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G-CSF及与辛伐他汀联合应用对大鼠急性心肌梗死后细胞凋亡的影响
随着凋亡相关研究的进展,心肌细胞凋亡与心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)的关系逐渐受到重视.本实验联合应用粒细胞集落刺激因子(granulocyte-colony stimu-lating factor,G-CSF)和辛伐他汀动员干细胞修复AMI后的梗死心肌,通过流式及免疫组化法检测细胞凋亡率和BCL-2/BAX比值,评价其干细胞动员作用对梗死后心肌细胞凋亡的影响.
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大黄素对大鼠结肠环行平滑肌细胞[Ca2+]i的影响
目的:观测大黄素对Wistar大鼠结肠环行平滑肌细胞胞质游离钙水平([Ca2+]i)的影响,并探讨机制.方法:酶解法分离结肠环行平滑肌细胞,分别采用图像分析系统和激光扫描共聚焦显微镜观测细胞长度和[Ca2+]i的变化.结果:大黄素可收缩大鼠结肠环行平滑肌细胞,也可浓度依赖性升高[Ca2+]i;大黄素作用后,[Ca2+]i迅速升高达到峰值([Ca2+]iPeak),而后下降至平台期([Ca2+]iSustain,仍高于静息值).Nifedipine对大黄素的钙动员作用没有明显影响,EGTA明显降低[Ca2+]iSustain.Heparine几乎完全抑制[Ca2+]iPeak,Ryanodine明显抑制[Ca2+]iPeak.结论:大黄素通过升高[Ca2+]i收缩结肠环行平滑肌细胞.大黄素升高[Ca2+]i的机制为:活化IP3受体释放细胞内钙,进一步以CICR方式促进RYR受体开放,共同作用升高[Ca2+]i,细胞外钙内流参与平台期[Ca2+]i的升高.
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肝细胞生长因子对骨髓内皮祖细胞的动员作用
目的: 分析肝细胞生长因子(HGF)能否动员骨髓内皮祖细胞,以及动员的内皮祖细胞能否参与创伤修复时的血管新生和内皮修复.方法: 将腺病毒HGF载体(adenovirus vector encoding HGF gene, Ad-HGF)经尾静脉注射到Balb/c小鼠体内,用ELISA方法检测血浆HGF水平的变化;用流式细胞术检测外周血CD34+细胞含量变化;对外周血单个核细胞进行分离、培养,并对生长的细胞克隆进行内皮细胞表面标志Tie-2、vW因子的免疫组化检测.建立雌性小鼠CCl4肝损伤模型,静脉移植HGF处理后雄性小鼠外周血单个核细胞到其体内,4 W后利用原位杂交技术检测新生肝组织中是否存在雄性细胞.结果: 注射Ad-HGF能明显提高小鼠血浆的HGF水平,并使外周血中以CD34、Tie-2和vW因子等为标志的内皮祖细胞的数量显著增多.这些细胞参与肝损伤修复时的血管新生.结论: HGF对骨髓内皮祖细胞具有明显的动员作用.
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抗CD49d单克隆抗体与重组人粒细胞集落刺激因子动员小鼠外周血干细胞的比较研究
正常情况下外周血干细胞(PBSC)数量很低,因此需要进行动员才能获取足够数量的PBSC以保证移植成功.Craddock等发现抗CD49d单克隆抗体(单抗)能成功动员小鼠的PBSC,且具高效性.为寻找新PBSC动员剂,我们比较观察了抗CD49d单抗与临床常用的动员剂重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF) 对小鼠PBSC的动员作用,现报道如下.
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脑钠肽对内皮祖细胞动员作用的研究
目的 探讨循环脑钠肽对内皮祖细胞的动员作用.方法 选择80例可疑冠心病患者行冠状动脉造影;造影结果示23例排除冠心病,57例有明显的冠状动脉狭窄确诊为冠心病, 其中稳定型心绞痛组 (SAP) 患者有21例, 不稳定心绞痛(UAP)16例,急性心肌梗死(AMI)20例,UAP与AMI作为急性冠脉综合征(ACS)组,全部患者取外周血用酶联免疫吸附法(ELISA)检测脑钠肽(BNP)水平和流式细胞仪测定CD133与KDR双阳性表达水平. 结果 ACS组患者脑钠肽水平明显高于SAP组及对照组,有统计学意义(P<0.01);稳定型心绞痛组脑钠肽高于对照组,有统计学意义(P<0.05).对照组与稳定型心绞痛组患者循环内皮祖细胞水平均明显低于急性冠脉综合征组患者(P<0.01),稳定型心绞痛循环内皮祖细胞低于对照组,无统计学意义(P>0.05).结论 随着脑钠肽水平的升高,早期内皮祖细胞的水平也呈有规律的动态变化.冠脉问题越严重,BNP水平越高,并且内皮祖细胞数量会更多.
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抗CD49d单克隆抗体联合rhG-CSF动员小鼠外周血干细胞的实验研究
外周血干细胞移植是能治愈白血病的有效方法,正常情况下外周血干细胞(PBSC)数量很低,需要进行动员才能获取足够数量的干细胞,以保证移植成功.目前,临床上常用的造血干细胞动员剂是重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF),但其存在所需时间长、剂量大、费用高、异基因移植时大剂量注射可引起剧烈骨骼疼痛、健康供者不愿接受等弊端.Craddock等[1]发现抗CD49d单克隆抗体能成功动员小鼠的PBSC,且具有高效性.2002年4～12月,我们观察了抗CD49d单克隆抗体与rhG-CSF对小鼠PBSC的协同动员作用.现报告如下.
