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氯胺酮对结直肠癌患者Th1和Th2细胞影响的研究
目的 辅助性T淋巴细胞(Th)在抗肿瘤免疫中发挥重要作用,尤其Th1/Th2比值降低与胃肠道恶性肿瘤转移复发有关.本研究拟在体外佛波醇-十四酸酯-乙酸酯(PMA)和离子霉素刺激下,探讨不同浓度的氯胺酮对结直肠癌患者Th1和Th2细胞的影响.方法 选取山东省肿瘤医院2014-10-01-2015-05-31收治的20例结直肠癌患者和20名健康体检者的外周静脉血.健康体检者每份血样分离出的外周血单个核细胞(PBMCs)加入等容积0.9％氯化钠为正常对照组(C0组,n=20);结直肠癌患者每份血样分离出的PBMCs随机分为C1组、K1组、K2组和K3组,分别加入0.9％氯化钠、25、50和100 μmol/L氯胺酮(n=20).各组均加入PMA和离子霉素混合溶液2μL孵育4h后收集细胞.采用三色荧光流式细胞技术测定Th1及Th2细胞亚群比例,并计算两者比值(Th1/Th2).结果 C0组Th1细胞比例为9.36％,C1组为6.39％,差异有统计学意义,P＜0.001;C0组Th1/Th2比值为2.48,C1组为1.63,差异有统计学意义,P＜0.001.与C1组比较,K1组中Th1细胞、Th2细胞和Th1/Th2比值均无明显变化,均P值＞0.05;K2组中Th1/Th2比值由1.63升高至1.71,P＜0.001;K3组中Th1细胞、Th2细胞比例降低,Th1/Th2比值升高,P值均＜0.01.随着氯胺酮浓度的增加,Th1/Th2比值不断增高,P值均＜0.01.结论 结直肠癌诱导免疫应答,使Th1/Th2平衡向Th2偏移.在体外PMA和离子霉素的刺激下,小剂量氯胺酮对结直肠患者的Th1、Th2和Th1/Th2比值影响不大.高浓度氯胺酮能抑制Th细胞分化,但增加Th1/Th2比值,且随着浓度的增加,对Th细胞分化的影响越大.
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重症急性胰腺炎大鼠早期肠源性内毒素血症对Th1/Th2平衡的影响
目的:探讨肠源性内毒素血症对重症急性胰腺炎大鼠机体免疫功能的影响.方法:将Wistar大鼠(260±20)g40只,随机分为假手术组(n=8)和重症急性胰腺炎模型组(n=32),后者又分为3 h、12 h、24 h和36 h组,每组8只,观察血浆内毒素和血清淀粉酶及Th1/Th2比值的变化.结果:血浆内毒素水平的升高,使促炎细胞因子过度释放,Th1/Th2比值持续升高(P＜0.01).血浆内毒素和Th1/Th2比值呈显著正相关(P＜0.01).结论:在重症急性胰腺炎的早期,血浆内毒素的升高使机体的细胞免疫功能过强,导致组织细胞损伤加重.
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脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织Th1/Th2细胞平衡与PARP-1表达的相关性
目的：探讨大鼠大脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）模型脑组织Th1/Th2细胞平衡与二磷酸腺苷核糖多聚酶-1（Poly（ADP-ribose）polymerase-1，PARP-1）表达是否存在相关性。方法：将健康雄性SD大鼠随机分成正常对照组、假手术组、模型组、PARP-1抑制剂PJ34组，按再灌注不同时间点分为6、12、24、48、72 h五个亚组，各组取材前进行神经功能损伤评分，氯化三苯基四氮唑（triphenyltetrazolium chloride， TTC）染色评价脑梗死体积，RT-PCR技术检测脑缺血/再灌注损伤病灶中PARP-1 mRNA的表达，Western Blot技术检测PARP-1聚合体蛋白的表达，ELISA技术测定干扰素-γ（interferon-γ，INF-γ）、白介素4（interleukin 4，IL-4）水平。结果：与假手术组比，模型组神经功能损伤评分、脑梗死体积、PARP-1表达及炎性反应效应细胞（helper T cell 1，Th1）与辅助性效应细胞（helper T cell 2，Th2）的比值均显著增加（P<0.01）；与模型组比，PJ34组梗死体积明显减小（P<0.01），PARP-1表达、Th1/Th2比值均显著降低（P<0.01）；Th1/Th2与PARP-1水平呈显著正相关（r=0.984，P<0.05）。结论：MCAO大鼠脑组织Th1/Th2细胞平衡状态与PARP-1表达存在相关性。
关键词： 二磷酸腺苷核糖多聚酶-1 Th1/Th2比值 大脑中动脉阻塞 -
蓝科肤宁联合他克莫司软膏治疗急性阴囊潮湿疗效研究
目的 研究蓝科肤宁联合他克莫司软膏治疗急性阴囊潮湿(ASE)的临床疗效及免疫调节作用.方法 将67例ASE患者随机分为2组,对照组33例进行抗组胺治疗,治疗组34例给予蓝科肤宁联合他克莫司软膏治疗,观察两组疗效及TH1/TH2比值变化.结果 治疗组总显效率为91.18%,高于对照组的72.73%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组症状及体征总评分(TSS)为(4.2±1.2)分,低于对照组的(5.8±1.5)分,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组TH1/TH2比值大于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 蓝科肤宁联合他克莫司软膏治疗ASE,可有效缓解瘙痒、疼痛、糜烂症状,使TH1/TH2比值趋于平衡,增强机体免疫能力.
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胃癌患者外周血Th1/Th2检测及其临床意义
目的 探讨胃癌患者外周血Th1/Th2的漂移状况,并分析其临床意义.方法 选取胃癌患者23例及同期体检的健康志愿者18例(对照组),采用流式细胞仪三色荧光法检测和分析外周血中的Th1/Th2状态.结果 胃癌患者外周血Th1、Th2和Th1/Th2比值均较正常对照组明显减少,差异有统计学意义(t分别=5.68、2.38、5.35,P均＜0.05).同时,机体的Th1和Th2状态出现失衡,发生"Th1向Th2"漂移,形成Th2型状态.此外,分期越晚的胃癌患者,其Th2在Th细胞中所占的比重越大.结论 胃癌患者抗肿瘤免疫功能明显受损,且受损程度与胃癌患者的分期存在相关性,Th1/Th2比值可能与胃癌的发病机制及预后情况相关.
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基于肿瘤相关巨噬细胞的宫颈癌免疫学病理机制研究
目的:分析肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)在宫颈癌发病中的作用机制,明确其与Th1/Th2比值、Th17/CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg比值的相关性.方法:以27例宫颈癌患者和53例宫颈上皮内瘤变(CINⅡ22例、CINⅢ31例)患者为研究对象,治疗前抽取患者空腹肘静脉血,采用流式细胞仪测定Th1/Th2、Th17/CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg比值,采用ELISA试剂盒测定血清IFN-γ、IL-4、IL-17A、IL-17F、TGF-β1、IL-10水平;术中留取病理组织,采用免疫组化实验测定TAMs CD68表达.结果:宫颈癌患者外周血Th1/Th2与Th17/CD4+CD25+ Foxp3+ Treg比值低于CINⅢ,CINⅢ低于CINⅡ,各组之间的差异有统计学意义(P＜0.05).宫颈癌患者血清IL-4、TGF-β1、IL-10水平高于CINⅢ,CINⅢ高于CINⅡ,血清INF-γ、IL-17A、IL-17F水平低于CINⅢ,CINⅢ低于CINⅡ,各组之间的差异有统计学意义(P＜0.05).宫颈癌患者病灶组织TAMs CD68表达水平高于CINⅢ,CINⅢ高于CINⅡ,各组之间差异均有统计学意义(P＜0.05).相关性分析结果显示TAMsCD68表达水平与Th1/Th2比值、Th17/CD4+CD25+ Foxp3+ Treg比值及IL-17A水平呈负相关性,与IL-10、IL-4水平呈正相关性(P＜0.05).结论:宫颈癌TAMs与Th1/Th2、Th17/CD4+CD25+ Foxp3+ Treg密切相关,可能通过影响这两大体系的平衡介导宫颈癌的发生与发展.
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儿童紫癜性肾炎肾组织Th1/Th2比值与肾脏微血管损伤的关系
目的 探讨儿童紫癜性肾炎(HSPN)肾组织Th1/Th2比值与肾脏微血管损伤的关系.方法 选取32名HSPN患儿为病例组,根据肾脏病理结果分为4个亚组:HSPN Ⅱ级(n=8),Ⅲ a级(n=7),Ⅲb级(n=10)及Ⅳ/Ⅴ级(n=7).5例因肾外伤切除肾组织患者为对照组.免疫组化法检测肾组织INFγ(标记Th1细胞)、IL-4(标记Th2细胞)及CD34(标记微血管)的表达,并进行微血管评分,计算微血管密度(MVD),分析肾脏INFγ,IL-4表达与肾脏病理分级、肾脏微血管评分和MVD之间的关系.结果 与对照组相比,病例组肾组织INγ表达降低,IL4表达升高,Th1/Th2比值随着HSPN病理损伤的加重而减小,各级间差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,HSPN Ⅱ级和Ⅲa级组MVD显著增加,但Ⅳ/ Ⅴ级组MVD显著减少(P＜0.05).与对照组和HSPN Ⅱ级组比较,HSPNⅢa级、Ⅲb级以及Ⅳ/Ⅴ级组肾脏微血管评分明显增加,且随病理分级的增加,肾脏微血管评分逐渐增加,各级间差异有统计学意义(P＜0.05).肾组织Th1/Th2比值与微血管密度变化呈负相关(r=-0.921,P＜0.01).结论 Th1/Th2比值降低可能参与了HSPN肾脏微血管损伤.
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接种乙肝疫苗对成人外周血Th1/Th2的影响研究
目的 通过检测乙肝疫苗接种者的外周血Th细胞分泌的IFN-γ和IL-4,探讨Th活化与乙肝疫苗无应答的关系.方法 利用流式细胞仪分析方法对31例乙肝疫苗应答者和23例乙肝疫苗无应答者外周血中淋巴细胞的胞内细胞因子(IFN-γ和IL-4)和表面抗原(CD4)进行分析.结果 乙肝疫苗无应答者外周血IFN-λ(P ＜0.01)和Th1/Th2比值(P＜0.05)与乙肝疫苗应答者有明显差别.结论 乙肝疫苗接种者Th细胞的活化与乙肝疫苗无应答存在一定关系.
