儿各30例,应用蛋白芯片检测血清标本.结果 42例结核病患儿中任意抗体为阳性的患儿为25例,阴性的患儿为17例.蛋白芯片检测结核病的灵敏度为59.5％,特异度为66.7％.结论 结核分枝杆菌蛋白芯片对儿童结核病的诊断有较好的辅助作用,多项抗体阳性可提高诊断特异度.
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蛋白芯片多肿瘤标志物诊断直结肠癌相关指标的筛选
目的了解12项肿瘤标志物指标与直结肠癌的相关性,从而为多指标联合诊断提供依据.方法采用蛋白芯片法检测12项肿瘤标志物;术前直结肠癌组共358例,正常对照组共160例.结果12项指标中直结肠癌组较正常对照组高且具统计学意义(P＜0.05)的指标有:CEA、CA242、CA199、CA125、Ferritin、HCG、CA153、AFP、NSE、PSA,与正常对照组间差异无统计学意义(＞0.05)的指标有:f-PSA、HGH.结论单项指标诊断直结肠癌的应用价值有限,CEA、CA242、CA199、CA125、Ferritin、HCG、CA153、AFP、NSE、PSA是联合诊断的可选指标.
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多肿瘤标志物指标诊断肺癌的临床应用价值探讨
目的了解12项肿瘤标志物指标与肺癌的相关性,从而为多指标联合诊断提供依据.方法采用蛋白芯片法检测12项肿瘤标志物;术前肺癌组共97例,正常对照组共160例.结果12项指标中肺癌组较正常对照组高且具统计学意义(P＜0.05)的指标有:CEA、CA125、Ferritin、CA242、CA199、CA153、HCG,与正常对照组间差异无统计学意义(P＞0.05)的指标有:NSE、AFP、f-PSA、PSA、HGH.结论单项指标诊断肺癌的准确性均不高,价值有限,CEA、CA125、Ferritin、CA242、CA199、CA153、HCG均为肺癌相关指标,是联合诊断的可选指标.NSE指标仅对小细胞肺癌有诊断价值.
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肺结核实验室诊断的研究进展
肺结核是由结核分枝杆菌感染引起的肺部变态反应性疾病,严重威胁人类健康,是各级检验机构重点关注和检测的传染性疾病之一.近年来该病在我国发病率呈现上升趋势,虽然一经确诊后治疗手段比较成熟和固定,但早期检查和早期发现对于疾病的病程及预后有重大的影响.该文就近期肺结核在诊断技术方面的进展作一综述,为临床治疗提供指导.
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多肿瘤标志物蛋白芯片在肺癌中的临床应用
肺癌是严重威胁人类健康的恶性肿瘤,在我国居城市人口死亡原因首位.已有许多研究表明,肿瘤标志物在肺癌检出中起着非常重要的作用.蛋白芯片是以蛋白质为检测手段或检测目的的生物芯片的一种,近年来应用蛋白芯片的方法联合检测肿瘤标志物是引人关注的话题,基于目前国内外的研究进展,就多肿瘤标志物在肺癌中的临床应用简要综述.
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蛋白芯片技术检测多肿瘤标志物的应用
肿瘤标志物是指由肿瘤细胞所产生,存在于血液、细胞、组织或体液中,反映肿瘤存在和生长的一类物质,包括蛋白质、激素、酶和多胺等,目前临床上常用的肿瘤标志物大多是肿瘤相关抗原.这些标志物并非肿瘤细胞所特有,而是由于肿瘤细胞的表达量明显增加,从而与正常细胞之间存在量的差异.肿瘤标志物大多无器官特异性(广谱标志物),同一种肿瘤可含一种或多种标志物,而不同肿瘤或同种肿瘤的不同组织类型既可有共同的标志物,也可有不同的标志物.
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蛋白芯片联合检测乳头溢液中CA153、 CEA在乳腺癌早期诊断中的价值
目的 通过使用蛋白芯片联合检测乳头溢液中CA153、CEA水平,探讨联合检测乳头溢液中CA153、CEA在乳腺癌早期诊断中的价值.方法 应用蛋白芯片-化学发光法检测87例患者乳头溢液中CA153、CEA水平,并进行对照分析.结果 CA153、CEA水平在乳腺癌组显著高于良性病变组,乳腺癌组乳头溢液CA153、CEA阳性率显著高于良性病变组,乳腺癌组中两者总阳性率亦高于单一阳性率,但尚无统计学意义.结论 检测乳头溢液无损伤,使用蛋白芯片方法重复性好,联合检测诊断符合率更高,具有确切的临床应用价值.
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SELDI-TOF-MS 技术在消化系统肿瘤诊断中的应用
表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(surface enhanced laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术是随着蛋白质组学的兴起而出现的新技术,是一种基于蛋白质芯片和质谱技术的多种疾病标志物的分析平台.SELDI-TOF-MS技术是一种操作简单、方便快捷、样本用量少、敏感性高、特异性强的高通量的研究蛋白组学的方法.为此,本文就SELDI-TOF-MS技术的原理、特点及其在消化道肿瘤诊断中的应用作以下综述.
关键词： 蛋白质组学 SELDI-TOF-MS 消化系统肿瘤 蛋白芯片 -
多肿瘤标志物蛋白芯片在肿瘤筛查的应用
目的：讨论12种肿瘤标志物蛋白芯片检测系统(C-12)在肿瘤筛查的应用。方法采用C-12型多肿瘤标志物蛋白芯片检测试剂盒检测1950例健康体检者及336例住院患者血清中12种肿瘤标志物的水平，结合临床情况，分析比较检出阳性率和临床肿瘤诊断符合率。结果健康体检者C-12检测指标阳性率5.13%低于住院患者26.49%(P<0.05)；阳性健康体检者肿瘤检出率56.52%与阳性住院患者79.78%比较差异具有统计学意义(P<0.05)；蛋白芯片检测结果阳性者与临床诊断肿瘤者其符合率达71.85%。结论多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统是肿瘤高危人群筛查的重要手段，可用于临床肿瘤的辅助诊断、预后及疗效观察。
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肿瘤标志物检测对卵巢癌的诊断价值分析
目的：分析肿瘤标志物血清抗原( serum carbohydrate, CA125)、癌胚抗原( carcino-embryonic antigen,CEA)、甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)、血清铁蛋白( serum ferritin,SF)这4项指标对卵巢癌的诊断价值。方法应用蛋白芯片技术对前来北京市体检中心体检人员的血清中CA125、CEA、AFP、SF 4项肿瘤标志物水平进行检测,并结合临床诊断结果分析4项肿瘤标志物联合检测对卵巢癌临床诊断的价值。结果卵巢癌组CA125、CEA、AFP、SF水平明显高于良性瘤组及对照组(P<0.05)；卵巢癌组CA125、CEA、AFP、SF检测阳性率也高于良性瘤组及对照组(P<0.05),4项指标联合检测阳性率高(88.7%)。结论肿瘤标志物CA125、CEA、AFP、SF的检测可以提高卵巢癌临床诊断水平,对卵巢癌的预防和监测有重要意义。
