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HBeAg阳性和HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清学指标及肝组织病理学比较
目的 回顾性分析HBeAg阳性和HBeAg阴性慢性乙型肝炎(CHB)患者血清学指标及肝组织病理指标的异同.方法 对537例CHB患者的临床资料进行统计,分析HBeAg阳性(321例)和 HBeAg阴性(216例)CHB患者ALT、HBV DNA定量、肝组织炎症水平、肝组织纤维化程度以及肝细胞HBcAg分布等指标的差异.结果 两组患者ALT(Z=1.391,P=0.164)及肝组织炎症水平(χ2=7.1189,P=0.0682)差异无统计学意义;HBeAg阳性组患者HBV DNA载量高于HBeAg阴性组(Z=12.893,P＜0.001),而肝组织纤维化程度低于HBeAg阴性组(χ2= 42.871,P< 0.0001);两组患者肝细胞HBcAg分布不同,HBeAg阳性组患者的HBcAg主要分布为核型和混合型,HBeAg阴性组患者HBcAg则主要表现为阴性,差异具有统计学意义(χ2= 119.3522,P< 0.0001).结论 HBeAg阴性与HBeAg阳性CHB患者的肝组织炎症水平相似,然而因HBeAg阴性组HBV DNA载量低、肝纤维化程度重,故存在更加广泛而急迫的抗病毒治疗指征.
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葡萄原花青素体内外抑制乙型肝炎病毒表面抗原和e抗原的初步研究
目的 探讨葡萄原花青素体内外对乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)的抑制作用.方法 体外分别取不同浓度(50 mg/L、100 mg/L和200 mg/L)的葡萄原花青素各0.25 ml,以1:1的比例与HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者血清共孵育4 h后检测其HBsAg和HBeAg的含量,并以生理盐水孵育组作为对照组.体内研究选择60例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者随机分为阿德福韦酯单药治疗组(对照组)和阿德福韦酯联合葡萄原花青素治疗组(试验组),每组各30例患者(其中对照组失访1例).阿德福韦酯剂量为10 mg/d,葡萄原花青素剂量为100 mg/次,3次/d,疗程均为8周.治疗前后分别检测其血清HBsAg、HBeAg、HBV DNA水平以及患者的肝功能,同时观察各组患者不良反应情况.结果 体外3个浓度葡萄原花青素组与HBeAg阳性血清共孵育后HBsAg和HBeAg含量均较对照组降低(P< 0.05).体内研究中,两组患者治疗后HBsAg水平差异无统计学意义(P> 0.05),但试验组患者治疗后HBeAg定量水平低于治疗前和对照组治疗后的水平(P< 0.05).结论葡萄原花青素对HBsAg和HBeAg具有一定程度的抑制作用,值得进一步深入研究.
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慢性乙型肝炎患者肝细胞HBV cccDNA、tDNA及HBV表面标志物的相关性研究
目的 回顾性分析慢性HBV感染者肝细胞内HBV ccc DNA含量与肝细胞tDNA、HBsAg、HBcAg的关系以及临床意义.方法 应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测未经抗病毒治疗的患者58例(未抗病毒组)、经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者4例(抗病毒组)的肝细胞HBV ccc DNA和tDNA含量,应用免疫组化法定性检测肝组织内HBsAg和HBcAg表达,用SPSS 13.0软件统计分析肝细胞HBV ccc DNA含量、tDNA、HBsAg、HBcAg间的关系.结果 肝细胞HBV ccc DNA、HBV tDNA含量与HBsAg、HBcAg在肝细胞中的表达模式间差异无统计学意义(P> 0.05).肝细胞内HBV cccDNA含量与HBV tDNA含量呈高度正相关(P<0.01).慢性乙型肝炎抗病毒治疗患者中,疗程> 2年并达到<病毒性肝炎防治方案>停药标准,肝细胞内ccc DNA、tDNA含量较未抗病毒组显著降低,但肝细胞内仍然可以检出HBV ccc DNA、tDNA.结论 肝细胞HBV ccc DNA含量与HBsAg、HBcAg在肝细胞的表达模式间无一定规律性.核苷(酸)类似物抗病毒治疗 2~3年并不能完全清除肝细胞内HBV ccc DNA.
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乙型肝炎病毒e抗原真核表达载体的构建及在酵母中的表达
为探讨乙型肝炎病毒(HBV)e抗原(HBeAg)的功能,用多聚酶链反应(PCR)的方法以HBV ayw亚型全序质粒pCP10为模板扩增HBeAg基因,克隆到pGEM-T载体中扩增并测序,鉴定符合GenBank报告序列.用EcoRI和PstI双酶切后回收片段,连接到真核表达载体pGBKT7中并转化酵母AH109,在色氨酸缺陷型培养基(SD/-Trp)上筛选阳性菌落.提取阳性酵母菌的蛋白质,进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western免疫印迹分析,显示HBeAg基因在酵母细胞中表达,表达产物在胞内存在,相对分子质量(Mr)为43000左右.
