藏药佐太对CYP1A2和NAT2的活性及蛋白和mRNA表达的影响

代谢酶NAT2多态性与大肠息肉及腺瘤的复发

目的研究代谢酶基因NAT2多态性与大肠息肉及腺瘤复发的关系，探讨其与大肠癌遗传易感性。方法在1980年，建立了4 076例大肠癌高危人群队列，这4 076例均有大肠腺瘤或息肉史。从高危人群中随机抽取52例息肉、腺瘤复发2次以上者为复发组，另抽取52例无复发者为对照，从抗凝外周血白细胞中提取DNA，采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)方法分析,比较NAT2的多态性分布差异。结果 NAT2野生型Wt/Wt频率在无复发组(17/52, 32.7%)明显高于复发组(8/52,15.4%)，杂合型在复发组频率为40/52（76.9%），与无复发组频率30/52（57.7%）比较，差异均有显著意义（P<0.05）。以Wt/Wt基因型的危险度（OR）为1，则Wt/M*基因型的OR为2.96，95%CI为1.091～8.009，M*/M*基因型的OR为2.125，95%CI为0.666～6.781。在复发与无复发组中，未发现NAT2快速与慢速酶的差异。结论 NAT2野生型（Wt/Wt）可能是大肠腺瘤复发的保护因素，但未发现NAT2快速与慢速酶在大肠腺瘤复发中的差异。

NAT2基因多态性与肝毒性巢式病例对照研究

目的 从分子流行病学水平探讨N-乙酰基转移酶-2(N-acetyltransferase,NAT2)基因多态性与抗结核药物引起肝毒性的关系,寻找抗结核药物引起肝毒性的易感基因.方法 选择符合条件的肺结核新发病例187例为研究队列,收集每个成员的相关信息并采静脉血3 ml,进行常规抗结核治疗.随访6个月,定期检测其肝功能,出现肝中毒症状的36人组成病例组,在未出现肝中毒症状的成员中抽取36例组成配对对照组,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)技术检测其NAT2基因多态性.结果 经随访研究,因抗结核药引起的肝中毒患者占19.46%;1:1配对病例对照研究结果显示,慢型NAT2基因型肺结核患者较快型NAT2基因型的患者经抗结核药治疗后更易发生肝中毒(校正χ2=4.27,P<0.05),OR=4.00,95%CI=1.07～14.91.结论 慢型NAT2基因型是抗结核药物引起肝毒性的危险因素;通过检测肺结核病人的NAT2基因多态性,可指导其临床用药,有利于结核病的治疗.

N-乙酰基转移酶基因多态性与肺癌易感性关系

目的探讨N-乙酰基转移酶基因2(NAT2)多态性与肺癌易感性关系.方法采用1:1配对病例-对照研究,收集江苏省汉族人群原发性肺癌患者215例和相应非肿瘤对照215例.应用PCR-限制性片断长度多态性(RFLP)技术检测病例组与对照组NAT2基因M1、M2和M3等位基因突变频率,分析NAT2基因多态性与肺癌易感性之间的关系.结果M3等位基因频率在肺鳞癌组和对照组的分布差异有统计学意义(x2=4.30,P＜0.05),携带M3等位基因者患肺鳞癌危险性增加(OR=1.63,95% CI=1.03～2.59),尤其是增加不吸烟者患肺鳞癌的危险性(OR=2.23,95%CI=1.07～4.65).未发现NAT2乙酰化基因型与肺癌发生有相关性.结论 NAT2 M3等位基因可能与不吸烟者肺鳞癌易感性有关.

复方丹参滴丸对药物代谢酶CYP1A2,NAT2和X0活性影响的研究

目的 探讨复方丹参滴丸对CYP1A2,NAT2和X0活性的影响,指导临床医师合理用药.方法 以咖啡因作为探针药物.以HPLC测定受试者服用复方丹参滴丸前后尿液内咖啡因的5种主要代谢产物的相对含量,采用不同代谢物的比率分别评价CYP1A2,NAT2和X0活性的变化.结果 受试者用药前CYP1A2,NAT2和X0平均活性为4.20 ±1.54,0.36±0.12,0.33±0.05;服用复方丹参滴丸14 d后三者的平均活性为4.26±1.95,0.32±0.12,0.32±0.07;服用复方丹参滴丸28 d后三者的平均活性为4.35±1.26,0.30±0.11,0.31±0.04;服药14 d后CYP1A2,NAT2和X0活性无统计学差异;服药28 d后CYP1A2和NAT2活性无统计学差异,但X0的平均活性降低,且具有统计学差异.结论 复方丹参滴丸对药物代谢酶CYP1A2和NAT2活性无明显影响.服用治疗剂量的复方丹参滴丸对X0活性具有抑制作用.

人类N-乙酰化酶2蛋白质三维结构的计算机模拟技术的研究进展

NAT2是人体内重要的代谢酶,主要参与含氮药物的代谢.目前对NAT2基因序列测定和药物代谢等方面已经进行了大量的研究.近年来人们对蛋白质的三维(立体)结构的模拟越来越关注,但是对NAT2的三维立体结构以及它与药物结合的构效关系等研究仅处在一个起步阶段.该文对NAT2三维立体结构的构建的研究进展作一综述,着重介绍蛋白质立体结构的构建方法 和工具的研究情况.

药物代谢酶N-乙酰基转移酶2的研究进展

NAT2是人体内重要的药物代谢酶,参与20多种肼类化合物及致癌性芳香胺和杂环胺类化合物的生物激活和灭活代谢,NAT2基因编码区的多态性造成氨基酸序列的变化,进而影响酶的活性.在此对NAT2的基因多态性、基因型分型方法以及NAT2多态性在药物代谢和新药临床研究中的意义等进行了综述.

三维凝胶NAT2基因分型芯片的制备与优化

目的 研制N-乙酰化酶2(NAT2)基因分型芯片,以快速、准确检测患者的NAT2单核苷酸基因多态性.方法 设计并合成中国人中常见的NAT2酶基因5个突变位点的探针对和包含5个突变位点的两对引物;样本经PCR扩增后,采用丙烯酰胺点样液制备芯片,并与TEMED反应固化芯片;分别用探针与芯片杂交,采用博奥晶芯LUXSCAN 10K微阵列芯片扫描仪分析结果.结果 优化了PCR扩增条件,使两组PCR在相同条件下扩增;优化了芯片制备及杂交条件,双链DNA采用碱变性,清除非特异键合采用电泳方法;建立了NAT2酶基因分型标准:信号强度Cy3:Cy5≥5为野生型,Cy3:Cy5为0.6～1.5时为杂合子,Cy3:Cy5≤0.2为突变型;对20例标本的基因分型结果采用直接测序法进行验证,结果均一致.结论 三维凝胶NAT2基因点突变分型芯片法是一种特异性强、高通量的NAT2基因分型方法,适用于临床快速基因分型,指导相关药物合理使用.[KH

NAT2基因多态性与柳氮磺吡啶治疗溃疡性结肠炎安全性的关系

目的:探讨N-乙酰基转移酶2(NAT2)基因型多态性与柳氮磺吡啶(SASP)治疗溃疡性结肠炎(UC)安全性的关系.方法:在38例UC患者及36例健康对照者中,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测NAT2的基因多态型,并对UC患者进行NAT2基因型与SASP药物不良反应(ADR)的相关性分析.结果:慢型乙酰化基因型的UC患者服用SASP后ADR的发生率高于快型乙酰化基因型患者,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:UC患者使用SASP出现的ADR与NAT2慢型乙酰化基因型相关.

抗结核治疗肝损害患者NAT2、Mn SOD的基因多态性研究

目的 探讨抗结核治疗肝损害患者N-乙酰基转移酶2(NAT2)、锰超氧化物歧化酶(Mn SOD)的基因多态性,探讨NAT2、Mn SOD的基因多态性与肝损害之间的分子机制,为肝损害的防治提供参考. 方法 选取新乡医学院第一附属医院2015年1-12月期间诊断为肺结核行抗结核治疗的133例患者,采用聚合酶链反应检测患者NAT2、Mn SOD的基因多态性,分析结果. 结果 患者发生肝损害者46例,发生率为34.59％;患者NAT2等位基因型共检出6种,分别为NAT2*4、NAT2*6、NAT2*7、NAT2* 5B、NAT2* 5C、NAT2* 5A,出现频率分别为50.75％、24.06％、16.17％、4.89％、2.26％、1.88％.27例患者为快乙酰化基因型、71例为中乙酰化基因型、35例为慢乙酰化基因型,分别占20.30％、53.38％、26.32％.有肝损害患者中20例(43.48％)为慢乙酰化基因型、26例(56.52％)为中、快乙酰化基因型,无肝损害患者中15例(17.34％)为慢乙酰化基因型、72例(82.76％)为中、快乙酰化基因型,两者比较差异有统计学意义(x2=10.68,P＜0.05);患者Mn SOD基因在47位碱基上存在单核苷酸多态性,84例患者为T/T基因型、37例为T/C基因型、12例为C/C基因型,分别占63.16％、27.82％、9.02％.有肝损害患者中23例(50.00％)为T/T、10例(21.74％)为T/C、13例(28.26％)为C/C,无肝损害患者中58例(66.67％)为T/T、22例(25.29％)为T/C、7例(8.05％)为C/C,有肝损害患者中C/C基因型比例明显高于无肝损害患者,差异有统计学意义(x2=9.62,P＜0.05). 结论 抗结核治疗肝损害患者NAT2慢乙酰化基因型及Mn SOD基因47位C/C基因明显升高,可能参与了患者肝损害的发生.

NAT2和CYP2E1基因多态性及其代谢表型在中国汉族儿童中的分布

目的 N-乙酰基转移酶-2(NAT2)和细胞色素氧化酶P450 2EI(CYP2E1)在药物的代谢过程中起重要的作用.该研究旨在了解NAT2、CYP2E1的基因多态性及其代谢表型在中国汉族儿童中的分布,为实现药物的个体化治疗提供参考依据.方法 应用聚合酶链式反应并测序的方法检测341例中国汉族儿童(年龄0～14岁,男211例,女130例)NAT2、CYP2E1的重要SNPs基因型,并判定其代谢表型.结果 在中国汉族儿童中,NAT2的7个SNPs(rs1801279、rs1041983、rs1801280、rs1799929、rs1799930、rs1208、rs179993)基因型均以野生型为主；NAT2代谢表型以快代谢型的频率高(61.3％),其次是中间/慢代谢型(34.1％).CYP2E1的4个重要SNPs基因型(rs2031920、rs3813867、rs6413432、rs72559720)被命名为:CYP2E1*5、*6、*2,均以野生型为主,野生型频率分别为:61.3％、60.1％、99.4％；由于CYP2E1基因型和代谢表型的关系还未明确,未对其进行代谢表型分型.结论 NAT2基因在中国汉族儿童中的分布以野生型/快代谢型为主,CYP2El基因以野生型为主,基因型/代谢表型在中国汉族儿童中的多态性分布为药物的个体化治疗提供参考依据.

The experience of environmental molecular epidemiological research conducted in the Southern Ukraine

女性被动吸烟和NAT2基因多态性与乳腺癌易感性的研究

目的 研究中国女性被动吸烟和NAT2基因多态性及其环境因素交互作用与乳腺癌易感性的关系.方法 以病例对照研究的方法,150例乳腺癌患者和150例健康对照者采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP),检测NAT2基因多态性,分析NAT2基因型的分布特征.结果 NAT2慢型者患乳腺癌的相对危险性是NAT2快型者的2.70倍,其95％CI( 1.66～4.39),经统计学检验有统计学意义(P＜00.05)；被动吸烟的妇女患乳腺癌的相对危险性是不吸烟的1.88倍,其95％CI( 1.18～2.98),经统计学检验有统计学意义(P＜0.05)；NAT2慢型同时被动吸烟者患乳腺癌的相对危险性是NAT2快型者且未暴露于被动吸烟者的4.37倍,其95％CI (2.29～8.35),经统计学检验有统计学意义(P＜0.05).结论 NAT2基因多态性和被动吸烟与乳腺癌的易感性有关,NAT2慢基因型且同时被动吸烟者增加患乳腺癌的危险性.

从人口腔细胞获取基因组DNA作基因多态性分析的可行性

背景与目的:口腔洗液上皮细胞应用于检测基因多态性已有多篇文献报道,但口腔洗液中含有少量食物残渣是否给基因多态性检测带来干扰已备受关注.本研究比较口腔上皮细胞和血样品DNA中某些基因的多态性,同时以同样的方法检测食物中动植物组织的DNA,以排除食物残渣干扰实验结果的可能性,并探讨改良口腔洗液上皮细胞收集方法.方法:收集62例人口腔洗液,每例收集40ml,加10 ml异丙醇固定.其中30例进行细胞涂片检查上皮细胞含量,同时采集外周血5 ml.另采集人们常食用的米饭、青菜、毛豆、苹果、猪肉、牛肉、鸡肉、鸭肉.所有样品分别经蛋白酶K消化,酚氯仿抽提,乙醇沉淀提取基因组DNA.结合PCR-RFLP技术进行口腔细胞和血细胞基因多态性分析比较.并用Alu片段测定人口腔洗液、外周血及上述食物DNA.结果:62例口腔洗液DNA含量为(135.15±64.30)μg(22.36～330.70μg);其中30例经镜检含有人上皮细胞者有75%～95%,DNA含量为(143.44±61.64)μg(51.01～283.58μg);30例外周血中DNA含量为(91.19±38.01)μg(30.83～178.63μg).琼脂糖凝胶电泳结果显示:62例口腔上皮细胞和30例血样品均具有高分子量DNA,其中61例口腔细胞和30例血样品均能扩增βglobin、Alu以及NAT2、GSTM1、GSTT1、CYP1A 1和CYP2E1基因片段,但所有的食物DNA全部未能扩增.30例口腔洗液与相应血液的基因多态性结果一致.结论:口腔洗液DNA大部分来源于人,即使含有少量食物残渣也不会给基因多态性分析带来干扰,其基因多态性检测结果与血样品DNA分析结果完全一致.

山东地区NAT2基因多态性与乳腺癌易感性的研究

[目的]研究NAT2基因多态性与乳腺癌易感性的关系.[方法]采用1:1配对病例-对照研究,对山东地区100例乳腺癌患者和100例健康对照者采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR- RFLP),检测NAT2基因多态性,分析NAT2基因多态性与乳腺癌易感性之间的关系.[结果]携带NAT2/5B等位基因者患乳腺癌 危险性增加（OR=2.38, 95％CI=1.54～3.67）；幔基因型者患乳腺癌的危险性是快基因型者2.28倍(OR=2.28,95％CI=1.12～4.63);是中间基因型者2.14倍（OR=2.14,95％CI=1.08～4.24）；慢型乙酰化患乳腺癌的危险性是快型乙酰化的2.11倍（OR=2.11, 95％CI=1.15-3.88）.[结论]NAT2基因多态性在乳腺癌的遗传发病机制中起重要作用,携带NAT2/5B等位基因、慢基因型及慢型乙酰化能增加患乳腺癌的易感性.

NAT1、NAT2基因多态性与广东地区汉族人群喉癌遗传易感性研究

目的:探讨毒物代谢酶NAT1、NAT2基因多态性与广东地区汉族人群喉癌遗传易感性的关系.方法:采用病例-对照研究的方法,检测233例广东地区汉族喉癌和102例健康对照组外周血中NAT1(NAT1*4,NAT1* 11,NAT1*10,NAT1/3)、NAT2(WT、M1、M2和M3)基因多态性.结合病历资料分析NAT1、NAT2多态基因与喉癌临床病理特征之间的关系.结果:喉癌患者携带NAT2快基因表型(18.88％)频率小于正常对照组(45.1％)(OR =2.53,P=0.00).NAT2慢基因表型与重度吸烟在喉癌致病过程中有协同作用(P=0.013,OR =3.42).NAT2基因表型与喉癌的临床病理特征无关.喉癌与对照组中NAT1多态基因频率无显著性差别.结论:NAT2快基因表型与喉癌的易感性关联,易感性与吸烟发生协同作用.NAT2基因多态性不影响喉癌的发展过程及预后.NAT1基因多态性可能与喉癌的遗传易感性无关.

青海藏、汉族肺结核患者N-乙酰基转移酶2基因型比较

目的 了解N-乙酰基转移酶2(NAT2)的基因型及其代谢表型在青海省藏、汉族肺结核患者之间的分布.方法 采用实时荧光定量PCR Taqman探针法检测114例肺结核患者(年龄18 ～79岁,藏族69例,汉族45例)NAT2基因的重要单核苷酸多态性(SNP)位点基因型,并判定代谢表型,比较两个民族的基因型及代谢型是否存在差异.结果 青海省藏、汉族肺结核患者NAT2基因7个SNP位点基因型比较无显著性差异(P＞0.05).两个民族NAT2代谢型比较无显著性差异(P＞0.05).青海省藏、汉族肺结核患者NAT2的7个SNP位点基因型都以野生纯合型和杂合突变型为主.两个民族肺结核患者NAT2代谢型均以快代谢型和中间代谢型为主,其中藏族肺结核患者快代谢型、中间代谢型、慢代谢型频率分别为40.58％、49.28％、10.14％,汉族肺结核患者为51.11％、35.56％、13.33％.结论 青海省藏、汉族肺结核患者的NAT2基因型和代谢型无显著性差异.