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磁感应加温对兔耳VX-2肿瘤的杀伤效应
目的 建立家兔耳部VX-2肿瘤模型,探讨磁感应加温方法对肿瘤的杀伤效应.方法 于家兔耳部皮下注射VX-2肿瘤细胞悬液建立兔耳肿瘤模型,局部注射纳米Fe3O4微粒磁液并进行磁感应加温,观察瘤体大小及组织病理变化.结果 兔耳皮下接种2×106个瘤细胞10天后能形成长径＞5 mm的类圆形VX-2肿瘤,利用此模型可大体观察磁液在肿瘤局部的聚集情况;400 mg/ml的磁液50-100μl局部注射能在15 kA/m的交变磁场中使肿瘤组织有效升温至43℃以上,并发生坏死.结论 家兔耳部肿瘤模型易于建立和观察,利用该模型证明磁感应加温能对瘤组织产生明显的杀伤作用.
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活体细胞凋亡检测筛选肝癌敏感化疗药物的实验研究
目的:通过动物实验探讨99Tcm-HYNIC Annexin Ⅴ活体细胞凋亡检测筛选肝癌敏感化疗药物的可行性.方法:20只VX-2荷瘤免随机分为4组,通过治疗剂量的紫杉醇(PAC,n=6),5-氟尿嘧啶(5-FU,n=5),表柔比星(EPI,n=5)分组干预治疗,同时建立对照组(C,n=4).分别予化疗前2h、化疗后46 h静脉注射99Tcm-HYNIC-Annexin V,2h后再以单光子发射计算体层摄影(SPECT)成像,选取肿瘤部位放射性计数(T)及腿部非肿瘤区部位放射性计数(NT),计算其比值(T/NT),进行半定量分析,确定敏感化疗药物.取肿瘤组织,分别予免疫组化(Tunel)和流式细胞仪(FCM)分析组织细胞凋亡率,放射性核素聚集显像与肿瘤细胞凋亡进行相关性分析.实验数据以SPSS 17.0软件分析.结果:99Tcm-HYNIC-Annexin Ⅴ放射显像显示,化疗前各组肿瘤部位均无明显显像(F=0.025,P=0.980),放射性核素分布主要聚集在肾脏及膀胱区.药物干预48 h后,对照组仍无显像,而药物干预组显像清楚,放射性计数显著高于对照组(F=16.52,P＜0.001)及化疗前(P＜0.01).药物干预组中,PAC组肿瘤组织放射性显像显著高于5-FU组和EPI组(P值分别为0.042和0.003),而5-FU组与EPI组间放射性显像差异无统计学意义(P=0.224).99Tcm-HYNIC-Annexin Ⅴ活体细胞凋亡检测结果与免疫组化及流式细胞检测结果一致(R2=0.537 7,P=0.002;R2=0.695 4,P＜0.001).结论:99Tcm-HYNIC-Annexin V核素显像检测能够反映活体组织细胞凋亡情况,该方法能够在活体状态下筛选敏感化疗药物.
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兔肝脏、肌肉、皮下VX2肿瘤模型的建立和对比研究
目的 通过对肝脏、肌肉及皮下不同部位兔VX2肿瘤模型的建立和比较,寻求更适合于肿瘤经皮介入治疗的荷瘤动物模型.方法 将54只新西兰白兔按VX2肿瘤接种部位不同随机分为肝脏组、肌肉组和皮下组,每组18只.三组动物术后12、16、20 d均进行CT灌注扫描,测量肿瘤大小,每次各组分别处死6只兔进行病理观察,并对三组模型的建模手术时间、肿瘤体积及并发症等情况进行比较.结果 皮下组肿瘤生长慢,肌肉组其次,肝脏组生长快,组间差异有统计学意义(P<0.05).接种第12天,肝脏组肿块长径已约1 cm,而皮下组则需20 d肿块长径才达1 cm左右,肌肉组肿块生长速度介于二者之间.三组建模所用时间分别为肝脏组(5.54±0.51)min,肌肉组(1.02±0.20)min,皮下组(0.98±0.21)min,肝脏组明显较长.除了肝脏组出现腹水、肝内转移及腹壁种植外,皮下组、肌肉组均无明显影响模型的情况.结论 与肝脏和皮下建模相比,兔肌肉内VX2肿瘤模型具有操作简单,成瘤稳定,肿瘤生长速度适中的优点,更适合作为兔VX2瘤的经皮介入治疗模型.
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建立兔移植性Vx-2肝癌模型的改进
目的建立Vx-2兔移植性肝癌改良模型.方法将Vx-2瘤粒经剖腹直接种植于肝实质内,依观察时间不同分成3组,每组10只,种植后分别观察2、3、4周,对比观察其病理形态学和影像学表现.结果 15只种植成功,种植2周组各项观察指标为满意.结论以瘤粒肝内种植方式、2周后可成功建立Vx-2兔移植性肝癌模型.
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兔Vx-2移植性肝癌模型的建立及其影像学表现
目的用3种不同植瘤方式建立稳定的兔Vx-2移植性肝癌模型,分析移植性肝肿瘤的DSA影像特征.方法 60只新西兰白兔随机分成3组,每组20只.第1组,将Vx-2瘤细胞(约5×107个)经肝动脉灌注入兔的肝脏;第2组,将Vx-2瘤细胞(约5×107个)经剖腹途径接种于兔的肝左叶;第3组,将瘤组织块(约含106～108个瘤细胞)经剖腹途径植入兔肝左叶.之后,对3组兔比较观察:1. 不同方式植瘤的成活率;2. 肝内肿瘤体积变化和肿瘤生长率;3. 大体及镜下(光镜和电镜)瘤组织形态特征;4. 成熟模型的DSA表现.结果 1. 3组植瘤成活率分别为7/20、10/20、19/20,第3组植瘤成活率高(P<0.05),其瘤体呈指数性生长;2. 病理学及CT表明该瘤在肝组织中呈浸润式生长,其性状与移植于兔其它部位的Vx-2鳞状细胞癌特征相似;3. DSA影像示移植性肝肿瘤具有丰富的血供.结论成功建立了兔Vx-2移植性肝癌模型,瘤组织块种植方式成功率明显高于其他两种方法,为肝癌介入治疗的实验研究提供了可靠的大型动物模型.
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氩氦刀冷冻治疗肝肿瘤对兔肾功能的影响
目的探讨冷冻治疗肝肿瘤对肾脏功能的影响.方法24只荷瘤兔随机分成3组:A组(氩氮刀手术治疗单次组n=8),B组(氩氮刀手术治疗二次组,n=8),C组为假手术对照组(n=8).分别于术前,术后3、7、14天观察血中的尿素氮(BUN),肌酐(Cr)和肾脏的病理变化.结果A、B组术后第三天血尿素氮升高,肌酐升高,肾小管上皮细胞发生颗粒样变性.术后第7天A组肌酐恢复正常,14天后A、B两组各项指标均恢复正常.C组无明显变化.结论氩氦刀冷冻治疗肝肿瘤对肾脏有影响,但是影响为可逆性的,暂时性的损害.
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99m Tc-联肼尼克酰胺-膜联蛋白V活体检测兔肝癌细胞凋亡的研究
目的 探讨99mTc-联肼尼克酰胺(HYNIC)-膜联蛋白V(Annexin V)活体检测细胞凋亡的可行性.方法 99mTc通过HYNIC标记Annexin V合成99mTc-HYNIC-Annexin V.建立兔VX-2肝癌模型.将10只新西兰大白兔随机分为2组,通过治疗剂量的化疗药物紫杉醇(PAC,n=6),同时建立对照组(C,n=4),分别予化疗前,化疗后24、48 h静脉注射99mTc-HYNIC-Annexin V,通过单光子发射计算体层摄影(SPECT)成像,选取肿瘤部位放射性计数(T)及腿部非肿瘤区部位放射性计数(NT),计算其比值(T/NT),进行半定量分析.后1次显像后处死兔,取肿瘤组织,分别予免疫组织化学原位末端转移酶标记(TUNEL)和流式细胞仪(FCM)分析组织细胞凋亡率,并与核医学检测结果比较,确定核医学检测结果与其是否相关.实验数据以SPSS 17.0软件进行t检验、方差和相关分析.结果 99mTc-HYNIC-Annexin V标记率为95％以上,放化纯为95％以上.99mTc-HYNIC-Annexin V放射显像显示两组化疗前肿瘤部位放射性核素聚集T/NT为2.62±0.56、2.53±0.60.化疗后24h及48 h对照组放射性核素聚集T/NT分别为2.72 ±0.70、2.62±0.66,紫杉醇干预组放射性核素聚集T/NT分别为6.43 ±0.97、6.64±1.15,与对照组、化疗前比较差异有统计学意义(P＜0.01),24h与48 h两组间放射性核素显像差异无统计学意义(P＞0.05)；对照组与紫杉醇组免疫组织化学分析肿瘤组织细胞TUNEL染色阳性率分别为4.00±0.81、13.50±2.74,流式细胞分析肿瘤组织细胞凋亡率分别为(7.83±1.11)％、(20.81±3.33)％.两组间比较差异均有统计学意义(P＜0.01),放射性核素聚集程度与免疫组织化学分析组织细胞TUNEL阳性率和流式细胞分析组织细胞凋亡率的结果显著相关(rTUNEL=0.747,P＜0.05；rFCM=0.909,P＜0.01).结论 紫杉醇可以诱导兔VX-2肝癌细胞凋亡,99mTc-HYNIC-Annexin V核素显像检测能够反映活体组织细胞凋亡,该方法能够在活体状态下检测细胞凋亡,化疗后24 ～48 h是放射性检测细胞凋亡的窗口时间.
关键词： 癌 肝细胞 99mTc-联肼尼克酰胺-膜联蛋白V 脱噬作用 VX-2 -
间歇和连续热灌注对兔 VX-2肿瘤内阿霉素浓度的影响
背景与目的:已证实阿霉素热化疗对体外兔 VX-2细胞的抑制作用比常温阿霉素的作用强,而热灌注对机体的生命体征有一定影响.本研究在兔 VX-2移 植瘤模型建立基础上,比较间歇性热灌注与连续性热灌注对兔呼吸、心率、体温及 VX-2肿瘤内阿霉素浓度的影响,验证间歇性热灌注的有效性和安全性,以寻找更安全有效的灌注方式.方法:在 30只新西兰大白兔后腿上建立 VX-2肿瘤模型,并随机分为常温灌注组、 60℃连续灌注组和 60℃间歇灌注组(每组 10只).经股动脉插管、 DSA证实为肿瘤供血动脉后,分别给予常温 100 ml盐水加阿霉素 (ADM)灌注、 60℃热盐水 100 ml加阿霉素连续灌注、 60℃热盐水 100 ml加阿霉素间歇性灌注.灌注过程中,测量 60℃热灌注组与 60℃间歇灌注组肿瘤组织内 43℃～ 45℃持续时间;灌注后即时检测各组兔呼吸(次 /分)、心率(次 /分)、体温(℃)及肿瘤组织内阿霉素浓度.结果:常温灌注组阿霉素浓度为( 7.115± 2.180)μ g/ml, 60℃连续灌注组为( 17.213± 1.657)μ g/ml, 60℃间歇性灌注组为( 16.545± 3.426)μ g/ml;60℃间歇灌注组阿霉素浓度与 60℃连续灌注组无显著性差异( P >0.05), 60℃连续组、间歇组阿霉素浓度与常温灌注组均有显著性差异( P< 0.05). 60℃间歇性灌注组 43℃～ 45℃持续时间为( 24.31± 2.45) min, 60℃连续灌注组为( 22.53± 1.44) min,两组之间无显著性差异( P >0.05).连续灌注组与常温灌注组兔的呼吸、心率、体温变化有显著性差异( P< 0.05),而间歇灌注组与常温灌注组兔的呼吸、心率、体温变化无显著性差异( P >0.05).结论:常温灌注组与连续灌注组的药物浓度无显著性差异;与连续性热灌注相比,经动脉间歇性热灌注化疗方法更安全.
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阿霉素化疗与热化疗对兔毛细胞白血病VX-2细胞体外作用的比较
目的:观察比较热疗、化疗、热化疗对体外兔VX-2细胞的生长抑制规律的影响,为临床介入性热化疗提供实验数据.方法:以体外长期培养的兔VX-2细胞为靶细胞,采用水浴加温法、进行体外细胞毒试验(MTT法),观察单纯热疗,单纯化疗及热疗与化疗结合对兔VX-2细胞的生长抑制规律的影响及差别.结果:(1)温热和阿霉素对VX-2均有一定的抑制和杀伤作用,两者一定方式的联合具有协同或相加作用;(2)热化疗加热温度以42～43℃为佳,加热时间以30分钟以上为佳.结论:(1)热对化疗有增敏作用;(2)一定温度的热化疗优于单纯热疗和单纯化疗.
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阿霉素热化疗对兔鳞癌VX-2细胞的毒性作用
目的研究阿霉素热化疗对兔鳞癌细胞(VX-2)的毒性作用.方法以体外长期培养的兔VX-2细胞为靶细胞,采用水浴加温法进行体外细胞毒试验(MTT法),观察了热疗,化疗及热化疗对兔VX-2细胞的生长抑制的影响.结果温热和阿霉素对VX-2 均有一定的抑制和杀伤作用,一定方式的两者联合具有协同或相加作用.热化疗加热温度以42～43℃为佳,加热时间以30及60 min为佳.结论加热可以明显提高VX-2 细胞对阿霉素的敏感性.
