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采用熔解曲线分析法检测红细胞Duffy血型抗原Fy-a/b基因型
本研究建立用于红细胞Duffy血型抗原Fy-a/b基因分型的熔解曲线分析方法.根据β-actin和Fy-a/bmRNA序列设计并合成引物,建立实时荧光多重PCR-熔解曲线分析法,并用该方法与常规PCR-SSP法同时检测中国成都地区198名献血者Duffy血型抗原Fy-a/b的基因型.结果表明,熔解曲线分析法和常规PCR-SSP法的基因分型结果完全一致.198名中国成都地区献血者中Fya(+)178例(89.9％),Fya(+)Fyb(+)杂合子19例(9.6％),Fyb(+)1例(0.5％),Fy4基因频率0.947,Fyb基因频率0.053,符合中国人Duffy血型分布特点.结论:本研究成功建立了红细胞Duffy血型抗原Fy-a/b基因分型的熔解曲线分析方法,该方法适用于大规模Duffy血型基因分型.中国成都地区的献血者Duffy血型基因以Fya为主.
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Duffy血型系统的分子遗传学及临床应用研究
目的 应用分子生物学技术研究人群中Duffy血型基因的分子遗传学结构和多态性以及Duffy血型在HDN产前检查的可行性.方法 采用建立Duffy血型序列特异引物引导的PCR反应基因分型(PCR-SSP)方法,结合血型血清学方法,检测我院收集的孕妇及其丈夫的血样标本的Duffy基因型.结果 采用本研究的方法共检出深圳地区Duffy基因型基因频率分别为Fya:0.95,Fyb:0.05.共检出1例Fy(a-b-)个体.其中检测出孕妇为Fy(a-b+)型,丈夫为Fy(a+b-)型样品1例.结论 应用PCR-SSP方法能够准确检测血液和羊水样品的Duffy基因型,能够用于Duffy血型不合引起的新生儿溶血反应的产前诊断.
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四川省汉族人群Duffy血型基因分型研究
目的 研究四川地区Duffy血型基因型分布,为建立红细胞库奠定基础.方法 对150名汉族健康献血者采用PCR-SSP方法进行Duffy血型系统进行基因分型检测.结果 四川地区汉族人群Duffy基因分型检测结果,Fya 基因频率为:0.929.Fyb:0.071;检出3例Fy(a-b-)个体.结论 PCR-SSP法检测Duffy血型简单、快捷、准确,为建立红细胞库奠定了基础.
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广西地区汉族人群Duffy血型基因分型
Duffy血型在人类学研究中是一个有用的工具.1950年在多次输血的血友病患者血清中发现的抗Fya和1951年在一名产妇血清中发现的抗Fyb是Duffy血型系统中常见的两个抗体[1].Duffy血型系统有6个抗原,即Fya(FY1)、Fyb(FY2)、Fy3(FY3)、Fy4(FY4)、Fy5(FY5)、Fy6(FY6).Duffy血型的基因位于染色体1q22-23,由于44号氨基酸的改变出现FY1和FY2这两种基因型[2].近些年分子生物学技术在血型研究领域的应用越来越多,本文采用PCR-SSP方法对广西地区健康献血者进行Duffy血型的基因分型研究.
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Duffy血型的基因分型
目的建立Duffy血型基因分型方法。方法根据Duffy血型cDNA结构，合成分型引物，建立聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)分型方法，对102例浙江省汉族无血缘关系的献血者进行基因分型。结果 PCR-SSP分型方法与血清学分型方法结果完全一致，102例浙江省汉族人，Fya纯合子91例(89.22%)，FyaFyb杂合子10例(9.80%)，Fyb纯合子1例(0.98%)。Fya基因频率0.9412， Fyb基因频率0.0588。结论 PCR-SSP对Duffy血型基因分型，具有方法可靠、稳定，试剂来源广泛等优点，适合于临床常规应用。浙江省汉族Duffy血型基因以Fya为主。
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汉族女性乳腺疾病患者的Duffy表型多态性与乳腺癌的关系
背景与目的:DBG (Duffy blood group) 血型系统包括基因型和表现型.其表现型由红细胞表面携带血型抗原的蛋白决定.流行病学研究表明:不同的民族有不同的DBG表型分布;不同民族在乳腺癌的发病率和死亡率方面也有所不同.本文旨在验证DBG表型是否与乳腺癌的发生和恶性程度有关.方法:应用的抗-Fya 和抗-Fyb,采用了非直接抗人球蛋白法.我们检验了上海复旦大学附属肿瘤医院乳腺科的连续253例女性患者的DBG 表型,根据凝血情况分为Fya+Fyb-、Fya-Fyb+、 Fya+Fyb+和Fya-Fyb-四种表型.同时收集患者的临床病理资料,分析DBG表型与临床病理特征之间的关系.结果:有乳腺疾病的汉族女性患者和普通汉族人群在DBG 表型分布方面的差异无显著性.在乳腺癌的发病方面, Fya-Fyb-和 Fya-Fyb+ 有更高的乳腺癌的发病倾向,但差异无显著性,Fya-表型的患者群和Fya+ 表型的患者群相比有更高的恶性率,差异无显著性 (两者分别为57.14%和39.02%,P=0.28). 各表型之间在ER、PR、Her-2、P53、PCNA、PS2、nm23和P450 状态方面差异无显著性;在乳腺癌的病理分级方面差异也无显著性.表型Fya-的患者比 Fya+ 的患者有更高的腋淋巴结转移率 (分别是100% 和 39.13%, P〈0.05, FisHer 精确检验).结论:本研究表明,对于乳腺癌患者的腋淋巴结转移,Duffy血型表型体系中的Fya抗原比Fyb抗原更加重要. Fya-表型对于发现潜在的腋淋巴结转移的乳腺癌患者有帮助.
关键词： Duffy血型 Duffy抗原/趋化因子受体(DARC) 乳腺癌 转移 -
Duffy血型系统
Duffy血型系统为人类23个血型系统中发现较早的血型系统.有关Duffy血型的分布国内报道的不少,但有关临床的报道只见到一例[1].为此,本文作者根据Mollison专著[2]及国内外有关文献作一简要综述,希引起同道的注意.
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云南佤族人群红细胞抗原多态性调查及生物学意义
目的:通过研究云南佤族人群Rh、Duffy血型系统抗原表现型的分布、抗原频率与不规则抗体产生几率的关系,从而为云南少数民族人群血型分布的多态性提供科学依据.同时为该民族群体稀有血型库的建立、组织配型和免疫性输血反应的预防提供科学数据.方法:采集云南省耿马县3代内无血缘关系的佤族人群(男女各150例)血样5 mL(EDTA抗凝),采用微柱凝胶法检测Rh、Duffy及抗体筛选,Duffy血型系统基因分型检测采用序列特异引物引导的PCR反应(PCR-SSP),所得结果与当地汉族人群为对照,作对比分析.结果:300例佤族人中RhD阳性率为99.0％,RhD阴性率为1.0％;Duffy基因分型检测结果:Fya基因频率0.994 5,Fyb基因频率0.003 5,Fya-b+检出1例;佤族女性有5例抗体筛选检测为阳性,均为同种抗体(E抗体),不规则抗体检出率占女性人群的3.33％.结论:云南佤族人群的Rh、Duffy血型系统抗原分布状况及抗原分布特征与当地汉族人群基本相符,但也有本民族的特点,佤族人群(尤其是妇女)的不规则抗体检出率比当地汉族人群高.
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南京地区人群Duffy血型的基因分型
目的 调查南京地区人群中Duffy血型的基因分型情况.方法 收集3000例南京地区献血者标本,采用PCR-序列特异性引物法进行基因分型,对稀有表型进行Duffy表型确认.结果 3000例标本中,FYA/FYA 2726例,FYA/FYB 271例,FYB/FYB 3例;FYA和FYB基因频率分别为0.9538和0.0462,符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05);3例FYB/FYB标本经血清学验证,均为稀有表型Fy(a-b+).结论 南京地区人群Duffy血型基因分型符合 Hardy-Weinberg平衡 ,与国内其他地区人群一致 ;稀有表型的确认对建立稀有血型库具有重要意义.
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Duffy血型系统抗-Fya抗体1例
Duffy血型系统为人类320个血型系统中发现较早的,与临床输血密切相关的Duffy抗原有Fya和Fyb,血型系统的抗体主要有抗Fya和抗Fyb抗体.人血清免疫抗体抗Fya抗体较罕见,为IgG类型的抗体.笔者发现1例抗Fya抗体引起的交叉配血不合的病例,现报道如下.
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云南傣族人群红细胞Rh、Duffy血型抗原多态性调查
目的 调查云南傣族人群的Rh、Duffy血型系统抗原表现型的分布及抗原频率,为云南傣族血型分布的多态性及防治Rh、Duffy血型系统引起的溶血症提供科学依据.方法 采集云南省境内3代内无血缘的傣族人群200例(男女各100例)、汉族对照组100例(男女各50例)为无关人群,采集血样3ml(EDTA抗凝),采用微柱凝胶法检测Rh、duffy及抗体筛选,Duffy血型系统基因分型检测采用PCR-SSP法,对比分析两人群间的差异.结果 200例傣族人群中RhD阳性率为98.5%,RhD阴性率为1.5%,100例汉族人群100例(男女各50例)中RhD阳性率99.0%,RhD阴性率1.0%.Duffy基因分型检测结果:傣族200份样本中,Duffy血型各种表型分布为:Fy(a+b-)表型187例(93.5%),Fy(a+b+)表型12例(6.0%),Fy(a-b+)表型1例(0.5%),未发现Fy(a-b-)表型.基因频率为:Fya(0.965),Fyb(0.035);汉族100份样本中,Duffy血型各种表型分布为:Fy(a+b-)表型92例(92.0%),Fy(a+b+)表型5例(5.0%),Fy(a-b+)表型3例(3.0%),未发现Fy(a-b-)表型.基因频率为:Fya(0.945),Fyb(0.055).傣族人群抗体筛选阳性率为1.5%,均为同种抗体,其中2例E抗体.结论 云南傣族人群的Duffy血型系统抗原分布状况及抗原分布特征与当地汉族人群基本相符,但也有本民族的自身特点,傣族族人群的RhD阴性率和不规则抗体检出率比当地汉族人群的不规则抗体检出率高,差异有统计学意义(P<0.05).
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Duffy血型研究及临床应用新进展
Duffy血型是人类重要的血型系统之一,Duffy血型不仅仅与输血安全及母婴血型不合引起的新生儿溶血病密切相关,Duffy抗原作为趋化因子还在人类疟疾疟原虫受体、炎症、肿瘤、移植排斥等方面发挥着重要作用.本文从Duffy抗原表达和基因结构、Duffy血型在人群中的分布、Duffy血型的检测方法、Duffy血型生物学功能及临床应用等方面,综述国内外关于Duffy血型研究与临床应用的现状及新进展.
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PCR-SSP法检测Rh阴性无偿献血者Duffy血型的基因分型研究
目的 调查Rh阴性无偿献血者Duffy血型的基因分型情况.方法 用分子生物学技术(PCR-SSP)进行DNA水平的检测,并以Rh阳性无偿献血者作为对照.结果 Rh阴性无偿献血者Duffy血型的基因频率为Fya=0.9252,Fyb=0.0747;而Rh阳性无偿献血者的基因频率为Fya=0.95,Fyb=0.05.无Fy(a-b-)个体.结论 Rh阴性无偿献血者Duffy血型的基因分型结果显示和Rh阳性无偿献血者无明显差异.
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西非马里Duffy血型抗原分布
目的 了解西非马里人群Duffy血型系统抗原分布情况,建立西非马里人群Duffy血型抗原初步资料,改变西非马里地区的用血习惯,掌握存在的用血风险,提供临床用血信息.方法 随机抽取无血缘关系的马里医院门诊术前患者的全血标本5 ml(EDTA抗凝),采用卡式凝胶法检测,使用单克隆抗-Fya、抗-Fyb,按照试剂说明书进行Fya、Fyb抗原检测,用正常黄种人的全血EDTA抗凝标本做阳性对照.结果 114份门诊随机采样患者中,Fy(a+b+)6例,Fy(a+b-)2例,Fy(a-b+)2例,Fy(a-b-)104例.Fya基因频率为0.035 3,Fyb基因频率为0.035 3,Fy基因频率为10.198 0.经Hardy-Weinberg平衡检验,观察值与期望值之间差异有统计学意义(P＜0.05);去除沉默基因重新做Hardy-Weinberg平衡检验,吻合度良好,观察值与期望值之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 西非马里黑人人群中Fy(a-b-)抗原频率高,Fya和Fyb抗原为稀有抗原.本例调查研究为西非当地建立Duffy血型资料,指导临床储血和合理使用血液提供依据.
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沈阳地区Duffy血型Fya阴性人群调查报告
中国人群中Fya抗原阴性表型比较少见,一旦产生抗Fya抗体,再次输血可能引起严重的输血反应.本实验室在择期手术的1例患者血清中发现抗Fya抗体,现报告如下.1 材料与方法1.1 患者资料患者,男,81岁,辽宁省本溪市人,ID号3316019.主动脉瓣狭窄并关闭不全、直肠癌术后及心功能不全心功能Ⅲ级.
关键词： Duffy血型 IgG型抗Fya抗体 配合性试验 -
抗FYa抗体引起交叉配血不合1例
临床患者因多次输血而产生不规则抗体的现象时有发生,而IgG型抗Fya抗体是非常罕见的同种异体抗体,笔者在1例溶血性贫血的患者血清中,检出IgG型抗Fya抗体,报告如下.
关键词： Duffy血型 IgG型抗Fya抗体 交叉配血 -
北京地区献血人群Duffy血型表型筛查及稀有血型库的建立
目的 调查Duffy血型表型在北京地区的分布频率,将筛选出的稀有血型红细胞甘油化冷冻保存,并建立稀有血型献血者档案资料,解决Duffy稀有血型患者输血难题.方法 收集北京地区无血源关系健康汉族献血者的血液标本1 752份,少数民族献血者标本274份,外籍献血者标本137份,利用微柱凝胶法鉴定Duffy血型表型,PCR-SSP检测Duffy血型基因,并随机选择17例做Duffy血型基因编码区域序列测定,以检测表现型与基因型符合性.结果 1 752名汉族献血者,274名少数民族献血者,137名外籍献血者的Duffy血型各表型分布分别为:Fy(a+b-)表型1530例(87.33％)、227例(82.85％)、83例(60.58％),Fy(a+b+)表型213例(12.16％)、42例(15.33％)、32例(23.36％),Fy(a-b+)表型9例(0.51％)、5例(1.82％)、20例(14.60％),Fy(a-b-)表型0、0、2例(1.46％).FYA基因频率分别为93.41、90.51、72.26,FYB基因频率分别为6.59、9.49、26.28,FY基因频率0、0、1.46.汉族与少数民族献血者,中国与外籍献血者表型频率比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05).17例FY基因编码序列部分测序结果除2例Fy(a-b-)由于存在FYB基因外,其余标本与血清学、PCR-SSP法均符合.FYA与FYB基因的不同在于FY基因编码区域第131位核苷酸碱基为A或G.结论 北京地区汉族献血者Fya阴性表型频率与国内报道相似,而少数民族及外籍献血者较高,在北京地区建立Fya阴性稀有血型供者库,以便解决稀有血型患者紧急输血问题,对提高输血安全具有重要意义.
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河北汉族人群Duffy血型系统抗原频率调查
目的 了解河北汉族人群Duffy血型系统抗原分布状况,建立河北汉族人群稀有血型抗原初步资料,解决抗-Fya等稀有血型抗体患者的用血问题.方法 随机抽取无血缘关系的河北汉族健康人群血样5mL(EDTA抗凝),采用抗球蛋白检测卡法,按照说明书进行献血者Fya、Fyb抗原检测,对于检测出的Fya阴性标本,采用SSP法进一步确认抗原基因状况.结果 在1 901份献血者标本中Fya+b+ 233例(12.26％),Fyab-1 663例(87.48％),Fya-b5例(0.26％),未检测出Fya-b-标本.Fya基因频率为0.936 1,Fyb基因频率为0.063 9.经Hardy-Weinberg平衡检验,观察值与预期值之间差异无统计学意义(x2=1.123 2,P＞0.05),河北汉族人群中Duffy血型系统抗原分布符合Hardy-Weinberg平衡.结论 在河北汉族人群中Fya阴性表型分布很低,一旦患者产生抗-Fya,通过随机筛查试验找到相合的供者非常困难,严重时会危及到患者的生命,因此,实验室有必要建立Fya阴性献血者资料库,以便及时为患者提供合适的血液成分.
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深圳献血人群Duffy血型基因多态性的研究
目的 建立Duffy血型的分子生物学检测方法,研究深圳献血人群Duffy血型基因多态性.方法 在2011年8～11月本中心900名无血源关系献血者标本中,用卡式微柱凝胶抗球蛋白方法鉴定Duffy血型表现型,建立Duffy血型的基因分型方法PCR-SSP法及PCR产物直接测序法,对900例标本DNA进行PCR-SSP法检测,其中50例做Duffy血型基因编码区域序列测定.结果血 清学结果为Fy(a+b-)855例,Fy(a+b +)43例,Fy(a-b+)2例,Fy(a-b-)0例.900例Duffy血型PCR-SSP法基因分型结果与血清学表现型完全一致.50例FY基因编码序列部分测序结果与血清学、PCR-SSP法吻合,表现型FY(a+b-)标本测序结果可见FY基因第2外显子第125位核苷酸碱基为纯合子G；表现型FY(a-b+)标本测序结果为第125位核苷酸碱基为纯合子A.结论 Duffy 血型PCR-SSP基因分型方法及PCR产物直接测序法可以正确地鉴定Duffy基因型,适用于Duffy血型基因多态性的研究.深圳地区Fya的基因频率为0.973 9,Fyb的基因频率为0.026 1.
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抗-Fya导致配血不合1例
中国人群中Fya抗原阴性的表型比较少见,一旦产生抗-Fya,再次输血时可能引起严重的溶血性输血反应[1].本实验室在择期手术的1例患者血清中发现抗-Fya,现报告如下.1病例简介患者,男,81岁,汉族,辽宁省本溪市人,因“主动脉瓣狭窄并关闭不全、直肠癌术后及心功能不全,心功能Ⅲ级”收入本院治疗.10年前因外伤在某院手术时曾接受输血治疗.本次入院,术前交叉配血不合,随进一步做抗体鉴定.
