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高压培养对猪离体主动脉内皮细胞功能的影响
目的:观察高压培养对猪离体主动脉血管内皮细胞(PAEC)增殖,分泌一氧化氮(NO)、内皮素(ET)的影响.方法:胶原酶和胰蛋白酶消化猪主动脉内膜,制备3～6代血管内皮细胞的单细胞悬液.分正常压力组,高压状态(24 kPa)组,每组八孔,0.5×104个细胞/ 孔.1.细胞生长试验:正常压力组, 高压力(24 kPa)组, 均放在37℃,5%CO2 孵箱中培养1,3,5天后进行细胞计数.2.PAEC分泌NO及ET含量,正常压力组、高压力组均放在37℃,5%CO2孵箱中培养48小时后取培养液测定.结果:1.细胞生长试验: 高压组与正常压力组相比,第一天细胞数明显增加,呈促进增长作用, 第三、五天细胞数明显减少,呈抑制生长作用.2.PAEC分泌NO及ET含量:高压组与正常压力组相比,分泌NO降低 ,ET升高.结论:高压培养PAEC早期促进增殖,稍后抑制其生长,使其分泌ET增加,NO降低.
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高压培养对血管内皮细胞P-选择素和一氧化氮合酶的影响
高血压时血管壁侧压(静水压)对血管内皮细胞(EC)的影响了解甚少.我们曾发现180mg Hg(1mm Hg=0.133 kPa)压力培养对猪主动脉EC的生长具有双向性的影响,本研究观察高压培养对EC的一氧化氮合酶(NOS)及P-选择素分泌的影响
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高压培养对血管平滑肌细胞增殖的影响及机制
目的研究高压培养对血管平滑肌细胞增殖的影响及机制. 方法利用丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)、血小板衍化生长因子(PDGF)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)生物活性检测,观察高压培养对平滑肌细胞增殖、PDGF和AngⅡ的影响. 结果高压培养促进血管平滑肌细胞增殖,使MAPK活性增加,同时平滑肌细胞分泌PDGF、AngⅡ增加. 结论高压培养促进血管平滑肌细胞增殖,可能是通过促使血管平滑肌细胞分泌PDGF、AngⅡ增加,进而促进MAPK活性增加途径实现的.
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高压培养调节E选择素表达及核因子κB信号通路
目的 观察高压培养对内皮细胞E选择素表达的影响及其可能的分子机制.方法 在自制的可调压力培养箱中,用高于1个标准大气压的不同压力培养人脐静脉内皮细胞,运用间接免疫荧光技术、流式细胞术检测血管内皮细胞粘附分子E选择素蛋白的表达,Western blot检测核因子κB抑制因子α的表达,间接免疫荧光法观察核因子κB的表达分布.结果 高压培养和大气压培养细胞形态无明显差异;高压培养E选择素表达明显增加,180 mmHg培养24 h E选择素的表达升高1.5倍;180 mmHg培养6 h和12 h核因子κB抑制因子α的表达降低2倍多;180 mmHg培养24 h激活核因子κB,使其转位于细胞核.结论 高压培养促进E选择素表达,核因子κB信号通路参与调控.
关键词： 病理学与病理生理学 高压培养 E选择素 核因子κB 核因子κB抑制因子α -
无或低血清条件下高压培养促进平滑肌细胞和内皮细胞生长
目的 观察高压培养对无或低血清条件下平滑肌细胞和内皮细胞生长的影响.方法 用无或0.5%血清培养基,在高于1个标准大气压(标准大气压设定为0 mmHg)30～180 mmHg压力下培养人脐静脉内皮细胞和大鼠血管平滑肌细胞.用台盼蓝染色细胞计数法和MTT评价细胞的生长情况.结果 在低血清条件下,高压培养的血管内皮细胞生长速度明显快于标准大气压培养的血管内皮细胞,细胞计数和MTT结果显示高压培养比大气压培养细胞生长增加约30%.无血清大气压培养平滑肌细胞2天后,未见明显的活细胞,而高压培养大鼠平滑肌细胞仍能保持生长.结论 无或低血清条件下,高压培养能保持血管平滑肌和血管内皮细胞的生长.
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高压培养促进人血管内皮细胞和人单核细胞的粘附
目的 探讨体外高压培养对人血管内皮细胞粘附功能的影响,为高血压和血管动脉粥样硬化的发病关系提供实验依据. 方法 体外培养血管内皮细胞,分别以不同的压力(0、120、150、180、210 mmHg)培养细胞,细胞计数法测定内皮细胞与单核细胞的粘附率. 结果 高压培养明显增加内皮细胞和单核细胞的粘附率,180 mHg高压培养细胞较大气压力(0 mmHg)培养24 h粘附率增加约3.6倍;但MG132预处理抑制了180mmHg高压培养诱导的内皮细胞与单核细胞的粘附率. 结论 高压培养促进血管内皮细胞的粘附功能.
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高压培养及卡托普利干预对猪离体主动脉内皮细胞功能的影响
目的:利用高压培养猪离体主动脉血管内皮细胞的实验模型,研究高压刺激对血管内皮细胞增殖及分泌一氧化氮(NO)、内皮素(ET)的影响及卡托普利(Cap)、去甲肾上腺素(NE)的干预作用.方法:制备3-6代猪主动脉血管内皮细胞的单细胞悬液,分为4个组,每组8孔,5×10 4个细胞/孔,①对照(control)组,② Captopril(10 -5 mol/L) 组,③ Norepinephrine (100 μg/L) 组,④Captopril+norepinephrine组,培养1、3、5 d后,进行细胞计数,培养48h后测培养液中的NO和ET含量.结果:①细胞生长试验:Cap组细胞数明显少于对照组(P＜0.01)而NE组细胞数明显多于对照组(P＜0.01),NE+Cap组与对照组无显著差异.②猪主动脉内皮细胞分泌NO及ET含量:Cap组ET含量低于而NO含量高于对照组(P＜0.01);而NE组ET含量高于而NO含量低于对照组(P＜0.01),NE+Cap与对照组无显著差异.结论:卡托普利抑制高压培养PAEC的增殖,抑制ET分泌,促进NO分泌,而NE则具有相反作用;卡托普利能对抗NE对PAEC的作用.
