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人载脂蛋白A-Ⅰ的原核表达及二级结构和功能鉴定
目的为获得高产量并具有正常结构和生物学活性的原核表达人载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ).方法利用DNA重组技术对人apoA-Ⅰ的前8个氨基酸引入沉默突变,以pET-30b(+)为原核表达载体,在apoA-Ⅰ多肽链C-末端引入6×组氨酸标签,采用镍亲和层析对表达蛋白进行纯化.分别使用圆二色分析、浊度澄清试验和胆固醇外流试验对重组apoA-Ⅰ的α螺旋含量、脂质结合动力学及促细胞胆固醇外流能力进行评价.结果获得高表达产量的重组apoA-Ⅰ(12 mg纯化apoA-Ⅰ蛋白/L菌液);重组蛋白的α螺旋含量为(54±4)%,脂质结合动力学速率常数k1/2为0.059±0.002 min-1,胆固醇外流百分比为(16.68±1.77)%.结论可获得高产量并具有生物学活性的重组人apoA-Ⅰ;为构建apoA-Ⅰ其他突变体提供模式.
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载脂蛋白A5对冠心病的影响
临床及流行病学研究表明血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平与冠心病的发生、发展密切相关[1],HDL-C参与体内胆固醇逆向转运,将外周细胞堆积的胆固醇转运至肝脏转化清除,具有抗动脉粥样硬化的作用,HDL-C水平降低是冠心病发生发展的独立危险因素.载脂蛋白是一类能与血浆脂质结合的蛋白质,对血浆脂蛋白代谢起决定性作用,载脂蛋白(apo)A5是新近发现的新型载脂蛋白,与TG代谢密切相关.
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载脂蛋白测定的临床应用
载脂蛋白(apolipoprotein,apo)系指蛋白(LP)中的蛋白质,为运输脂类的载体,在脂质代谢中起着重要作用.除与脂质结合外,还是某些酶的激活剂或抑制剂,也是细胞膜受体的识别标志.
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载脂蛋白测定在国内的临床应用
载脂蛋白(Aplipoprotein.APO)系脂蛋白(LP)中的蛋白质,为运输脂类的载体,在脂质代谢中起着重要作用.除与脂质结合外,还是某些酶的激活剂或抑制剂,也是细胞受体的识别标志.现已发现APO有20多种,常用的有APOA(Ⅰ.Ⅱ.Ⅲ.Ⅳ)、APOB(100.74.26.48)、APOC(Ⅰ.Ⅱ.Ⅲ)、APOD、APOE(Ⅱ.Ⅲ.Ⅳ)等大多数学者将APOAⅢ改称为APOD.
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ApoA1/C3/A4基因簇多态性与脂代谢及妊娠高血压综合征的研究概况
载脂蛋白( apolipoprotein,Apo)是一类能与血浆脂质结合,稳定脂蛋白的结构,调节脂蛋白代谢关键酶活性,具有脂类转运功能的蛋白质.Apo的结构及合成异常可影响血浆脂蛋白代谢,不仅对动脉粥样硬化的发生和发展有很大影响,而且还是高血压、肥胖和胰岛素抵抗的易感因子[1].目前已报道的Apo有20多种,其中,编码ApoA1、ApoC3、ApoA4和ApoA5的基因共同位于第11号染色体长臂,形成ApoA1/C3/A4/A5基因簇.妊娠高血压综合征(简称为妊高征)是妊娠期特有的疾病,严重地威胁母婴安全与健康,目前仍是我国孕产妇及围生儿死亡的主要原因之一.研究表明,Apo多个基因多态性位点与血脂代谢密切相关,而脂代谢异常又是妊娠高血压综合征的发病过程中的重要环节.现对这三者之间的关联性研究做一综述.
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血脂、脂蛋白、载脂蛋白测定结果的临床分析方法
血脂广泛存在于人体中,是血浆中的中性脂肪(甘油三酯、胆固醇)和类脂(磷脂、糖脂、固醇、类固醇)的总称.血脂不仅是细胞代谢的必需物质,也是维持细胞能量来源和细胞结构的重要成分.血脂与血液中的特殊蛋白质和极性类脂一起组合成的球状巨分子复合物,称为脂蛋白.与脂质结合形成脂蛋白的蛋白,称为载脂蛋白.血脂测定,主要包括脂蛋白和载脂蛋白在内的各种试验.它不仅是异常脂蛋白血症鉴别及分型的重要依据,同时也是临床常见健康体检的组合检测项目之一.
