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冰柜内快速冷冻切片法
手术中病理诊断以冷冻切片应用广,以往常用的二氧化碳及半导体冷冻切片机,由于置于室温下进行切片,切片极易与切片刀附着,而且切片较厚易破碎,技术要求高,现已淘汰.目前,低温恒冷切片机已被大多数大、中型医院采用,但其大的缺点就是机器价格昂贵,很难在基层单位推广使用.我们尝试把普通切片机置于冰柜内做快速冷冻切片获得成功,现将方法介绍如下.
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四种判断组织切片刀锋利程度的方法
组织切片刀是制作组织切片的必备工具.我们须经常砥磨才能使其保持锋利,才能保证切片工作顺利进行.现今已基本由磨刀机代替手工磨刀.但不论是机磨还是手磨刀应磨到什么程度为佳,如何去掌握刀的砥磨程度,有人曾提出用显微镜观察刀刃.锋利的刀刃镜下为一细密锯齿状纹线.这一判断方法操作较繁琐不适合于日常工作需要.
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电镜超薄切片技术实践的探讨
在21世纪的今天,电子显微镜技术早已在工业、农业、地矿、环境科学尤其在生物医学、计量医学、远程病理诊断等方面得到普遍的应用.
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用油石手工磨刀的体会
手工磨刀是病理技术人员必须撑握的一项基本技术.要做好一张优良的HE切片,首先要有一把锋利的切片刀.尽管随着医学的发展,自动磨刀机及一次性刀片逐渐代替了手工磨刀,可是在实际使用中并不十分理想,因为自动磨刀机的磨盘和切片刀之间角度难以准确撑握,很难磨出刀锋.而一次性进口刀片价格昂贵,基层医院还不能普及.经改用400颗粒氧化锌油石进行手工磨刀后,取得十分满意效果.
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如何提高一次性切片刀使用率
随着医疗各行业的迅猛发展，病理科的各种设备也逐步完善与先进，以往的手摇式切片机、磨刀机也渐渐淘汰，半自动、全自动病理切片机，一次性切片刀片已经普及，这大大提高了病理技术员的工作效率，但由于一次性切片刀的普及太快，大家在切片过程中缺乏合理使用的经验，使得每张切片刀使用有效量仅在30～40只蜡块，目前市场销售的进口刀片，价格仍较昂贵，使用率偏低随之而来的是科室成本的增加，因此，如何提高一次性刀片的使用率成了每个合格技术员的当务之急[1]。
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股骨头坏死经手术治疗后再生骨的电镜标本制备方法
在透射电镜生物样品的制作过程中,骨组织的制作是较复杂的,脱钙过程、切片刀的要求、切片速度、厚度都与其它组织不同,特别是人的股骨头坏死经治疗后再生骨的材料更难得.现将实验过程归纳如下.
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骨组织石蜡包埋后脱钙不理想快速补充脱钙法
在工作中常会碰到有的骨组织脱钙至包埋后,在修蜡块时,发现有的骨组织部分脱钙不理想,无法将蜡块的组织面修平,而且会损坏切片刀.因此必须再次进行脱钙.
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电镜切片中使用钻石刀的几点体会
透射电镜样品制备过程所使用的切片刀,有玻璃刀和钻石刀两种.玻璃刀是用长400mm、宽25mm、厚6.5mm的进口玻璃条通过制刀机制成的.钻石刀是将一小块钻石磨成刀镶嵌在特制的槽上.实验发现,钻石刀除价格昂贵外,与玻璃刀相比有许多优点.
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骨质脱钙方法
组织里含有骨质或钙化灶,需先行脱钙处理.因骨质由钙盐组成,切片时既切不成完整的切片,又损伤切片刀的刀锋,因此,在取材时如遇到骨质或钙化灶,应进行脱钙处理后才转入脱水透明.1 标本的处理常用的为酸性溶液脱钙法,即骨组织或钙化组织内的钙盐多为不溶性,钙盐遇酸后生成一种可溶性的钙盐而游离出钙离子,经脱钙后的骨组织易于进行切片.方法如下.
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影响透射电镜生物样品超薄切片效果因素分析
由于电镜技术的不断发展,样品制备技术的不断改进,制备切片厚度在50nm以下的超薄切片已成为透射电镜生物样品制备的常规制样技术.但是如何制得高质量的超薄切片,得到清晰的高反差电镜图像,客观存在很多因素影响,比如超薄切片机性能好坏、玻璃切片刀是否锋利、组织包埋块硬度怎样、操作者技术经验等等.笔者根据几年的切片经验就上述影响超薄切片的几个因素作简略分析如下.
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组织切片刀的使用体会
在组织切片技术中,无论是组织的固定还是切片的染色,都常被作为获得良好切片的关键来加以研究.但作者发现却少有人探讨在切片过程中发挥重要作用的切片刀的使用.即使在技术理论中对于切片刀的论述也多是一带而过.其实获得一把锋利的切片刀,并不容易.在此作者仅将多年关于切片刀的使用体会加以总结.
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巧用一次性病理切片刀体会
一次性切片刀以其锋利的刀刃,能切出高质量的蜡片(甚而连续切片)而深受广大病理技术人员的青睐,应用也日益普及.然而目前市场销售的进口刀片,价格仍较昂贵,一般每张刀片使用有效量又仅在30～40只蜡块,如何提高刀片使用效率,节省成本,已成为技术员关心的问题.我们多年来采用Leica2035型切片机和其818型一次性刀片,结合切片技巧,提高了一次性刀片的使用率,并保证制片质量,现将体会介绍如下.
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改良HGF染色在骨髓活检石蜡切片中的应用
苏木素-姬姆萨-酸性品红染色(haematoxilingiemsa acid fuchsin,HGF)通常应用于骨髓活检的塑料切片[1].但由于普通塑料包埋的Hemapun865剂在室温下聚合时引起强烈放热,使组织和细胞内的各种酶活性遭到破坏,无法进行免疫表型的检测,且塑料包埋组织较硬,对切片刀要求高.本科将HGF染色用于骨髓活检的石蜡切片,效果良好,现将方法介绍如下.
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厨房需要哪种刀
如果有人公开骗你说你需要全套各种型号的专业厨具,那么没有人比他更坏,更顽固了.我希望搜查业余厨师的厨房的各个角落,就是为了把他们的刀具从抽屉里扔出去——那些中号的"实用"刀具,那些电视广告上出现的没用的锯齿边刀具,所有很难磨利的不锈钢的垃圾,那些设计笨拙的切片刀——这些废物连一个西红柿都切不了.
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采用犀牛牌双面不锈钢刀片制作石蜡切片
采用犀牛牌双面不锈钢刀片制作石蜡切片,比普通石蜡切片刀的切片效果好,操作简便、快捷、省时、经济适用.光镜下组织结构完整无损,清晰透明,具有推广和应用价值, 本切片技术目前国内未见文献报导.1.材料和方法 1.1 材料沈勒公司产犀牛牌双面不锈钢刀片;日本羽毛公司产Mic rotome Holder;美国产AO型滑动式切片机;人体和各类实验动物不同组织 ,10%甲醛固定,常规脱水、石蜡包埋.1.2 方法 1)先将刀架固定在滑动式切片机上 ,将固定刀片的压盖螺丝松开,取一双面刀片顺刀刃方向从中间剪断或折断,平行分开同时夹在刀架上,刀刃外留0.5～0.6mm的宽度,再将固定的螺丝紧靠.2)切片时刀锋下倾角调至1.5～2.0mm,刀架的平行角调至130～140度之间.3) 切片过程中应将粗切与细切所用的刀片各自专用.以便于节省刀片,保证切片质量.4)取片用小楷毛笔,当刀刃接触蜡块时,用毛笔尖抵住蜡片的起始端,随着进刀速度,把组织切片同步提起离开刀刃.2.结果用该刀片制作石蜡切片可达3μm,无颤痕,刀痕显著减少,镜下组织细胞结构完整,清晰透明,达到良好的染色诊断和观察的效果.3.讨论长期以来,石蜡切片大都采用双平面型的高碳钢切片刀,统称普通石蜡切片刀, 该刀在使用过程中弊端较多.凡用过一次就须磨一次.磨刀方法不当,会使刀刃损伤,切片刀痕多,既浪费时间,也影响染色和观察效果.我们采用双面刀片制作石蜡切片,既不用磨刀、被刀,操作也简便,省时省力,切片厚度一般在3～5μm.刀痕皱褶明显减少.从双面刀片与普通切片刀的切片效果对比看,普通切片刀的切片之刀痕皱褶高于双面刀片的一倍之多.从适用角度,我们对双面刀片的切片限量方面作了实验统计,每一刀片对小于2.5 cm2硬度不同的各种组织蜡块平均能切3块,连续性切片可切15～30张,因此,肯定此项切片技术不仅提高了切片质量也提高了切片的工作效率.其方法可行可靠.该特别提出的是用双面刀片制作石蜡切片很经济适用.每片双面刀片0.5元,进口单面一次性刀片18元,相当于36张双面刀片.36张双面刀片可切80～90块,若用单面刀片至少需4～6片.折价80～110元.几年来我们已将此技术应用于尸检、活检病理切片和制作教学切片及科研实验动物的石蜡切片工作中,取得了良好的实验效果.应提出的是,该刀片毕竟不是石蜡切片专用刀具,在使用过程中受到一些条件所限,所以操作时注意以下几方面:组织块宽度不能大于刀片的长度;组织固定脱水浸蜡必须充分;骨组织脱钙必须充分;刀刃外留宽度不能大于0.7mm,不小于0.6mm.
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常规石蜡切片常见问题及解决方法
目的：探讨影响常规石蜡切片质量的常见问题，找出原因并予以解决改善。方法常规石蜡切片过程中观察切片机使用性能，防故障，切片机各部位螺丝及切片刀应拧紧；干涸组织、含脂肪、胶质、血液充分组织应用防脱片，调整脱水时100％乙醇二甲苯适宜时间；切片水洗水流不可过快过大；切片刀保持洁净，经常更换刀片，取材应切除线结等异物；包埋组织不平整深切或重新包埋切片。结果常规石蜡切片过程中常见问题经过处理后，减少了切片厚薄不均、脱片、皱褶、不完整、破碎等现象出现，效果良好。结论本人在长期的实际工作中总结了常规石蜡切片过程中存在的常见问题及主要原因并结合实践发现解决方法，有助于提高常规石蜡切片的质量，确保常规病理诊断的准确率。
