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大鼠脑多梗死性痴呆模型的建立
目的 建立大鼠脑多梗死性痴呆(MID)模型.方法 从大鼠颈内动脉逆行注入4 mg/ml、8 mg/ml葡聚糖凝胶微粒.术后24 h对大鼠行行为学评分,术后26～30 d行Morris水迷宫实验以及尼氏染色.结果 8 mg/ml组动物行为学评分显著高于4 mg/ml组;后续试验中模型组选取8 mg/ml组.水迷宫实验模型组大鼠逃避潜伏期与空白组以及假手术组相比明显延长(P＜0.01),穿越目标区域的次数明显减少(P＜0.01).尼氏染色可观察到模型组固缩凋亡的尼氏体.结论 葡聚糖凝胶能制备大鼠多梗死性痴呆.
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奥沙利铂长循环热敏脂质体的包封率测定及体外释放考察
目的:建立奥沙利铂脂质体的包封率和含量测定方法,并对其体外释放进行考察.方法:采用逆相蒸发法制备奥沙利铂脂质体,用葡聚糖凝胶G-50柱分离载药脂质体和游离药物,以水为洗脱液,RP-HPLC法测定包封率,采用透析法考察脂质体在37℃和41℃的体外释放规律.结果:柱层析分离方法的药物回收率为99.25%,柱加样回收率为100.37%;药物含量测定方法的工作曲线为A =3E+06c-3290.8(n=5),r=0.9999,线性范围0.0201～2.0100 mg/ml,方法回收率为100.70%;脂质体在41℃条件下的释放规律符合一级动力学过程.结论:本方法简便、灵敏、准确,可以用于测定奥沙利铂脂质体的含量和包封率,所制得的脂质体具有明显的热敏释放特征.
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凝胶柱分离纯化茶多酚中表没食子儿茶素没食子酸酯的工艺优化
目的：探讨一种适合产业化分离纯化茶多酚中表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）的工艺。方法以葡聚糖凝胶为填料，研究中压柱层析分离 EGCG 的效果。结果茶多酚经脱色、过柱、冻干后得白色粉末状固体物，经高效液相色谱法（HPLC）检测EGCG的纯度达90%以上。结论本工艺经中试验放大验证适合产业化生产。
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葡聚糖凝胶色谱法用于纳米粒包封率的测定
目的 考察葡聚糖凝胶柱色谱法对分离地塞米松纳米粒的影响因素.方法 在单因素考察的基础上,星点设计效应面优化法优化色谱参数,并进行包封率的验证.结果 优条件为径高比0.23,流速0.52 mL· min-1,载药量41μg,分离比可达79.01％.结论 葡聚糖凝胶色谱拄可用于纳米粒包封率的准确测定.
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葡聚糖凝胶柱色谱法测定脂质体包封率的条件筛选
目的考察用葡聚糖凝胶法测定脂质体包封率的影响因素.方法正交实验设计,筛选优条件.结果葡聚糖凝胶柱径高比、洗脱流速、上样量都影响脂质体与游离药物分离效果.结论粒径为100～300 μm的Sephadex G-50适于脂质体包封率的测定.
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川芎嗪长循环脂质体包封率的测定
目的 建立川芎嗪长循环脂质体的包封率测定方法.方法 采用葡聚糖凝胶-G50微型柱分离脂质体和游离药物,以高效液相色谱法分别测定含量,并计算包封率.结果 葡聚糖凝胶-G50可使川芎嗪长循环脂质体和游离药物完全分离;HPLC条件下,川芎嗪与辅料和溶剂峰分离良好,川芎嗪浓度在1.09～43.60 μg/mL范围内线性关系良好(r = 0.9994,n = 6).结论 所建立的方法简单可行、重复性好、准确、稳定,为评价和控制川芎嗪长循环脂质体的质量提供了依据.
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微柱凝胶技术的应用
微柱凝胶技术,是近年来在国外先进国家的很多血液免疫实验室得到大力推广的一种新的检测技术.凝胶试验(gel test,GT)可以代替各种传统方法检查红细胞抗原和抗体,它的基本原理是:红细胞与血清在含有葡聚糖凝胶的特制小试管中孵育,经过离心,如果抗原抗体不相适应,则红细胞沉淀在管底,即阴性反应,如果抗原抗体相适应,则抗体吸附在凝胶上,从而使红细胞不易下沉,被扣留(固定)在凝胶之间,即阳性反应.GT具有操作简单、省时、敏感性高、阴阳性结果明显、结果易保存等优点.笔者分别用传统试管血型血清学法和凝胶试验法,对送检的3例新生儿标本进行新生儿血清学检查,实验充分说明GT在实际应用中的优越性.对比实验报告如下.
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肽的分离纯化研究进展
对近5年来具有代表性的不同分子量肽的分离纯化文献进行综述,并总结出肽分离纯化的一般技术路线,为肽的分离纯化研究提供参考.
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凝胶过滤层析分离蛋白质实验中三种过滤介质分离效果的比较
目的探讨凝胶过滤层析分离蛋白质的佳实验效果.方法分别采用不同规格的凝胶过滤层析介质Sephadex G-50、G-75、G-100,通过凝胶过滤层析法分离已知分子量的混合蛋白质.结果混合样品得到分离,呈现三组分离样品的层析图.结论从大分子物质中除去小分子物质时应选用交联度大的介质G-50.进行中等蛋白质分离时,选用G-75较为合适.将小分子物质浓缩而除去大分子物质时,应选用交联度小的介质,如G-100或G-200.
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含丹参中药注射液鞣质检查新方法
目的:探索一种适合于含丹参中药注射液的鞣质检查方法.方法:利用葡聚糖凝胶分离丹参有效成分与鞣质,然后常规检查.结果:此鞣质检查方法可排除丹参有效成分的干扰,快速简便,准确可靠.结论:葡聚糖凝胶分离检查法可作为含丹参中药注射液的鞣质检查新方法.
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用葡聚糖凝胶色谱法测定氟氯西林钠胶囊中的高聚物
抗生素中的高分子杂质一般是药物中相对分子质量大于药物本身的杂质的总称,分为内源性杂质、外源性杂质和其他来源杂质[1].内源性杂质是抗生素自身聚合的产物,全称为高分子聚合物,其可在生产或储存过程中产生,也可在药物的不当使用过程中产生[2].研究证实,β-内酰胺类抗生素中的高分子聚合物是引发速发型过敏反应的过敏原,是引起药品不良反应(ADRs)的主要因素.故控制产品中的高分子聚合物的含量,对减少此类抗生素过敏反应具有重要意义[3].目前,《中华人民共和国药典》2015年版(以下简称药典)已对其收载的多个β-内酰胺类抗生素品种明确制定了高分子聚合物控制指标,但未见氟氯西林聚合物检测方法.
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凝胶过滤分离蛋白质实验条件的研究
目的 研究凝胶过滤各影响因素对蛋白质分离的影响.方法 应用一般色谱方法.选择葡聚糖凝胶Sephadex G-75和几种蛋白质对装柱、洗脱液、流速和操作压等条件进行试验.结果 选用不同浓度的凝胶悬液进行装柱,不同离子成分、pH的洗脱液,不同流速和操作压对几种蛋白质进行色谱分离,得到不同的结果.结论 凝胶悬液较稀利于装柱,洗脱液的离子成分不直接影响分离效果,而洗脱液的pH对几种蛋白质分离产生明显影响,酸性条件下分离的效果好,适当的流速和操作压有利于提高色谱柱的分辨率,保证色谱柱的反复正常使用.
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葡聚糖凝胶色谱法测定盐酸头孢甲肟中高分子聚合物
目的 建立葡聚糖凝胶色谱法测定盐酸头孢甲肟的聚合物的方法.方法 色谱柱为葡聚糖凝胶Sephadex G-10(15 nm×35 cm);流动相A:0.1 mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH7.0),流动相B:水;流速:1.0 ml·min-1;检测波长为254 nm,进样量为200μl.结果 供试品溶液在3.10～46.20 g·L-1浓度范围内,溶液的浓度与聚合物峰面积呈良好的线性关系(r=0.9993);盐酸头孢甲肟对照品在0.025～0.25 g·L-1浓度范围内,溶液的浓度与对照品峰面积呈良好的线性关系(r=0.9997).结论 本测定方法简便,灵敏性高,重复性好.
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葡聚糖凝胶柱层析法分离测定注射用阿洛西林钠中的聚合物
目的 建立一种利用葡聚糖凝胶柱分离测定注射用阿洛西林钠中聚合物的方法.方法 注射用阿洛西林钠中的高分子杂质的定量洲定是利用葡聚糖凝胶柱色谱法.色谱柱:XK16/40Sephadex G-10,柱长:35cm;流动相A为pH7.0,0.025mol·L-1磷酸盐缓冲浪,流动相B为超纯水,流速:1.5mL·min-1,检测波长254nm,进样量200μL.结果 注射用阿洛西林钠在浓度为5.0～60 mg·mL-1的范围内与其峰面积呈良好的线性关系(r为0.9990).结论 本法用于注射用阿洛西林钠中的高分子杂质的测定,灵敏度高,准确性好.
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短葶山麦冬多糖提取纯化及组分的研究
目的 建立短葶山麦冬多糖的提取纯化方法,以及对多糖组分的初步研究.方法 采用水提醇沉法提取短葶山麦冬粗多糖,Sephadex G-100凝胶柱(16mm×800mm)对粗多糖进行纯化,将纯化所得的麦冬多糖完全水解,分别以木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖等单糖色谱纯为标准品,采用高效液相色谱法对上述全水解产物进行比对分析.结果 HPLC-ELSD定性分析发现麦冬多糖中单糖组成主要是果糖和葡萄糖,以果糖和葡萄糖的质量浓度对数与 HPLC-ELSD峰面积对数的线性关系定量分析出其组分的含量.由果糖的线性回归方程和葡萄糖的线性回归方程计算出两者的摩尔浓度比.结论 短葶山麦冬中多糖的糖单元基本组成是果糖和葡萄糖,并确定了其摩尔浓度比约为10∶1.
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测定硫酸软骨素相对分子质量及其分布的方法
开发了一种简单、微量的测定硫酸软骨素相对分子质量(Mr)的方法.首先用Mr已知的硫酸软骨素校正葡聚糖凝胶G-200色谱柱和琼脂糖凝胶6B色谱柱.然后采用凝胶色谱法用已校正的色谱柱测定(M)w未知的硫酸软骨素样品的Mr及其分布,并考察洗脱液离子强度变化的影响.在95％置信度下,重复测定的(M)w均值变动为(M)w±3％.
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影响右旋糖酐质量的因素分析
右旋糖酐系由蔗糖经肠膜状明串株菌发酵后生成的高分子葡萄糖聚合物,再经稀盐酸水解,后以酒精阶梯分离而制得不同分子量的右旋糖酐,即右旋糖酐20、右旋糖酐40、右旋糖酐70等,主要用于右旋糖酐输液、葡聚糖凝胶、右旋糖酐铁及其他药物载体等产品的生产.
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β-内酰胺类抗生素高分子杂质含量测定方法的研究
目的:缩短β-内酰胺类抗生素高分子杂质分析周期,减少工作量,优化检测方法.方法:采用葡聚糖凝胶高效液相色谱系统对几个品种进行检测,调整其进样量,降低流速,改善流动相B.结果:其方法可行,与标准基本一致,并且针对测定过程中的实际问题提出一些建议.结论:β-内酰胺类抗生素高分子杂质含量测定方法与原标准比较结果基本一致,检验周期缩短了近2/3,但检测工作中也遇到了一些具体问题,仍待解决.
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多柔比星磁性葡聚糖微球的制备及特性检测
目的:制备多柔比星磁性葡聚糖微球并检测其特性.方法:采用吸附法制备多柔比星磁性葡聚糖微球.高倍显微镜观察微球粒径大小及形态,紫外分光光度法检测微球中多柔比星的含量,测定微球磁吸附率,计算求和值S,确定佳投料比(药物:载体),绘制药物微球体外释放曲线.结果:制备的多柔比星磁性葡聚糖微球佳投料比为1∶15,磁吸附率为100%.微球外形圆整,分散性好.多柔比星30 min释放28%;60min释放45%;6 h释放65%.结论:制备的多柔比星磁性葡聚糖微球缓释性好,磁响应性强,可作为一种治疗顽固性疼痛的靶向神经损毁剂.
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10-羟基喜树碱半固体脂质纳米粒的研制与稳定性考察
目的:制备10-羟基喜树碱的半固体脂质纳米粒(HCPT-SSLN)并考察其稳定性.方法:采用高温乳化蒸发-低温固体法制备了HCPT-SSLN;用透射电镜考察了纳米粒的形态;用激光粒度仪测定了粒径和ξ电位;考察了其混悬液和冻干粉的物理稳定性.结果:HCPT-SSLN纳米粒平均粒径为130.5 nm,载药量为2.51%,包封率为79.19%,ξ电位为-33.1mV;室温(25℃)和4℃下放置6个月,纳米粒外观、粒径及包封率无明显变化,冻干粉比混悬液的物理稳定性更高.结论:本实验制备的HCPT-SSLN包封率和载药量较高,粒径分布均匀,稳定性良好.初步表明HCPT适合进行SSLN包裹.
