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Ⅱ型成簇恒间隔短回文序列及相关蛋白系统（CRISPR／Cas）研究近况
1987年在大肠杆菌K12的碱性磷酸酶（ iap）基因的3′侧翼区首先发现了一类具有短回文特质的DNA重复序列［1］。2002年，这类结构被正式命名为成簇恒间隔短回文重复序列（CRISPR），CRISPR关联蛋白也同时得以命名［2］。2005年，3个研究课题组同时发现间隔序列可能源自于细菌染色体外的其他遗传物质，如噬菌体和接合质粒，并推论CRISPR／Cas系统可以抵制入侵的外源 DNA［3-5］。2007年，来源于侵染噬菌体的新的整合间隔序列得到实验验证；研究同时建立了新获得的间隔序列与细菌抵抗该噬菌体侵袭的直接关联关系，证明了CRISPR／Cas系统是抵抗噬菌体的获得性免疫系统［6］。 Marraffini和Sontheimer［7］证实CRISPR／Cas系统对于接合现象和质粒转化的干扰作用。近基于CRISPR／Cas作用机制的研究，发现了其在细菌毒力、致病性以及如何逃避宿主免疫系统等方面的相关作用［8］。
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肿瘤细胞回文序列介导的基因扩增机制研究进展
基因组不稳定是肿瘤细胞的特征性标志,基因扩增是一种特殊的基因组不稳定性的表现形式,其在激活原癌基因引发癌症的过程中起着重要的作用.基因扩增将导致细胞加速生长增殖或耐药生长等表型.人们已经广泛注意到其在癌症的诊断和治疗等方面的重要临床意义.但是,人们对基因扩增的分子机制的认识仍然十分有限,本文综述了回文序列介导的基因扩增的分子机制,提出在DNA断点处以无模板形式、新合成小回文序列可能是一部分肿瘤细胞中基因扩增的关键机制,为进一步探索基因扩增的分子机制提供理论参考.
关键词： 基因扩增 基因组不稳定性 回文序列 DNA双链断裂和修复 -
人类性染色体研究进展
近研究表明:一对性染色体可能是由一对远古常染色体进化而来.Y染色体是人类小的染色体,是男性特有的染色体,包含SRY等多个男性特有基因.Y染色体上的男性特有序列(MSY)是一个包含不同染色质序列的嵌合体,MSY包含多个回文序列.回文序列上经常发生臂间基因转换,使Y染色体具有自我保护能力.女性失活X染色体上有15%的基因逃离失活进行表达,可能在男女性别不同和女性个体间差异中起决定作用.
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正常生育男性及少精子症患者精子中由回文序列介导的染色体突变
目的:探讨人类精子中由回文序列介导的一类新型染色体突变的发生规律.方法:对28例少精子症以及32例正常生育男性的精液样本,采用巢式及多重巢式PCR检测其中特定的易位DNA序列,并对结果进行统计学分析.结果:49例存在t(11;22)易位突变,其中少精子症组22例,正常生育组27例,两组之间差异无显著性(χ2=0.336,P＞0.05).此外,至少4例亦存在t(1;22)(p21.2;q11.2)、t(17;22)(q11;q11)或t(X;22)(q27;q11)易位突变.易位的发生与精子密度(r=-0.389,P＜0.05)、活动率(r=-0.397,P＜0.05)呈负相关,而与精液量或供精者年龄无显著相关;未发现易位突变率与回文序列的相似度之间存在关联.结论:由回文序列介导的染色体突变在人类精子中普遍存在,且与精子密度、活动率相关.对这类突变进行动态量化检测可望提供一种从分子水平评估精子质量的手段.
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Y染色体与男性不育关系的研究进展
Y染色体上含有对睾丸决定和睾丸分化过程起重要作用的基因和基因家族.男性不育原因多样,大量研究表明Y染色体微缺失与男性不育的关系密切.与X染色体相比,由于Y染色体大部分不参与性染色体的重组,使它无论在大小还是基因数量上都出现了退化,未来的男性或许会面临生存的问题.现就Y染色体与男性不育、未来男性的命运进行综述.
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铜绿假单胞菌PAO1株基因组中2个SOS盒序列的初步鉴定
目的 鉴定铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)PAO1株基因组中的SOS盒序列.方法 挑选铜绿假单胞菌PAO1株基因组中16个可能含有SOS盒序列的DNA片段,经PCR扩增后,用纯化的LexA表达蛋白做凝胶滞后实验;将获得的2个阳性DNA片段进一步用DNase Ⅰ足纹法进行LexA蛋白结合序列即SOS盒的鉴定;分析所获得的2个SOS盒中的回文序列,以此回文序列在PAO1基因组中进行检索,初步分析出可能的SOS盒序列和可能的调控基因.结果 通过DNase Ⅰ足纹法初步鉴定了PAO1基因组中2个SOS盒序列,即位于基因组4 052 647～4 052 662 bp位置的CTGTCTACTFATACAG序列和5 349 888～5 349 903 bp位置的CTGTATAAATAACCAC序列,分析其回文结构为"CTG…CAG",以此回文序列在基因组中进行检索,共获得了10个候选的SOS盒序列.结论 初步证实了PAO1基因组中的2个SOS盒,并获得了10条SOS盒候选序列.
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淋球菌mtrR基因启动子区域中回文序列的突变和其对TritonX-100耐受的关系
[目的]研究 mtrR基因启动子区域中回文序列的突变和其对TritonX-100耐受的关系.[方法]将TritonX-100进行系列稀释,测其对菌株的MIC值,然后扩增包含13回文序列在内的一段碱基,选择5株MIC>32μg/ml的菌株进行测序 [结果]这5株菌都发生了单个硷基的缺失.[结论]淋球菌染色体上mtrR启动子区域中13回文序列的A/T缺失可引起淋球菌对TritonX-100等脂溶性物质的抗性增强.
