首页 > 文献资料
-
CpG协同calpain DNA疫苗诱导BALB/c鼠TH1免疫应答和抗日本血吸虫感染
目的探讨含非甲基化CpG单核苷酸(CpG-ODN)协同calpain DNA疫苗抗日本血吸虫感染的保护性作用、诱导的免疫应答类型及其免疫机理. 方法 calpain基因从原核表达载体pGEX-2TK 亚克隆到含小鼠IL-2基因启动序列的真核表达载体pVAC,构建含日本血吸虫疫苗候选分子calpain 基因的真核表达体系pVAC-calpain的DNA疫苗,构建的DNA疫苗与CpG ODN免疫BALB/c小鼠,在不同阶段采血测定免疫鼠抗体的动态变化、RT-PCR分析免疫鼠细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-12的表达,加强免疫1周后用日本血吸虫尾蚴攻击感染免疫鼠,用减虫率、减卵率及其病理组织学指标考核保护性免疫的效果. 结果 pVAC-calpain的DNA疫苗体系诱导了IgG抗体的产生,免疫3周后细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-12的表达表现出差异.特别是在CpG-ODN和pVAC-calpain免疫组IFN-γ、IL-12有高度表达,而IL-4的表达受到相对抑制,对攻击感染的日本血吸虫表现出了45%的减虫效果,虫卵肉芽肿的面积显著性的减少. 结论 CpG ODN协同日本血吸虫calpain DNA疫苗诱导了TH1为主的免疫应答,并能部分抵抗日本血吸虫感染和减轻感染鼠由于TH2免疫应答所导致的虫卵肉芽肿反应,提示CpG ODN能够协同calpain DNA疫苗抗日本血吸虫感染和缓解日本血吸虫免疫病理反应.
关键词： 日本血吸虫 CpG-ODN calpain DNA疫苗 -
CpG-ODN和氢氧化铝复合佐剂对流感病毒裂解疫苗免疫效果的影响
目的 研究CpG-ODN和氢氧化铝复合佐剂对流感病毒裂解疫苗体液免疫和细胞免疫效果的影响,为今后研制新佐剂流感疫苗和解决流感疫苗产能不足的问题提供依据.方法 以不同剂量的2009 H1N1流感病毒裂解疫苗为抗原,分别以CpG-ODN、氢氧化铝以及CpG-ODN和氢氧化铝复合佐剂为疫苗佐剂免疫BALB/c小鼠,通过ELISA、血凝抑制试验和假病毒中和试验等方法评价体液免疫效果,通过ELISPOT、胞内细胞因子染色和体内CTL杀伤等方法评价细胞免疫效果.结果 与无佐剂对照组相比,CpG-ODN或氢氧化铝单独使用能够在一定程度上增强体液免疫,2针免疫后不同抗原剂量组中抗原特异性IgG抗体滴度、血凝抑制抗体滴度和中和抗体滴度分别提高3～6倍、2～4倍和4～8倍.CpG-ODN和氢氧化铝复合佐剂具有更强的佐剂效应,2针免疫后不同抗原剂量组中抗原特异性IgG抗体滴度、血凝抑制抗体滴度和中和抗体滴度分别提高23～ 57倍、9～20倍和16～64倍.根据体液免疫结果,复合佐剂能够使流感病毒裂解疫苗的抗原用量降低至少16倍.此外,复合佐剂能够显著增强流感病毒裂解疫苗的细胞免疫应答,不但能够促进抗原特异性CD4+T细胞的IFN-γ分泌,而且能够促进抗原特异性CD8+T细胞的CTL杀伤活性.结论 CpG-ODN和氢氧化铝复合佐剂能够增强流感病毒裂解疫苗的体液免疫和细胞免疫应答并显著降低抗原用量.
-
三种类型CpG-ODN作为蛋白亚单位疫苗佐剂的比较研究
目的 比较A、B和C3种类型CpG-ODN在动物模型中的疫苗佐剂活性,为设计高活性的新型人用疫苗佐剂提供理论基础.方法 用不同CpG-ODN刺激体外培养的小鼠脾细胞,检测上清中的IFN-γ和IgM,从而确定3种类型的CpG-ODN.以基因工程乙肝表面抗原(HBsAg)为模型抗原、不同类型CpG-ODN为佐剂免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA法检测被免动物血清中抗原特异性ISG、IgG1和IgG2a抗体.结果 小鼠免疫结果表明,与Al(OH),对照组相比,3种类型CpG-ODN均具有良好的疫苗佐剂活性,但B和C型CpG-ODN诱生的抗原特异性IgG和IgG2a抗体水平远高于A型CpG-ODN.虽然A型CpG-ODN也能够显著增强总抗体水平,但并不改变IgG1和IgG2a抗体亚型的比值.这与B和C型CpG-ODN能够极大地促进TH1类免疫应答并降低IgG1/IgG2a比值明显不同,提示不同类型CpG-ODN可能通过不同机制起到疫苗佐剂作用.结论 不同类型CpG-ODN具有不同疫苗佐剂活性,B和c型CpG.ODN在小鼠体内的体液免疫佐剂效果优于A型CpG.ODN.
-
CpG-ODN气道内应用抑制哮喘小鼠过敏性气道炎症及GATA-3的表达
目的研究气道内应用CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)对小鼠哮喘模型气道过敏性炎症的治疗作用及对肺内GATA-3表达的影响.方法鸡卵蛋白(OVA)免疫BALB/c小鼠建立哮喘模型,激发后1 h气道内滴入100ug CPG-ODN,处死动物后观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比(EOS%)的变化及IL-4、IL-5、IL-12、IFN-γ的含量变化.取肺组织行病理切片HE染色、AB-PAS染色检查,观察小鼠气道炎症情况,免疫组化染色观察CpG-ODN对小鼠哮喘模型肺部GATA-3表达的影响.结果CpG-ODN治疗组BALF中IL-12和IFN-γ的产生增加,Il-4、IL-5的产生减少,BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞比例降低,肺部炎症情况明显减轻,肺血管周围及支气管周围表达GATA-3的细胞数较哮喘模型组及对照寡核苷酸治疗组明显减少.结论哮喘小鼠激发阶段气道内滴入CpG可能通过诱导IL-12、IFN-γ产生,抑制GATA-3的表达,导致TH2型细胞因子的产生减少,从而减轻哮喘气道过敏性炎症.
-
CpG-ODN刺激HBV免疫清除期及耐受期患者PBMCs分泌IFNα的研究
目的 研究免疫清除期、免疫耐受期HBV感染者外周血单个核细胞(PBMCs)对寡核苷酸CpG-ODN刺激的差异.方法 HBV感染免疫清除期与免疫耐受期患者32例,常规分离PBMCs,体外用CpG-ODN刺激,用酶联免疫斑点(ELISPOT)方法检测PBMCs分泌的IFNa.结果 100.0%的免疫清除期HBV感染者PBMCs受CpG-ODN刺激、IFNa分泌实验阳性,而免疫耐受期的HBV感染者PBMCs受CpG-ODN刺激,只有40.0%IFNa分泌实验阳性,二者之间差异有统计学意义(P(0.01).结论 免疫清除期、免疫耐受期HBV感染者PBMCs对CpG-ODN刺激的免疫反应不同.
-
热休克蛋白70联合含CpG寡核苷酸的免疫治疗作用
目的 探讨肿瘤热休克蛋白70 (HSP70-PCs)联合含CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)对荷瘤模型的治疗作用及可能机制.方法 纯化肝癌细胞中的HSP70-PCs,SDS-PAGE及Western-blot技术对产物进行鉴定.建立小鼠肝癌皮下移植瘤模型,分别运用HSP70-PCs、CpG-ODN和HSP70-PCs联合CpG-ODN对其进行治疗,观察治疗作用.ELISA进行免疫后细胞因子分析.结果 二者联合可产生强大的抗肿瘤作用,肿瘤体积、质量、抑瘤率、肿瘤转移率及生存期限与两药单独使用比较差异有统计学意义；二者联合可以提高荷瘤小鼠血清IFN-γ及CXCL-10水平,与二者单独使用比较差异有统计学意义.结论 联合使用HSP70-PCs和CpG-ODN能显著提高机体免疫功能,对荷瘤小鼠有显著治疗作用,可能与诱导Th1型细胞因子产生有关.
-
重组HBsAg疫苗辅以CpG ODN对转基因小鼠的免疫治疗效果
目的利用免疫耐受的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)转基因(Transgenic mice,Tg)小鼠模型,研究重组HBsAg疫苗辅以CpG ODN的免疫治疗效果,为HBV的临床免疫治疗提供思路和依据.方法重组HBsAg疫苗单独或辅以CpG ODN,同时设干扰素(IFN)药物组和生理盐水(NS)照组,多次免疫治疗HBV转基因小鼠,于免疫前和末次免疫后2周、4周眼球后静脉丛取血,动态观察各组小鼠血清中HBsAg量、HBsAg阴转率、Anti-HBs阳性率和HBVDNA拷贝数的变化.在治疗后应用HE染色观察各组小鼠肝组织病变活动度以及SP组化法观察活肝组织中HBsAg表达量的改变.结果在免疫治疗后2周,HBsAg疫苗组和HBsAg+CpG组血清中的HBsAg量较免疫前和同期的IFN组、NS组均有明显降低(P＜0.05),并且到4周时降低作用依然很明显;免疫治疗后2周时两组100%出现Anti-HBs抗体;HBsAg+CpG组治疗后2周血清HBsAg有1只转阴,4周时阴转数增加到3只.其他三组中均无阴转;免疫治疗后2周至4周HBsAg+CpG组的小鼠HBV DNA的拷贝数可降低1～2个数量级,IFN组2周部分出现轻微降低但到4周时出现回升;HBsAg+CpG组肝组织中HBsAg量的表达均出现不同程度的降低;病理学检测显示HBsAg+CpG组肝组织中浸润大量淋巴细胞,可见恢复期的肝小叶.肝组织病变活动度情况为HBsAg+CpG组＞HBsAg组＞IFN组、NS组.结论CpG ODN增强重组HBsAg疫苗对HBV转基因小鼠的免疫治疗效果.重组HBsAg疫苗辅以CpG ODN可作为临床上免疫治疗慢性HBV感染的可行性途经.
-
CpG-ODN增强乙型肝炎病毒转基因小鼠对重组乙肝疫苗的细胞免疫应答
[目的] 探讨CpG-ODN作为佐剂对重组乙肝疫苗诱导乙肝病毒转基因小鼠产生细胞免疫应答的影响. [方法] 用重组干扰素(rIFNα-2b)、重组乙肝疫苗(rHBs vaccine)和重组乙肝疫苗+CpG-ODN分别免疫HBV转基因小鼠后,流式细胞仪检测免疫小鼠的外周血T淋巴细胞亚群,ELISA法检测免疫小鼠的外周血IL-2、IL-12(p70)和IFN-γ的含量,MTT法和乳酸脱氢酶法分别检测免疫小鼠的淋巴细胞增殖和杀伤功能. [结果] 重组乙肝疫苗组CD3+、CD4+、CD8+细胞在T细胞中所占百分比分别为(25.008±2.852)%、(13.640±1.616)%、(9.989±1.123)%均明显高于对照组,(P<0.05);IL-2、IL-12(p70)和IFN-γ的含量分别为(1304.288±572.212)pg/mL、(203.810±91.807)pg/mL、(860.736±336.888)pg/mL均明显高于对照组,(P<0.05);淋巴细胞特异性增殖和杀伤效应与对照组相比均有明显差异,(P<0.05).疫苗+CpG-ODN组与疫苗组比较,免疫小鼠产生更强的HBV特异性细胞应答(P<0.05),且以Th1型细胞免疫应答为主.而干扰素组由于给药次数和剂量等原因,与对照组无显著差异.[结论] CpG-ODN作为佐剂可以较好的增强重组乙肝疫苗诱导HBV转基因小鼠产生细胞免疫应答.
-
CpG-ODN对婴幼儿喘息性支气管炎外周血单个核细胞T-bet表达的影响
目的:探讨CpG-ODN干预对婴幼儿喘息性支气管炎外周血单个核细胞(PBMC)T-bet表达和IFN-γ分泌的影响.方法:对28例喘息性支气管炎(喘支组)患儿于急性期和恢复期分别抽取抗凝静脉血并分离PBMC,以终浓度为10 μg/ml的B型CpG-ODN刺激48小时,分别应用RT-PCR和Western blot检测CpG-ODN刺激前后患儿PBMC的T-bet mRNA和蛋白表达情况,以ELISA检测PBMC培养上清IFN-γ的变化,同时设立26例健康婴儿对照组.结果:与正常对照组比较,喘支患儿PBMC表达T-bet mRNA及蛋白明显减少(P＜0.05),应用CpG-ODN刺激后,两组小儿PBMC表达T-bet均显著上调,但产生IFN-γ无明显增多,对照序列ODN对T-bet表达及IFN-γ的分泌无明显影响.相关分析表明,喘支患儿T-bet mRNA与IFN-γ分泌呈正相关(r=0.57,P＜0.01),CpG-ODN刺激后,二者相关性明显下降(r=0.19,P＞0.05).结论:T-bet在喘支患儿PBMC中表达减少,提示T-bet表达缺陷参与了喘支的免疫病理,B型CpG-ODN作为一种免疫调节剂,可有效上调T-bet的表达,但不能诱导IFN-γ的产生.
-
Toll样受体9在食管鳞癌细胞的表达及作用
目的 观察Toll样受体9(TLR9)在食管鳞癌细胞的表达及作用.方法 用RT-PCR方法检测食管鳞癌细胞系TE10、TE30和TE70上TLR9的表达；流式细胞术检测TE10细胞上TLR9的表达；用TLR9的激动剂CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN) 10μg/ml分别作用TE10细胞12 h、24 h和48 h后,用MTT法检测细胞生长抑制率.结果 TE10细胞上有TLR9的表达；TLR 9激动剂CpG ODN作用于TE10细胞后不同时间均能明显促进TE10细胞生长(P＜0.01).结论 TLR9激动剂CpG ODN可促进食管鳞癌细胞的增殖,提示TLR9可能是食管鳞癌治疗的靶点之一.
-
CpG-ODN对肾小球肾炎进展的影响
目的 观察CpG-ODN对肾小球肾炎进展的影响.方法 将Wistar雄性大鼠随机分为N组(正常对照)、M组(模型对照)、CpG组和GpC组.N组大鼠经尾静脉注射生理盐水2.5 ml/(kg·d),其余3组大鼠经尾静脉注射抗-thy1.1单克隆抗体2.5 ml/(kg·d),隔日1次,共3次.注射抗-thy1.1单克隆抗体后,隔天,CpG组经尾静脉注射CpG-ODN,300μg/只,GpC组经尾静脉注射GpC-ODN,300μg/只,隔日注射,共3次.各组大鼠分别于用药前和第1针注射后1周测定尿蛋白;用药后第8周留取大鼠24 h尿、血清及肾脏组织,检测24 h尿蛋白定量、血清白蛋白和肾功;肾脏组织用于肾脏病理检查以及RT-PCR法检测TLR-9 mRNA的表达.结果 CpG组与M组和GpC组相比,血清白蛋白含量明显降低,且差异有显著意义;M组、CpG组和GpC组在给药后1周均出现尿蛋白,在给药后8周,24 h尿蛋白含量明显增多;CpG组与M组相比,TLR-9 mRNA在肾脏的表达水平明显增加,且差异有显著意义;GpC组与M组相比,差异无显著意义;光镜下可见CpG组肾组织病理改变明显加重.结论 天然CpG-ODN可促进肾小球肾炎病情加重,TLR-9可能在其发生机理中起重要作用.
-
乙型肝炎疫苗新型佐剂BW006对小鼠脾树突细胞表型和功能的影响
目的 研究新型佐剂BW006(含CpG基质的寡核苷酸)与重组乙型肝炎表面抗原(HBsAg)对小鼠脾树突细胞(Dendritic cell,DC)表型和功能的影响.方法 应用BW006和/或HBsAg体外刺激小鼠脾DC,流式细胞仪检测DC膜表面分子CD80和CD86的表达水平,分支DNA(bDNA)法检测IL-12p35和IL-12p40 mRNA的表达水平,ELISA检测IL-12p70的分泌水平.结果 5μg BW006体外刺激DC 3和6h,IL-12p35和1L-12p40的mRNA表达水平分别达峰值,刺激6h时较刺激前分别增加了约1.2和26倍；刺激12和24h,CD86和CD80的表达分别达峰值(74.53％和36.10％)；刺激24 h,DC分泌IL- 12p70的水平达高峰(3 311.20 pg/ml);5 μg BW006联合40 μg HBsAg体外刺激DC 24 h,DC表面分子CD80和CD86的表达阳性率分别为25.17％和51.65％,IL-12p70分泌水平达2 699.70 pg/ml,与BW006单独刺激组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 BW006具有早期活化DC,上调DC表面协同刺激分子CD80和CD86表达及诱导IL-12分泌的功能,作为乙肝疫苗的新型佐剂,具有较好的应用前景.
-
CpG-ODN对伤寒Ty21a疫苗诱导的细胞免疫应答的作用
目的 探讨CpG-ODN对伤寒Tv21a疫苗诱导的细胞免疫应答的作用.方法 分别用含10、30及50 μg CpG-ODN的伤寒Ty21a疫苗免疫小鼠,各剂量组分别于第0、14和28 d灌胃免疫3次,末次免疫后1周.采集小鼠脾细胞.流式细胞仪检测脾细胞MHC-Ⅱ类分子和CD40分子的表达;培养脾细胞,用ELISA法检测脾细胞培养上清液中IFN-γ和IL-10的水平.结果 不同剂量CpG-ODN的疫苗免疫组脾细胞CD40和MHC-Ⅱ类分子的表达水平均高于阳性对照组,且随着CpG-ODN剂量的增加.表达增强.加入不同剂量CpG-ODN的疫苗免疫组脾细胞培养上清液中IFN-γ和IL-10的水平均升高,且IL-10随着IFN-γ分泌水平的增加而降低.结论 CpG-ODN可提高伤寒Ty21a疫苗诱导的Th1型免疫应答水平.
关键词： CpG-ODN 佐剂 伤寒Ty21a疫苗. 细胞免疫应答 -
调节免疫反应的CpG-ODN
Toll样受体(TLR)初被认为在识别病原和激活天然免疫中发挥重要作用,现在发现通过活化TLR可以调节天然免疫和适应性免疫反应.在很多研究中,TLR-9的配体CpG-ODN引起了人们广泛的兴趣,其重要原因之一就是CpG-ODN容易人工合成和进行各种修饰以改变其免疫刺激活性.现在cpG-ODN的研究已从基础研究逐步向临床药物开发方向发展.
-
佐剂CpG-ODN与重组HBsAg疫苗联合免疫乙型肝炎病毒转基因小鼠的免疫应答研究
目的以CpG-ODN为佐剂与重组HBsAg(rHBsAg)疫苗合用,研究其对乙型肝炎病毒转基因(HBV Tg)小鼠模型的免疫应答效果.方法 40只HBV Tg小鼠随机分为4组,每组小鼠分别注射rHBsAg疫苗(单用rHBsAg组)、rHBsAg疫苗+CpG-ODN(试验组)、rIFNα-2b(IFN组)、生理盐水(对照组).经多次免疫HBV转基因小鼠,于免疫前、后不同时间采血,动态观察各组小鼠血清中HBsAg量、抗-HBs阳性率和HBV DNA的变化,检测肝组织中HBsAg的表达.检测免疫小鼠的外周血T淋巴细胞亚群和白细胞介素2(IL-2)、IL-12(p70)以及γ干扰素(IFN-γ)的含量,分别检测免疫小鼠的脾细胞增殖和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤功能并计算各组小鼠肝组织活性指数(HAI).结果 rHBsAg组和rHBsAg+CpG组在免疫小鼠后2周100%诱导抗-HBs;rHBsAg+CpG组能显著降低血清中的HBsAg量或使HBsAg转阴,rHBsAg+CpG组肝组织中HBsAg的表达量与血清中一样降低,并降低血清中HBV DNA的拷贝数.rHBsAg组的CD3+、CD4+、CD8+细胞在T细胞中所占百分比,IL-2、IL-12(p70)和IFN-γ的含量以及淋巴细胞特异性增殖和杀伤效应均明显高于对照组(P＜0.05).rHBsAg+CpG组与rHBsAg组比较,免疫小鼠产生更强的HBV特异性细胞应答(P＜0.05),且以Th1型细胞免疫应答为主.在rHBsAg+CpG组肝组织中出现大量淋巴细胞,肝脏的HAI在4个组中高.结论 CpG-ODN作为佐剂可以增强重组HBsAg疫苗诱导HBV转基因小鼠产生抗病毒免疫应答,重组HBsAg疫苗辅以CpG ODN可作为免疫治疗慢性HBV感染的可行性途经.
-
CpG-ODN下调HeLa细胞功能性Fas配体的表达
为观察CpG-ODN对宫颈癌细胞系HeLa细胞Fas配体(FasL)表达水平的影响,探讨其对由HeLa细胞Fas-FasL途径诱导的淋巴细胞凋亡作用.采用实时荧光RT-PCR方法检测HeLa细胞、正常宫颈上皮细胞中FasL和Jurkat T淋巴细胞中Fas的表达水平,应用HeLa细胞与Jurkat细胞共培养的方法体外研究HeLa细胞FasL诱导T淋巴细胞凋亡作用.结果显示:①HeLa细胞、正常宫颈上皮细胞中FasL表达阳性,其表达水平分别是(0.99±0.05)、(0.68±0.03),差别具有统计学意义(P=0.0007);Jurkat细胞Fas表达呈阳性;②HeLa细胞与Jurkat细胞共培养后Jurkat细胞的凋亡率为(38.23%±4.98%),应用抗体NOK-2中和HeLa细胞的FasL后,Jurkat细胞凋亡率减少为(3.54%±1.61%),两者相比,差别有显著性意义(P=0.0001);③HeLa细胞用CpG-ODN处理前后FasL的表达水平分别是(0.99±0.05)、(0.79±0.04),差别有统计学意义(P=0.005);CpG-ODN预处理的HeLa细胞与Jurkat细胞共培养后Jurkat细胞凋亡率为(6.41%±2.81%),而没有用CpG-ODN预处理的HeLa细胞与Jurkat细胞共培养Jurkat细胞凋亡率为(29.23±6.85)%,二者的差别有统计学意义(t=13.39,P=0.006).HeLa细胞可能通过表达FasL主动诱导T淋巴细胞凋亡从而在肿瘤的免疫逃逸中发挥作用,CpG-ODN可通过下调FasL的表达而减少肿瘤细胞主动诱导的T淋巴细胞凋亡.
-
乙肝疫苗联合CpG-ODN或单独应用对孕鼠及新生鼠的影响
目的探讨CpG-ODN作为免疫佐剂对乙肝疫苗诱导孕鼠及其新生鼠体液免疫功能影响,并观察注射CpG-ODN是否导致妊娠并发症发生.方法用CPG1826联合乙型肝炎病毒疫苗免疫孕期BALB/c小鼠,ELISA法检测孕鼠及其新生鼠血清IgG抗体.结果 CpG-ODN可明显提高正常成年鼠IgG抗体水平(P＜0.05),对孕鼠及其子鼠血清IgG水平无影响(P＞0.05);20 μg/只的CPG1826剂量未影响新生鼠体重以及胎脑重量.结论以20μg/只的CpG1826剂量免疫孕鼠,孕鼠及其新生鼠没有出现免疫增强作用,也未导致胎儿宫内发育迟缓(1UGR)等妊娠并发症.CpG-ODN是一种新型免疫佐剂,有较大的开发价值及广泛的临床应用前景,但在妊娠群体应用尚待进一步研究.
-
CpG-ODN对小鼠骨髓造血系统辐射损伤的保护作用
目的 探讨Toll样受体9(Toll-like recptor 9,TLR9)激动剂--含CpG基序的寡核苷酸(CpG-ODN)对小鼠骨髓造血系统辐射损伤的治疗作用.方法 小鼠在照射后30 min、24 h、48 h连续腹腔注射CpG-ODN(50 μg/只),观察小鼠不同剂量照射后存活率的变化,检测特定时间内血液中白细胞和骨髓中有核细胞的含量及其骨髓病理切片,外源性脾结节集落形成数.结果 CpG-ODN能提高照后小鼠的存活率,提高小鼠外周血白细胞和骨髓有核细胞数(P<0.01),缓解骨髓病理学的损伤,减少骨髓干细胞的死亡.结论 CpG-ODN能减轻小鼠骨髓造血系统辐射损伤.
-
CpG-ODN2216刺激健康人外周血淋巴细胞TH1/TH2细胞因子的表达
目的 观察CpG-ODN2216对健康人外周血单个核细胞(PBMC)中TH1/TH2淋巴细胞的极化作用,以及培养上清液中TH1/TH2型细胞因子的水平.方法 取健康献血员外周血用淋巴细胞分离液分离PBMC,与CpG-ODN2216共培养24 h,流式细胞仪检测PBMC中TH1/TH2淋巴细胞的改变,ELISA法测定培养上清液中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的释放水平.结果 CpG-ODN2216能刺激淋巴细胞向TH1、Tc1转化,对TH2无明显的刺激作用.培养上清液中IFN-γ的表达水平显著增高(P＜0.01),IL-2、IL-4和IL-10无明显改变(P＞0.05).结论 CpG-ODN2216可以促进外周血淋巴细胞向TH1、Tc1极化,并诱导PBMC产生高水平的TH1型细胞因子IFN-γ,介导TH1型免疫应答.
-
基于梅毒核酸疫苗pcD/Tp92的不同接种策略
目的 评估基于梅毒核酸疫苗pcD/Tp92的各接种优化策略对新西兰兔梅毒螺旋体(Tp)皮肤感染的免疫保护效应.方法 核酸疫苗pcD/Tp92采用2次肌内注射免疫或肌内注射初免鼻饲加强的免疫方式结合黏膜佐剂CpG ODN及Tp92重组蛋白,分别或联合免疫新西兰兔.酶联免疫吸附法(ELISA)检测各接种策略组免疫期间(0~8周)兔特异性抗体产生及变化水平,免疫8周后兔鼻咽部、阴道黏膜SIgA产生水平及兔脾细胞IL-2、γ干扰素(IFN-γ)诱导水平,噻唑蓝法(MTT)检测兔脾淋巴细胞增殖水平.记录各组在初次免疫后第10周兔皮下接种Tp标准株感染后接种部位感染早期皮损的变化.结果 采用pcD/Tp92核酸疫苗肌内注射初免,CpG-ODN联合Tp92重组蛋白抗原鼻饲新西兰兔加强免疫的接种策略组(C2组)分别与pcD/Tp92疫苗肌注组(A2组),pcD/Tp92疫苗肌注初免,pcD/Tp92鼻饲加强免疫组(B1组)或结合黏膜佐剂CpG ODN联合免疫的接种策略组(B2组)相比,既能促进pcD/Tp92核酸疫苗在兔体内免疫期间(8周)诱生更高特异性抗体水平(C2组:1.825±0.175;A2组:1.372±0.322;B1组:0.893±0.297;B2组:1.294±0.124;P<0.05),IL-2(C2组:154.7±14.6;A2组:112.3±13.4;B1组:76.6±21.5;B2组:97.3±18.7;P<0.05)及IFN-γ(C2组:277.4±24.4;A2组:232.8±25.3;B1组:165.7±22.6;B2组:211.3±24.6;P<0.05)分泌水平,以及更高的T细胞增殖分化水平(SI C2组:3.57±0.24;A2组:3.08±0.22;B1组:2.12±0.14;B2组:2.88±0.18;P<0.05),还能刺激更高的黏膜特异性SIgA抗体,导致低Tp感染部位皮损Tp阳性率(6.67%)及溃疡病灶形成率(6.67%)从而达到有效的保护作用.结论 pcD/Tp92核酸疫苗肌内注射初免,CpG ODN联合Tp92重组蛋白鼻饲加强免疫的接种策略能在新西兰兔体内诱导强的黏膜免疫和免疫保护效应.
