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RGD-FasL羟乙基壳聚糖缓释纳米粒制备及生物学研究
目的 使用羟乙基壳聚糖制备纳米颗粒(NPs),用来包载RGD-FasL融合蛋白(RF),鉴定其功能并评估其在肝癌治疗中的作用.方法 采用离子凝胶法制备RF羟乙基壳聚糖缓释纳米粒(RF-NPs);通过透射电镜、动态光散射法考察其理化性质;用紫外分光光度仪检测蛋白浓度来计算其载药率、包封率和体外释放度;通过MTT比色法检测对H22细胞增殖活性的影响,应用H22细胞建立小鼠肝癌模型进行体内抑瘤研究.结果 制备的RFNPs呈球形或类球形,平均粒径198.3 nm,Zeta电位+25 mV,包封率较高,且具有缓释效果,150 mg/L浓度时对H22细胞抑制率大于70％,并能在小鼠体内产生比较明显的抑瘤效果.结论 离子凝胶法制备RF-NPs的条件缓和、方法简单,是癌症治疗中具有很好的前景的蛋白药物载体.
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藤蟾方抑瘤及其诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究
目的探讨藤蟾方的抑瘤作用,对荷瘤小鼠胸腺、脾及肿瘤细胞凋亡指数的影响.方法建立小鼠移植性肝癌 H22肿瘤动物模型,给予藤蟾方高、中、低剂量灌胃,并设阳性对照组( 5- FU组)和阴性对照组(模型组) 10d后处死,观察结果.结果治疗 10d后,藤蟾方高、中、低剂量组均有抑瘤作用,其中以中剂量组疗效为显著( p<0.01),抑瘤率达 60.8%;肿瘤细胞凋亡指数比模型组高( p<0.05或 p<0.01),与 5- FU组比较无显著差异;小鼠胸腺、脾指数与 5- FU组比较有显著差异( p<0.01).结论藤蟾方中剂量组抑瘤效果佳;对小鼠免疫功能指标胸腺、脾具有保护作用;诱导肿瘤细胞凋亡,是藤蟾方抑瘤的机理之一.
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海芋石油醚部位对肝癌H22荷瘤小鼠的抑制及诱导凋亡作用研究
[目的]探讨海芋石油醚部位对肝癌H22荷瘤小鼠的抑制及诱导凋亡作用.[方法]建立小鼠肝癌H22移植瘤模型,随机分为模型组,顺铂组和海芋石油醚部位0.8 g·kg-1、0.4 g·kg-1、0.2 g·kg-1剂量组.观察小鼠肿瘤生长情况,测定抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数,H&E染色法观察肿瘤病理形态,流式细胞术检测H22肿瘤细胞凋亡情况,Western blot检测凋亡蛋白pro-caspase-8、pro-caspase-3、Bcl-2和Bax表达情况.[结果]海芋石油醚部位0.8 g·kg-1剂量组抑瘤率达31.41%;H&E染色法结果表明,海芋石油醚部位能使H22肿瘤细胞出现明显的凋亡形态改变;流式细胞术实验结果表明,随海芋石油醚部位给药剂量的增加,H22肿瘤细胞凋亡率也增加;Western blot结果显示,海芋石油醚部位能下调pro-caspase-8和pro-caspase-3,增加Bax/Bcl-2的比例.[结论]海芋石油醚部位能抑制H22荷瘤小鼠肿瘤的生长,其机制与诱导肿瘤细胞凋亡有关.
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红景天苷对腹水型H22肝癌抑制作用及其机制的初步研究
目的：观察红景天苷体内抗肿瘤作用,初步探讨其可能机制。方法建立荷瘤小鼠模型,实验分为5组,即红景天苷低、中、高剂量组,NS组及苦参碱对照组；ip给药8 d,观察小鼠肿瘤生长情况及生存时间,测定抑瘤率、生命延长率、脾脏系数以及血清IL-2、IL-12水平等指标。结果红景天苷能明显改善荷瘤小鼠一般状况；红景天苷低、中、高3个剂量组均有抑瘤作用( P<0．01),抑瘤率分别为28．9%、43．3%、53．5%；红景天苷各剂量组均能延长小鼠的生存时间( P<0．01),生命延长率分别为37．54%、48．96%、52．85%；红景天苷各剂量组小鼠脾脏系数与血清IL-2、IL-12水平均明显高于NS组与苦参碱组。结论红景天苷具有明显的抗肿瘤作用,其机制可能与提高机体免疫功能有关。
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盐酸米托蒽醌脂质体的药效学及毒性研究
目的 对盐酸米托蒽醌脂质体(Mit-lipo)与盐酸米托蒽醌普通制剂(Mit-inj)进行药效学及毒性比较研究.方法 采用小鼠肝癌H22、小鼠前列腺癌RM-1移植肿瘤模型探讨Mit-lipo的抗肿瘤作用;犬急性毒性、大鼠和犬长期毒性研究比较Mit-lipo和Mit-inj毒性差异.结果 Mit-lipo 1、2、4和6 mg·kg-1各剂量对H22实体瘤的抑瘤率分别为75.1%、76.5%、90.1%和93.8%,也可剂量依赖性抑制小鼠前列腺癌RM-1肿瘤的生长,与等剂量的Mit-inj 相比疗效明显增强.犬急性毒性结果表明Mit-lipo大耐受剂量(MTD)为2.0 mg·kg-1,毒性表现为轻微至中度的皮肤毒性,给药4周后皮肤毒性逐渐减轻.大鼠长期毒性结果表明Mit-lipo可明显降低Mit-inj引起的骨髓毒性,并产生新的皮肤毒性反应.犬长期毒性结果表明Mit-lipo 0.1、0.3和0.45 mg·kg-1组主要毒性反应为轻微至轻度的皮肤毒性反应,主要毒性靶器官为睾丸和皮肤,MTD为0.45 mg·kg-1,Mit-inj 0.45 mg·kg-1可致WBC和PLT值降低和睾丸毒性病变.结论 与普通制剂相比,米托蒽醌脂质体的体内抑瘤效果明显增强,且骨髓毒性明显降低.
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地鳖纤溶活性蛋白对S180和H22荷瘤小鼠肿瘤的抑制及诱导细胞凋亡作用
目的 研究地鳖虫纤溶活性蛋白(fibrinolytic proteins of Eupolyphaga sinensis,EFP)对肿瘤细胞凋亡的诱导作用及其机制.方法 采用纤溶平板法检测了EFP纤溶活性;采用流式细胞术检测了EFP高、中、低浓度对小鼠S180和H22实体瘤组织细胞凋亡的诱导作用;采用免疫组织化学法检测了Caspase-3的表达;采用TRAP-PCR银染法检测了腹水瘤组织端粒酶活性.结果 EFP对S180和H22实体瘤有一定的抑瘤作用,对H22和S180腹水瘤细胞端粒酶活性有一定降低作用,可提高Caspase-3表达水平,诱导细胞凋亡.结论 EFP具有诱导S180和H22肿瘤细胞凋亡作用.
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地鳖纤溶活性蛋白对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用
目的 探讨地鳖纤溶活性蛋白(fibrinolytic protein from Eupolyphaga sinensis Walker,EFP)对H22荷瘤小鼠的抑瘤功效.方法 采用水提取法对地鳖进行成分分离;皮下接种肿瘤细胞建立荷瘤小鼠动物模型;灌胃和皮下注射法观察EFP的抑瘤作用;ELISA法检测血清抗H22抗体水平;记录各组体重变化、脾脏和胸腺等免疫器官的器官系数,检测肝脏丙二醛(MDA)水平、肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性、肝脏谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)以及血清谷丙转氨酶(GPT)活力等生理生化指标.结果 EFP具有明显的抑瘤活性.经EFP灌胃和皮下注射后的荷瘤小鼠,与对照组荷瘤小鼠相比其胸腺指数、脾指数明显增加;抗H22抗体水平以及MDA、SOD、GPT、GOT活性明显增加;肿瘤生长缓慢.结论 EFP是地鳖抗肿瘤作用的主要有效成分,EFP在动物体内具有抗肿瘤作用,能通过增强荷瘤小鼠参与免疫抗体以及相关酶的活性而发挥抗肿瘤作用.
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参麦注射液对荷 H22小鼠免疫功能的影响
目的：研究参麦注射液对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法建立H22细胞小鼠移植瘤模型，将荷瘤小鼠随机分为模型组（荷瘤空白组），参麦注射液三个剂量组，另设空白参考组，每日灌胃给药，通过测定对白细胞总数及分类，sIL-2R、IL-2、IL-4含量，脾淋巴细胞增殖及迟发超敏反应能力的影响，探讨参麦注射液的免疫调节作用。结果参麦注射液可提高荷瘤小鼠白细胞总数；降低荷瘤小鼠血清sIL-2R的含量，提高IL-2，IL-4水平，改善小鼠脾淋巴细胞增殖和迟发型超敏反应能力。结论参麦注射液具有增强机体免疫功能的作用。
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牛樟芝微囊对肝癌H22的体内抗肿瘤实验研究
目的 观察牛樟芝微囊在体内对肝癌H22的影响作用.方法 采用皮下接种肝癌H22实体瘤模型观察牛樟芝微囊体内的抑瘤作用.结果 牛樟芝微囊能抑制肝癌H22实体瘤小鼠的肿瘤生长,高、中剂量组抑制率分别为45.24％(P<0.01)和33.10％(P<0.05).与模型对照组相比均有显著差异.结论 牛樟芝微囊在体内对肝癌H22肿瘤的生长有明显的抑制作用.
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阿司匹林对小鼠腹水型肝癌H22的作用研究
目的 研究阿司匹林对小鼠腹水型肝癌(H22)瘤株的体内外抑制作用. 方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测阿司匹林对H22细胞生长的抑制作用,并描绘量效曲线图. 建立肝癌H22细胞移植瘤模型并进行体内实验,观察尾静脉给予阿司匹林后体内抗癌效果. 结果 阿司匹林对小鼠肝癌H22细胞具备增殖抑制作用并表现出明显的剂量依赖性;同时,阿司匹林对肝癌 H22细胞实体移植瘤模型具备体内抗癌作用.200mg/(kg· d)尾静脉给药,抑瘤率达40.11%. 结论 阿司匹林对小鼠腹水型肝癌H22体内外均有抑制作用.
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中药仙鹤复方提取物急性毒性试验及对小鼠移植性肿瘤H22的抗肿瘤作用研究
目的 研究中药仙鹤复方乙醇提取物的急性毒性,以及中药仙鹤复方乙醇提取物和水提取多糖对小鼠移植性肿瘤H22的抑瘤作用,进而对中药仙鹤复方进行抗肿瘤活性研究.方法 测定中药仙鹤复方乙醇提取物的LD50,建立荷实体型肝癌H22小鼠模型,观察中药仙鹤复方乙醇提取物和水提取多糖的抑瘤作用.结果 中药仙鹤复方乙醇提取物的LD50为26.95g·kg-1,95%可信区间为21.99～33.01g·kg-1;中药仙鹤复方乙醇提取物9.25g·kg-1·d-1剂量组与中药仙鹤复方水提取多糖8.05g·kg-1·d-1剂量组时小鼠移植性肿瘤H22均有明显的抑制作用,其抑瘤率分别为49.2%(P＜0.01)和33.7%(P＜0.01).结论 中药鹤复方乙醇提取物和水提取多糖对小鼠移植性肿瘤H22有抑制作用.
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康爱胶囊抗肿瘤作用实验研究
目的 研究康爱胶囊急性毒性及对小鼠实体型移植性恶性肿瘤宫颈癌(U14)和腹水型移植性恶性肿瘤肝癌(H22)的抗肿瘤活性.方法 测定小鼠灌胃给药LD50,建立实体瘤宫颈癌(U14)和腹水型肝癌(H22)的小鼠模型[1],观察其抗肿瘤作用.结果 测得康爱胶囊对小鼠灌胃给药的大耐受量(MTD)为35.2g·kg-1;1.3g·kg-1,2.5g·kg-1连续灌胃10天对实体瘤宫颈癌(U14)小鼠抑瘤率分别达92.2%(P＜0.05),99.3%(P＜0.01):2.5g·kg-1,10.0g·kg-1连续灌胃7天对腹水型肝癌(H22)小鼠生命延长率分别达30.7%(P＞0.5)、34.6%(P＞0.5).结论 康爱胶囊对实体型肿瘤宫颈癌(U14)有明显的抑制作用,且毒性较小.
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扶正抑瘤方对ICR小鼠H22皮下移植瘤组织中凋亡相关因子表达的影响
目的 探讨扶正抑瘤方(FYG)与5-FU联用对凋亡相关因子及5-FU靶酶TS基因、蛋白表达的影响. 方法 建立H22肝癌ICR小鼠皮下移植瘤模型,分模型组、5-FU组、FYG组、5-FU+FYG 4组,连续给药FYG(3.6 g/kg·d)和5-FU(10 mg/kg·d)5 d,免疫组化方法检测肿瘤组织中凋亡相关因子(Bax,Bcl-2)和TS的蛋白表达情况,RT-PCR检测凋亡相关因子(Bax,Bcl-2,p53,C-myc)和TS的基因表达. 结果 与模型组相比,其它3组小鼠肿瘤组织中Bax蛋白表达显著上调(P＜0.05 or P＜0.01)；FYG组和5-FU+FYG组小鼠肿瘤组织中Bax基因表达明显上调(P＜0.05or P＜0.01)；5-FU组和5-FU+FYG组小鼠肿瘤组织中野生型p53基因表达显著上调(P＜0.05 or P＜0.01). 结论 FYG与5-FU联合应用可上调凋亡相关因子蛋白及基因的表达,但对TS几乎没有影响.
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竹叶黄酮对小鼠H22肿瘤抑制作用的研究
目的:探讨竹叶黄酮对荷瘤小鼠的抑瘤作用.方法:观察不同剂量竹叶黄酮对荷瘤小鼠肿瘤的抑瘤率、生命延长率、胸腺指数、脾脏指数以及用药前后体重变化等指标的影响.结果:竹叶黄酮具有一定的体内抗肿瘤作用,大、小剂量组的抑瘤率分别为31.6％、9.4％.竹叶黄酮组对荷瘤小鼠虽然没有环磷酰胺那么明显的抗肿瘤作用,但其毒副作用较少,还能延长腹术瘤小鼠的生存时间,增强小鼠免疫能力.结论:竹叶黄酮对小鼠恶性腹腔积液的形成具有抑制作用,还能抑制实体瘤的生长并增强小鼠机体的免疫能力,这为临床应用提供了实验依据.
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土家药东方蠊对荷H22小鼠肝癌皮下移植瘤生长的抑制作用
目的:研究土家药东方蠊提取物对荷肝癌H22小鼠的抑瘤作用,探求民族药对肝癌的治疗价值.方法:取对数生长期的H22细胞接种于BALB/c小鼠皮下,建立荷肝癌H22小鼠模型.随机分为对照组和中药大、中、小剂量组,分剐灌胃0.9％生理盐水及东方蠊提取物大中小剂量(52,26,13 mg/10g).2周后,各组小鼠称体质量,剥离皮下移植瘤,称瘤重,计算抑瘤率；并用TUNEL的流式细胞仪分析移植瘤细胞凋亡率.结果:东方蠊各组抑瘤率及细胞凋亡率明显高于对照组(P＜0.05或P＜0.01).结论 土家药东方蠊可抑制肝癌小鼠移植瘤的生长,促进肿瘤细胞凋亡,这可能是东方蠊抗肝癌的作用机制之一.
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咖啡酸锗对小鼠肝癌H22免疫器官的影响
目的:探讨咖啡酸锗对小鼠肝癌H22免疫器官的影响.方法:建立小鼠肝癌H22移植瘤模型,应用咖啡酸锗腹腔注射给药后,计算胸腺(脾脏)指数.结果:咖啡酸锗对小鼠胸腺(脾脏)指数高于环磷酰胺.结论:咖啡酸锗对小鼠免疫器官没有明显的抑制作用,但其是否有免疫增强作用,还有待实验研究.
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肿瘤细胞及辐照对近交系KM-HL小鼠影响的研究
目的 观察KM-HL鼠对肿瘤细胞的易感性;对137Cs-γ射线致免疫功能下降的研究,为KM-HL鼠作为实验用鼠提供理论依据.方法 给KM-HL小鼠接上S180、U14和H22等肿瘤,观察其生长情况;使KM-HL受到137Cs-γ线6.5Gy照射后,致免疫功能下降,观察血液、造血系统、脾系数、胸腺系数等免疫指标.结果 KM-HL小鼠接种S180、U14和H22的液体瘤细胞或实体瘤均生长较好;KM-HL小鼠受到照射后各项生理指标与对照组比有所下降并有统计学意义(P<0.01).结论 近交系KM-HL小鼠可作为肿瘤药物筛选和免疫功能药物筛选的实验用鼠.
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阿魏药酒抗肿瘤作用的初步探讨
目的 通过整体、细胞、分子三个水平实验,初步研究阿魏药酒的抗肿瘤作用.方法 建立小鼠H22肝癌皮下移植模型,灌胃阿魏药酒后测定肿瘤体积、体质量、免疫器官指数和血清中Col-I、CAT、T-SOD活力;采用MTT法测定不同浓度阿魏药酒对小鼠脾淋巴细胞增殖和肿瘤细胞生长的影响;明胶基质金属酶谱法考察阿魏药酒对基质金属蛋白酶表达的影响.结果 本实验剂量下,与对照组比较,阿魏药酒灌胃可使肿瘤生长减慢,抑瘤率为12.8%,对各脏器指数均无显著性影响,可使血清中Col-I、T-SOD和CAT活力增强,给药期间不影响小鼠生长状态;实验所用阿魏药酒浓度对小鼠乳腺癌4T1细胞生长无明显影响,低浓度能促进小鼠脾淋巴细胞增殖;阿魏药酒可降低MMP-2和MMP-9的表达.结论 阿魏药酒对肿瘤细胞无直接生长抑制作用,可阻止肿瘤的浸润和转移,与具有细胞毒作用的其他中药联合用于抗肿瘤治疗更合理,其抗肿瘤作用可能与其免疫调节和抗氧化作用有关.
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生附子对小鼠H22肝癌皮下移植瘤模型的抗肿瘤作用研究
[目的]研究生附子水煎液对小鼠H22肝癌皮下移植模型的作用.[方法]建立小鼠H22肝癌皮下移植肿瘤模型,次日治疗组用生附子水煎液灌胃治疗,模型组用生理盐水灌胃.通过检测小鼠体质量、自主活动、瘤重和瘤体积,观察肿瘤组织病理学变化,评价生附子水煎液对H22肝癌皮下移植瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用.[结果]与模型组小鼠体质量比较,给药组体质量上升相对平缓,自主活动增多,生存状态良好.给药组的肿瘤组织重量较轻,与模型组相比有显著性差异(P＜0.05).HE染色结果表明:模型组小鼠的肿瘤组织细胞核大、呈致密深染,细胞核与细胞质比例失衡,细胞核密集区域较多,而给药组的肿瘤组织染色后,细胞核密集程度与模型组相比明显降低,核染色较浅.[结论]生附子水煎液对小鼠H22肝癌皮下移植瘤的生长具有抑制作用.
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天南星抗肿瘤的初步研究
目的：观察天南星的抗肿瘤作用。方法体内实验：建立小鼠 H22肝癌皮下移植模型，灌胃给予天南星粉，2次／d，监测小鼠体质量，检测肿瘤体积、质量以及免疫器官指数，评价天南星对肿瘤生长的影响；体外实验：采用M T T法测定天南星水煎液对lew is肺癌细胞生长的影响。结果体内试验：在本实验剂量下（100 g／L ），与对照组比较，天南星灌胃可使肿瘤生长减慢，抑瘤率为347．％，给药期间不影响小鼠生长状态，胸腺指数和肝脏指数略微降低，脾脏指数升高；体外实验：天南星水煎液在实验剂量下对lew is肺癌细胞生长无影响。结论天南星有抗肿瘤作用，其抗肿瘤作用不是直接细胞毒作用。
