首页 > 文献资料
-
P2X4介导高糖刺激肾小管上皮细胞分泌白介素-1β的作用
目的 探讨P2X4 介导高糖刺激肾小管上皮细胞分泌白介素(IL)-1β 的作用.方法 利用不同浓度(5 ~ 50 mmol/L)葡萄糖刺激肾小管上皮细胞株(HK-2)0 ~ 72 h,观察细胞上清液中三磷酸腺苷(ATP)和白介素(IL)-1β 的表达.利用细胞外ATP 分解酶(Apyrase)与高糖(35 mmol/L)同时刺激HK-2 细胞48 h,观察细胞上清液IL-1β 的水平.利用小干扰RNA(siRNA)基因沉默HK-2细胞的P2X4 基因,观察高糖对细胞内钾离子钙离子浓度变化和细胞上清液中IL-1β水平的影响.利用PBFI-AM染色剂检测细胞内钾离子,利用Fluo-3/AM检测细胞内钙离子.两组间检测均数的比较采用t 检验.两组以上检测均数的比较进行单因素方差分析.结果 高糖刺激下HK-2 细胞上清液中IL-1β、ATP水平升高呈剂量和时间依赖性.Apyrase 能完全阻断高糖刺激细胞分泌IL-1β(8.2±4.9 μg/L与18.5±4.0 μg/L,P < 0.05).高糖刺激下HK-2 细胞内钾离子浓度降低,钙离子浓度升高.P2X4 基因沉默能够显著阻断高糖刺激下IL-1β 的分泌(12.5±2.9 μg/L与20.3±5.3 μg/L,P < 0.05).结论 P2X4 可介导糖尿病肾病肾小管上皮细胞分泌IL-1β,从而促进肾间质炎症反应.
-
小檗碱抗小鼠视网膜光损伤及P2X4受体调节作用研究
目的 从小胶质细胞P2X4受体角度揭示小檗碱抗视网膜光损伤的部分作用机制.方法 将健康清洁级小鼠完全随机分为空白组、LD组和BBR组,后两组持续给予照度为10000±1500 Lux的光照4 h建立视网膜光损伤模型,48 h后取材,比较各组小鼠视网膜形态学变化,并观察小胶质细胞及P2X4在视网膜中的阳性表达.结果 与空白组比较,LD组小鼠视网膜明显变薄,细胞凋亡明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05),而BBR可缓解其凋亡情况;与空白组比较,LD组小鼠视网膜外核层(Outer Nuclear Layer,ONL)的小胶质细胞数量和P2X4表达均明显增加(P<0.05),而BBR组的小胶质细胞数量和P2X4表达均降低,以P2X4的表达降低为明显(P<0.05).结论 小檗碱具有较好的抗视网膜光损伤的作用,这可能与BBR通过P2X4受体调控小胶质细胞的活动有关.
-
小胶质细胞P2X4受体:探索视网膜光损伤的新靶点
视网膜小胶质细胞是一种视网膜固有的巨噬细胞,具有维持视网膜自身稳定的功能,在视网膜光损伤等视网膜病变中发挥重要作用,是我们探索视网膜疾病研究的新方向.P2X4受体是一种表达于小胶质细胞的ATP门控离子通道受体,对于小胶质细胞的激活和存活具有重要的调控作用,且已有大量文献证实其在视网膜中的表达.故本文将从视网膜小胶质细胞在光损伤中的作用及P2X4受体对光损伤中小胶质细胞的调控作用进行综述.
-
力竭运动对大鼠大脑P2X2、P2X4和P2X6受体表达的影响
目的:探讨一次和反复力竭游泳运动后大鼠大脑ATP受体P2X之三个亚型P2X2、P2X4和P2X6的时相性变化特点.方法:健康成年雄性SD大鼠68只,分为一次力竭游泳运动组和反复力竭游泳运动组及安静对照组,反复力竭组大鼠每日负重3％体重进行力竭游泳运动,共训练2周.运动组分别于力竭运动后即刻、4小时、12小时和24小时取材,采用实时荧光定量PCR方法测定力竭运动后大鼠P2X2、P2X4和P2X6受体亚型mRNA水平.结果:(1)反复力竭运动后12小时组P2X2相对表达率达到峰值,与反复力竭其它各组及安静对照组、一次力竭12小时组均有显著差异(P＜0.01).(2)一次力竭即刻组P2X4相对表达率与安静对照组、4小时组、12小时组比较有显著统计学差异(分别为P＜ 0.01、P＜0.05、P＜ 0.01).(3)反复力竭运动后12小时组P2X6相对表达率达到峰值.结论:3种受体亚型在一次力竭运动和反复力竭运动后12小时出现峰值或峰值趋势,提示在力竭运动后12小时,这3种P2X受体亚型所参与的中枢神经生理生化活动在此时可能会达到一个活跃期.
-
祖师麻肠溶微丸对结扎坐骨神经所致痛觉敏感大鼠背根神经节P2X4受体及P38MAPK表达的影响
目的:观察灌胃给予祖师麻肠溶微丸对CCI大鼠的MWT以及背根神经节中P2X4和P38MAPK受体的影响,探究祖师麻肠溶微丸治疗坐骨神经痛的机制.方法:术后第8天按MWT值对位随机分配法分为7组:Control组、Sham组、Model组、Positive Drug组、HEPZ组、MEPZ组和LEPZ组,于术后第8天开始灌胃给药.给药14 d后灌注固定,取背根神经节,免疫组化观察P2X4和P38MAPK的表达情况.结果:Model组在第8、14和20天MWT明显降低(P＜0.01).与Model组相比,其余各组第14天MWT值出现显著差异(P＜0.01),20 d以后差异持续存在(P＜0.01).免疫组化P2X4在背根神经节中的表达情况,各组均与Model组有统计学差异(P＜0.01),P38MAPK的表达情况除Positive Drug组外,各组与Model组相比,有明显差异(P＜0.05).结论:口服祖师麻肠溶微丸可明显改善CCI模型,提高MWT,且背根神经节中P2X4和P38MAPK受体表达下调,提示祖师麻肠溶微丸有治疗坐骨神经痛的作用,其止痛的效果与P2X4-P38MAPK通路有关.
-
糖尿病肾病肾间质炎症损伤程度与P2X4、NALP3表达的相关性研究
目的 观察糖尿病肾病患者肾间质损伤程度与P2X4、NALP3表达水平变化的相关性.方法 将45例糖尿病肾病患者设为观察组,40例肾错构瘤行切除术患者设为对照组.比较两组生化指标水平及肾小管上皮细胞P2X4、NALP3、白细胞介素-1β、白细胞介素-18的表达水平.结果 观察组尿素氮、血清肌苷、尿蛋白水平显著高于对照组(P<0.01),血浆总蛋白、血浆清蛋白、肾小球滤过率水平显著低于对照组(P<0.01).免疫组化荧光结果显示观察组P2X4、NALP3、白细胞介素-1β、白细胞介素-18均为高表达;激光共聚焦结果显示观察组P2X4、NALP3、白细胞介素-1β、白细胞介素-18表达均显著增强.观察组P2X4和NALP3分别与尿素氮、血清肌苷、尿蛋白、肾间质炎症、肾间质纤维化、肾小管萎缩、白细胞介素-1β和白细胞介素-18呈显著正相关(P<0.05),与肾小球滤过率呈显著负相关(P<0.05).结论 P2X4和NALP3的表达水平与肾间质炎症损伤程度存在显著正相关,可以作为一种新的监测指标,为临床诊断、治疗与预后评价提供参考依据.
-
P2X4过表达对帕金森病模型大鼠脑内细胞凋亡的作用
目的 探讨过表达 P2X4基因对6-羟基多巴(6-hydroxydopamine, 6-OHDA)诱导的帕金森病(Parkinson disease,PD)大鼠模型中脑内细胞凋亡的影响.方法 120只Wistar雄性大鼠随机分为6组(n=20):①对照组,②6-OHDA组,③单纯目的基因(RNA-P2X4)组,④目的基因(RNA-P2X4)+6-OHDA组,⑤单纯阴性病毒(P2X4-NC)组,⑥阴性病毒(P2X4-NC)+6-OHDA组.根据分组情况分别于大鼠左侧黑质定向注射携带目的基因的慢病毒或阴性病毒和(或)6-OHDA或等量生理盐水.免疫荧光法检测各组黑质中多巴胺能神经元细胞数;Western blot法分别检测各组黑质中P2X4R、caspase-1及NLRP3蛋白表达水平.结果 与P2X4-NC+6-OHDA组比较,RNA-P2X4+6-OHDA组P2X4R(1.099±0.05569 vs. 0.7821±0.02008,P=0.0003)、NLRP3(0.9875± 0.01932 vs. 0.6645±0.01747,P<0.0001)、caspase-1(0.9948±0.01788 vs. 0.8276±0.04543,P<0.0001)蛋白表达量均显著升高,差异有统计学意义.结论 P2X4在PD的发病中发挥重要作用,P2X4激活后可增加NLRP3炎性体和caspase-1的表达,促进炎症及凋亡反应,有潜在的神经损害作用.
-
乙酸致内脏痛大鼠孤束核及胸髓中P2X4受体表达的变化
本文探讨了乙酸致内脏痛模型大鼠孤束核及胸髓背角内P2X4受体表达的时程变化.将SD大鼠随机分为6组:空白对照组、内脏痛10、30、60、90和180 min组,分别检测各组大鼠行为学以及孤束核、胸髓背角浅层内P2X4受体的表达变化.结果表明,乙酸致内脏痛后各组大鼠均出现典型的扭体行为,内脏痛指数在60、90和180 min组高,30 min组其次,10 min组低,各组之间的差别有统计学意义(P＜0.01);各内脏痛组P2X4阳性产物在孤束核及胸髓背角浅层表达明显增高,产物呈绿色点状,见于细胞胞膜、突起、胞浆,其时程变化是10min出现表达,30 min进一步增高,60 min达到顶峰,90 min开始下降,至180min进一步降低.此结果表明延髓孤束核及胸髓背角浅层内的P2X4受体在内脏伤害性刺激后表达增加,60 min达到高峰.
