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兔移植肝糖原在缺血再灌注期间的代谢特点
我们研究了兔肝移植的供肝糖原含量在缺血再灌注期间的变化及代谢特点,现报告如下.材料与方法1.动物分组及模型:选用健康成年新西兰大耳白兔42只,体重2.0～2.5kg,雌雄不限,随机均分为供体组(21只)和受体组(21只).其中供体组再随机均分成3个亚组,分别作相应处理:A组(7只):术前禁食24*!h,自由饮水;B组(7只):正常喂食,术前2*!h禁食;C组(7只):正常喂食,并于术前24*!h内自耳缘静脉点滴25%葡萄糖液30*!ml/6*!h,共4次,每次平均于30*!min内注射完.受体组均给予正常喂食,术前2*!h禁食.以B组为对照组.参照Jamieson等[1]介绍的方法进行供体组兔肝的原位灌注及切取.将切取的供肝立即置于4℃ Euro-collines液,冷存6*!h后,按我科自建的方法再灌注2*!h.
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准分子激光屈光性角膜切削术后兔眼角膜上皮过度增生的实验研究
屈光状态回退是准分子激光屈光性角膜切削术(excimer laser photorefractive keratectomy, PRK)后常见并发症，术后角膜上皮过度增生被认为是引起该并发症的原因之一［1］。本研究通过测定增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)对PRK术后角膜上皮细胞的增殖活性变化进行观察，以探讨角膜上皮过度增生的发生机制。 一、材料与方法 1.实验动物：健康新西兰大耳白兔24只，随机分为8组，每组3只。第1组为正常对照组，其余各组均为实验组，按术后1 d、3 d、1周、2周、1个月、3个月及6个月不同处死时间分为实验1～7组。 2.手术方法：全麻后采用美国Omnimed UV 200型准分子激光机进行角膜切削。拟矫正屈光度：右眼-5.00 D，左眼-15.00 D。 3.角膜处理方法：使用4%甲醛液固定，石蜡包埋后连续切片，分别行HE及免疫组化染色，并应用目镜尺型测微计测量HE染色切片角膜中央区上皮层厚度。 4.角膜上皮层PCNA测定：(1)试剂：链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物（streptavidin-biotin-enzyme complex，SABC）试剂盒及PCNA单克隆抗体，由武汉博士德生物工程有限公司提供。(2)染色方法：SABC法。 5.统计学方法：正常对照组与各实验组比较，采用方差分析中Dunnett t检验；左、右眼各数据比较，采用配对t检验。
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银杏叶对兔实验性高眼压损伤的保护作用
银杏叶含有多种药理活性的有效成分，如黄酮类，内酯B，萜类等，其药理作用有改善缺血性心肌，脑组织血液供应，清除氧自由基，抗血小板活化因子的作用，目前已广泛应用于心脑血管病的治疗。而视网膜缺血再灌注损伤中，银杏叶提取物EGb(estract ginkgo biloba)的保护作用，国外也有过报道。作者探讨银杏叶对视网膜缺血再灌注损伤保护作用。1 材料与方法1．1 药品和仪器 银杏叶(深圳海王医药集团提供，批号19980106)，每片20 mg含银杏叶提取物9．6 mg(黄酮20％，萜类6％)。其他分析用试剂均为分析纯；721分光光度计(上海第三生化仪器厂)；视觉电生理仪(重庆泰克医电仪器有限公司)。1．2 实验动物及分组 新西兰大耳白兔，♂24只，体重(30±5) kg(第三军医大学野战外科研究所实验动物中心)，随机分为4组：假手术组；缺血再灌注组；缺血再灌注+EGb l组(60 mg*kg-l*d-1)，缺血再灌注+EGb 2组(120 mg*kg-l*d-1)。1．3 模型制作 2％戊巴比妥钠25 mg*kg-1静脉注射麻醉，将连接生理盐水瓶输液管的七号针头于角膜缘刺入前房，然后升高输液瓶至动物垂直距离180 cm处，此高度可在眼内形成16．64 kPa(1 kPa＝7．5 mmHg)的眼压，阻断眼底血流以致视网膜缺血，维持60 min，拔出针头，视网膜恢复血供。缺血再灌注+EGb组动物于缺血前2周及术后给予银杏叶片，将药物混合于饲料(200 g含60 mg EGb)中喂养，术后家兔苏醒继续饲混有药物的饲料。1．4 组织取材及指标测定 动物于缺血12 h后处死，立即摘除眼球，置于0℃生理盐水中，分离视网膜加生理盐水l mL制成视网膜组织匀浆。用邻苯三酚法测SOD活性；硫代巴比妥酸比色法测MDA的含量;紫外分光光度法测定组织蛋白质含量。
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脊髓缺血预适应
缺血预适应是Murry等人[1]于1986年早提出的,此后,这一现象对心肌的保护作用已被证实[2～4].但在中枢神经系统,尤其是脊髓,这方面的研究则很少.自Matsuyama [5]在1997年在世界上首次报道了一组小猎兔犬的脊髓缺血预适应研究结果后,国内范涛[6]也报道了一组新西兰大耳白兔的脊髓缺血预适应现象,目前尚无其他人报道类似的研究结果.
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制天南星对兔膝骨关节炎关节液IL-1和关节滑膜的影响
目的:探讨制天南星对兔膝骨关节炎关节液IL-1和关节滑膜的影响.方法:将60只新西兰大耳白兔随机均分为5组,A组为空白对照组,B组、C组、D组、E组采用日本鬼头康彦法造模,造模成功后A组、B组灌生理盐水,C组、D组、E组分别给予相当于成人每日剂量10 g、30 g、60 g的制天南星水煎剂,连续4周.于给药前1天、2周末、4周末抽取关节液0.5mL,离心,于-20℃保存,待测.IL-1的含量用ELISA检测.实验完毕后解剖左膝关节,观察关节形态改变;切取滑膜组织,制作切片,HE染色,光镜观察.结果:2周、4周后关节液检测,造模组中IL-1的含量高于其他对照组,组间比较,P＜0.01,有统计学意义.B组、C组、D组、E组关节增粗,关节滑膜增生,关节软骨变薄,部分缺损,胫骨平台内外侧可见骨赘形成,以B组增生明显,而D组、E组骨质增生个体数量少,程度轻;光学显微镜下,D组及E组的滑膜细胞增生、炎性细胞浸润数量少.结论:大剂量制天南星治疗兔膝骨关节炎能降低关节液中IL-1的含量,减轻滑膜炎症,疗效与剂量存在正相关性.
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银翘散对内毒素血症兔早期IL-1β、IL-10含量及WBC计数的影响
目的 探讨银翘散防治感染性疾病的作用及机制.方法 18只新西兰大耳大白兔随机分为空白组、模型组和银翘组.模型组及银翘组经耳静脉注射内毒素造模,0.5 h将银翘组用银翘散灌胃,模型组及空白组灌入等量蒸馏水,2h后心脏采血,用ELISA法检测白介素-1β(IL-1β)、白介素-10(IL-10)的表达,用生化常规法检测WBC计数.结果 与空白组比较,模型组IL-1β的表达、WBC计数明显高于空白组(P＜0.01);与模型组比较,银翘组IL-1β的表达、WBC计数明显低于模型组(P＜0.01);与空白组比较,银翘组IL-1β、WBC计数无明显差异(P＞0.05);空白组、模型组、银翘组IL-10的表达无明显差异(P＞0.05).结论 银翘散在早期可能是通过抑制炎性因子来控制内毒素血症的炎症发展.
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抵当汤对糖尿病兔腹主动脉球囊损伤后血管重构的研究
目的:探讨抵当汤对糖尿病兔腹主动脉球囊损伤后血管重构的作用及机制.方法:首先建立糖尿病兔模型,分为假手术组、模型组、抵当汤低剂量组、抵当汤高剂量组、Y-27632组,除假手术组外,其他各组兔接受球囊损伤手术,建立糖尿病实验兔腹主动脉球囊损伤模型.模型组接受生理盐水胃管注入;Y-27632组接受Y-27632胃管注入,给药剂量为70 mg/(kg·d);抵当汤低剂量组、抵当汤高剂量组分别给予8.1 g/(kg·d)、16.2 g/(kg·d)的抵当汤胃管注射.术后通过血管影像学、病理学方法观察抵当汤对糖尿病实验兔腹主动脉球囊损伤后血管内径、内膜、中膜、血流速度等的影响.结果:与假手术组比较,模型组动脉内径和血流速度均明显降低,管腔面积和内膜包绕面积显著减少,内膜面积和中膜面积显著增加,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),说明以动脉内膜增殖及管腔狭窄为特征的糖尿病实验兔腹主动脉球囊损伤后动脉损伤模型造模成功.与模型组比较,Y-27632组的动脉内径显著升高,抵当汤高剂量组和抵当汤低剂量组的动脉内径和血流速度均显著升高,Y-27632组、抵当汤低剂量组、抵当汤高剂量组的中膜面积显著降低,抵当汤低剂量组和抵当汤高剂量组的内膜包绕面积均增加,差异均有统计学意义(P＜ 0.05,P＜0.01).与Y-27632组比较,抵当汤高剂量组血流速度显著升高,内膜面积和中膜面积显著降低,内膜包绕面积显著增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).与抵当汤低剂量组比较,抵当汤高剂量组血流速度显著升高,内膜面积和中膜面积显著降低,差异均有统计学意义(P＜ 0.05,P＜0.01).结论:抵当汤可以改善糖尿病实验兔腹主动脉球囊损伤后的血管重构.
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利多卡因对心室颤动自限性的影响
目的 采用在体兔心脏模型研究利多卡因对室颤(VF)自限性的影响.方法 在使用利多卡因前后测定a(左室前壁)、b(左室心尖部)两部位的心室舒张期阈值(VDT),心室相对不应期(VRRP),心室有效不应期(VERP),不应期离散(RPd),心率(HR),左心室压力(LVP),随后,用脉冲串刺激诱发VF,观察诱发VF的致颤阈值(VFT).结果 在体兔心脏模型和使用利多卡因前比较,VRRP及VERP延长(P＜0.05),RRPd及ERPd缩小(P＜0.05),VFT明显提高(P＜0.01),LVP无变化.与使用利多卡因前比较,室颤的频率增快,室颤波的高度增加,室颤波的宽度变窄(P＜0.01),室颤持续的时间缩短(P＜0.01).结论 使用利多卡因,心室的不应期延长,其离散度缩小,VFT提高,VF不易诱发.
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自主神经对心室颤动自限性的影响
目的 采用在体兔心脏模型研究自主神经对室颤自限性的影响.方法 电刺激迷走神经或交感神经外周端前,或刺激时(10Hz或30Hz),以及刺激迷走神经+静脉注射阿托品0.3 mg/kg或刺激交感神经+静脉注射美托洛尔0.03mg/kg时,分别测定心室舒张期阈值(ventricular diastolic threshold,VDT),心室相对不应期(ventricular relative refractory period,VRRP),心室有效不应期(ventricular effective refractory period,VERP),不应期离散(refractory period dispersion,RPd),心率(heart rate,HR),左心室压力(left ventricular pressure,LVP),随后,用脉冲串刺激诱发室颤,观察诱发室颤的致颤阈值(VFT).结果 刺激迷走神经,能延长VRRP及VERP(P＜0.05),RRPd及ERPd缩小(P＜0.05),VFT提高(P＜0.05),HR减慢(P＜0.05),VDT及LVP无变化;刺激交感神经,能缩短VRRP及VERP(P＜0.05),RRPd及ERPd增大(P＜0.05),HR加快(P＜0.05),VDT及LVP无变化.结论 电刺激迷走神经有助于室颤终止,室颤不易发生且易自行终止,电刺激交感神经则不利于室颤终止,室颤更易发生且不易自行终止.
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急性肺血栓栓塞兔模型的一种新制作方法
目的:探讨如何建立操作简便、可重复性好的急性肺血栓栓塞模型(acute pulmonary embolism APTE).方法:纯种新西兰大耳白兔24只,充分耳缘静脉麻醉后,暴露并分离右侧股静脉,应用深静脉穿刺针插入股静脉,后引入导引导丝,拔出穿刺针,沿导引导丝引入剪去尖端的单腔深静脉管(规格:5.5Fr 20cm 16Ga),进管深度约10cm,经深静脉管注入3～5个自体栓子,辅以生理盐水10ml推注,栓子沿血液循环嵌顿于肺动脉,从而造成急性血栓性肺栓塞模型,模型建立7d后处死家兔,取出肺脏,常规酒精脱水,石蜡包埋,HE染色,观察光镜下肺组织病理改变.结果:24只家兔肺解剖组织光镜下均可见栓子,其中急性死亡2只,成功率为91.7％,尸解表明,大多数栓子栓塞于肺动脉段水平,且右叶栓塞率明显高于左叶.结论:该方法建立急性血栓性肺栓塞具有较高的成功率,操作简便,可重复性好.
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应用及拮抗血管内皮生长因子影响骨折愈合的病理观察
血管生成在骨折愈合过程中起着极其重要的作用,血管内皮生长因子(VEGF)作为一种特异性促血管内皮细胞增生及血管生成因子,对正常生理及病理过程中的血管再生起着关键性作用.为探讨VEGF在骨折愈合过程中的作用,笔者采用新西兰大耳白兔左侧桡骨骨折模型,观察分别应用VEGF及其多克隆抗体对骨折愈合的影响.
