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两种獐牙菜属植物中两种苦苷的含量分析
目的:建立同时测定川东獐牙菜、显脉獐牙菜中獐牙菜苦苷和龙胆苦苷含量的高效液相色谱方法.方法:采用HYPERSIL BDS C18色谱柱(4.6mm×200mm,5μm),流动相为甲醇-水梯度洗脱(MeOH%:0min 15%,40min 45%),流速为1.0ml/min,检测波长为240nm,柱温为25℃.结果:獐牙菜苦苷和龙胆苦苷分别在1.04～31.20μg和0.22～6.50μg范围内线性关系良好,r分别为0.99992和0.99996,平均回收率分别为97.34%和96.30%,RSD均小于3%(n=6).结论:本方法操作简便,分离效果好,灵敏度高,重现性好,为控制川东獐牙菜和显脉獐牙菜质量提供参考.
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HSCCC法分离制备龙胆有效成分龙胆苦苷
目的:采用高速逆流色谱技术(HSCCC)从龙胆中分离制备高纯度龙胆苦苷.方法:利用制备型高速逆流色谱仪,以氯仿-甲醇-正丁醇-水(5:4:2:4)为溶剂系统对龙胆甲醇粗提物进行分离,上相为固定相,下相为流动相,转速为820 r/min,流速为2.0 ml/min.结果:所得龙胆苦苷经HPLC分析,纯度达到96.68%(峰面积百分比).结论:此研究为其他环烯醚萜苷的分离纯化提供了依据.
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新疆产5种秦艽植株不同部位龙胆苦苷含量的薄层扫描法测定
采用薄层扫描法测定了新疆产5种秦艽植株不同部位中龙胆苦苷含量,结果表明,根中龙胆苦苷含量(2.07%～5.55%)明显高于茎(0.14%～0.66%),5种秦艽中又以天山秦艽的含量多,新疆秦艽次之,小秦艽的较低.
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HPLC法同时测定复方黑骨藤提取物中3种成分的含量
目的:建立HPLC法同时测定复方黑骨藤提取物中龙胆苦苷、延胡索乙素和杠柳苷的含量.方法:采用AichromBond-1 C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇(A)-2％氨水溶液(B),梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;柱温:25℃;检测波长:233 nm(龙胆苦苷)、275 nm(延胡索乙素)、239 nm(杠柳苷).结果:龙胆苦苷回归方程:y1 =0.1101x1-0.0215(r1=0.9999),线性范围:3.628～ 362.8 μg/mL;延胡索乙素回归方程:y2=0.5075x2-0.3903(r2 =0.9999),线性范围:4.328 ～ 432.8 μg/mL;杠柳苷回归方程:y3 =0.0743x3+0.495(r3 =0.9999),线性范围:6.476 ～ 647.6 μg/mL.3种成分的平均加样回收率分别为99.58％、99.86％、99.64％,RSD分别为0.8％、1.2％、1.14％.结论:利用HPLC法可同时测定复方黑骨藤提取物中3种成分的含量,该方法简单、准确、重复性好,可为复方黑骨藤的质量控制与评估提供参考.
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正交试验优选复方黑骨藤超声法提取工艺
目的:研究复方黑骨藤药材的佳超声提取工艺.方法:以杠柳苷、龙胆苦苷和延胡索乙素的提取率为质量指标,采用正交试验优选提取工艺;以抗炎效果为生物指标,验证提取工艺的有效性.结果:佳工艺条件为:提取2次,提取时间为30 min,料液比为1:15,提取温度为60℃,功率为800 W,超声间隙时间为5 s/3 s,药材粒度为过24目.以佳工艺提取得到的提取物能有效抑制二甲苯引发的小鼠耳廓肿胀度.结论:该方法适用于复方黑骨藤中有效成分的提取,该提取物有较好的抗炎效果,此工艺合理可行,方法可信.
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颠龙合剂质量标准研究
目的:建立颠龙合剂的质量标准.方法:采用薄层色谱法对处方中颠茄酊、薄荷进行定性鉴别;采用高效液相色谱-质谱联用法测定颠龙合剂中龙胆苦苷的含量.结果:TLC专属性强,阴性对照无干扰;龙胆苦苷在0.100 ～1.00 μg/mL范围内呈良好线性关系(r=0.9990),定量限为0.100 μg/L,平均加样回收率为98.87％,RSD为1.65％(n=9),日内、日间精密度的RSD值均低于2％.结论:该方法准确、灵敏,可用于颠龙合剂的质量控制.
关键词： 颠龙合剂 薄层色谱法 高效液相色谱-质谱法 龙胆苦苷 -
秦艽中龙胆苦苷提取工艺研究
目的:优选出秦艽中龙胆苦苷的佳提取工艺.方法:采用正交试验法,考察溶剂浓度、溶剂用量、提取时间、提取次数对龙胆苦苷提取率的影响,采用高效液相色谱法测定其含量.结果:所考察的因素中,对秦艽中龙胆苦苷提取率的影响程度为:提取次数＞溶剂浓度＞溶剂用量＞提取时间;佳工艺为:用10倍量70%的乙醇提取3次,每次1.5 h.结论:本提取工艺可行,可为充分利用秦艽资源提供参考.
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大孔吸附树脂富集秦艽叶中龙胆苦苷的工艺研究
目的:优选用于富集秦艽叶中龙胆苦苷的大孔吸附树脂的型号,并研究其工艺条件和参数.方法:采用不同大孔吸附树脂对龙胆苦苷进行吸附及洗脱性能实验,同时采用高效液相色谱法进行分析检测.结果:筛选出效果较好的D-101大孔吸附树酯,确定了佳工艺条件.结论:此法可较好的富集龙胆苦苷.
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高效液相色谱法测定清肝胶囊中龙胆苦苷的含量
目的:建立高效液相色谱法测定清肝胶囊中龙胆苦苷的方法.方法:以C18反相柱为色谱柱,甲醇-水(3∶7)为流动相.检测波长270 nm,用乙酸乙酯和甲醇混合液作提取剂.结果:平均回收率为98.38%,r=0.9995,线性关系良好.结论:此方法灵敏、准确,适用于龙胆苦苷的测定.
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龙胆泻肝片中龙胆苦苷的含量测定
龙胆泻肝片由龙胆、柴胡、黄芩、栀子(炒)、泽泻、关木通、车前子(盐炒)、当归(酒炒)、地黄、甘草(蜜)十味药组成,具清肝热、利湿热之功.用于肝胆湿热,头晕目赤,耳鸣耳聋,耳肿疼痛,胁痛,口苦,尿赤涩痛,湿热带下;临床疗效较好.为了更好地控制龙胆泻肝片的质量,本文对龙胆泻肝片中龙胆苦苷的含量测定方法进行了研究.
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微波技术在秦艽浸提中的应用
目的:研究微波技术对秦艽中龙胆苦苷浸出量的影响,并与传统的水煎法提取进行比较.方法:采用正交试验法考察微波输出功率、药材粒径、浸提时间三个因素对提取效率的影响,优选出龙胆苦苷的佳提取方案.以优选出的微波提取方案为试验组,用常规水煎法为对照组进行平行试验.结果:药材粒径对龙胆苦苷浸提的影响非常显著(P＜0.01),功率对龙胆苦苷浸提的影响显著(P＜0.05),时间对龙胆苦苷浸提的影响不显著.微波浸提法对龙胆苦苷的提取效率明显优于常规水煎法.结论:微波浸提法是一种提取效率高、操作简单、省时的提取中药活性成分的新方法,值得推广应用.
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秦艽种质资源主要生物学特性与龙胆苦苷含量的相关分析
目的:分析秦艽种质资源主要生物学特性与龙胆苦苷含量的相关性.方法:基于已建立的高效液相色谱法测定收集的40份秦艽种质资源根中龙胆苦苷的含量,采用SPSS 16.0软件中的Spearman秩相关和回归分析中的优尺度分析秦艽种质资源主要生物学特性与龙胆苦苷含量的相关性.结果:收集的40份秦艽种质根中龙胆苦苷的含量为7.56％～11.32％,龙胆苦苷含量和莲座叶叶形、顶端花序密度具有极显著的相关性,莲座叶的叶形越窄则根中龙胆苦苷的含量越高,顶端花序越密则根中龙胆苦苷含量越高;根中龙胆苦苷含量和花萼颜色、茎颜色具有显著相关性,颜色越深,龙胆苦苷含量越高.结论:以提高龙胆苦苷含量为目标选育优良单株时,莲座叶为披针形、顶端花序密集、花萼颜色和茎颜色为红色或红绿色的秦艽资源是主要选育对象.
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宁夏六盘山区野生和栽培秦艽中龙胆苦苷含量测定
目的:比较宁夏六盘山区野生和栽培秦艽的质量,为人工栽培秦艽提供参考.方法:采用反相高效液相色谱法测定秦艽的龙胆苦苷含量.结果:宁夏六盘山区栽培的3种秦艽中龙胆苦苷含量均高于野生秦艽,且以种植二年为宜.结论:六盘山区种植秦艽是可行的.
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麻花秦艽开发利用探讨
采用高效液相色谱法(HPLC)测定甘肃栽培麻花秦艽不同部位、产地和采收期样品的龙胆苦苷含量.结果表明:3年生秦艽的龙胆苦苷含量稍高于2年生,但差异性不显著;根、茎和叶的平均龙胆苦苷含量依次为13.3%、2.95%和2.24%;同一生长年限随采收期延后,茎、叶中龙胆苦苷含量逐渐降低,而根中含量却逐渐上升;不同产地的根样品,依海拔由低到高的,陇西、康乐和临潭分别为10.23%、13.12%和15.54%.本探讨获初步结论:甘肃栽培的麻花秦艽茎和叶的龙胆苦苷均已达到药典的2%标准,宜加以开发利用;从龙胆苦苷产量及生产成本综合考虑,以种植两年较好,根的采收期宜在10月以后封冻前;而以茎叶为生产目标可在8月下旬至9月初采收为佳;高海拔区栽培秦艽有利于秦艽根中龙胆苦苷含量的积累.
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青海产秦艽中龙胆苦苷分布状态
采用反相高效液相色谱法(HPLC)测定青海省不同产地、不同部位秦艽中龙胆苦苷的含量,结果:根部龙胆苦苷的含量高于地上其他部位,而且麻花秦艽普遍高于小秦艽;有些产地的花、叶或茎所含的龙胆苦苷超过中国药典2%的要求,可考虑开发利用.
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甘肃产8种秦艽的龙胆苦苷含量比较
目的:测定甘肃产秦艽类药材活性成分龙胆苦苷的含量,以评价药材质量.方法:采用高效液相色谱法.结果:龙胆苦苷在0.94 μg～4.70 μg范围内具有良好线性关系,平均回收率为98.3%(RSD＝1.3%).结论:所测8种样品中龙胆苦苷含量均高于<中国药典>(2000年版)秦艽含量测定项下标准要求.
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新疆地产秦艽中龙胆苦苷含量比较
秦艽是临床上用于祛风除湿、和血舒筋、清热利尿的常用中药材.<中国药典>2000年版收载有龙胆科秦艽(大叶秦艽,又称大叶龙胆)Gentiana macrophylla Pall.、麻花秦艽G.straminea Maxim.、粗茎秦艽(又称粗茎龙胆)G.crassicaulis Duthie ex Burk.或小叶秦艽G.dahurica Fisch.等4种.新疆是秦艽主产区之一,据<新疆中药资源普查名录>记载新疆龙胆科植物有秦艽和龙胆等13种.本研究用HPLC法测定5种秦艽药材有效成分龙胆苦苷含量,并与药典收载的加以比较,为新疆秦艽药用植物开发利用提供参考.
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麻花艽愈伤组织培养过程中龙胆苦苷含量的变化
目的:研究麻花艽愈伤组织培养过程中龙胆苦苷含量的变化,为通过愈伤组织培养或细胞悬浮培养生产龙胆苦苷奠定基础.方法:通过生物量测定,确定愈伤组织的生长曲线;采用染色体压片和原生质体观察,确定不同生长时期愈伤组织中的细胞分裂指数;并通过HPLC法测定不同生长时期愈伤组织中龙胆苦苷的含量.结果:愈伤组织生长曲线呈“S”型,生长周期为33 d,可分为4个时期,即延滞期、对数生长期、稳定期和衰退期;每一时期的细胞分裂指数分别为22.18％、54.23％、67.55％和26.97％,各时期对应的龙胆苦苷含量分别为7.92、15.01、25.02和14.04 mg/g DW.结论:龙胆苦苷的积累与愈伤组织的增殖呈同步趋势,在稳定期达到大值.
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秦艽愈伤组织的培养及其龙胆苦苷含量的研究
目的:为扩大和提高甘肃道地药材秦艽资源的利用效率.方法:以秦艽种子的萌发所获得的幼芽作为外植体,诱导形成愈伤组织；筛选诱导愈伤组织产生的不同培养基和培养条件,并继代培养；应用HPLC法测定龙胆苦苷的含量.结果:秦艽愈伤组织生长的佳培养基为MS+2,4-D(1.0 mg/L) +6-BA(0.5 mg/L),佳继代培养基为MS+2,4-D(1.0 mg/L) +6-BA(0.5 mg/L) +NAA(0.5 mg/L),佳继代时间为30 d.龙胆苦苷积累量在指数生长后期(28 ～30 d)达高,为0.78 mg/g DW.结论:筛选出了适宜的秦艽愈伤组织培养方法.秦艽愈伤组织在固体培养基上的生长曲线呈“S”型,且愈伤组织中龙胆苦苷的积累量随愈伤组织增殖而不断增加.
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外源AgNO3对秦艽幼苗生长及龙胆苦苷生物合成的影响
目的:探究外源AgN03对秦艽幼苗生长和龙胆苦苷含量积累的影响.方法:以秦艽Gentiana macrophylla Pal1.幼苗为研究对象,利用高效液相色谱法检测外源施加AgNO3后秦艽幼苗中龙胆苦苷含量的积累变化及其对秦艽幼苗生长的影响,进一步利用实时荧光定量PCR技术检测龙胆苦苷生物合成途径上多个酶基因的表达.结果:当秦艽幼苗在含有1 mmol/L AgNO3的MS培养基上生长9d时,秦艽幼苗中龙胆苦苷的含量是对照的1.91倍,鲜重、干重以及根长平均增加了29％、32％和43％;荧光定量PCR结果显示,龙胆苦苷合成途径上多个酶基因的表达显著上调.结论:外源AgNO3可显著促进秦艽幼苗中龙胆苦苷的积累,同时可显著促进秦艽幼苗生物量(于重、鲜重)的增加和根的伸长.
