首页 > 文献资料
-
核因子-κB和环氧合酶-2在胃癌及癌前病变中的表达
核因子-kB(NF-KB)为核转录因子中一员,被激活后从细胞质转位入核,与靶基因的调控区结合,调控蛋白转录.环氧合酶-2(COX-2)是位于核膜的膜结合蛋白,在血管内外激活物激活的条件下可表达,在组织损伤及炎症时表达增加,在正常生理状态下多数组织内检测不到[1].研究表明NF-κB和COX-2过度活化或表达则与消化道细胞癌变及肿瘤的生物学行为有关.我们采用免疫组织化学染色,分析NF-κB与COX-2在胃癌标本、癌前病变和慢性胃炎黏膜中的蛋白表达情况,探讨NF-κB和COX-2的表达与胃癌的关系以及NF-κB和COX-2两者之间的关系.
-
运动与生肌调节因子研究进展
生肌调节因子(myogenic regulatory factors,MRFs)包括MyoD、myogenin、myf5、MRF4四个成员.MRFs可与E盒结合,调节基因的转录.在几个肌肉表型蛋白的调控区,如快肌肌球蛋白轻链、肌球蛋白重链(MHC)Ⅰ和MHCⅡb都有E盒的存在[1].
-
膀胱癌患者体液中线粒体基因HV1突变的检测及临床意义
近年来发现,在体液中可以检测到肿瘤细胞核DNA[1,2],但由于数量较少,以及正常DNA的稀释作用,检出率较低.线粒体DNA(mitochondria DNA,mtDNA)区别于核DNA的特点有两个:其一,它缺乏损伤修复机制,可能会先于核DNA而受到环境因素的影响并持续存在;其二,mtDNA数量多,复制率高,可能更易于检测.为此我们应用单链构象多态性分析(SSCP)法检测了膀胱癌患者血浆和尿液中mtDNA调控区的HV1区(mtDNA 16024-16383)突变,并与核基因p53检测进行对照.现将结果报道如下.
-
蒙古族AT1R基因调控区SNPs与高血压关系
目的探讨蒙古族人血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)基因调控区单核苷酸多态性(SNPs)与原发性高血压的关系.方法在现况研究基础上,分别选择299例高血压患者和281例血压正常者进行病例对照研究,应用PCR/RFLP(多聚酶链反应/片段长度多态性)和PCR/SSCP(多聚酶链反应/单链构像多态性)方法检测AT1R基因调控区-2228G/A、-214A/C(-213G/C)和-153A/G 3个位点的基因多态性.用χ2检验比较病例组和对照组基因型和等位基因频率分布.结果各位点基因型的分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律.在病例组和对照组中,AT1R基因-2228G/A、-214A/C(一213G/C)和-153A/G位点各基因型频率和各等位基因频率差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 AT1R基因调控区-2228G/A、-214A/C(-213G/C)和-153A/G基因多态性与蒙古族高血压无关联.
关键词： 高血压 血管紧张素Ⅱ1型受体 调控区 基因多态性 -
先天性心脏病相关致病基因调控区变化的研究进展
先天性心脏病是指出生前就存在心脏及大血管结构或功能异常的一类疾病,严重威胁儿童健康.遗传因素在先天性心脏病发生发展中占据重要地位.越来越多的研究表明,除了基因编码区异常与先天性心脏病发病相关以外,先天性心脏病相关致病基因调控区变化也参与其发生.调控元件主要包括启动子、增强子、衰减子等.该文就调控区功能元件的变化与先天性心脏病发生关系进行综述,以期进一步阐述其发病机制,为临床诊疗提供新思路.
-
TNF家族新成员BLyS和其受体TACI
众所周知,肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)家族参与各种免疫和炎症反应的调控.1994年Smith等人发现TNF家族所有成员,除α-淋巴毒素外,都是II型膜蛋白.它们的生物学作用方式主要是通过细胞间接触,由膜结合形式的配体与其相应的受体结合;或者通过加工和排出可溶性配体,配体再和其受体结合的.另外,该家族的其他成员诸如CD27L,C D30L,OX40L,FasL和4-IBBL都有胞浆调控区,它们与受体结合后能进行信号传递[1 -5]
-
B等位基因调控区突变可能导致弱B表型
目的:对1例血清学血型鉴定困难的患者进行ABO基因分型,分析引起血型鉴定困难的原因及其突变基因. 方法:采用微柱凝胶法及全自动血型鉴定系统,对该例患者进行血清学血型鉴定及抗人球蛋白试验和抗体筛查,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增结合Sanger测序及PCR产物克隆的方法,分析该患者及其父母ABO基因的增强子、启动子、第1~7外显子区及其侧翼序列,寻找变异位点. 结果:该例患者的血清学正定型为ABweak,ABO基因外显子分型结果为A102/B101,其B等位基因增强子CBF/NF-Y微卫星区比正常的4个43 bp串联多了一个串联,B等位基因启动子缺少-35~-18的18 bp序列.结论:该患者B等位基因调控区内的变异很可能是引起其B抗原弱表达的原因.
-
β2-肾上腺素能受体基因单核苷酸多态性及在汉族人群中的分布(摘要)
目的研究中国人β2-肾上腺素能受体(beta2-adrenoceptor,β2-AR)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP),并观察这些SNPs在汉族人群中的多态性分布.方法应用荧光标记自动测序法测定来自安徽大别山地区80名非亲缘关系人群β2-AR基因序列,确定单核苷酸多态位点及基因型.结果在3.8kb长度范围内共发现8个SNPs,其中5个位于编码区,平均274bp出现1个SNP;3个位于调控区,平均721 bp出现1个SNP,与国外报道相比,-468C→G,-367T→C,-47C--→T,-20T→C,+79C→G,+100G→A,+491C→T,+1 098T→C未在本研究人群中检测到.各SNPs等位基因频率在人群中的分布符合Hardy-Weinberg平衡.结论β2-AR基因SNPs呈不均匀分布,且具有很大的种族差异;其等位基因频率在人群中分布符合Hardy-Weinberg平衡.
-
用染色体缓移法分析 5′端未知序列
随着分子生物学技术的不断发展，基因克隆的方法日新月异。文库筛选获得新序列虽直接可靠，但是工作量大，周期长，耗时耗材耗力，而且选择受限于已有文库，逐渐不作为首选方法采用。 PCR技术自 1985年发明以来，以其快速敏感的特点被广泛应用于基因的表达分析及检测；近年来，其应用范围被进一步拓宽到对未知片段的克隆和分析，其假阳性率高、错配率高等缺陷亦不断得到改进；新的聚合酶的发现，使扩增产物长度可达到 20 kb（ long-distance,LD PCR） [1， 2]。同时，网络资源的共享以及网上生物学软件的免费使用，也使 PCR引物的设计和选择更趋于精确，产物特异性进一步提高。 人鼻咽是位于颅底、咽后壁之间的立方体状结构，本实验室曾用新发展的 cDNA微阵列技术克隆到鼻咽特异性表达基因 YH1[3]。为了实现转基因在鼻咽的定向表达，须获得该基因的特异性调控区。本研究利用染色体缓移的方法， PCR扩增出 YH1基因的 5′端旁侧序列，并初步分析了其调控活性。 1 材料与方法 1． 1 试剂来源 实验中所用的 Human GenomeWalker kit， Advantage-GC Genomic PCR kit， Advantage PCR Cloning kit 等均购自 Clontech公司。 1． 2 染色体缓移 实验流程：分别用 5种限制性内切酶（ DraⅠ ,EcoRⅤ ,PvuⅡ ,ScaⅠ ,SspⅠ）酶切人基因组 DNA，得到五种基因组限制性酶切片段库在基因组限切片段的末端加上接头（内含引物序列）设计两组基因特异性引物，分别与接头中的引物配对，进行巢式 PCR反应凝胶电泳检测，回收特异性 PCR产物后亚克隆测序。
-
中国汉族个体HLA-Ⅰ类基因全长序列鉴定及多态性比较
目的 鉴定中国汉族个体HLA-Ⅰ类3个基因座-A、-B、-C的全长序列并比较其各亚区多态性.方法 利用前期已建立的HLA-Ⅰ类基因3.7-4.5 kb全长序列高保真扩增、克隆及步移测序方法,从业已经过HLA高分辨测序分型、结果已知的1000(人)份中国汉族造血干细胞捐献者的血样中,分别选择含HLA-A、-B、-C所有血清学家系等位基因的标本45、38、52份做序列鉴定与比较.结果 共获得汉族个体HLA-Ⅰ类基因110条全长序列,包括38个HLA-A等位基因4.2 kb序列,30个HLA-B等位基因3.7kb序列,以及42个HLA-C等位基因4.3-4.5 kb序列;所获110个等位基因的全长序列均提交GenBank及IMGT/HLA数据库,获得WHO命名委员会的命名,其中首次报道全长序列的等位基因有70个,包括新等位基因21个、修正序列的等位基因2个、5'-启动子序列及3'-UTR序列或内含子序列的等位基因47个,其他40个等位基因均在5'-启动子及3'-UTR区,延伸了IMGT/HLA数据库中释放发布的全长序列.结论 1)所鉴定的全长序列可为HLA-Ⅰ类基因测序分型引物和探针的正确设计、HLA基因表达调控、分子进化及疾病关联等研究,提供详实的基础资料和信息;2)中国汉族个体HLA-C基因的第2、3外显子及3'-UTR区,与HL4-A、-B相应区域比较,其全长序列多态性水平及分布较独特,暗示HLA-C基因免疫学功能的独特性.
