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脐血免疫功能研究进展
免疫系统是机体重要的防御系统,免疫功能低下与多种疾病的发生发展密切相关,故一直是基础医学和临床医学的研究重点.由于在新生儿时期免疫系统并未完全发育成熟,故其功能与儿童及成人有较大差别.近年来,有关新生儿脐血免疫功能的研究取得了很大进展,现对此作一综述.一、脐血的T淋巴细胞亚群脐血的T淋巴细胞数及亚群与成人和儿童有明显不同.早期应用单克隆抗体技术研究人类T淋巴细胞发育,发现随着T淋巴细胞成熟其表面抗原呈规律性表达,功能也随之变化.根据其表型,把T淋巴细胞的发育分为胸腺内和外周血两个阶段.胸腺内的发育分为三个时期,早期胸腺细胞(Ⅰ期)表达T9、T10抗原;普通胸腺细胞(Ⅱ期)丢失T9,获得T6,保留T10,共同表达T4和T8;成熟胸腺细胞(Ⅲ期)则T6消失,获得成熟T淋巴细胞抗原T3,并开始分化为T3+T4+T10+和T3+T8+T10+两个不同功能的细胞群,然后T10丢失进入外周血成为T3+T34+和T3+T8+两个成熟的T淋巴细胞亚群.脐血T3+细胞数较成人外周血少,T6+细胞占10%～15%,T10+细胞数则高达50%以上;成人外周血几乎无T6+细胞,T10+细胞《10%,T4+和T8+细胞的总和基本上等于T3+细胞数.Rabian-herzog等[1]研究表明,脐血淋巴细胞多属幼稚细胞或为处于抑制状态的淋巴细胞.表现为脐血T淋巴细胞白细胞介素2(IL-2)受体及HLA-DR表达明显
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新生儿淋巴细胞功能研究进展
近年来，有关新生儿淋巴细胞免疫功能的研究取得了很大进展，现对此作一综述。 一、 T淋巴细胞亚群及细胞因子 新生儿脐血淋巴细胞绝对数及其亚群与成人及儿童有明显不同。D′Arena等［1］研究发现，脐血淋巴细胞绝对数明显多于成人，但T细胞表型不成熟，T淋巴细胞亚群百分率与成人比较有明显差别，分别是：CD+3细胞(59.9±12.0)%与(74.9±4.6)%；CD-3CD+16和(或)CD+56（NK）细胞为(23.8±10.1)%与(10.8±5.3)%,CD+3CD+16和(或)CD+56细胞毒T细胞为(0.3±0.3)%与(10.7±4.1)%。足月儿脐血尚含有CD+3CD+25和CD3HLADR+活性T细胞。大多数脐血T细胞共同表达CD45RA幼稚抗原,而成人外周血T细胞则含有数量较多的CD45RO+记忆细胞。Murphy等［2］的研究表明，脐血单核细胞表达低荧光强度的CD14（CDdim14)细胞水平明显低于成人，脐血CDdim14 细胞表达人类白细胞抗原的百分率也明显低于成人；而高荧光强度的CD14（CDbright14）细胞表达CD36（OKM5 ）的能力却高于成人。表明脐血单核细胞表达特异性抗原的能力与成人不同，脐血中“抑制”或“幼稚”T淋巴细胞占绝对多数。
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CD3激活的异体高效杀伤细胞治疗晚期恶性肿瘤
肿瘤生物治疗是当今继手术、放疗和化疗的第4种治疗手段.我们自1995年始采用CD3体外激活的高效杀伤细胞治疗晚期恶性肿瘤病人25例,疗效满意,总结如下.
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视黄酸调节胰岛素样生长因子基因在脐血淋巴细胞的表达
目的 探讨维生素A促进免疫细胞功能的机理。方法 采用逆转录－聚合酶链反应，检测分析视黄酸(RA)对体外培养的脐血淋巴细胞（CBL）胰岛素样生长因子1（IGF-Ⅰ）及两类受体（IGF-IR, IGF-IIR）基因表达水平的调节。结果 生理浓度RA使CBL IGF-Ⅰ、IGF-IR和IGF-IIR基因表达都显著上调，但升高的时间和幅度有所不同。当加入生理浓度的RA培养6-24小时，IGF-Ⅰ mRNA显著高于单用SAC（P<0.05）。IGF-IR mRNA表现为先降后升再降的变化曲线，在单用SAC刺激6小时略有下降，但同时有RA存在时则使其升高，其差异非常显著（P<0.01）。IGF-IIR mRNA的变化曲线比较平坦，在SAC＋RA刺激24小时IGF-IIR mRNA升高明显，与单用SAC相比差异有显著性（P<0.05）。结论 提示在RA对免疫细胞的作用中IGFs的调节可能是一条重要途径。
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视黄酸受体在脐血淋巴细胞抗体生成中的作用
目的:研究视黄酸(RA)促进脐血淋巴细胞(CBL)抗体生成的作用机制.方法:对脐血标本进行血清维生素A(VA)浓度测定,采用RT-PCR法检测CBL中视黄酸受体-α(RAR-α)的基因表达水平,并采用ELISA法检测细胞培养上清液中IgM含量.结果:脐血血清VA水平与未培养CBL中RAR-α的基因表达水平之间存在正相关:r=0.50(P＜0.01);RA增加金黄色葡萄球菌Cowan I株(SAC)活化CBL的IgM生成能力(P＜0.001);RA上调SAC活化CBL中RAR-α的基因表达水平(P＜0.001);RA使RAR-α基因表达的上调幅度与RA使IgM生成的上调幅度之间存在正相关:r=0.40(P＜0.05).结论:RA对CBL抗体生成的促进作用可能通过
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妊娠晚期母体外周血与胎儿脐血淋巴细胞凋亡的对比研究
目的:比较妊娠晚期母体外周血与胎儿脐血间淋巴细胞凋亡及其调控基因的表达,探讨妊娠期母体与胎儿在免疫功能方面的差异.方法:采用流式细胞技术分析ICP及正常妊娠妇女外周血及脐血间淋巴细胞凋亡率;以免疫细胞化学染色技术检测两组孕妇外周血及脐血间淋巴细胞上Fas、FasL、Bcl-2的蛋白表达.结果:正常妊娠组脐血淋巴细胞凋亡率显著高于外周血(P<0.05),脐血淋巴细胞上Fas、FasL的表达显著低于母体外周血淋巴细胞(P<0.05),而Bcl-2在两者间无显著性差异;ICP组脐血淋巴细胞凋亡率亦明显高于外周血(P<0.05),脐血淋巴细胞上Fas、Bcl-2的表达显著低于母体外周血淋巴细胞(P<0.05),FasL在两者间无显著性差异.结论:妊娠晚期外周血与脐血间淋巴细胞的凋亡及其调控基因的表达存在差异,而这种差异可能在维持妊娠期免疫耐受的稳定性及移植物抗宿主的排斥反应方面有重要的作用.
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妊娠不同时期胎盘单核-巨噬细胞来源树突样细胞刺激脐血T淋巴细胞的特性比较
目的:观察妊娠不同阶段胎盘来源的树突样细胞(DC样细胞)刺激脐血淋巴细胞增殖活化特点的差异,进一步研究胎盘免疫细胞在妊娠耐受及分娩发动中的作用.方法:机械分离妊娠中、晚期胎盘中的单个核细胞,用磁珠分离法获取CD14+细胞,以内皮(逆)穿越系统诱导其分化为DC样细胞,并用流式细胞仪分析细胞表型,ELISA法检测细胞培养上清中白细胞介素(IL)-12、IL-10水平,CCK-8法检测其激发脐血淋巴细胞增殖能力,流式细胞术检测其所刺激的脐血T淋巴细胞内细胞因子.结果:足月妊娠胎盘来源的经诱导的细胞高表达与免疫激活有关的细胞表面标志物CD80、CD86;培养上清中检出较高水平的IL-12,极低水平的IL-10,具有较强的刺激脐血淋巴细胞增殖的能力；能刺激脐血T淋巴细胞分化形成较多的IFN-γ产生细胞,而分化形成的IL-10产生细胞则较少.但相比之下,中期妊娠胎盘来源的经诱导的细胞则低表达CD80、CD86(P＜ 0.05),培养上清中检出较高水平的IL-10(P＜ 0.05),但检测出的IL-12浓度极低(P＜0.05),刺激脐血淋巴细胞的能力较弱(P＜0.05)；刺激脐血T淋巴细胞分化形成较多的IL-10产生细胞(P＜0.05),而分化形成的IFN-γ产生细胞较少(P＜0.05).结论:妊娠不同时期胎盘来源的单核-巨噬细胞分化形成的DC样细胞免疫学特性不同,高表达CD80、CD86、IL-12的DC样细胞细胞在妊娠免疫耐受中止及分娩发动中发挥着一定的作用,而低表达CD80、CD86,高表达IL-10的细胞可能参与了妊娠过程中的免疫耐受.
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妊娠期肝内胆汁淤积症脐血淋巴细胞凋亡的初步研究
目的 探讨脐血淋巴细胞凋亡在妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)发病中的意义.方法 采用流式细胞技术分析ICP患者和正常妊娠妇女脐血淋巴细胞的凋亡率;通过免疫细胞化学染色技术检测ICP患者和正常妊娠妇女脐血淋巴细胞上凋亡调控基因Fas、FasL、Bcl-2的蛋白表达.结果 ICP患者脐血淋巴细胞凋亡率低于正常妊娠组(P＜0.001),脐血淋巴细胞上Fas、Bcl-2表达水平两组间差异无统计学意义(P＞0.05),而FasL表达水平在ICP组高于正常妊娠组(P＜0.005).结论 ICP患者存在脐血淋巴细胞凋亡率及凋亡调控基因表达的异常,可能致移植物抗宿主反应异常而在ICP的发病中起一定作用.
关键词： 妊娠期肝内胆汁淤积症 脐血淋巴细胞 凋亡 调控基因
