首页 > 文献资料
-
幽门螺杆菌硫氧还蛋白1表达量对胃癌BCG-823细胞生长的影响
目的 研究幽门螺杆菌(Hp)不同表达量硫氧还蛋白1(Trx1)对人胃癌细胞(BCG-823)生长的作用.方法 将高表达Trx1及低表达Trx1 Hp分别以1∶50,1∶100,1∶200细胞细菌浓度比进行细菌细胞共培养,设不加菌空白对照组,分别于24 h及48 h后分别用倒置显微镜及MTT法观察细胞形态及细胞存活率,并收集1∶100浓度组细胞用流式细胞仪检测细胞周期.结果 从镜下观察及测细胞OD值均发现Hp可使BCG-823细胞增生活跃,并呈浓度及时间依赖性,高Trx1组细胞存活率明显高于对应时间及浓度的低Trx1组,两组比较有统计学差异;用流式细胞仪检测细胞周期结果表明高Trx1组BCG-823细胞进入S期的比例于24 h及48 h均明显高于低Trx1细菌组,且无亚二倍体出现,结果有统计学差异.结论 高表达Trx1的Hp对胃癌细胞有促增殖作用,Trx1与Hp的致癌机制可能有关.
-
替米沙坦对糖尿病大鼠胰岛硫氧还蛋白与硫氧还蛋白相互作用蛋白表达的影响
目的 探讨替米沙坦对糖尿病大鼠胰岛硫氧还蛋白(TRX)与硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)表达的影响.方法 SD大鼠分为正常对照(NC)、糖尿病(DM)和替米沙坦干预(TM)组.DM组和TM组大鼠高脂高糖喂养4周后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)(30mg/kg)构建2型糖尿病(T2DM)模型,TM组予替米沙坦10mg·kg-1·d-1干预,8周后测定血浆生化指标、胰岛中胰岛素、TRX和TXNIP的表达.结果 DM组和TM组空腹血糖、丙二醛以及胰岛中TXNIP水平均较NC组高(P＜0.05),TM组血糖与DM组差异无统计学意义,但TM组上述其余指标水平较DM组低(P＜0.05);DM组和TM组空腹胰岛素、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶及胰岛中胰岛素和TRX水平低于NC组(P＜0.05),但TM组高于DM组(P＜0.05).结论 T2DM大鼠胰岛TRX表达较正常大鼠降低,而TX-NIP升高;氧化应激水平和低胰岛素血症的改善可能与替米沙坦干预了这种变化有关.
-
自发性脑出血患者急性期的影响预后因素及临床评分
自发性脑出血(spontaneous intracerebral hemorrhage,SICH)在脑卒中各亚型的发病率仅次于缺血性脑卒中.在西方国家中,脑出血约占所有脑卒中的15％,占所有住院脑卒中患者的10％～30％,我国的比例高达18.8％～47.6％[1].2015年,美国心脏病协会/美国卒中协会(AHA/ASA)和中华医学会神经病学分会/中华医学会神经病学分会脑血管病学组相继发布了新脑出血治疗指南[1-2].其分别对SICH的诊断、治疗及预防等进行了更新和总结.由于脑出血发病凶险,患者发病前多伴有基础疾病,其患病30 d内的病死率为20％～40％,其中约一半的死亡发生在起病48 h内[3].脑出血急性期哪些因素对患者病程及预后将产生影响和怎样的影响?如何评价患者预后?这些都是临床实践中经常遇到的困惑和挑战.现拟从SICH患者可能发生的早期伴发因素及临床评分两方面阐述.
-
硫氧还蛋白硝基化在慢性阻塞性肺疾病发病中作用
目的 探讨硫氧还蛋白(Trx)硝基化修饰在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病过程中作用. 方法 收集非吸烟者肺组织标本10例,吸烟者肺组织标本12例,COPD肺组织标本26例(根据GOLD指南将COPD患者肺功能进行了分级:GOLD2-3级(COPDⅡ-Ⅲ),GOLD4(COPDⅣ)).检测肺组织中Trx的活性及表达量,应用免疫组化及ELISA法检测硝基化酪氨酸含量,应用免疫共沉淀法检测硝基化Trx含量. 结果 非吸烟组、吸烟组、COPDⅡ-Ⅲ组、COPDⅣ组Trx相对蛋白表达量分别为[(0.13±0.03)、(0.29±0.06)、(0.45±0.1)、(0.68±0.21)] μmol·min-1·mg-1,吸烟组及COPD组肺组织中Trx表达量较非吸烟组均上升(t=2.312、2.642、3.312,均P＜0.01);非吸烟组、吸烟组、COPDⅡ-Ⅲ组、COPDⅣ组Trx活性分别为[(2.40±0.52)、(2.30±0.60)、(1.40±0.32)及(0.98±0.20)] μmol·min-·mg-1蛋白,COPD组Trx活性较对照组下降(t=2.553、3.852、3.870,均P＜0.01).非吸烟组、吸烟组、COPDⅡ-Ⅲ组、COPDⅣ组肺组织中硝基化Trx表达量分别[(1.9±0.2)、(2.8±0.3)、(7.9±1.7)及(9.1±2.7)]μmol·min-1·mg-1,COPD组硝基化Trx较非吸烟组上升(t=3.826、6.332、9.932,均P＜0.01). 结论 Trx硝基化修饰后活性下降,在COPD发病过程可能扮演着重要角色,抑制Trx硝基化修饰可能成为COPD治疗的新靶点.
-
硫氧还蛋白通过Smad3/AP-1通路抑制人血管内皮细胞黏附蛋白的表达
目的 研究硫氧还蛋白(Trx)在动脉粥样硬化中对血管内皮细胞保护作用的分子机制. 方法 应用腺病毒感染的方法在原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中建立过表达硫氧还蛋白及其对照的细胞模型.以致动脉粥样硬化重要危险因子氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)为刺激剂.应用免疫印迹及间接免疫荧光法检测Trx,黏附分子(ICAM-1,VCAM-1)及其上游信号分子(Smad3,AP-1)的蛋白表达及细胞定位.应用胰岛素还原法检测Trx的活性,应用荧光探针DCFHDA进行细胞内活性氧检测. 结果 和对照组相比过表达Trx组Trx表达量明显提高,活性检测显示Ad-Trx的活性上调率为(26.2±3.3)％,细胞内活性氧(ROS)检测提示过表达Trx显著抑制细胞内ROS的产生.和对照组相比在基础及氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激下过表达Trx组明显下调了内皮细胞黏附分子的表达(P＜0.05),显著提高了内皮细胞中Smad3的磷酸化(P＜0.05).而应用Smad3磷酸化特异性的抑制剂SIS3预处理细胞反转了Trx对黏附蛋白的抑制作用.SIS3预处理细胞进一步上调了oxLDL刺激下AP-1亚基c-Fos的核蛋白表达. 结论 Trx抑制内皮细胞黏附分子表达的作用可能是通过上调Smad3蛋白的磷酸化及抑制核转录因子AP-1亚基c-Fos的核表达来调节的.
-
老年人血清硫氧还蛋白和3-硝基酪氨酸与糖尿病视网膜病变相关性研究
目的 探讨硫氧还蛋白、3-硝基酪氨酸与糖尿病视网膜病变(DR)的关系,为临床防治糖尿病视网膜病变提供新的依据. 方法 筛选山西大医院内分泌科确诊的2型糖尿病(T2DM)患者156例,根据眼底检查结果,分为糖尿病正常眼底(NDR)组、非增殖型DR(NPDR)组、增殖型DR(PDR)组各52例,收集同期健康者52例为对照(CON)组.采用固相夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组血清硫氧还蛋白、3-硝基酪氨酸含量,并对检测结果进行统计学分析. 结果 CON组、NDR组、NPDR组、PDR组硫氧还蛋白的表达水平依次增高,分别为(324.1±69.3) pg/L、(429.5±36.9) pg/L、(515.2±43.0)pg/L、(588.8±112.5) pg/L,各组比较差异有统计学意义(F=19.00,P=0.000);3硝基酪氨酸的表达水平CON组、NDR组、NPDR组、PDR组亦为依次升高,分别为(0.16±0.07) ng/L、(0.22±0.05) ng/L、(0.28±0.06) ng/L、(0.38±0.09) ng/L,各组比较差异有统计学意义(F=28.62,P=0.000).血清硫氧还蛋白的表达与DR的严重程度呈正相关(r=0.65,P=0.001);3硝基酪氨酸的表达与DR的严重程度呈正相关(r=0.67,P=0.001),血清硫氧还蛋白和3硝基酪氨酸的表达水平相关(r=0.72,P=0.001). 结论 硫氧还蛋白、3-硝基酪氨酸血清含量随DR严重程度加重而增高,与DR的严重程度呈正相关.
-
硫氧还蛋白通过下调Nox4活性抑制血管内皮细胞黏附蛋白的表达
目的 探讨动脉粥样硬化始动环节中硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)对还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶Nox4亚型的作用,及其参与内皮细胞黏附蛋白表达的分子机制研究. 方法 应用腺病毒感染的方法在原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中建立高表达硫氧还蛋白(Ad-Trx)及其对照(Ad-GFP)的细胞模型.以致动脉粥样硬化重要危险因子氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)为刺激剂.用免疫印迹法检测细胞间黏附蛋白-1(ICAM-1)、Nox4及P22 phox的表达;用间接免疫荧光的方法检验Trx在细胞内的表达;提取细胞膜组织,用酶学方法测定内皮细胞NADPH氧化酶的活性;应用荧光探针DCFH-DA进行细胞内活性氧检测. 结果 Trx过表达及NADPH氧化酶特异性的抑制剂Apocynin可以显著下调ox-LDL刺激下内皮细胞ICAM-1的表达和活性氧产生.与对照组相比过表达Trx抑制了内皮细胞膜组分中ox-LDL刺激下Nox4的表达、NADPH氧化酶活性增加以及P22 phox的表达增加. 结论 Trx通过下调内皮细胞Nox4的活性,抑制内皮细胞ICAM-1的表达,减轻炎性损伤,保护内皮细胞功能.
-
人硫氧还蛋白基因表达对病毒性心肌炎小鼠心肌炎症反应的影响及其机制
目的 探讨携带人硫氧还蛋白(hTRX)的重组腺病毒对柯萨奇B3(CVB3)病毒性心肌炎小鼠心肌炎症反应的影响及其机制.方法 雄性Balb/c小鼠60只,4周龄,体重l2~14 g,分为3组,即对照组、心肌炎组和hTRX组,每组20只.hTRX组及心肌炎组小鼠腹腔注射100 TCID50的CVB3病毒0.1 ml,对照组同时给予等量的生理盐水.接种病毒前2 d,hTRX组小鼠心包腔穿刺注射滴度为2.5× 108pfu/ml的TRX重组腺病毒30 μl,心肌炎组小鼠心包腔穿刺注射滴度为2.5×108pfu/ml的空载体重组腺病毒30 μl.于接种病毒的第7天将小鼠处死取心脏.心脏病理切片苏木素伊红染色观察各组心肌病理改变,电镜观察心肌超微结构改变,Western blot法检测心肌组织核因子κB(NF-κB)蛋白含量,ELISA法检测心肌组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)蛋白含量.结果 (1)各组小鼠心肌组织光镜观察结果:心肌炎组小鼠心肌炎病变检出14只,hTRX组检出5只,对照组未检出.光镜下观察可见,对照组小鼠心肌组织未见炎性细胞浸润及坏死灶,细胞排列整齐,呈圆柱状,细胞质丰富红染,胞核卵圆,位于细胞中央;心肌炎组小鼠可见局灶性心肌坏死和炎性细胞浸润;hTRX组小鼠可见点状心肌坏死和炎性细胞浸润.(2)各组小鼠心肌组织透射电镜观察结果:心肌炎组小鼠心肌细胞肿胀、大量肌丝溶解、线粒体肿胀空化.而与心肌炎组相比,hTRX组小鼠心肌细胞肿胀较轻、肌丝溶解较少、线粒体肿胀空化较少.(3)各组小鼠心肌细胞核中NF-κB的蛋白含量:心肌炎组小鼠心肌组织细胞核NF-κB蛋白含量高于对照组(F=6.237,P<0.01), hTRX组则低于心肌炎组(F=6.009,P<0.01).(4)各组小鼠心肌组织中TNF-α和IL-1β的蛋白含量:心肌炎组小鼠心肌组织TNF-α和IL-1β蛋白含量均高于对照组(F值分别为8.670和8.462,P均<0.01),而hTRX组则均低于心肌炎组(F值分别为7.542和7.219,P均<0.01).结论 hTRX可减轻病毒性心肌炎小鼠的心肌损伤和炎症反应,其机制可能与hTRX可下调NF-κB、TNF-α和IL-1β蛋白表达密切相关.
-
小分子干扰RNA抑制高氧暴露下人肺腺癌A549细胞中的硫氧还蛋白-2对还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位1、细胞色素C氧化酶工表达的影响
目的 探讨小分子干扰RNA(small interference RNA,SiRNA)抑制高氧暴露下人肺腺癌A549细胞中硫氧还蛋白-2(thioredoxin-2,Trx-2)对还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadenine dinucleotide,NADH)脱氢酶亚单位1(NADH dehydrogenase subunit 1,ND1)及细胞色素C氧化酶Ⅰ(cytochrome C oxidase Ⅰ,COX Ⅰ)表达的影响. 方法 体外传代培养A549细胞系,将Trx-2序列特异性的SiRNA转染A549细胞,随机分为无干扰空气组、无干扰高氧组、干扰后空气组与干扰后高氧组.分别于高氧或空气暴露12、24、48 h提取A549细胞总RNA和蛋白.采用逆转录.聚合酶链反应技术测定Trx-2、ND1和COX Ⅰ mRNA水平的表达,Western印迹技术检测Trx-2蛋白的表达. 结果 (1)序列特异性SiRNA可显著抑制Trx-2表达.(2)无干扰高氧组24 h Trx-2mRNA水平为0.7799-4-0.1249,显著高于无干扰空气组(0.4424±0.1140)(P<0.05).干扰后高氧组24 h Trx-2 mRNA水平为0.2774±0.0174、48 h为0.2587±0.0069,均显著低于干扰后空气组和无干扰高氧组(P
-
高氧暴露对早产新生大鼠肺组织凋亡信号调节激酶1表达的影响
目的 研究早产新生大鼠高氧肺损伤肺组织中凋亡信号调节激酶1(apoptosis signalregulating kinase 1,ASK1)及硫氧还蛋白(thioredoxin.Trx)和硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase,TrxR)的表达变化及意义,探讨高氧肺损伤的发病机制和防治措施.方法 早产新生SD大鼠128只,生后1 d随机分为空气组和高氧组,每组64只.两组于生后1,4、7、10、14 d各时间点处死8只大鼠取肺组织,采用HE染色观察肺组织病理学变化;采用逆转录一聚合酶链反应技术测定Trx和TrxR mRNA表达;免疫组织化学方法检测肺组织ASK1蛋白的表达和分布,Western印迹法检测ASK1蛋白表达水平变化.两组间比较采用t检验.结果 (1)肺组织病理学:与对照组比较,高氧组肺组织出现明显肺泡炎性改变和肺发育滞后.(2)肺组织ASK1广泛分布于肺泡上皮细胞和血管内皮细胞胞浆中;高氧暴露1、4 d肺组织ASK1蛋白表达分别为0.4382±0.0227和0.5270±0.0432,高于空气组(0.3458±0.0263和0.3760±0.0058)(P<0.01),7 d时下降为0.4343±0.0254,但仍高于空气组(0.3473±0.0220)(P<0.01).(3)高氧组Trx和TrxR mRNA表达强度均高于空气组,且二者分别于10 d(0.6860±0.0811)和7 d(2.0351±0.1600)时达高峰(P<0.05).(4)Western印迹法检测ASK1蛋白水平变化与免疫组织化学法的结果一致.结论 ASK1可能参与高氧肺损伤的发生发展,而Trx系统可能在其中发挥重要保护作用.
-
促甲状腺素抗氧化传导通路与甲状腺乳头状癌侵袭力的关系
目的 探讨促甲状腺素受体(thyroid-stimulating hormone recepter,TSHR)、抗氧化酶1(pemxiredoxin 1,Prxl)、硫氧还蛋白1(thioredoxin1,Trx1)、缺氧诱导因子1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)α在甲状腺乳头状癌侵袭、转移中的作用.方法 选取2003至2007年于天津市肿瘤医院手术切除的34例典型甲状腺乳头状癌石蜡包埋标本、39例高细胞型甲状腺乳头状癌石蜡包埋标本,以癌旁正常甲状腺组织作对照,采用免疫组织化学SP法,检测TSHR、Prx1、Trx1、HIF-1α在甲状腺乳头状癌中的表达,并将检测结果结合患者的临床资料(性别、年龄、肿瘤大小、局部侵犯、颈淋巴转移、组织学亚型、T分期)等进行分析.结果 甲状腺乳头状癌中的Prx1、Trx1、HIF-1α的阳性表达率均高于癌旁正常甲状腺组织(χ2值分别为5.49、6.16、40.48,P值均<0.05).甲状腺乳头状癌中的TSHR的阳性表达率低于癌旁正常甲状腺组织(χ2=15.70,P<0.05),高细胞型甲状腺乳头状癌的TSHR的阳性表达率低于典型甲状腺乳头状癌(χ2=4.24,P<0.05).肿瘤侵犯甲状腺被膜外、有颈淋巴转移、高细胞型、T3-T4期甲状腺乳头状癌的Prx1、Try1、HIF-1α的阳性表达率更高,差异有统计学意义(P值均<0.05).甲状腺乳头状癌中Trx1与Prx1、Trx1与HIF-1α的阳性表达具有关联性(列联系数分别为0.664和0.652,P值均<0.05).结论 甲状腺乳头状癌中Prx1、Trx1和HIF-1α的高表达与肿瘤的侵袭和转移有关,TSH可能通过Prx1-Trx1-HIF-1信号传导通路促进甲状腺癌的发展.
-
慢性高眼压大鼠外侧膝状体硫氧还蛋白抗氧化系统的变化研究
目的 研究慢性高眼压大鼠外侧膝状体硫氧还蛋白抗氧化系统的动态变化及其可能的分子调控机制.方法 采用烧灼巩膜上静脉诱导高眼压的方法建立大鼠慢性高眼压模型,有眼作为实验眼(实验组),左眼仅分离静脉但不烧灼,作为假手术眼(假手术组).高眼压模型大鼠共25只,4只大鼠作为空白对照组.在眼压升高后不同时间点(1、3、7、14、28 d)采用免疫印迹法和RT-PCR方法检测硫氧还蛋白Trx1、Trx2蛋白和mRNA表达以及硫氧还蛋白调控基因Txnip、Sesn2和Srxn1的表达,并按照时间进行分组.在各时间分组组内数据采用配对t检验;在各时问分组组问采用单因素方差分析.结果 大鼠高眼压3d,硫氧还蛋白抗氧化系统中硫氧还蛋白表达灰度值为0.83±0.02,较对照组(1.02±0.04)有所下降,差异具有统计学意义(F=4.871,P=0.005);14d组,Trx1的mRNA相对表达量0.63 ±0.04,较对照组(0.96±0.03)有所下调,差异具有统计学意义(t=13.647,P＜0.05);7 d组,上游基因Sesn2 mRNA相对表达量为0.53±0.11,较对照组(0.96±0.03)有所下降(t=13.812,P＜0.05);7d组和14 d组Srxn1的mRNA相对表达量分别为0.71 ±0.05、0.49±0.03,较对照组(0.97±0.02、0.96 ±0.02)有所下降(7d组t=9.451,P＜0.05; 14 d组t=13.611,P＜0.01),差异具有统计学意义.抑制基因Txinp mRNA表达分别为1.83±0.04、2.37±0.03,较对照组(1.00 ±0.02、0.95 ±0.03)有所上调,差异具有统计学意义(7 d组t=-7.924,P＜0.05,14 d组t=12.637,P ＜0.01).结论 慢性高眼压大鼠外侧膝状体存在氧化损伤,且发生氧化损伤时外侧膝状体内Trx系统Trx1、Trx2受多途径抑制发生不同程度表达下调,其上游抑制基因表达上调,上游促进基因表达下调.
-
幽门螺杆菌硫氧还蛋白-1基因克隆及其重组蛋白表达与活性测定
目的:克隆幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx1)基因,构建含有该目的基因的原核细胞表达载体,表达纯化该蛋白,并检测该蛋白活性.方法:以Hp国际标准菌株26695的总RNA为模板,设计含有酶切位点的特异性引物,用逆转录PCR的方法扩增Hp Trx1的cDNA,连接至pEASY-T1载体构建成pEASY-T1-Hp Trx1.对pEASY-T1-Hp Trx1进行双酶切后将目的片段连接至pET-30a,形成pET-30a-Hp Trx1重组质粒,并在大肠杆菌BL21 plys S中进行表达.应用镍柱亲和层析纯化重组的Hp Trx1蛋白,并检测其二硫键还原酶的活性.结果:测序结果显示Hp Trx1 cDNA成功连入pET-30a质粒,且与GenBank(HP0824)完全一致.含质粒pET-30a-Hp Trx1的大肠杆菌BL21 plys S成功表达出Hp Trx1蛋白,活性检测显示重组Hp Trx1蛋白具有二硫键还原酶的活性.结论:成功构建原核表达载体pET-30a-Hp Trx1,并表达、纯化出有活性的Hp Trx1蛋白,为进一步研究Hp Trx1的生物学活性及其对肿瘤发生的作用机制奠定了基础.
-
硫氧还蛋白-1高表达的幽门螺杆菌慢性感染蒙古沙土鼠模型的建立与评价
目的：建立硫氧还蛋白-1（thioredoxin-1，Trx1）基因高表达的幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）慢性感染蒙古沙土鼠模型，评价 Trx1在 Hp 长期定植导致胃黏膜的病变及其致癌性中的作用。方法：健康雄性蒙古沙土鼠75只，随机分为3组：Trx1高表达 Hp 组（30只），Trx1低表达 Hp 组（30只）和对照组（15只）。分别采用 Trx1高表达和低表达 Hp 菌株灌胃，建立 Hp 长期感染蒙古沙土鼠腺胃模型。在接种 Hp 后第4、20、34、48、70和90周分批处死动物，行快速尿素酶实验和 Warthin-Starry 银染判定 Hp 定植情况，HE 染色观察胃黏膜病理改变。结果：（1）成功建立了 Trx1高表达和低表达 Hp 长期感染蒙古沙土鼠腺胃的动物模型。（2）Trx1高表达和低表达 Hp 组胃黏膜病变随时间延长而逐渐加重，Trx1高表达 Hp 组出现黏膜不平及结节性病变的时间分别为第20周和第34周，早于Trx1低表达 Hp 组（分别为第48周和第70周）；Trx1高表达 Hp 组从第48周起观察到黏膜糜烂（3只），而 Trx1低表达 Hp 组和对照组在整个实验过程中均未见明显的黏膜糜烂改变。Trx1高表达 Hp 组出现病变的时间和病变范围明显早于／重于 Trx1低表达 Hp 组。（3）Trx1高表达 Hp 组在接种后第34周可观察到上皮细胞的轻度异型增生，明显早于 Trx1低表达 Hp 组（第48周）。第90周，Trx1高表达 Hp 组有71．4％（5／7）、Trx1低表达 Hp 组有42．8％（3／7）检出管状腺癌（P ＝0．592），均为早期癌，且 Trx1高表达 Hp 组有1例为黏膜下癌，此外，Trx1高表达 Hp 组还观察到2例上皮细胞重度异型增生（28．6％，2／7），而在 Trx1低表达 Hp 组仅观察到3例上皮细胞中度异型增生（42．8％，3／7）。结论：Trx1高表达和低表达的 Hp 可稳定定植于蒙古沙土鼠腺胃，出现类似于人感染 Hp 后出现的各种病理变化，并诱发腺癌的发生；Trx1高表达 Hp 组胃黏膜病变明显重于 Trx1低表达 Hp 组，Trx1可能是我国人群 Hp 致病及致癌的毒力因子。
-
代谢综合征合并心肌梗死大鼠模型的建立及 氧化应激相关机制的探讨
目的 建立一种稳定、易复制、符合临床实际的代谢综合征(MS)合并心肌梗死(MI)大鼠模型,并探讨MS对心肌梗死的影响.方法 OLETF大鼠用于建立MS模型,给予高脂饲料喂养;LETO大鼠作为对照,给予标准饲料喂养.MS模型造模成功后,将对照大鼠和模型大鼠分别给予假手术处理(sham组,MS-Sham组)和心肌梗死造模(MI组,MS-MI组).心肌梗死造模采用结扎大鼠心脏左前降支方法制作心肌梗死模型,假手术处理只开胸穿线不结扎左前降支.超声心动图测量大鼠左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室短轴缩短率(LVFS)、左心室射血分数(LVEF).酶联免疫吸附试验(ELISA)测定心肌组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)、髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)水平;免疫印迹和RT-PCR法检测心肌组织硫氧还原蛋白(TRX)和硫氧还原蛋白相互作用蛋白(TXNIP)的蛋白和mRNA水平.结果 MS和MI对大鼠的LVEDD、LVESD、LVFS、LVEF均有影响(P<0.05),两者交互效应对大鼠的LVEDD、LVFS、LVEF有影响(P<0.05).MS和MI对大鼠心肌组织的GSH-Px、T-AOC、MPO、MDA及TRX和TXNIP蛋白和mRNA水平均有影响(P<0.05),两者交互效应对大鼠心肌组织的T-AOC、MDA和TXNIP mRNA水平有影响(P<0.05).结论 本研究建模方法简便、实用性强,符合MS合并心肌梗死临床发病实际.TRX系统稳定性被破坏可能是MS加重心肌组织氧化应激水平及左室功能下降的内源性机制之一.MS在MI中发挥影响左室功能的作用机制仍需进一步探讨.
-
TXNIP∕NLRP3信号通路在糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤中的作用
目的 评价硫氧还蛋白相互作用蛋白∕NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(TXNIP∕NLRP3)信号通路在糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤中的作用.方法 清洁级健康雄性SD大鼠,8~12周龄,体重200~220 g,采用腹腔注射1%链脲佐菌素65 mg∕kg的方法建立糖尿病模型.取糖尿病模型制备成功的大鼠24只,采用随机数字表法分为3组(n=8):假手术组(S组)、肾缺血再灌注组(I∕R组)和TXNIP抑制剂白藜芦醇组(R组).R组于糖尿病模型制备成功后第3周每天腹腔注射白藜芦醇10 mg∕kg,连续7 d.糖尿病模型制备成功后第4周,采用双侧肾蒂夹闭25 min再灌注的方法制备肾缺血再灌注损伤模型.再灌注48 h时处死大鼠取肾组织,观察病理学结果,采用比色法测定MDA含量、SOD活性和组织超氧阴离子清除力,采用ELISA法检测IL?1β和IL?18含量,采用TUNEL法检测细胞凋亡情况.采用Western blot法测定肾组织TXNIP、NLRP3和caspase?1的表达.左心室取血标本,测定血清BUN 和Cr浓度.结果 与S组比较,I∕R组和R组血清Cr浓度和细胞凋亡指数升高,肾组织超氧阴离子清除力降低,TXNIP、NLRP3和caspase?1表达上调,I∕R组血清BUN浓度、肾组织MDA、IL?1β和IL?18含量升高,SOD活性降低(P<0.05),肾组织病理学损伤加重;与I∕R组比较,R组血清BUN和Cr浓度降低,肾组织MDA、IL?1β、IL?18含量和细胞凋亡指数降低,SOD活性和组织超氧阴离子清除力升高,TXNIP、NLRP3和caspase?1表达下调(P<0.05),肾组织病理学损伤减轻.结论 糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤的病理生理机制与TXNIP∕NLRP3信号通路激活有关.
关键词： 硫氧还蛋白质类 NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3 糖尿病 肾 再灌注损伤 -
大鼠自体原位肝移植术后不同时期小肠组织硫氧还蛋白2表达的变化
目的 评价大鼠自体原位肝移植术后不同时期小肠组织硫氧还蛋白2(Trx2)表达的变化.方法 健康SPF级SD雄性大鼠40只,8～ 10周龄,体重210 ～ 260 g,采用随机数字表法,将其分为2组:假手术组(S组,n=8)和自体原位肝移植术组(OLAT组,n=32).OLAT组分别在术后4、8、16、24h时取小肠组织,光镜下观察病理学结果,进行Chiu评分,并测定超氧阴离子(O2--)、过氧化氢(H2O2)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、还原型谷胱甘肽(GSH)和Trx2水平.结果 与S组比较,OLAT组术后4、8、16 h时小肠组织Chiu评分和O2-活性升高,术后4、8h时小肠组织H2O2含量升高,术后4、8h时小肠组织GSH-Px、GSH水平和Trx2表达降低(P＜0.05);与术后8h时比较,OLAT组术后4、16、24h时小肠组织Chiu评分降低,术后16、24h时小肠组织H2O2含量降低(P＜0.05).结论 大鼠自体原位肝移植术后经历了小肠Trx2介导的早期抗氧化功能的降低和后期的恢复过程.
-
表达硫氧还蛋白1的幽门螺杆菌对人胃上皮细胞株GES-1生长的影响
背景:幽门螺杆菌(Hp)感染在胃癌的发生过程中发挥重要作用,细菌毒力因子是导致不同胃疾病的重要因素.目的:研究高、低表达硫氧还蛋白1(Trx1)的Hp对人胃上皮细胞株GES-1生长的作用.方法:按1∶50、1∶100、1∶200的细胞/细菌比例分别加入GES-1细胞和高、低表达Trx1的Hp菌株共培养,并设不加菌株的空白细胞作为对照组,分别于培养24h和48 h时采用倒置相差显微镜观察细胞形态变化,MTT法检测细胞存活率.收集1∶100浓度组和对照组GES-1细胞,采用流式细胞术检测细胞周期.结果:高、低表达Trx1的Hp对GES-1细胞有损伤作用,细胞存活率降低,且呈时间和浓度依赖性,在Trx1高表达组中尤为明显.流式细胞术显示Trx1高表达组GES-1细胞进入S期的比例在24h和48 h均明显高于Trx1低表达组.结论:高、低表达Trx1的Hp对GES-1细胞生长具有抑制作用,高表达Trx1的Hp具有更强的致病性,与致胃癌作用有关.
-
真菌抗氧化酶的研究进展
真菌对抗宿主的氧化损伤作用是真菌能顺利入侵宿主的一个重要因素。抗氧化酶的调节是真菌发挥抗氧化作用的重要途径之一，也是目前研究的热点。其中，抗氧化酶包括过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽还原酶与谷胱甘肽过氧化物酶、硫氧还蛋白系统以及海藻糖酶系统。几种常见真菌的抗氧化酶及编码抗氧化酶的相关基因的研究取得了进展，包括编码过氧化氢酶的相关基因如CTT1、CATA；编码超氧化物歧化酶的SOD基因；谷胱甘肽系统相关的GRX、GST基因；编码硫氧还蛋白系统的TRX、TRR基因以及海藻糖系统相关的TPS、ATH1基因等。
-
硫氧还蛋白相关蛋白14的研究
硫氧还蛋白相关蛋白14(TRP14)是一种新发现的硫氧还蛋白(Trx)家族二硫还原酶,具有保守的CPDC模序.其结构和功能既与Trx家族代表性成员Trx具有相似性,又有诸多不同.当肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导细胞产生活性氧时,TRP14可作为细胞内氧化还原状态的感受器,改变其作用底物动力蛋白轻链的氧化状态,从而调控TNF-α诱导的转录核因子-κB (NF-κB)信号途径、丝裂原活化的蛋白激酶信号途径和凋亡信号途径.
关键词： 硫氧还蛋白质类 肿瘤坏死因子-α 硫氧还蛋白相关蛋白14
