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云南兰坪地区带绦虫rDNA-ITS PCR-RFLP分析
目的 对云南兰坪地区带绦虫种类进行鉴定.方法 分别选取云南兰坪地区带绦虫(LP株)、猪带绦虫(ZD株)、牛带绦虫(ND株)和都匀亚洲带绦虫(DY株)成虫孕节3片(ZD株、ND株、DY株均为标准对照),抽提基因组DNA,PCR扩增rDNA-ITS片段,用限制性内切酶DdeⅠ对扩增片段作酶切分析.结果 LP株rDNA-ITS片段PCR扩增产物经DdeⅠ酶切后的图谱与DY株一致,与ND株和ZD株均不同.结论 云南兰坪地区带绦虫(LP株)与DY株相似,同属于亚洲带绦虫.PCR-RFLP适用于带绦虫病的流行病学调查和临床诊断.
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云南西部三地带绦虫生物多态性分子遗传学标记的研究
目的 利用分子遗传学标记对采自云南西部楚雄、大理和怒江三地带绦虫进行生物多态性研究. 方法 取云南楚雄株、大理株、怒江株和贵州从江株成虫节片,抽提线粒体DNA,PCR扩增线粒体DNA细胞色素B(mtDNA-Cytb)序列部分区段,并测序;结合GenBank中已知猪带绦虫和亚洲带绦虫mtDNA-Cytb序列,构建系统发育树. 结果 序列分析显示云南大理和怒江带绦虫mtDNA-Cytb序列部分区段完全一致,同源性为100%;云南楚雄和贵州从江带绦虫mtDNA-Cytb序列部分区段基本一致,同源性为99%.系统发育树显示云南怒江和大理带绦虫与台湾亚洲带绦虫的遗传距离较近,距云南楚雄、贵州从江牛带绦虫较远,与猪带绦虫则更远. 结论 云南大理和怒江带绦虫属于亚洲带绦虫,云南楚雄带绦虫属于牛带绦虫.mtDNA-Cytb序列分析可以用于带绦虫生物多态性研究.
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绦虫及其虫卵的电镜制样探讨
在带绦虫超微结构研究中，样品制备一直存在较多困难。为配合我院研究生课题研究，我们对绦虫成虫及其虫卵的电镜制样进行了探索和改进，获得了满意的结果。
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云南大理洱海环湖带绦虫流行病学调查
调查大理州洱海周围居民带绦虫病平均感染率为9.3%,白族大年龄组及男性居民感染率较高.吃"生皮"是带绦虫感染的主要因素.
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旋毛虫孔雀绿染色标本制作
孔雀绿是一种弱碱性胞核染料,也是一种很好的指示剂.纪伟华等[1]用孔雀绿染色法制作的带绦虫妊娠节片标本,子宫与周围组织清楚.旋毛虫标本常通过卡红或苏木精染色制作永久标本[2],作者首次用孔雀绿染色法制作旋毛虫标本.
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四川地区81例带绦虫病患者的临床分析
目的 总结2012年至2015年四川地区带绦虫病患者的流行病学及临床特征,为该病防治提供依据.方法 回顾性分析2012年1月至2015年8月于本院就诊的81例带绦虫病患者的流行病学及临床特征.结果 本组病例年龄为16~79岁,以青壮年(20~50岁)多见(58例,70.37%),且男性多于女性(1.25︰1);均为藏族人群,以甘孜州、阿坝州地区为主(73例,90.13%);均有食用生牛肉史.患者多以腹痛为首发症状(70例,86.4%),部分患者可自主排出白色蠕动节片(22例,27.16%),可伴有不同程度的嗜酸性粒细胞增高(20例,24.69%)和贫血(15例,18.64%).内镜均发现扁平软体白色蠕动节片,包括胃镜阳性6例(7.41%)和肠镜阳性75例(92.59%).患者常患有基础疾病(50/81,占61.73%),多以基础疾病就诊而发现带绦虫感染.70例患者接受中药驱虫治疗,治愈65例(92.86%).结论 有食用生牛肉史的藏族人群是带绦虫病的高危人群,建议常规行带绦虫病的相关筛查.内镜检查阳性率高,且操作简便、安全可靠,可作为带绦虫病的常规检查,有助于减少漏诊及误诊.
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牛带绦虫病4例
带绦虫俗称寸白虫,是人体常见的绦虫,寄生于人体的带绦虫主要为猪带绦虫和牛带绦虫.猪带绦虫和牛带绦虫感染主要与生食或半生食猪肉或牛肉有关[1].
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分子生物学技术在带绦虫分类中的应用
传统的带绦虫分类是根据成虫和囊尾蚴的形态特征,有一定的局限性,尤其是对形态相近的虫种鉴别困难.近年来发展的分子生物学技术从基因水平检测带绦虫种间或种内个体间的遗传差异,若将两者有机结合,虫种鉴别将更加全面和客观.该文综述了PCR-限制性片段长度多态性技术(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)、随机扩增多态性DNA(randomly amplified polymorphic DNA,RAPD)、DNA序列分析等分子生物学技术在带绦虫分类研究中的应用.
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云南4个少数民族带绦虫分子鉴定研究
目的 利用分子遗传标志对采自云南西部彝族(楚雄)、傈僳族(怒江)、普米族(怒江)、白族(大理)等4个少数民族带绦虫标本作生物多态性的研究. 方法取云南彝族分离株、傈僳分离株、普米分离株、白族分离株和贵州从江分离株带绦虫成虫节片,提取线粒体DNA,PCR扩增线粒体DNA细胞色素B(mtDNA-Cytb)序列部分片段测序;结合GenBank中已知猪带绦虫、牛带绦虫和牛带绦虫亚洲亚种 mtDNA-Cytb序列,使用PHYLIP软件包运用大似然法和大简约法构建系统发育树.结果系统发育树显示云南傈僳族、普米族和白族带绦虫标本与台湾牛带绦虫业洲业种的遗传距离接近,距云南彝族、贵州从江牛带绦虫标本较远,与猪带绦虫则更远. 结论云南傈僳族(怒江)、普米族(怒江)和白族(大理)带绦虫标本属于牛带绦虫亚洲弧种,云南彝族(楚雄)带绦虫标本属于牛带绦虫;mtDNA-Cytb 序列分析可以用于带绦虫生物多态性研究.
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分子生物学技术在带绦虫鉴别中的应用
传统的带绦虫鉴别方法是根据成虫和其囊尾蚴的形态特征,但对于形态学特征相似的虫种鉴别较为困难.分子生物学技术提供了一种从分子水平来鉴别带绦虫的方法,使虫种鉴定结果更为客观.本文综述了DNA序列分析、PCR限制性片段长度多态性技术和环介导等温扩增技术在带绦虫虫种鉴别中的应用.
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广西4地带绦虫分离株COX1序列分析
目的 分析广西4地带绦虫分离株COX1序列,了解亚洲绦虫在广西的分布.方法 对鹿寨、融水、田东、三江等4县现症病人进行驱虫,收集绦虫成虫.绦虫成虫经反复洗涤后,各取孕节一节,研碎后提取基因组DNA;同时设计特异性引物,PCR扩增各分离株COX1片段,对扩增产物进行T-A克隆测序；应用相关软件分析序列的同源性、遗传距离,同时构建系统发生树.同时,从GenBank检索亚洲绦虫、猪带绦虫和牛带绦虫COX1基因序列,并与4地分离株基因序列进行比较.结果 广西4地5个带绦虫分离株的COX1碱基序列长度均为444 bp.鹿寨株与亚洲绦虫之间基因差异为5个位点(1.11％),同源性为98.87％,遗传距离为0.011,其在邻接法和简约法构建的系统发生树中位于同一分枝.融水A株与猪带绦虫同源性达100％,B株与牛带绦虫和亚洲绦虫的同源性分别达98.20％和96.17％；田东和三江分离株与猪带绦虫的同源性分别为99.55％和96.40％,遗传距离分别为0.005和0.037；鹿寨株与牛带绦虫的同源性达96.40％.结论 广西鹿寨县存在亚洲绦虫流行,融水县存在牛带绦虫和猪带绦虫混合流行.
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带绦虫虫种分子分类遗传标记的研究进展
带绦虫虫种分子分类研究中,遗传标记的选择为重要.目前应用的遗传标记有:① 线粒体基因:包括线粒体细胞色素C氧化酶第1亚基基因(cox1)、细胞色素b基因(mtDNA-Cytb),线粒体-12S rRNA基因(mtDNA-12S rRNA).②核基因组中的核糖体基因:包括ITS1、ITS2基因序列以及核基因组中的组织蛋白L型半胱氨酸酶基因序列.现对不同的遗传标记的种间、种内差异性,以及在带绦虫虫种的分子分类中的适用范围进行阐述,提出带绦虫虫种鉴定和亚洲牛带绦虫虫种定位在遗传标记的使用上应该有所区别.
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抗猪带绦虫六钩蚴兔血清的制备及重组质粒pcDNA3.1/TSO45-4B在小鼠骨骼肌的表达
目的:制备抗六钩蚴全虫可溶性抗原的兔血清,观察本室制备的猪带绦虫六钩蚴期特异性抗原基因TSO45-4B的重组核酸疫苗pcDNA3.1/TSO45-4B经肌肉接种后在宿主体内的表达.方法:用次氯酸钠法孵化六钩蚴,Dot-B1ot、ELISA检测兔血清中特异性抗体及滴度;以pcDNA3.1/TS045-4B进行体内转染,继之免疫组化法观察其在鼠体骨骼肌的表达.结果:抗六钩蚴兔血清多克隆抗体制备成功,抗体效价为1:20 100;免疫组化染色后在重组质粒注射部位肌肉组织的肌纤维内显示阳性的棕黄色分泌颗粒.结论:重组质粒在小鼠骨骼肌内成功地表达为猪囊尾蚴病多基因DNA疫苗的研制提供了体内表达的依据之一.
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猪带绦虫六钩蚴期特异性抗原基因真核表达质粒pcDNA3.1/TSO45-4B的构建
目的:构建表达猪带绦虫六钩蚴期特异性抗原基因TSO45-4B的真核表达质粒pcDNA3.1/TSO45-4B.方法:全基因合成TSO45-4B的基因序列,并利用PCR扩增该基因序列,将其插入真核表达载体pcDNA3.1,经酶切、测序鉴定.结果:经酶切和测序鉴定表明所构建的重组表达质粒中含有TSO45-4B基因.结论:成功构建pcDNA3.1/TSO45-4B重组质粒.
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云南保山、普洱带绦虫mtDNA-ND1基因序列测定及分析
目的 对云南保山、普洱地区带绦虫标本进行鉴定.方法 选取带绦虫成虫节片,抽提虫体基因组DNA,PCR扩增mtDNA-ND1基因序列,并测序;结合GenBank中已知的亚洲带绦虫、牛带绦虫、猪带绦虫mtDNA-ND1基因序列,经DNA MAN软件处理后构建系统发育树状图与同源树状图.结果 带绦虫系统发育树与同源树状图显示P1、P2、B3、B6、B7、ND与N2的同源性近.B1、B2、B4、B5、YZ与Y1的同源性近.ZD与Z3的同源性近.结论 云南保山存在亚洲带绦虫与牛带绦虫;普洱存在牛带绦虫.mtDNA-ND1基因序列可用于三种带绦虫的分类鉴定.
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云南6地域带绦虫mtCOXⅠ片段序列测定分析
目的 利用mtCOXⅠ片段的PCR和序列测定鉴定云南6地域(怒江、大理、迪庆、西双版纳、临沧、楚雄)带绦虫的虫种,并构建系统发育树.方法 从6地域采集带绦虫成虫,抽提DNA,PCR扩增mtCOXⅠ片段,并做序列测定;结合GenBank中已知的猪带绦虫、牛带绦虫、亚洲带绦虫mtCOXⅠ序列, 经DNA MAN软件处理后计算遗传距离并构建系统发育树状图.结果 遗传距离矩阵表显示:NJ4、NJ1和DQ2的遗传距离为99.8%,DL4和NJ3的遗传距离为99.5%,NJ2和DQ3的遗传距离为98.8%,DL3与BZ3的遗传距离为98.3%,而与BZ2的遗传距离为96.0%;系统发育树显示:NJ1～4、DL2～3及DQ1～3共10个标本株与BZ3聚为一支.BN1、CX1、LC1与BZ2聚为一支,两支交汇后再与由DL1和BZ1聚合的一支汇合.结论 怒江和迪庆各株为亚洲带绦虫,西双版纳、临沧和楚雄株为牛带绦虫,大理株为亚洲带绦虫和猪带绦虫.同虫种不存在地理区域的差异.mtCOXⅠ片段的序列测定可用于带绦虫分类鉴定.
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湛江市区鼠类带状链尾蚴感染调查
带状链尾蚴(Strobilocercus fasciolaris)是泡尾带绦虫(Hydatigera taeniaeformis)的幼虫,主要寄生于各类脊椎动物的肝脏中;人类也有感染的报道[1,2].
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食物源性寄生虫病的流行形势与控制对策
1概述食源性寄生虫病(disease of parasite infected by foods)是指进食生鲜的或未经彻底加热的含有寄生虫虫卵或幼虫的食品而感染的一类疾病的总称.随着人民生活水平的提高,饮食来源和方式的多样化,由食源性寄生虫病造成的食品安全问题将愈加突出,由此引发食源性寄生虫病的发病率大幅度升高.2001～2004年我国人体重要寄生虫病现状的调查结果显示,食源性寄生虫病的发病率在局部地区明显上升,其中,以华支睾吸虫感染为严重,感染率比1990年第一次全国调查的结果上升了75%,流行区的感染率为2.4%,估计流行区感染者达到1200多万人.带绦虫感染率比1990年上升了52.47%,感染带绦虫人数为55万人;另外,由于生食或半生食猪肉和溪蟹等引起的其他食源性寄生虫病,如囊虫病、旋毛虫病、并殖吸虫病、弓形虫病在局部地区,特别是西部贫困地区比较高.食源性寄生虫病已成为影响我国食品安全和人民健康的主要因素之一.
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云南兰坪地区带绦虫mtCOX I片段测定分析
目的 对云南兰坪地区带绦虫种类进行鉴定.方法 选取成虫样本,进行基因组抽提,扩增线粒体细胞色素C氧化酶Ⅰ(mtCOX Ⅰ)部分基因片段,序列测定后,用生物学软件DNA MAN进行同源性分析并构建系统发育树.结果 LP1和LP4同源性达99.8%.LP1-4与BZ2-3的同源性均在95%以上,而与BZ1的同源性较远,低于88%.亚洲带绦虫与牛带绦虫较接近,远离猪带绦虫.结论 云南兰坪地区带绦虫株与亚洲带绦虫标准株相似,同属于亚洲带绦虫.mtCOX Ⅰ片段可用于带绦虫分类鉴定.
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带绦虫妊娠节片孔雀绿染色标本制作
孔雀绿是一种弱碱性胞核染料,也是一种很好的指示剂[1].纪伟华等曾用孔雀绿水溶液对带绦虫妊娠节片(孕节)标本进行染色,使孕节的内部结构清晰,便于观察[2].
