佐太和HgS对药物代谢酶和转运体基因表达的影响

藏药佐太(主要含β-HgS)和中药朱砂(96％ HgS)是传统医药中的配伍成分,其含重金属(汞)的安全问题和中西药合用时的相互作用问题日益受到关注.本实验就其对药物代谢基因的影响进行了研究.小鼠连续7d口服给予不同剂量佐太、HgS(10,30,100,300mg· kg-1),或氯化汞(HgCl2,33.6mg·kg-1),RT-PCR检测药物代谢酶和转运体蛋白相关基因表达.佐太和HgS对Ⅰ相(CYP1A2,CYP2B10,CYP3A11,CYP4A10)和Ⅱ相(UGT1A1,UGT2A3,SULT1A1,SULT2A1)药物代谢酶以及转运体蛋白(OATP1A1,OATP1A4,OATP1B2,OATP2B1,MRP1,MRP2,MRP3,MRP4)均无明显影响,而HgCl2显著上调CYP2B10,CYP4A10,UGT1A1,UGT2A3,SULT1A1,SULT2A1,OATP1A4,MRP1,MRP3,MRP4,对OATP1A1有抑制作用.综上,佐太和HgS在300 mg· kg-1的剂量下对肝脏代谢基因的表达没有产生明显的影响,而1/10等汞量的HgCl2则明显上调或改变Ⅰ相、Ⅱ相药物代谢基因和转运体基因的表达.

藏药佐太的炼制配方原料“能持八金”灰的化学成分与结构分析

目的:对藏药“佐太”炼制的配方原料——“能持八金”灰的化学成分和微观结构进行分析,以探明佐太炼制物质基础.方法:采用扫描电镜-X射线能谱(SEM-EDX)和X-射线衍射(XRD)分别对能持八金(金、银、青铜、红铜、黄铜、铁、锡、铅)灰的元素成分、结构组成及微观形态进行分析测定.结果:扫描电镜-能谱分析发现,八金灰中除了八金本身所含主要元素外,还含有大量的硫、氧、碳及一定量的其他元素.XRD结构分析发现,金灰中存在AuPb2,PbO(正方晶型和斜方晶型),Pb单质等,银灰中存在Ag2S和PbO等,青铜灰中存在Cu1.98(Zn0.73Feo.29)Sn0.99S4,CuS,SiO2,NaCu2S2及Ca( Fe+2,Mg)( CO3)2等,红铜灰中存在Cu7S4(斜方晶型和单斜晶型),CuO等,黄铜灰中存在Cu7 S4,PbS,ZnS,CaCO3,NaCu2S2等,铁灰中存在FeS,Fe+2 Fe2+3 O4及SiO2等,锡灰中存在SnS及SiO2等,铅灰中存在PbS,PbSO4,SnS2等物相.结论:通过扫描电镜-能谱分析和X-射线衍射分析,获得了八金灰的元素成分和微观结构组成的基础数据,为探讨佐太炼制的物质基础提供了有力的科学数据支持.

藏药佐太安全性研究及其复方当佐的临床安全观察初探

佐太是含重金属藏药的典型代表,迄今仍缺乏现代安全性评价数据.该研究通过佐太的急性毒性试验、亚急性毒性试验、单次给药汞分布试验、长期汞蓄积毒性试验及其复方当佐的临床安全性初步观察,以期获得佐太的药用安全数据.急性毒试验发现:半数致死量试验的各组KM小鼠未出现死亡和中毒现象,未做出佐太LD50;佐太的大耐受量为80 g·kg-1.亚急性毒性试验发现:佐太在低剂量(13.34 mg· kg-1·d-1)和中剂量(53.36 mg·kg-1·d-1)时可降低Wistar大鼠血清ALT,AST,Crea水平,且在低剂量时具有显著性差异;高剂量(2 000 mg·kg-1·d-1)佐太可显著增加血清ALT,AST,Crea,MDA水平;血清BUN和GSH水平随着剂量增加而降低,呈显著性量效关系.单次给药分布试验发现:佐太单次给药24 h后,Wistar大鼠的肾脏、肝脏及肺中汞含量出现升高趋势,且在肾脏中呈显著剂量依赖性.长期蓄积毒性试验发现:KM小鼠在临床等效剂量(6.67 mg· kg-1·day-1)给药佐太4.5个月、停药1.5个月,从2.5个月时肾脏开始出现显著性汞蓄积,停药后又逐步降低,而肝、脾和脑中汞含量及血清ALT,AST,TBIL,BUN,Crea均无显著性变化;在给药4.5个月时KM小鼠肾、肝和脾组织有轻微结构性变化,停药后又恢复正常;佐太组动物体重增加与对照组之间无显著性差异.当佐临床安全观察发现:受试者在临床剂量下服药当佐1个月,血清生化、血常规和尿常规各指标均无不良变化.该研究证实了传统藏药佐太的毒性极低,其临床配伍药用安全性较好,在临床剂量下和临床服药周期内对机体无不良作用,但长期大剂量用药可能会对肾脏等产生一定的影响.

含HgS传统药物朱砂和佐太中汞的胃肠道溶出及吸收蓄积研究

中药朱砂和藏药佐太的主要成分分别为α-HgS和β-HgS,但是关于朱砂、佐太、α-HgS和β-HgS中的汞在人体胃肠道中的溶出吸收以及在器官中的分布蓄积的比较研究未见报道.该研究模拟了4种硫化汞类化合物在人体胃肠道中的溶出过程,然后测定汞溶出度,分别比较不同药物间汞溶出度差异以及不同溶液的促溶能力差异.为了探究朱砂和佐太在机体内的吸收蓄积情况,分别以其临床等效剂量灌胃小鼠,同时设置与朱砂等汞量的α-HgS和β-HgS给药组,以及与佐太等汞量的β-HgS和HgC12给药组,然后比较各组不同药物中的汞在小鼠体内吸收蓄积能力差异以及小鼠不同组织器官对汞的蓄积能力差异.实验结果表明,佐太在人工胃肠液中的汞溶出度均较大,其次是β-HgS,朱砂和α-HgS也有一定的溶出.对于小鼠汞吸收蓄积实验,HgCl2吸收蓄积能力强,β-HgS其次,α-HgS略强于朱砂;不同器官对汞的蓄积能力大小依次是肾＞肝＞脑.该研究贴近临床实际,观察含汞药物朱砂和佐太在胃肠道中的溶出以及吸收分布蓄积,为临床安全用药提供参考,也希望为含重金属药物的安全性评价提供研究模式.

藏药“佐太”的粉末X射线衍射指纹图谱分析

通过粉末X射线衍射对藏药“佐太”、朱砂、轻粉的粉末X射线衍射(PXRD)谱图进行比对分析,明确了藏药“佐太”中汞主要以黑色的立方晶系β型HgS形式存在,建立了“佐太”粉末X射线衍射法指纹图谱.“佐太”粉晶主成分黑辰砂和硫的X射线衍射花样以强线d-(I/I0)％分别表达为:黑辰砂3.356 4/100,2.061 4/55.0,2.911 8/35.0,1.760 1/37.0,1.339 5/12.0.1.304 5/10.0,1.192 0/10.0,1.683 4/7.0,1.458 0/5.6;硫3.824 4/100,3.197 5/40.2,3.442 2/38.1,3.095 6/19.7,5.690 9/16.8,2.851 0/16.3,2.414 4/11.3.这16条衍射谱线可作为“佐太”粉末X射线衍射法指纹图谱的主要参考值,对“佐太”的快速、无损分析和“佐太”质量标准的补充具有现实意义.

藏药佐太对CYP1A2和NAT2的活性及蛋白和mRNA表达的影响

藏药佐太对西红花苷-1大鼠体内药动学的影响

目的 探讨藏药佐太对西红花苷-1在大鼠体内药动学特征的影响.方法 对照组(连续ig生理盐水7 d)和实验组(连续ig佐太混悬液7 d或21 d)大鼠按5 mg/kg剂量im西红花苷-1后,采用反相高效液相色谱法测定给药后大鼠血浆中西红花苷-1的质量浓度,DAS 2.0软件计算各组大鼠西红花苷-1的药动学参数.结果 实验组大鼠分别按10 mg/(kg·d)连续ig佐太7 d和21 d后,西红花苷-1的药动学特征发生明显变化,AUC、C_(max)和MRT显著大于对照组,而CL和Vd显著小于对照组,并且随着佐太用药时间的延长,西红花苷-1的AUC增大.结论 给予佐太后西红花苷-1在大鼠体内的吸收显著增多、消除显著减慢.

略谈藏医药佐太的炮制及应用

目的:利用现代炮制工具,缩短周期,减少工作量.方法:取水银100 kg进行炮制.结果:单缸和八缸球磨机炮制佐太不但不影响其疗效,生产周期为传统炮制时间的1/2.结论:采用此炮制发具有很好的适应性和可行性.

藏药“佐太”通过抑制caspase-3促进293细胞增殖

目的:研究藏药“佐太”对人胚肾细胞293生长的调节作用,初步探讨“佐太”对caspase-3的表达的调控与293细胞增殖的关系.方法:通过MTT检测不同浓度的藏药“佐太”作用于人胚肾细胞293的增殖情况,同时RT-PCR及WesternBlot方法初步探讨藏药“佐太”对293细胞作用48和后caspase-3表达的变化情况.结果:“佐太”在0.125g/L和0.25g/L浓度作用293细胞48和后发现对293细胞具有一定的促增殖作用；而在RT-PCR结果中可以看到“佐太”0.25g/L浓度作用293细胞48和后caspase-3表达量较低,而在0.125g/L浓度时caspase-3表达量略有增加；结论:藏药“佐太”在一定浓度时,通过抑制caspase-3的表达促进人胚肾细胞293的增殖.

藏药佐太在模拟胃液、肠液中的汞溶出差异

目的 比较佐太在模拟胃液、肠液中的汞溶出差异.方法 收集16批佐太,测定其总汞含有量,以及在模拟胃液、肠液中溶出的汞质量浓度,并计算其溶出量.结果 16批样品中总汞含有量为44.46％～50.7％,在模拟胃液中的汞溶出量为432.64 ～ 51 817.64 ng,差异120倍;在模拟肠液中的汞溶出量为19.81～313.29 ng,差异16倍.结论 佐太在模拟胃液中的汞溶出量和差异均显著高于在模拟肠液中,本研究可为其质量研究提供参考.

微波消解ICP-AES法同时测定藏药佐太中的4种金属元素

藏药佐太也称为佐塔、佐台,是藏语"仁青欧曲佐珠钦木"的简称[1].佐太在藏医药的使用中有悠久的历史,应用面广,使用量大,其配制工艺独特烦琐,用料复杂,是在金属汞中加以多种辅助药物,经过洗、涤、煮等多道复杂炮制工艺,去垢、去锈、去毒后加以金、银等多种重金属煅烧而成的水银灰药[2].

藏药佐太中汞在小鼠体内的蓄积

目的 探索给予KM小鼠不同剂量和不同时间的佐太后,汞在体内的蓄积情况.方法 KM小鼠随机分为空白组,佐太低、中、高剂量组(42 d,6.07、60.70、606.97 mg/kg;14 d,606.97 mg/kg),给药后,测定小鼠脑(嗅球、皮层、海马、下丘脑、脑干、小脑)、心脏、肺脏、肾脏、肝脏、脾脏、血清、肌肉中汞含有量.结果 与空白组相比,给予42 d低剂量佐太后,能够显著增加小鼠海马、小脑、肺脏、肾脏、肝脏、血清中汞含有量;给予42 d中剂量佐太后,能够显著增加小鼠嗅球、皮层、海马、脑干、小脑、心脏、肺脏、肾脏、肝脏、脾脏、血清中汞含有量;给予42、14 d高剂量佐太后,能够显著增加小鼠嗅球、皮层、海马、下丘脑、脑干、小脑、心脏、肺脏、肾脏、肝脏、脾脏、肌肉、血清中汞含有量.结论 小鼠灌胃佐太后,汞在不同组织中产生蓄积,且表现出剂量和时间依赖性,提示佐太及其复方制剂不宜过量、长期使用.

藏药佐太在两种抑郁小鼠模型中的抗抑郁活性

目的 通过行为绝望模型—悬尾实验(TST)、不可预测性慢性温和应激(CUMS)模型,探索藏药佐太(硫化汞、硫磺等煅制品的混合物)的抗抑郁作用.方法 行为绝望模型—悬尾实验中,KM小鼠给予佐太14 d后,通过测定悬尾实验不动时间、开场实验(OFT)、血清中皮质酮(CORT)变化,评价佐太的抗抑郁活性.构建CUMS模型KM小鼠,给予佐太42 d,通过糖水偏好实验、开场实验和强迫游泳实验,进一步评价佐太的抗抑郁作用.通过ELISA法测定小鼠血清中5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)和海马中脑源性神经营养因子(BDNF)的水平.结果 行为绝望模型—悬尾实验中,与空白组相比,佐太在剂量为60.697、303.49 mg/kg时能显著降低小鼠悬尾不动时间和血清中CORT水平.CUMS模型实验中,与CUMS模型组相比,佐太在剂量为6.069 7、60.697、606.97 mg/kg时,均可显著提高受试小鼠的糖水偏好率、开场实验中的自主活动,同时可显著降低强迫游泳实验(CFST)中的不动时间,表明佐太能缓解慢性应激引起的抑郁样行为.另外,佐太在上述3个剂量下,可显著增加CUMS模型小鼠血清中NE和海马中BDNF的水平,并在剂量为6.069 7、60.697 mg/kg下,可显著增加CUMS模型小鼠血清中5-HT的水平.结论 藏药佐太在行为绝望模型和CUMS模型小鼠中表现出一定的抗抑郁活性,可能是通过降低CORT,提高5-HT、NE、BDNF的水平而发挥作用.

藏药佐太的研究现状与进展

藏药佐太是一种古老的传统藏药，由水银、硫黄、八金、八矿等原辅料炮制而成。佐太含有汞、金、银、铅、铜、铁等多种金属，是藏药中重金属元素的主要来源，也是配制名贵藏成药的贵重原料，现代医药迫切需要对其临床合理应用进行深入研究。本文对近年来有关佐太的研究进行全面的分析和总结，从制备工艺、化学成分、药效学、药代动力学、毒理学、质量标准及临床应用等方面进行了综述。

藏药佐太中汞的长期蓄积性实验研究

目的 探索KM小鼠以临床等效剂量长期给予佐太后汞在体内的蓄积情况,为佐太复方制剂临床用药安全提供科学依据.方法 KM小鼠分为空白组和给药组,给药剂量为每天6.67 mg·kg-1bw,给药4.5个月,停药1.5个月.分别于给药前、给药后0.5个月、1个月、1.5个月、2个月、2.5个月、3个月、3.5个月、4个月、4.5个月、停药0.5个月、停药1个月和停药1.5个月13个时间点采集血液、肾、脑、肝、脾,并检测汞含量.结果 与空白组比较,给药组小鼠的肾脏中汞含量变化显著,在给药1.5个月后开始升高为38.24 ng/g,到3个月时达到高值84.68 ng/g,停药1.5个月后逐渐恢复至正常水平31.46 ng/g;脑组织中汞含量在给药2个月后开始升高为23.60 ng/g,至4.5个月一直高于空白组,但数据呈波动状态,和空白组比较无统计学差异.血液、肝脏、脾脏中汞含量给药组较空白组变化不显著,停药0.5个月后汞含量接近空白组值.结论 KM小鼠长期给予临床等效剂量佐太后,汞在肾脏中产生一定蓄积,脑组织中的汞含量略高于空白组,血液、肝脏和脾脏中汞蓄积不明显,停药后各器官中的汞含量均可逐步恢复至正常水平.

藏药佐太中的汞在大鼠体内吸收和排泄的初步研究

目的 以藏药佐太主要成分汞为研究对象,初步探讨其在大鼠体内的吸收和排泄情况. 方法采用微波消解技术和原子荧光光度计测定血清、肝脏组织、肾脏组织、尿液和粪便中的汞含量.结果 实验1组和实验2组大鼠分别连续给予佐太7 d和21 d后,血清中汞含量较低,肾脏组织中汞含量显著增多;实验1组大鼠肝脏组织中汞含量显著增多,但实验2组显著减少;实验组大鼠尿液中检测到的汞较少,粪便中检测到大量的汞.结论 佐太中的汞在大鼠体内吸收较少,主要通过粪便排出体外,长期使用在肾脏有蓄积现象.

藏药佐太长期给药对小鼠毒性的初步研究

目的 探索KM小鼠以临床等效剂量长期给予藏药佐太后对机体的毒性情况,为佐太成方制剂的临床安全用药提供科学依据.方法 KM小鼠随机分为空白组和给药组,给药剂量为6.67 mg·kg-1 bw·d-1,给药周期为4.5个月,灌胃给药,观察小鼠的外观体征、体重变化、进食饮水等情况,并检测血常规、肝肾功能血清生化指标以及肝、肾、脾、脑组织病理学结构.结果 与空白组比较,给药组小鼠的外观特征、行为特征、体重变化、进食饮水、粪便外观在整个实验过程中无显著性差异；给药组小鼠的红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)显著高于空白组(P＜0.05),其他血常规指标均无显著性差异；4.5个月时给药组AST/ALT出现显著性下降,但血清ALT、AST、TBIL、BUN、Crea等指标均无显著性变化；病理组织学观察发现,4.5个月时给药组小鼠肾脏近曲小管、肝脏和脾脏组织学结构出现了轻微变化,脑组织学结构正常.结论 KM小鼠以临床等效剂量给药佐太4.5个月,对其外观体征、生长发育状况、血常规指标、肝肾功能血清生化指标、脑组织学结构无明显影响,但可能会对KM小鼠肾脏、肝脏和脾脏组织学结构产生一定程度的影响,提示含佐太复方制剂服用周期不宜过长.

藏药"佐太"主要药效学研究

目的 通过动物实验研究藏药"佐太"的抗惊厥、解热、抗炎及增强免疫的作用.方法 尼可刹米注射液致小鼠惊厥法、伤寒Vi多糖疫苗致热家兔法、二甲苯致小鼠耳肿胀法和不同剂量"佐太"对小鼠非特异性免疫功能的影响.结果 "佐太"能明显延长小鼠惊厥潜伏期及死亡潜伏期;明显降低因伤寒Vi多糖疫苗致热的新西兰兔体温;显著降低二甲苯致小鼠耳肿胀度;明显提高小鼠廓清指数和吞噬指数.结论 "佐太"具有良好的抗惊厥、解热、抗炎及增强免疫的作用.

佐太及珍宝类藏成药中砷、汞的研究进展

佐太是诸多珍宝类藏成药中的贵重原料,但也是珍宝类藏成药中砷、汞的主要来源.现对近年来有关佐太及珍宝类藏成药中砷、汞总量测定,游离态砷、汞测定,形态分析及安全性评价进行了归纳总结.

藏药佐太对大鼠CYP1A2和NAT2活性的影响

目的：研究藏药佐太对大鼠细胞色素氧化酶（CYP1A2）、药物代谢酶N-乙酰基转移酶2（NAT2）活性的影响。方法：将70只SD大鼠随机均分为正常对照（生理盐水）组和佐太低、中、高剂量（1.2、3.8、12 mg/kg）单次给药组和多次给药组（每天1次，连续12 d），分别ig给药。正常对照组、佐太单次给药组于第2天，佐太多次给药组于第13天分别ig给予咖啡因（25 mg/kg），5 h后采集尿液，按10 mg/ml加入维生素C。采用高效液相色谱法测定大鼠尿液中咖啡因代谢物5-乙酰氨基-6-甲酰氨基-3-甲基尿酸（AFMU）、1-甲基黄嘌呤（1X）、1-甲基尿酸（1U）、1，7-二甲基尿酸（17U）的含量，以（AFMU+1X+1U）/17U、AFMU/（AFMU+1X+1U）比值来反映CYP1A2和NAT2活性。结果：与正常对照组比较，佐太中剂量单次给药组及多次给药组、高剂量多次给药组大鼠（AFMU+1X+1U）/17U、AFMU/（AFMU+1X+1U）比值降低，即CYP1A2和NAT2活性降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：佐太对大鼠CYP1A2和NAT2活性有明显抑制作用。