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  • 力学信号的拮抗剂或激动剂对体外培养的C2C12成肌细胞自身抗原相关因子表达的影响

    作者:刘幸卉;陈荣;曾慧君;史丹丹;曹标;廖华

    目的 探讨力学信号的拮抗剂或激动剂对体外培养的C2C12成肌细胞自身抗原表达的影响.方法 根据不同的处理方法将C2C12细胞分成对照组、EGTA、A23187、钙调蛋白抑制剂calmidazolium chloride、钙调蛋白(calmodulin)、一氧化氮合成酶抑制剂NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)、硝普钠(SNP)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-2抑制剂1、重组肝细胞生长因子(HGF)、抗HGF抗体、肝细胞生长因子受体C-met和抗C-met处理组.用Western blot法检测不同处理条件下NuRD脱乙酰酶复合物可重构成分(Mi-2)、组氨酰-tRNA合成酶(HRS)、DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)和Ku-70蛋白的表达变化.结果 与对照组相比,A23187、calmodulin组、SNP、重组HGF组、重组C-met处理后,自身抗原表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),EGTA、calmidazolium chloride、L-NAME、抗HGF兔多克隆抗体、抗C-met兔多克隆抗体处理后,自身抗原蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).MMP-2组的自身抗原蛋白水平表达与对照组相比无显著性差异(P>0.05).结论 细胞外钙离子和钙调蛋白、L-NAME和SNP、HGF、C-met参与介导成肌细胞自身抗原的表达.

  • 人源M2二联体靶抗原BP-E2融合蛋白的克隆表达与鉴定

    作者:周晔;姚定康;陈燕;蒋天舒;蒋廷旺;吴传勇;陈波;仲人前;邓安梅

    目的 克隆表达抗线粒体抗体二亚型(AMA-M2)的二个靶抗原侧链2-氧酸脱氢酶复合体E2(BCOADC-E2)、丙酮酸脱氢酶复合体E2(PDC-E2)及其连接形成的二联体BP-E2融合蛋白,用于人原发性胆汁性肝硬化(PBC)的早期临床诊断.方法 根据BCOADC-E2,PDC-E2的cDNA序列设计引物,从正常人的琳巴细胞中提取RNA,通过RT-PCR方法 扩增得到相应的基因片段,经测定序列验证后插入表达栽体pET28a(+),构建重组表达裁体pET28a(+)-BCOADC-E2,pET28a(+)-PDC-E2,pET28a(+)-BP-E2,转化大肠杆茵BL21(DE3)后诱导表达蛋白质.表达蛋白经SDS-PAGE,Western-blot等鉴定.结果 经核苷酸序列测定和酶切鉴定结果表明,成功地构建了三种重组质粒.IPTG诱导表达后,获得三种融合蛋白.经免疫学鉴定,重组抗原片段具有AMA-M2的免疫原性.结论 重组表达的BP-E2融合蛋白将有利于原发性胆汁性肝硬化(PBC)的实验室诊断.

  • BIOVUE血型工作站操作出现判断模糊及处理对策

    作者:许昌林

    BIOVUE血型工作站具有灵敏度高、速度快、正确率高、故障少、操作简便、可同时进行ABO系统及Rh系统血型鉴定和交叉配血等优点。该仪器在我科使用以来结果可靠,日渐被临床所接受。Rh血型系统引起溶血性输血反应,一直是临床安全输血的重点。通过使用BIOVUE血型工作站及柱凝反应系统以来,可同时检测ABO及Rh血型系统,对Rh血型引起溶血性输血反应,自身抗原及各种干扰素引起血型鉴别误解、判断不清,具有简便安全性。现将我们操作中体会介绍给同行,以供参考。1 操作中可能出现的问题仪器使用时,电压不稳定引起温度波动,离心速度与长短,血液和抗凝剂比例不恰当,反定型已知血细胞配制有效期因素,自身病理性抗原干扰素,过量加标本于柱凝反应板因素。以上都可能引起鉴定判断模糊。2 对操作中可能出现问题的对策 BIOVUE血型工作站应安装稳压器24 h待机状态,抗凝剂与血液比例应1∶9,血液标本应及时检测,如不能及时检测,应将血液标本置于2~8 ℃保存。应防止凝集反应板被细菌污染,离心标本应严格控制2 000 r/min 5 min,反定型已知血细胞应在有效期内使用,对患有自身抗原干扰素血细胞应洗涤,标本血细胞悬液浓度在3%~5%,标本加入柱凝集反应板每柱应10 μl。注意以上因素即可明确判断,确保输血工作安全可靠。

  • 1例伴发恶性胸腺瘤的副肿瘤性天疱疮临床及免疫学研究

    作者:张秉新;王京;郑瑞;林涛;李挺;王仁贵;卜定方;朱学骏

    目的报告我国首例伴发恶性胸腺瘤的副肿瘤性天疱疮(PNP)临床及免疫学特征.方法对患者进行系统体检、医学影像学、组织病理学和免疫学检查,使用重组蛋白免疫印迹法对由胸腺瘤分泌抗体所针对的自身抗原进行了研究.结果患者确诊为PNP,伴发恶性胸腺瘤,患者血清中含有抗重组人包斑蛋白(envoplakin)和周斑蛋白(periplakin) L亚区GST融合蛋白的抗体.结论 PNP具有独特的临床表现、组织病理以及免疫学特点,患者血清中的自身抗体针对多种抗原,包斑蛋白和周斑蛋白的L亚区很可能是PNP患者血清抗体结合的主要位点.

  • 寻常型天疱疮棘层松解的机制

    作者:徐思嘉;许人超;潘萌;郑捷

    寻常型天疱疮是危及患者生命的自身免疫性大疱性疾病,临床上表现为皮肤黏膜表面松弛性水疱、大疱,伴糜烂面,组织病理学上表现为棘层松解.其发病机制尚未完全明了,主要依赖多种自身抗体的协同作用,抗原抗体的结合一方面直接干扰桥粒的黏附功能,另一方面影响细胞内的信号途径,改变蛋白酶类的活性和钙的代谢,终导致角质形成细胞的分离、棘层松解的形成.

  • 1型糖尿病发病及防治的免疫学研究进展

    作者:李蕴;赵文明

    1型糖尿病是一种T细胞介导的自身免疫性疾病,胰岛β细胞受到自身免疫破坏而不能合成和分泌胰岛素,临床症状较严重.大量研究表明,1型糖尿病的发病机制与β细胞自身抗原、巨噬细胞、树突状细胞、B淋巴细胞和T淋巴细胞等有关,并且免疫学防治近年来成为1型糖尿病的研究热点.本文就此对1型糖尿病的免疫学相关发病因素和防治做一具体介绍.

  • 梅尼埃病的相关免疫因素研究进展

    作者:龚帆;谭长强

    梅尼埃病的病因至今仍未完全清楚,但近十几年,随着耳免疫学研究的进展和深入,大量实验研究和临床观察结果发现,在部分梅尼埃病患者的发病过程中,免疫学因素起着极其重要的作用,本文就国内外有关梅尼埃病的免疫学研究的新成就加以综述.

  • 钠/碘转运体与甲状腺疾病

    作者:沈耿;常向云

    钠/碘转运体(NIS)是一种膜蛋白,在甲状腺细胞摄碘中起重要作用.此蛋白受多种因素的调控,与其他甲状腺自身抗原关系密切.NIS在某些甲状腺疾病的发病及治疗中起重要作用,成为目前研究的热点.

  • 风湿性疾病概要

    作者:刘嘉玲

    风湿病学是研究各类风湿性疾病与骨、关节、肌肉、肌腱、滑膜等疾病的一门专业学科.它是以免疫学为基础理论的,阐明自身免疫病如何因自身耐受遭到破坏,导致机体免疫系统对自身抗原发生免疫应答,产生自身抗体或致敏淋巴细胞,从而引起相应组织或器官的病理性损伤,并出现一系列复杂的临床表现.风湿病学在我国是一门较年轻的新兴学科,但随着分子遗传学、分子免疫学、分子药理学的深入研究,本学科近年来发展迅速,且鉴于各种风湿病患病率在我国呈上升趋势,为协助临床医师进一步了解风湿性疾病,现对风湿病学基本要点与近年进展介绍如下.

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