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腰椎间盘突出什么时候手术
近总有人询问椎间盘突出怎么办,能不能按摩,需不需要手术治疗.什么是椎间盘椎间盘属于没有血供的组织,一旦受损,就几乎不能自我修复.椎间盘外面的部分叫纤维环,里面的部分叫髓核.髓核是人体仅有的两种自身抗原之一,会引起机体的自身免疫反应,也就是炎症.
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4种自身抗原与狼疮性肾炎相关性的CrELISA分析
目的:分析4种自身抗原与狼疮性肾炎(LN)的相关性,以寻找具有更高敏感性与特异性的特征性自身抗原。方法收集广西医科大学第一附属医院检验科2013年7月—2014年7月期间的患者血清120例,其中正常人血清、系统性红斑狼疮(SLE)患者血清、LN患者血清及肾病综合征(NS)患者血清各30例。以CrELISA法检测四种阳性抗原蛋白在各组血清中的表达情况,并以生物信息学分析结果。结果 A1、A2在SLE组中的表达量(0.67±0.36)、(0.31±0.18)相对在正常人组中的表达量(0.47±0.24)、(0.22±0.10)与NS组中的表达量(0.33±0.17)、(0.19±0.10)更高(P<0.05),与LN组中的表达量(0.53±0.27)、(0.27±0.14),差异无统计学意义(P>0.05)。结论4种抗原中,A1、A2的敏感性相对较高,更可能是SLE/LN的特征性自身抗原,有望成为SLE/LN的诊断依据。
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雷公藤治疗类风湿关节炎细胞和分子生物学机制的研究与进展
雷公藤治疗类风湿关节炎(RA)至今已40余年, 其对RA具有显著疗效[1].现认为[2]RA是易感机体由不明病因激活免疫系统后, 在综合因素作用下, 产生一种以破坏关节为主要特征的自身免疫性疾病, 即便病因不复存在, 但因分子模拟机制作用于自身抗原而发生的自身免疫反应性.
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检测桥本氏甲状腺炎患者TPO抗体的临床意义
甲状腺过氧化物酶(TPO)是一种与膜结合的血红素蛋白,是甲状腺激素合成的关键酶,也是引起自身免疫性甲状腺疾病(AITD)的一个重要的自身抗原.其与TPO抗体(TPOAb)的免疫反应,会引起AITD患者的临床症状的变化.桥本氏甲状腺炎(HT)是一种自身免疫性甲状腺疾病,表现为甲状腺肿型即HT伴有临床甲低症状.TPOAb的检测对诊断HT病具有重要的临床意义.
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Ro60/SSA基因转染HEp-2细胞作为间接免疫荧光检测底物及其应用
本研究拟改造间接免疫荧光技术(IIF)抗核抗体(ANA)检测法的底物HEp-2细胞,建立抗60kDRo60/SSA抗体免疫荧光检测法.采用PCR扩增人源Ro60 cDNA,克隆入真核表达载体pEGFP-C1,并转染HEp-2细胞.通过荧光显微镜、免疫印迹法(IBT)及IIF鉴定转染细胞(HEp-Ro60)中Ro60-绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的表达和抗原性.分别以HEp-Ro60以及HEp-2为底物的IIF检测10份抗Ro/SSA对流免疫电泳(CIE)检测阳性、其他抗体阴性血清以及对照血清.获得的转染细胞传十几代后仍具有较强的Ro60-GFP表达,融合蛋白保持Ro60的抗原性.IIF检测中HEp-Ro60的滴度比HEp-2增加了6.7倍(P<0.01),而且2例HEp-2细胞上IIF检测为阴性的血清在HEp-Ro60上为阳性.10例阳性血清中有8例出现了特征性荧光模式.结论是HEp-Ro60可用于IIF检测抗Ro抗体,并增加了ANA检出的敏感性.
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细胞因子与多发性硬化病的关系
多发性硬化(multiple sclerosis, MS)是中枢神经系统(CNS)以髓鞘成分为自身抗原(Ag)的自身免疫性疾病,多发性炎症和脱髓鞘为本病的特征.实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis, EAE)是研究MS的动物模型,通过对EAE的研究,发现MS的发生、发展与免疫调节网络的功能失衡有关.炎性细胞因子(cytokine, CK)和下调免疫反应的免疫抑制性CK相互影响、相互制约构成这一调节网络的两个主要方面.本文就这两类CK在MS及EAE中的作用和变化以及相互之间的调控简要综述如下.
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肿瘤标志物的研究与临床应用评价
迄今所应用的肿瘤标志物主要有胚胎抗原,天然自身抗原,糖类抗原,细胞角蛋白,肿瘤相关的酶,激素以及某些癌基因等,下面予以扼要介绍.
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伴侣素包含T复合蛋白1ε亚基(CCT5)是与人γδT细胞相关的自身抗原
目的:探讨CCT5与γδT细胞及自身免疫病的关系。方法 PCR扩增人CCT5的基因,表达并纯化CCT5重组蛋白;用3条CCT5蛋白的肽段免疫小鼠,制备并筛选抗CCT5的单克隆抗体;固相化CCT5重组蛋白,体外扩增人外周血单个核细胞中的γδT细胞;用制备的单抗通过ELISA检测正常人、类风湿性关节炎( RA)及系统性红斑狼疮( SLE)患者血浆中CCT5蛋白的含量;用流式细胞技术分析不同亚型γδT细胞的比例,并与血浆CCT5含量做相关性分析。结果 PCR扩增获得CCT5基因,目的片段长度为1750 bp;经SDS-PAGE分析可见重组CCT5蛋白分子质量约为65 ku,并获得了纯化。通过筛选,获得两株抗CCT5单克隆抗体对。重组CCT5蛋白能在体外扩增外周血γδT细胞;而血浆CCT5浓度与Vγ9和Vδ2 T细胞的比例呈显著正相关。在RA及SLE患者血浆中,可溶性CCT5的浓度显著低于正常对照( P<0.05)。结论 CCT5是与人Vγ9δ2γδT细胞识别的相关自身抗原,有助于我们深入了解Vγ9δ2γδT细胞在自身免疫病中的作用。
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E3泛素连接酶 VHL 通过调控 HIF-1α维持 Treg 稳态及功能
调节性 T 细胞(regulatory T cell,Treg)是 CD4+ T 细胞的重要亚群,参与了免疫耐受和对自身抗原的耐受反应。Von Hipp-el-Lindau(VHL)基因的失活或者突变促进多种肿瘤发生。HIF-1α是 VHL 复合物的底物,在常氧状态下,HIF-1α经脯氨酸羟化酶(prolyl hydroxylase domain,PHD)的羟化后被 VHL 识别,进而被泛素化修饰,再经由蛋白酶体降解,所以维持在较低水平。有研究表明,HIF-1α参与维持 Th17和 Treg 平衡。本文作者,对于 VHL 是否参与了 Treg 细胞的调控进行了研究。
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Toll样受体在格林-巴利综合征发病机制中的作用
格林-巴利综合征(Guillain-Barre syndrome,GBS)又称急性炎症性脱髓鞘性多发性神经根炎,是累及周围神经的自身免疫性脱髓鞘疾病,主要病理改变是脱髓鞘和炎性浸润。临床上呈急性或亚急性发病,以迅速进展的肢体无力、腱反射减弱、肌张力降低为特征,是世界范围内引起急性弛缓性瘫痪的常见病因。目前多认为是由感染等因素诱导、细胞及体液免疫共同介导的自身免疫性疾病,其确切发病机制尚未完全阐明。Toll 样受体(Toll like receptor,TLR)是一种模式识别受体,可以识别病原微生物的保守抗原分子,如脂多糖、肽聚糖等。Toll 样受体信号的过度活化可打破机体对自身抗原的免疫耐受,参与自身免疫性疾病的发生。近年来研究发现 Toll 样受体家族(TLRs )在 GBS 发病及发展过程中具有重要作用。本文综述了 TLRs 及其信号通路在 GBS 发病机制中的作用,重点介绍 TLR2,4,9在GBS 发病机制中的作用。
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自身免疫性疾病患者P D-L1自身抗体的筛查
免疫检查点主要指免疫系统中存在的抑制性免疫调节信号,生理情况下一方面参与维持对自身抗原的免疫耐受,避免自身免疫性疾病,另一方面通过调节外周组织中免疫应答的持续性和强度避免组织损伤[1]。细胞毒性T淋巴细胞抗原-4(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4, CTLA-4)、程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD1)及其配体 PD-L1(programmed cell death-ligand 1)是目前免疫检查点研究的热点分子[2],被认为是免疫调节的主要信号通路。自身抗体是免疫病理调节潜在的调控方式,国外研究主要聚焦于类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA),早期文献报道可以检测到CTLA-4自身抗体[3],近期报道了 RA患者中检出 PD-L1自身抗体[4]。目前国内尚未见相关研究,在其他免疫关联性自身免疫疾病国内外均少有涉及,本研究筛查了多种自身免疫关联性疾病,以及免疫病理为基础的结核病患者PD-L1自身抗体存在状况,明确免疫检查点分子自身抗体调控方式的存在,为研究自身免疫病及免疫关联疾病发病机理、寻求新的治疗策略提供基础研究依据。
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CD4+T淋巴细胞亚群在自身免疫性疾病中的研究进展
自身免疫性疾病是指机体对自身抗原发生免疫应答导致自身组织损害所引起的疾病.其发病机制尚不十分明了,但大量研究表明自身免疫性疾病患者体内存在多种免疫异常,特别是效应T淋巴细胞紊乱及细胞因子网络失衡.自身反应性T细胞增殖和B细胞活化,可产生大量炎性因子和自身抗体引起免疫损伤.近年来,人们逐渐把研究的焦点放在不同效应T淋巴细胞的分化调节、相互作用及产生的细胞因子变化方面.根据产生的细胞因子及功能不同,原始CD4+T淋巴细胞可分化为经典的Th1、Th2及新近发现的Th17、Tr(调节性T细胞)、Th22、Th9、Tfh(滤泡性辅助性T细胞)等不同效应T细胞.
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NK细胞免疫调节功能的前沿问题--"NK-reg"是否存在
免疫系统通过识别自我和非我保护机体免受外来病原体的侵袭,同时又通过对自身抗原的免疫耐受来防止自身免疫性疾病的发生.不适当的免疫应答,如对自身抗原产生应答,对外来病原体产生免疫耐受或应答过强,均会对机体造成严重损伤.
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白癜风患者血清抗黑素细胞抗体检测及相关抗原的鉴定
目的:检测白癜风患者血清抗黑素细胞胞质和胞膜蛋白质抗体,并鉴定高识别率的胞膜抗原;检测白癜风患者血清抗酪氨酸酶相关蛋白1( TRP-1)抗体与热休克蛋白70( HSP70),并探讨二者的关系。方法体外培养高纯度正常人黑素细胞,间接免疫荧光法检测抗黑素细胞抗体并对相关抗原定位,裂解黑素细胞并抽提蛋白质,免疫印迹法检测50例白癜风患者血清(4例HBsAg阳性),并用蛋白质谱分析技术鉴定相关胞膜抗原;ELISA法检测70例白癜风患者血清(10例HBsAg阳性)抗TRP-1抗体和HSP70。结果间接免疫荧光法显示白癜风相关抗原位于黑素细胞胞质及胞膜上。免疫印迹法检测显示,膜抗原阳性率为80%,相应膜抗原相对分子质量( Mr )大约为86×103、75×103、60×103、52×103、44×103,各条带阳性率分别为36%、58%、22%、2%、2%;胞质抗原阳性率为30%,其M r约为110×103、90×103、75×103、50×103、40×103,各条带的阳性率分别为12%、4%、12%、10%、2%。20例对照血清胞膜抗原和胞质抗原阳性率分别为15%和5%。白癜风组均明显高于对照组。蛋白质谱鉴定显示:Mr为86×103和75×103的膜抗原为Lamin A/C,Mr 为60×103的膜抗原为Vimentin X1。在合并乙型肝炎的白癜风患者血清中存在高水平的抗TRP-1抗体与HSP70,并且二者浓度呈显著正相关性( r=0.927,P<0.01)。结论通过蛋白质谱鉴定,发现了一种新的白癜风相关黑素细胞膜抗原,对白癜风自身免疫机制的研究有重要意义。通过检测血清抗TRP-1抗体和HSP70,初步探讨了HBV感染与白癜风发病的关系。
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CD4+CD25+调节性T细胞研究的意义
以往的免疫学理论认为,实现自身免疫耐受的主要机制是胸腺细胞及前B(pre-B)细胞在中枢免疫器官中的克隆清除(clonal deletion).其次,进入外周的成熟淋巴细胞如果表达针对自身抗原的识别受体(TCR或者BCR),通常被诱导进入免疫无能(anergy)状态而不表现任何自身反应性.另外尚有部分淋巴细胞对自身抗原的免疫忽视(ignorance)也被认为是外周免疫耐受的机制之一.上述三种途径均以"被动"的方式实现自身免疫耐受(recessive tolerance).近年积累的大量实验证据表明,机体可能更主要地是通过CD4+CD25+调节性T(Tr)细胞以"主动"的方式维持自身免疫耐受(dominant tolerance).这一发现将改变我们对自身免疫耐受及免疫调节机制的认识,并将对免疫学基本理论的发展产生重大影响.
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调节性T细胞与类风湿关节炎的研究进展
自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿关节炎(RA)和1型糖尿病等,是由于机体自身免疫耐受出现异常的结果.一般情况下,机体有一系列控制自身反应性T、B细胞的机制.克隆消除是免疫系统发展过程中第一位的选择机制,又称阴性选择.克隆消除是一种中枢耐受,它可以将对自身抗原产生应答的T细胞进行清除.但是,这一机制并不彻底,一些自身反应性T细胞可以从这一消除机制中逃逸,从而进入外周系统造成全面破坏.为了调节这些可能产生自身损害的T细胞,机体在外周系统产生了外周耐受,包括克隆无能、外周清除、免疫忽视和一系列调节性T细胞(Treg).当机体Treg的数量减少或功能减退时,便会出现自身免疫性与变态反应性疾病.本文着重介绍Treg在RA中的作用.
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Th17与1型糖尿病
1型糖尿病是一种以选择性易感人群胰岛β细胞损害、胰岛素分泌绝对减少为特征的自身免疫性疾病。其发病率在全球持续增长,每300人当中就有1人患有1型糖尿病。1型糖尿病的病因和发病机制较复杂,至今仍未完全明确,认为其与自身免疫紊乱密切相关,近年来有研究认为其发病与Th17密切相关,本文将Th17的相关特征及其介导1型糖尿病发病的机制进行综述。
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Th17+ T细胞、吸烟与慢性阻塞性肺疾病的相关性研究进展
Th17+T细胞(T helper type 17 cell)是一种新近发现的不同于Th1、Th2细胞的CD4效应性T细胞亚群,其分化受到局部微环境中不同细胞因子的调节,可以清除特定的细胞外病原体起到保护作用,对自身抗原的特异性又可导致炎症和自身免疫性疾病发生。
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去唾液酸糖蛋白受体H1亚单位基因片段的克隆表达及其检测自身免疫性肝炎的价值
目的 克隆去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein reeeptor,ASGPR)H1亚单位显性表位435 bp基因片段,构建表达重组质粒,进行表达、纯化,以获得具有免疫活性的ASGPR蛋白,建立间接ELISA法,并探讨其在检测自身免疫性肝炎(AIH)中抗ASGPR抗体的价值.方法 将ASGPRH1亚单位糖类识别区(CRDH1)435 bp的基因片段定向克隆至真核表达载体PEGH,经D-半乳糖诱导表达,表达产物用谷胱甘肽凝胶珠(Glutathione Sepharose4B)亲和纯化,并通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法(WB)及蛋白质谱(MALDI-TOF)进行免疫活性鉴定,应用表达蛋白建立ELISA法.同时用该方法检测45例AIH、30例SLE、30例类风湿关节炎(RA)、10例原发性干燥综合征(SS)患者、30名健康献血者的抗ASGPR抗体阳性率.结果 经重组质粒测序结果证实,CRDHl/PEGH目的 基因已正确插入真核表达载体中,基因序列正确,符合表达框架;SDS-PAGE检测表达产物为l条相对分子质量42 500的蛋白表达条带.质谱蛋白肽指纹数据通过Mascot在人类蛋白质数据库中分析比对,与ASGPR H1亚单位蛋白同源性为98.34%,WB分析表明,重组蛋白具有人ASGPR抗原反应性;间接ELISA检测血清结果显示,AIH组中抗ASGPR抗体的阳性率为35.6%(16/45),非AIH组均为阴性,差异有统计学意义(χ2=31.85,P<0.01).结论 成功克隆的ASGPR H1基因可在啤酒酵母菌中成功表达,且重组的自身抗原具有较好的抗原性和特异性.应用纯化蛋白建_上的间接ELISA检测AIH抗ASGPR抗体具有较好的特异性.
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组氨酰转移核糖核酸合成酶自身抗原的原核表达及初步临床应用
目的 通过克隆人组氨酰转移核糖核酸合成酶自身抗原Jo-1基因,构建重组表达质粒,获得具有免疫活性的纯化重组蛋白,建立间接ELISA法,并探讨其在检测多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)中的抗Jo-1抗体的价值.方法 构建重组表达载体,在大肠杆菌DH5 α和BL21(DE3)中表达;融合蛋白经Ni-NTA树脂柱进行亲和层析纯化,并通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(WB)进行免疫活性鉴定;应用表达蛋白建立间接ELISA法.同时用该方法检测30名正常献血者,30例SLE,30例类风湿关节炎(RA),10例原发性干燥综合征(SS),75例PM/DM患者血清中抗Jo-1抗体.结果 经重组质粒测序和酶切结果证实,Jo-1目的基因已正确插入原核表达载体中,基因序列正确,符合表达框架;经SDS-PAGE检测显示,表达产物在相对分子质量55 000处有一明显的蛋白表达条带;WB分析表明,重组蛋白具有人Jo-1抗原反应性;间接ELISA法检测标本血清结果显示,PM/DM组中抗Jo-1抗体的阳性率为28%,非PM/DM组(疾病对照组及正常对照组)均为阴性,其差异均有统计学意义(x2=31.84,均P<0.01).结论 成功克隆了人组氨酰转移核糖核酸合成酶自身抗原Jo-1基因,其可在大肠杆菌中表达,且重组自身抗原具有较好的抗原性和特异性.应用纯化融合蛋白建立的间接ELISA法检测PM/DM抗Jo-1抗体具有较好的特异性.