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3-溴丙酮酸对人卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响
目的 观察3-溴丙酮酸对人卵巢癌SK-OV-3细胞株增殖和凋亡的影响,探讨3-溴丙酮酸对人卵巢癌细胞的体外抗肿瘤效应.方法 MTT比色法和集落形成试验检测3-溴丙酮酸对SK-OV-3细胞的增殖抑制作用；采用投射电镜观察3-溴丙酮酸作用后的SK-OV-3细胞形态学改变；流式细胞术检测3-溴丙酮酸作用后SK-OV-3细胞的凋亡,并对细胞周期的变化进行分析.结果 3-溴丙酮酸对SK-OV-3细胞的增殖有明显的抑制作用,具有时间(一段时间内)和剂量依赖性(P＜0.05).3-溴丙酮酸主要将细胞阻滞于G0/G1,S期细胞明显减少.结论 3-溴丙酮酸对SK-OV-3细胞增殖的抑制效应具有时间依赖性(一段时间内)和剂量依赖性,并可诱导其凋亡.
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3-溴丙酮酸抗肿瘤作用及机制研究
3-溴丙酮酸(3-bromopyruvate)是一种强烷化剂,通过大量体内及体外实验发现3-溴丙酮酸能通过抑制肿瘤细胞糖酵解来抑制肿瘤细胞ATP的产生,导致大量肿瘤细胞死亡.近年来有关3-溴丙酮酸的抗肿瘤研究已取得突破性的进展,现基于国外近几年的研究,对3-溴丙酮酸的抗肿瘤作用及其作用机制进行了综述,为开发新的有效抗肿瘤药物提供了方向.
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3-溴丙酮酸对胰腺癌细胞的抑制作用
目的：观察3溴丙酮酸（3-BrPA）对MiaPaCa-2胰腺癌细胞的生长调节作用，并初步探讨其作用机制。方法：用不同浓度的3-BrPA处理胰腺癌细胞，采用蛋白印迹法检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和己糖激酶Ⅱ（HK-Ⅱ）的表达水平，用葡萄糖、乳酸检测试剂盒检测癌细胞葡萄糖消耗和乳酸生成的速率，MTT法测定细胞增殖速率。结果：与对照组相比，10μmol/L 3-BrPA不影响HIF-1α和HK-Ⅱ的蛋白表达，而25、50、100μmol/L的3-BrPA则能抑制HIF-1α和HK-Ⅱ的蛋白表达（P＜0.05）,对HIF-1α的抑制率分别为（16.49±2.23）%、（35.18±4.76）%、（68.74±5.65）%，对HK-Ⅱ的抑制率分别为（19.18±4.13）%、（45.07±5.12）%、（59.82±4.75）%。在所用的高浓度（100μmol/L）3-BrPA显著降低癌细胞的葡萄糖消耗和乳酸生成（P＜0.05）。3-BrPA能抑制胰腺癌细胞的增殖，10、25、50、100μmol/L处理的各组细胞增殖抑制率分别为（2.99±1.37）%、（8.72±3.92）%、（16.34±6.49）%和（56.11±17.22）%,50μmol/L与100μmol/L 3-BrPA造成的抑制有统计学意义（P＜0.01）。结论：3-BrPA对MiaPaCa-2胰腺癌细胞生长和葡萄糖代谢有抑制作用，其机制可能是通过抑制HIF-1α和HK-Ⅱ的表达得以实现。
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3-溴丙酮酸联合索拉菲尼对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响
目的 探讨3-溴丙酮酸(3-BrPA)联合索拉菲尼(SOR)对人肝癌细胞SMMC7721、HepG2增殖和凋亡的影响及其相关分子机制. 方法 首先采用MTT法检测不同浓度3-BrPA(20,40,80,160,320 μmol/L)、索拉菲尼(2,4,8,16,32 μmol/L)以及100 μmol/L 3-BrPA与索拉菲尼(2,4,8,16,32 μmol/L)联合对肝癌细胞SMMC7721、HepG2作用24 h的增殖抑制作用.之后将肝癌细胞分为对照组、3-BrPA组、SOR组、3-BrPA+SOR组,PI单染流式细胞术检测肝癌细胞SMMC7721、HepG2凋亡;DAPI染色检测SMMC7721、HepG2细胞核的变化;Western blot检测SMMC7721、HepG2细胞Bcl-2和Bax蛋白表达. 结果 3-BrPA、索拉菲尼以及两药联合作用于SMMC7721、HepG2细胞24 h细胞存活率随浓度增高而降低(P<0.05).100 μmol/L 3-BrPA与索拉菲尼联合作用于SMMC7721、HepG2细胞24 h的存活率显著高于同浓度的索拉菲尼单独处理(P<0.05).100 μmol/L 3-BrPA与16 μmol/L索拉菲尼联合诱导肝癌细胞SMMC7721、HepG2的凋亡率为(47.4±5.02)%、(46.2±4.14)%,显著高于对照组和单独用药组(P<0.05).DAPI染色结果显示3-BrPA+SOR组细胞表现为细胞核皱缩浓集,呈现亮蓝色荧光,或细胞核呈分叶、碎片状,且明显多于单独用药组;Western blot结果显示3-BrPA+SOR组明显下调SMMC7721细胞Bcl-2的表达(P<0.05),但对促凋亡蛋白Bax的表达无明显影响. 结论 3-BrPA能增强索拉菲尼对肝癌细胞SMMC7721、HepG2的增殖抑制作用,且能增强索拉菲尼诱导肝癌细胞的凋亡,其机制可能与下调抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达有关.
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动脉灌注3-溴丙酮酸对兔移植性直肠肿瘤的作用
目的：观察动脉灌注3-溴丙酮酸(3-BrPA)对兔移植性直肠肿瘤的作用效果。方法将60只移植有直肠肿瘤的新西兰大白兔随机分为低、中、高剂量治疗组及生理盐水对照组,每组各15只。对低、中、高剂量组实验兔分别经导管于肠系膜后动脉灌注0.5 mmol/L、1.0 mmol/L、2.0 mmol/L浓度的3-BrPA各10 ml；对照组灌注等量生理盐水。4 d后活体解剖取出直肠肿瘤,镜下观察肿瘤细胞坏死程度并计算坏死率,评估各浓度3-BrPA对肿瘤的作用效果。结果60只实验兔完成直肠肿瘤移植、动脉灌注实验,镜下实验兔肿瘤细胞均有不同程度损坏。低剂量组Ⅰ级坏死3只,Ⅱ级坏死11只,Ⅲ级坏死1只,治疗有效率为6.7%；中剂量组Ⅱ级坏死2只,Ⅲ级坏死10只,Ⅳ级坏死3只,治疗有效率为86.6%；高剂量组Ⅲ级坏死2只,Ⅳ级坏死13只,治疗有效率为100%；对照组Ⅰ级坏死15只。中、高剂量组Ⅲ、Ⅳ级肿瘤坏死率、治疗有效率、4级肿瘤坏死水平比较差异有统计学意义(P<0.05),3-BrPA治疗作用明显,而正常肠组织无损伤。结论动脉灌注3-BrPA治疗兔移植性直肠肿瘤有一定疗效,高浓度剂量组肿瘤坏死率和治疗有效率高,疗效显著。
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肝动脉灌注3-溴丙酮酸阻断大鼠肝癌能量代谢的实验研究
目的 体外检测3-溴丙酮酸对Walker256细胞的抗肿瘤活性,体内研究经肝动脉灌注3-溴丙酮酸对大鼠肝癌的治疗作用.方法 ①体外研究采用二苯基四氮唑溴盐噻唑蓝比色法检测不同浓度(1、5、10、25、50 μmol/L)3-溴丙酮酸对Walker256细胞的抗肿瘤活性,琼脂糖凝胶电泳检测肿瘤细胞凋亡.②取30只雄性Wistar大鼠建立肝癌模型,并于肿瘤种植后11d行胃十二指肠动脉逆行插管动脉灌注治疗,随机分为动脉灌注3-溴丙酮酸组(A组)、生理盐水组(B组)和丝裂霉素联合碘油栓塞组(C组).介入术前1d和术后第3天进行磁共振成像(MRI)检测肿瘤体积,之后处死大鼠,病理检查肿瘤坏死情况.结果 体外研究显示,1、5、10、25、50μmol/L 3-溴丙酮酸对Walker256细胞抑制率分别为(10.9±0.9)％、(18.5±1.7)％、(24.2±1.3)％、(40.4±3.0)％、(55.1±2.4)％,50 μmol/L 3-溴丙酮酸能诱导Walker256细胞凋亡.3-溴丙酮酸治疗后第3天,A、B、C组肿瘤平均体积分别为(482.98±103.88)mm3、(432.44±437.39)mm3、(569.79±268.89)mm3,组间差异无统计学意义(P＞0.05).A组中7只Ⅲ级坏死,2只Ⅳ级坏死和1只Ⅰ级坏死,B组6只均为Ⅰ级坏死,C组5只Ⅲ级坏死和1只Ⅱ级坏死,A组肿瘤平均坏死率明显高于B组,差异有统计学意义(P=0.001),A组与C组间差异无统计学意义(P=0.927).结论 肿瘤能量阻断剂3-溴丙酮酸有较强的体内、外抗肿瘤作用.
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3-溴丙酮酸对SMMC-7721肝癌细胞增殖的抑制作用
目的 观察3-溴丙酮酸(3-BrPA)对SMMC-7721肝癌细胞增殖的抑制作用.方法 对经0.25mmol/L～8.00mmol/L 3-BrPA溶液处理的SMMC-7721细胞,采用MTT法检测细胞增殖抑制情况,并在荧光显微镜和电镜下观察细胞内部结构的变化.结果 3-BrPA对SMMC-7721细胞的增殖有明显的抑制作用,其中在0.75mmol/L浓度下的抑制作用强;经处理后的细胞,在荧光染色下显示坏死细胞增多,在电镜下显示细胞染色质分散,少量核染色质凝聚.结论 3-BrPA对SMMC-7721肝癌细胞有抑制作用.
关键词： SMMC-7721肝癌细胞 3-溴丙酮酸 增生 -
3-溴丙酮酸联合多西他赛对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响
目的:观察3-溴丙酮酸(3-Bromopyruvic acid,3-BrPA)联合多西他赛(docetaxel,DTX)对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响,并探讨相关分子机制.方法:MTT实验检测不同药物处理后乳腺癌MDA-MB-231细胞株存活情况;流式细胞术PI单染法检测用药后细胞凋亡情况;ATP试剂盒检测3-BrPA对细胞内ATP水平的影响;线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测3-BrPA对细胞线粒体膜电位的影响;Western blot检测用药后HexokinaseⅡ、Bax、Bcl-2和Mcl-1蛋白的表达情况.结果:3-BrPA、DTX均可抑制MDA-MB-231细胞的生长,呈现浓度依赖性,低浓度3-BrPA明显增强DTX对MDA-MB-231细胞的抑制作用;3-BrPA作用于MDA-MB-231细胞5h后,随药物浓度递增细胞内ATP水平递减;3-BrPA作用于MDA-MB-231细胞24h后,HKⅡ表达减少,且使细胞线粒体膜电位发生降低;40 μmol/L 3-BrPA联合2 μmol/L DTX处理24h后,MDA-MB-231细胞凋亡率为63.5％,较单独用药组的凋亡率明显提高(P＜0.01).3-BrPA与DTX联合作用于MDA-MB-231细胞后,凋亡相关蛋白Bcl-2和Mcl-1的表达减弱,Bax的表达增强.结论:3-BrPA可增强DTX对乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用以及凋亡诱导作用,其机制可能与下调Mcl-1和Bcl-2表达、上调Bax表达有关.
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3-溴丙酮酸对耐顺铂鼻咽癌细胞增殖及凋亡的影响
目的:探讨糖酵解抑制剂3-溴丙酮酸(3-BP)对耐顺铂鼻咽癌细胞HNE1/DDP增殖和凋亡的影响.方法:MTT比色法和集落克隆形成实验检测3-BP对HNE1/DDP细胞的增殖抑制作用,PI染色法检测3-BP对HNE1/DDP细胞凋亡的影响,Western blotting检测凋亡相关蛋白多聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)、髓样细胞白血病-1(Mcl-1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)的表达.结果:3-BP可显著抑制HNE1/DDP细胞的增殖,其48 h的IC50值为260.2μmol/L.低浓度(10、20、40μmol/L)的3-BP能明显抑制HNE1/DDP细胞集落克隆的形成.3-BP可诱导HNE1/DDP细胞发生明显的细胞凋亡(P<0.01),80、160、320μmol/L 3-BP作用48 h的细胞凋亡率分别为(13.7±2.1)％、(25.5±2.4)％、(45.5±3.5)％,对照组的细胞凋亡率为(1.6±0.6)％.Western blotting结果显示,3-BP处理HNE1/DDP细胞后可促进PARP的剪切,能下调抗凋亡蛋白Mcl-1和Bcl-2的表达.结论:3-BP对HNE1/DDP细胞具有增殖抑制及凋亡诱导作用,其机制可能与下调抗凋亡蛋白Mcl-1和Bcl-2的表达相关.
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3-溴丙酮酸对肝癌Bel7402细胞凋亡及相关蛋白表达的影响
目的：：观察糖酵解抑制剂3-溴丙酮酸对肝癌Bel7402细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法：采用MTT法检测3-溴丙酮酸对Bel7402细胞的增殖抑制效应,PI单染流式细胞术检测不同浓度3-溴丙酮酸(0、50、100、200μmol/L)对Bel7402细胞凋亡的影响,ATP检测试剂盒分析细胞内ATP水平,Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果：3-溴丙酮酸可浓度和时间依赖性地抑制Bel7402细胞的增殖(P<0.01),作用24、48、72 h的IC50值分别为422.9、143.9、85.0μmol/L。3-溴丙酮酸可诱导Bel7402细胞发生明显的细胞凋亡,50、100、200μmol/L 3-溴丙酮酸作用24 h的细胞凋亡率均明显高于对照组(P<0.01)。 ATP水平检测结果表明,3-溴丙酮酸可明显降低Bel7402细胞内的ATP水平(P<0.01)。 Western blot结果显示,3-溴丙酮酸可下调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,并上调凋亡诱导蛋白Bax的表达。结论：3-溴丙酮酸具有诱导肝癌Bel7402细胞凋亡的作用,其机制可能是通过引起细胞内ATP降低、调节细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。
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3-溴丙酮酸联合阿霉素对乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响
目的:研究3-溴丙酮酸(3-BrPA)联合阿霉素(ADM)对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及凋亡的影响.方法:采用3-BrPA 80、160、320 μmol/L作用于MDA-MB-231乳腺癌细胞18 h后,测定其对细胞内ATP的影响;分别用3-BrPA 10、20、40、80、160 μmol/L和ADM 0.75、1.5、3、6、12 μmol/L,以及3-BrPA 80 μmol/L与ADM 0.75、1.5、3、6、12 μmol/L合用作用于MDA-MB-231乳腺癌细胞24、48和72 h后,MTT法检测乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖情况;3-BrPA 80 μmol/L组、ADM 0.75 μmol/L组以及3-BrPA 80 μmol/L与ADM 0.75 μmol/L合用组作用于乳腺癌细胞MDA-Mb-231 24 h后,利用碘化丙啶染色,流式细胞仪检测其诱导乳腺癌细胞凋亡的影响;采用3-BrPA 16 μmol/L、ADM 0.2 μmol/L以及3-BrPA 16 μmol/L与ADM 0.2 μmol/L合用作用于乳腺癌细胞MDA-MB-231,5 d后观察对集落克隆形成的影响.结果:3-BrPA对乳腺癌细胞MDA-MB-231 ATP的生成有抑制作用;3-BrPA联合ADM后可明显增强ADM的细胞毒性作用;3-BrPA 80 μmol/L与ADM 0.75 μmol/L合用组诱导乳腺癌细胞MDA-MB-231 24 h凋亡率为39.6%,均显著高于对照组、3-BrPA单用组和ADM单用组(P<0.01);3-BrPA增强ADM对乳腺癌细胞MDA-MB-231集落克隆形成的抑制作用.结论:3-BrPA可以增强ADM对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的抑制作用以及增强ADM诱导乳腺癌细胞凋亡的作用.
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3-溴丙酮酸抑制人肝癌细胞株糖酵解的研究
目的 观察3-溴丙酮酸(3-BrPA)对人肝癌细胞株糖酵解的影响.方法 不同浓度3-BrPA处理人肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞QSG-7701后,细胞活性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和Western blot检测HepG2和QSG-7701经过3-BrPA处理前后细胞内c-Myc、单羧酸转运蛋白1(MCT1) mRNA和蛋白表达,酶耦联法检测上述细胞葡萄糖吸收、乳酸分泌及细胞内三磷酸腺苷(ATP)含量.结果 细胞存活和凋亡结果显示随3-BrPA浓度增加,细胞生长抑制率和凋亡率随之增高.不同浓度3-BrPA(25、50、75μmol/L)处理HepG2细胞24h后,凋亡率分别为(4.64±2.68)％、(14.57±8.41)％、(40.55 ±23.41)％,对照组0μmol/L下HepG2凋亡率为(5.62±3.24)％,75 μmol/L组与对照组比较差异有统计学意义(P=0.025).在mRNA和蛋白水平上,与QSG-7701比较,HepG2中c-Myc、MCT1均高表达(P=0.001、0.000),且当3-BrPA浓度为75 μmol/L时表达均下降(P=0.041、0.000).糖代谢结果显示当3-BrPA浓度为75 μmol/L时HepG2的葡萄糖吸收、乳酸分泌及细胞内ATP含量均逐渐降低(P=0.035、0.000、0.045),而QSG-7701中无改变(P=0.898、0.841、0.112).结论 3-BrPA通过抑制c-Myc/MCT1表达抑制HepG2的糖酵解,从而抑制HepG2细胞生长、促进细胞凋亡.
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扩散加权成像对肝动脉灌注3-溴丙酮酸治疗大鼠肝癌早期疗效的评价
目的：探讨扩散加权成像（DWI）对3-溴丙酮酸介入治疗大鼠肝癌模型早期疗效的评价。方法20只雄性Wistar大鼠采用瘤块种植法建立肝癌模型，种植术后10 d随机分为动脉灌注3-溴丙酮酸组（A组）和生理盐水组（B组），介入术前1 d和术后第3天行MRI检测肿瘤体积和表观扩散系数（ADC），术后第3天处死大鼠，病理分析肿瘤坏死率。结果14只大鼠完成介入手术（A＝10，B＝4）。介入术后第3天A、B组肿瘤平均体积为：482.98±103.88 mm3和255.04±148.30 mm3， A、B组肿瘤体积无统计学差异（P＝0.465）；介入术后第3天A、B组肿瘤平均ADC值为（15.15±5.20）×10-4s/mm2和（7.57±0.53）×10-4s/mm2，A、B组ADC值有统计学差异（P＝0.024）。肿瘤坏死率：A组7例为Ⅲ级坏死，2例为Ⅳ级坏死和1例Ⅰ级坏死，B组4例均为Ⅰ级坏死，治疗后A组肿瘤平均坏死率明显高于B组（P＝0.005）；肿瘤病理分级与术后ADC值呈正相关（r＝0.897）。结论3-溴丙酮酸对大鼠肝癌模型有较强的抗肿瘤作用，MRI测量肿瘤治疗后早期体积变化不能反映其疗效，尽管ADC值可评估3-溴丙酮酸对大鼠肝癌介入治疗的早期疗效，但尚须进一步研究确立其诊断标准。
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单羧酸转运蛋白1增强乳腺癌细胞对3-溴丙酮酸的敏感性
目的 探究单羧酸转运蛋白1(MCT1)在增强乳腺癌细胞对3-溴丙酮酸(3-BrPA)敏感性中的作用,为乳腺癌治疗提供新思路.方法 MTT法检测3-BrPA对乳腺癌细胞的增殖抑制作用,溴化丙啶单染法流式细胞术检测细胞凋亡,ELISA试剂盒检测细胞内己糖激酶Ⅱ、乳酸脱氢酶、乳酸、三磷酸腺苷水平,Western blot检测MCT1蛋白的表达,瞬时转染cDNA上调MCTl的表达后,检测3-BrPA对MDA-MB-231细胞的增殖和三磷酸腺苷水平的影响.结果 3-BrPA对MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响不明显,200 μmol/L作用24 h后增殖抑制率和凋亡率仅为8.72％和7.8％;但200 μmol/L 3-BrPA作用MCF-7细胞24 h后其增殖抑制率和凋亡率为84.6％和82.3％.MDA-MB-231细胞的MCT1过表达后,200 μmol/L 3-BrPA对细胞的增殖抑制率为72.44％,明显高于对照组(P＜0.05);25、50、100、200 μmol/L 3-BrPA作用细胞6h后,细胞内三磷酸腺苷水平和对照组相比分别为96.98％、88.44％、43.3％、27.56％.结论 MCT1能增强乳腺癌细胞对3-BrPA的敏感性,其机制可能是将3-BrPA转运到细胞内,从而抑制细胞糖酵解来发挥抗肿瘤作用.
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3-溴丙酮酸增强肝癌细胞对顺铂敏感性的作用
目的：探讨3-溴丙酮酸（3-BP）增强肝癌细胞对顺铂敏感性的作用及其可能机制。方法MTT法检测3-BP、顺铂对HepG2、SMMC7721细胞的增殖抑制作用。选择低于半数抑制浓度（IC50）的100μmol/L的3-BP和8μmol/L的顺铂单独或联合处理细胞，PI单染流式细胞术检测细胞凋亡，caspase 3活性检测试剂盒测定caspase-3的活性变化，ATP检测试剂盒测定细胞内ATP水平，Western blot检测XIAP、PARP蛋白的表达。结果3-BP在50~400μmol/L浓度范围内对HepG2、SMMC7721细胞具有明显的增殖抑制作用（P<0.01），作用48 h的IC50分别为238.9±13.9μmol/L、278.7±11.7μmol/L；顺铂在2~32μmol/L浓度范围内对HepG2、SMMC7721细胞具有明显的增殖抑制作用（P<0.01），作用48 h的IC50分别为16.4±0.9μmol/L、20.9±1.8μmol/L。100μmol/L 3-BP与8μmol/L顺铂联合作用于HepG2、SMMC7721细胞48 h的增殖抑制率分别为（60.6±2.2）%、（56.8±2.3）%，明显高于对照组和单独用药组（P<0.01）。100μmol/L 3-BP与8μmol/L顺铂联合作用于HepG2、SMMC7721细胞48 h的凋亡率分别为（51.1±4.3）%、（46.5±3.9）%，较单用3-BP、顺铂的凋亡率明显提高（P<0.01）。结论3-BP能增强肝癌细胞HepG2、SMMC7721对顺铂诱导的凋亡的敏感性，其机制可能是通过引起细胞内ATP缺乏、下调XIAP蛋白的表达以及增加caspase-3的活性。
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3－溴丙酮酸促进胃癌细胞凋亡的机制
目的：探讨3－溴丙酮酸（3－BrPA）抑制胃癌细胞生长并诱导凋亡的作用机制。方法将胃癌细胞MGC－803分为以纯培养基培养为阴性对照，3－BrPA低、中、高剂量处理和5氟尿嘧啶（5－FU）作为阳性对照。分别以0、4、6、8μg／mL的3－BrPA及0.5 mmol／L的5－FU处理。药物作用24、48 h后，MTT法检测细胞生长抑制率，流式细胞术检测细胞凋亡率，酶偶联法检测细胞内乳酸含量及HK活性，Real－time PCR检测Bcl－2、BaX和Cyt－c的mRNA表达。结果 MTT结果和凋亡检测结果表明，随着3－BrPA浓度增加、作用时间延长，细胞生长抑制率和凋亡率也随之增大（P＜0.05）。酶偶联检测结果显示，随3－BrPA浓度增加、作用时间延长，细胞内乳酸含量及HK的活性是降低的，且呈浓度依赖性（P＜0.05）；Real－time PCR结果显示随3－BrPA浓度增加， BaX和Cyt－c的mRNA表达量升高，而Bcl－2的mRNA表达量降低（ P＜0.05）。结论3－BrPA对MGC－803细胞的生长抑制作用和促凋亡作用可能与其能抑制MGC－803细胞内关键酶HK的活性，降低糖酵解效率，并通过激活线粒体凋亡通路相关。
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3-溴丙酮酸治疗人胃癌细胞动物模型的实验研究
目的:探讨3-溴丙酮酸(3-Bromopyruvic acid;3-BrPA)对人胃癌细胞株SGC-7901裸鼠皮下种植瘤的抑制作用.方法:建立人胃癌裸鼠皮下种植瘤模型,将成瘤后的裸鼠随机分为实验组:3-BrPA低、中、高剂量组,PBS(磷酸盐缓冲液)阴性对照组1(pH7.4)、对照组2(pH 6.8～7.8)及阳性对照5-FU组.连续4周每天瘤体周围皮下注射给药,停药24h后取下瘤体;原位末端标记法(TUNEL法)检测肿瘤细胞凋亡指数,透射电镜下观察肿瘤组织细胞形态及结构变化;计算肿瘤的体积抑瘤率.结果:3-BrPA给药组的瘤体积分别与2个PBS组比较均有意义(P＜0.05),其中高剂量组与5-FU组差异无统计学意义(P＞0.05).透射电镜观察到3-BrPA低、中、高组及5-FU组裸鼠的肿瘤组织细胞均出现典型的凋亡特征.TUNEL法检测凋亡指数显示:实验组凋亡指数分别与2个阴性对照组比较均有意义(P＜0.05),其中5-FU组凋亡指数与中剂量组差异无统计学意义(P＞0.05),而与高剂量组差异有统计学意义(P＜0.05).结论:3-溴丙酮酸在体内对人胃癌细胞SGC-7901种植瘤有较强的抑制作用.
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3-溴丙酮酸对人肝癌HepG-2细胞增殖和凋亡的影响
目的:通过3-溴丙酮酸作用于HepG-2细胞,观察3-溴丙酮酸对HepG-2细胞增殖和凋亡的影响.方法:MTT法检测细胞增殖,倒置显微镜和透射电镜观察细胞形态,流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡.结果:3-溴丙酮酸在25～75 μg/mL范围内,对HepG-2细胞的增殖具有明显的抑制作用并呈现剂量依赖性.3-溴丙酮酸处理HepG-2细胞后,倒置显微镜观察到细胞生长稀疏,细胞质透亮度下降,细胞脱落增多;透射电镜观察到染色质固缩、边集,核质内可见空泡.流式细胞术结果显示3-溴丙酮酸可将HepG-2细胞阻滞于S期,且DNA直方图上可见亚二倍体峰.在3.125～25 μg/mL范围内,3-溴丙酮酸可剂量依赖性的诱导HepG-2细胞凋亡.结论:3-溴丙酮酸抑制HepG-2增殖并诱导HepG-2凋亡.
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3-溴丙酮酸联合顺铂抑制肺癌细胞株A549的生长
目的 探讨3-溴丙酮酸(3-bromopyruvate,3-BrPA)联合顺铂体外抗肺癌A549细胞的作用及其可能机制.方法 采用CCK-8检测不同浓度的3-BrPA、顺铂单用及联用对A549细胞的增殖抑制;选择低于半数抑制浓度(IC50)的40 μmol/L 3-BrPA与1 mg/L顺铂单独和联合作用A549细胞48 h后,用倒置相差显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡;不同浓度的3-BrPA作用A549细胞48 h后,流式细胞术检测细胞周期变化,己糖激酶(hexokinase,HK)活性检测试剂盒检测3-BrPA对细胞内HK活性的影响.结果 CCK-8结果显示,与阴性对照组比较,3-BrPA浓度大于20 μmol/L时对A549细胞有明显抑制作用(P＜0.01),与单用顺铂组比较,3-BrPA联合顺铂组可显著增强顺铂对A549细胞的毒性作用(P＜0.01);3-BrPA作用A549细胞48 h后,倒置显微镜观察到3-BrPA组大多数细胞出现凋亡,而联合用药组细胞凋亡更加明显,部分区域出现细胞碎片等坏死征象;流式细胞术结果显示,3-BrPA和顺铂单用组及联合用药组细胞凋亡率均明显高于阴性对照组(P＜0.01),且联合用药组细胞凋亡率明显高于单独用药组(P＜0.01);细胞周期检测结果显示3-BrPA可将A549细胞阻滞于G1期;HK活性结果显示:与阴性对照组比较,3-BrPA组HK活性明显降低(P＜0.01).结论 3-BrPA有抑制肺癌A549细胞增殖、诱导其凋亡的作用,且与顺铂具有协同抗肺癌A549细胞增殖作用,其机制可能为抑制肺癌细胞糖酵解,进而影响肺癌细胞能量代谢.
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3-溴丙酮酸肿瘤多药耐药逆转剂的研究进展
鉴于肿瘤细胞对糖酵解的高度依赖性及多药耐药相关ABC蛋白存在依赖ATP供能的共性,选择以糖酵解途径为靶标的3-溴丙酮酸研究肿瘤MDR逆转剂是有效克服肿瘤MDR的新思路.但3-溴丙酮酸的稳定性、靶向性及其毒理部分的研究尚未取得突破性的进展,现对3-溴丙酮酸的研究进展作一综述.
