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膜型基质金属蛋白酶-1对乳腺癌细胞浸润能力的影响
目的 研究膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)对乳腺癌细胞株浸润能力的影响,并初步探讨其作用机制.方法 用20μg/ml刀豆素(ConA)刺激乳腺癌细胞株MDA-MB-453,促使其表达MT1-MMP蛋白,并用免疫细胞化学和Western blot法检测;然后加入外源性MMP-2原酶(proMMP-2),并用明胶酶谱分析法检测proMMP-2被激活的情况;后用侵袭实验检测细胞株的浸润能力.实验中将细胞株分为4组:空白对照组、ConA组、MMP-2组和ConA+MMP-2组,各组实验结果进行对比分析.结果 利用ConA刺激后,ConA组和ConA+MMP-2组的细胞均表达MT1-MMP蛋白,另两组无MT1-MMP蛋白表达.明胶酶谱分析实验发现,MMP-2组只检测到72 000原酶形式的MMP-2,ConA+MMP-2组同时检测到72 000原酶形式和64 000活酶形式的MMP-2,其余两组检测不到任何形式MMP-2.侵袭实验结果显示,ConA+MMP-2组细胞穿过Marigel胶的细胞数目明显多于其他组.结论 MT1-MMP能显著增强乳腺癌细胞株的浸润能力,其机制主要是通过激活MMP-2原酶,降解肿瘤周围的基质成分实现的.
关键词： 侵袭性 体外 膜型基质金属蛋白酶-1 基质金属蛋白酶-2 乳腺肿瘤 -
CD44基因变异体对人乳腺癌细胞株MCF-7的侵袭作用
目的 探讨一种新的CD44基因变异体(CD44v17)对人乳腺癌细胞株MCF-7侵袭能力的影响及其机制.方法 以人乳腺癌耐阿霉素细胞株(MCF-7/ADR)cDNA为模板,采用聚合酶链反应(PCR)扩增目的片段,将其T-A克隆后,进行测序;构建CD44v17质粒真核表达载体(pcDNA3.1-CD44v17);应用脂质体转染法将pcDNA3.1-CD44v17转染入MCF-7细胞中,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及明胶酶谱法测定转染细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达;Transwell法检测CD44v17对MCF-7细胞的侵袭力;Western blot检测胞外信号调节蛋白激酶(ERK)及磷酸化蛋白激酶(p-ERK)变化.结果 限制性内切酶消化证实,重组载体已正确克隆;DNA序列分析显示,CD44v17包含CD44基因1～4号外显子、16～17号外显子、18号外显子1～205位碱基(GeneBank NO.FJ216964).MCF-7细胞转染peDNA3.1-CD44v17后,CD44 mRNA表达量和蛋白表达率分别为0.92±0.22和(70.0±2.5)%;透明质酸(HA)处理后,MMP-2 mRNA表达量和蛋白活性分别为0.72±0.22和1.14.4-0.12,MMP-9 mRNA表达量和蛋白活性分别为0.85±0.19和1.23±0.25,细胞侵袭能力明显增加,侵袭细胞数目为352±33个/视野,而CD44单抗可以阻断这种作用;CD44单抗和促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路抑制剂预处理转染细胞后,显著阻断了P-ERK的表达.结论 在MCF-7/ADR细胞中发现CD44v17,并成功克隆和建立pcDNA3.1-CDd4v17;HA与CD44v17受体结合,通过CD44→ras→MAPK信号传导通路调节MMP-2和MMP-9的表达,从而增加MCF-7细胞的侵袭力.
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FTY720对人类肝癌细胞HepG-2侵袭能力的影响
目的 研究FTY720对人类肝癌细胞HepG-2侵袭能力的影响.方法 培养人类肝癌细胞HepG-2,将其分为对照组、FTY720不同浓度(0.05、0.10、0.15 g/ml)给药组.通过细胞侵袭实验观察FTY720对HepG-2细胞侵袭能力的影响;RT-PCR检测细胞基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)mRNA水平表达的变化;ELISA法检测细胞MMP-2、MMP-9的蛋白表达变化.结果 与空白组[(110±3)个]相比,随着FTY720给药浓度的升高,各组癌细胞的侵袭能力呈浓度依赖性下降:0.05 g/ml FRY720处理组的细胞数量为(74±4)个,而0.10、0.15 g/ml药物处理组的细胞数量则为(42±3)、(25±5)个,差异有统计学意义(P<0.01).FTY720不同浓度组肝癌细胞MMP-2、MMP-9 mRNA表达较空白组明显下降(P<0.05),且随着fTY720浓度的升高,MMP-2、MMP-9表达逐渐下降(P<0.05).FTY720不同浓度组肝癌细胞MMP-2、MMP-9蛋白表达量较空白组明显下降(P<0.05),且在一定范围内与FTY720浓度成反比.结论 FTY720对肝癌细胞HepG-2侵袭能力具有抑制作用,并随FTY720浓度的升高侵袭能力逐渐下降,其机制之一可能是降低了肝癌细胞MMP-2、MMP-9的蛋白质及基因表达.
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MMP-2和TIMP-2在甲状腺乳头状癌中的表达及意义
目的:探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和组织基质金属蛋白抑制剂-2(TIMP-2)在人甲状腺乳头状癌组织中的表达及其与浸润程度、淋巴结转移的关系.方法:应用免疫组织化学S-P法对56例甲状腺乳头状癌组织及其癌旁正常甲状腺组织中MMP-2和TIMP-2表达情况进行检测.结果:MMP-2和TIMP-2在甲状腺乳头状癌组织中表达的阳性率分别为76.8%(43/56)和37.5%(21/56).在癌旁正常甲状腺组织中表达的阳性率分别为33.9%(19/56)和32.1%(18/56),表明MMP-2在甲状腺乳头状癌中有较高表达率.同时MMP-2和TIMP-2的表达与浸润程度、淋巴结转移有显著相关性(P＜0.05),与肿瘤大小无相关性.结论:MMP-2和TIMP-2的表达与甲状腺乳头状癌浸润程度、淋巴结转移密切相关,可作为判断甲状腺乳头状癌生物学行为和预后的参考指标.
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胞外基质蛋白Periostin和基质金属蛋白酶-2在结直肠癌中的表达及其临床病理意义
目的 探讨结直肠癌中胞外基质蛋白Periostin和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达及其与临床病理特征的关系和意义.方法 采用免疫组织化学EnVision二步法检测结直肠癌、管状腺瘤、绒毛状腺瘤及正常组织中Periostin和MMP-2的表达,分析各组间表达的差异及其与临床病理参数的关系.结果 在结直肠癌、管状腺瘤、绒毛状腺瘤和正常结直肠组织中Periostin的阳性率分别为83.7％(41/49)、40.0％(6/15)、32.1％(9/28)、0(0/15)；MMP-2的阳性率分别为71.4％(35/49)、60.0％(9/15)、64.3％(18/28)、0(0/15),二者在各组间表达的差异有统计学意义(x2=41.252,P=0.000;x2=24.811,P=0.000).Periostin阳性表达与患者性别(x2=0.002,P=0.961)、年龄(x2=2.267,P=0.132)、肿瘤部位(x2=1.506,P=0.220)、分化程度(x2=0.875,P=0.350)、淋巴结转移(x2=3.315,P=0.069)均无关.MMP-2阳性表达与淋巴结转移有关(x2=5.800,P=0.016),与患者性别(x2=0.562,P=0.453)、年龄(x2=0.138,P=0.711)、肿瘤部位(x2=0.408,P=0.532)、分化程度(x2=1.335,P=0.248)无关.Periostin和MMP-2表达在结直肠癌中呈正相关(r=0.332,P=0.020).结论 Periostin和MMP-2的表达与结直肠癌的发生、发展密切相关,联合检测二者的表达能更准确地评估结直肠癌的生物学特征及预后.
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基质金属蛋白酶2和9在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义
目的 探讨膀胱肿瘤组织中基质蛋白酶-2(MMP-2)及基质蛋白酶-9(MMP-9)的表达与膀胱移行细胞癌(TCCB)侵袭转移的关系.方法 选择新乡医学院第一附属医院2006年8月至2008年8月间行TCCB切除术后患者46例作为试验组,并取14例癌旁正常组织(肿瘤周围3～5 cm)作为对照组.采用免疫组织化学(EliVision法)检测MMP-2及MMP-9在膀胱肿瘤组织中的表达.结果 MMP-2和MMP-9在TCCB中的表达显著高于癌旁正常组织(P<0.01),Ⅱ、Ⅲ级TCCB中的阳性表达明显高于Ⅰ级(P<0.01);浸润性及Ⅲ级TCCB组织中的阳性表达高于浅表性及Ⅱ级中的表达,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 MMP-2及MMP-9的阳性表达与TCCB的恶性程度及侵袭转移有关,可作为判断膀胱肿瘤预后的有用指标.
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基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9在直肠癌中的表达及其临床意义
目的 探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在直肠癌发病机制及转移中的临床意义.方法 用RT-PCR方法检测MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA在正常肠组织以及直肠癌组织中的表达.结果 MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA在正常肠组织中低表达(0.3150±0.1766、0.3050±0.1995),而其在有转移的直肠癌患者癌组织中的表达明显增强,与正常对照组比较差异有统计学意义.结论 MMP-2、MMP-9在直肠癌患者中高表达,并且其在癌转移中有重要意义.
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Rac1基因对纤维肉瘤细胞侵袭胶原蛋白屏障的影响和机制研究
目的 体外研究外源Rac1基因表达对HT1080纤维肉瘤细胞侵袭胶原蛋白屏障的影响及其机制.方法 将转染显性负调控突变体Rac1V12N17(HN)、持续活化型Rac1V12(HV)或空载体(HW)纤维肉瘤HT1080细胞,在含胶原蛋白凝胶三维基质中培养,用得克萨斯红结合的鬼笔环肽染色显示细胞肌动蛋白骨架结构.用胶原蛋白凝胶薄膜覆盖滤膜的Transwell小室进行细胞侵袭胶原屏障实验,并观察2种蛋白酶抑制剂对上述细胞侵袭实验的影响.采用明胶酶谱法检测在三维基质中培养的上述转染细胞分泌型基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达和活化.结果 胶原蛋白凝胶中培养的HV和HN细胞在形态上表现出明显差异,前者有更多伪足样突起;HV细胞侵袭胶原屏障能力大于HW细胞,而后者又强于HN细胞,这种差别在应用广谱MMP抑制剂后消失,而抑肽酶则无影响;外源Rac1的表达促进胶原和纤维蛋白基质中培养的HT1080纤维肉瘤细胞分泌型MMP-2的表达和活化.结论 外源持续活化型Rac1基因在纤维肉瘤HT1080细胞内稳定表达,可诱导细胞内肌动蛋白聚集,增强细胞侵袭胶原屏障能力.Rac1表达促进MMP-2活化可能是其重要机制之一.
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重型颅脑损伤患者血清NSE和MMPs的动态变化及临床意义
目的 探讨重型颅脑损伤患者血清NSE、MMP-2及MMP-9蛋白水平变化及其临床意义.方法 采用前瞻性队列研究,收集重型颅脑损伤患者62例(死亡6例)及对照组20例,应用ELISA法检测血清中NSE、MMP-2及MMP-9水平,分析其变化趋势与临床病情变化和转归的关系.结果 各监测点重型颅脑损伤后患者血清NSE、MMP-2及MMP-9浓度显著增高(P＜0.01).NSE高峰出现在第5天,此后仍处于较高水平.MMPs在第5～7天仍持续性升高,提示患者可能预后不良甚至死亡.预后不良组患者伤后第1、3、5、7天血清MMP-2、MMP-9浓度显著高于相同时间点的预后良好组患者(P＜0.01).统计学分析表明,MMP-9在预后评估中价值高,其次为MMP-2,而NSE预测价值差.结论 血清NSE、MMP-2、MMP-9蛋白参与了急性颅脑损伤的病理生理过程,并可能在继发性脑损伤中起重要作用.其测定对于早期评估重型颅脑损伤的严重程度和预后有重要意义.
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阿托伐他汀减少小胶质细胞MMP-2诱导的胶质瘤侵袭和迁移
目的 研究阿托伐他汀对小胶质细胞促胶质瘤侵袭和迁移作用的影响及对胶质瘤侵袭和迁移的抑制作用.方法 CCK-8法检测梯度浓度阿托伐他汀对原代人小胶质细胞和U87胶质瘤细胞活性影响；胶质瘤条件培养基(GCM)激活小胶质细胞制备小胶质细胞条件培养基(MCM),Transwell细胞迁移实验和肿瘤侵袭实验检测MCM干预下U87侵袭和迁移能力,同时使用阿托伐他汀干预小胶质细胞激活过程,检测U87侵袭和迁移能力改变；明胶酶谱法检测阿托伐他汀干预下U87MMP-2和MMP-9表达,及阿托伐他汀与GCM联合干预下小胶质细胞MMP-2和MMP-9表达.结果 10-5mol/L阿托伐他汀对U87和小胶质细胞活性无明显影响(P＞0.05).U87在MCM中孵化24h,迁移和侵袭细胞数均较对照组增加(P＜0.001).U87在阿托伐他汀MCM中孵化24h,迁移和侵袭细胞数均较MCM组显著减少(P＜0.001).U87在阿托伐他汀中孵化24h,迁移和侵袭细胞数略微低于对照组(P＜0.05).明胶酶谱提示阿托伐他汀干预24h,U87和GCM激活的小胶质细胞MMP-2水平降低(P＜0.001).结论 阿托伐他汀对小胶质细胞MMP-2诱导的胶质瘤侵袭和迁移有强烈抑制作用,同时也能抑制胶质瘤本身的侵袭和迁移.
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TGF-β1、MMP-2、TIMP-2与子宫脱垂发生的相关性
目的:检测盆腔器官脱垂(POP)患者子宫骶韧带组织中转化生长因子-β1 (TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)蛋白的表达;分析TGF-β1、MMP-2、TIMP-2各变量之间的相关性;阐明氧化应激可能是POP的发生发展的诱导因素.方法:Western blot检测POP和非POP正常患者子宫骶韧带组织中TGF-β1、MMP-2、TIMP-2蛋白的表达.分析TGF-β1、MMP-2、TIMP-2各变量之间的相关性.结果:Western blot技术检测结果显示,与非POP正常组相比,POP组子宫骶韧带组织中TGF-β1及TIMP-2蛋白表达水平下降,而MMP-2蛋白表达水平增加,使得MMP-2/TIMP-2比值增大,上述差异有统计学意义(P＜0.01).变量间相关性分析结果:POP组组织中TGF-β1蛋白表达与MMP-2蛋白表达呈负相关,(r=-0.463,P＜0.05),而TGF-β1蛋白表达与TIMP-2蛋白表达之间呈正相关,相关具有统计学意义(r=0.743,P＜0.05);而非POP正常组组织中TGF-β1蛋白表达与MMP-2及TIMP-2蛋白表达均无显著相关性(r=0.183,P＞0.05;r =0.342,P＞0.05).结论:TGF-β1、MMP-2、TIMP-2可能通过机械力诱发的氧化应激反应对盆底组织的刺激作用;而TGF-β1在氧化应激中有保护作用.
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MMP-2,MMP-9和E-cadherin在皮肤恶性黑素瘤中的表达及意义
目的 检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和上皮型钙黏附蛋白(E-cadherin)在皮肤恶性黑素瘤中的表达及在肿瘤侵袭转移过程中的作用.方法 采用免疫组化SP法检测MMP-2、MMP-9和E-eadherin在32例恶性黑素瘤及10例色素痣中的表达.结果 MMP-2与MMP-9在恶性黑素瘤中阳性表达率分别为93.75％和87.50％,均明显高于色素痣,组间差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.01);MMP-2与MMP-9在有淋巴结转移者中阳性表达率均高于无淋巴结转移者(P＜0.05,P＜0.01).E-cadherin在恶性黑素瘤中阳性表达率为21.88％,明显低于色素痣,组间差异有统计学意义(P＜0.01);E-cadherin在有淋巴结转移者中阳性表达率低于无淋巴结转移者(P＜0.05).结论 MMP-2、MMP-9在恶性黑素瘤中均呈高表达,E-cadherin却高表达于色素痣,对它们的检测可能成为预测恶性黑素瘤转移和预后的重要指标.
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人高度近视眼房水中基质金属蛋白酶-2的表达
目的 比较高度近视及正视的白内障患者房水基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达情况.探讨房水中MMP-2与高度近视的相关性.设计实验研究.研究对象 30例年龄相关性白内障患者的房水.方法 白内障手术中收集合并高度近视患者房水15例(实验组)及正视眼患者房水15例(对照组).将房水标本通过蛋白质印迹法检测MMP-2酶原和活化MMP-2的表达.主要指标房水MMP-2的表达灰度值.结果 实验组中MMP-2酶原表达量(430.4±57.3)大于活化MMP-2(294.5±35.2)(t=10.400,P=0.000);对照组中MMP-2酶原表达量(402.8±57.7)大于活化MMP-2(280.3±49.7)(t=8.400,P=0.000).实验组和对照组间比较,MMP-2酶原(t=1.320,P=0.200)及活化MMP-2(t=0.900,P=0.375)表达量差异均无统计学意义.结论 在本样本有限的研究中,未检测到高度近视眼患者房水中MMP-2表达量的异常,房水中MMP-2有少量以活化形式存在,大部分以酶原形式存在,具有应激活化的潜能.
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RECK基因和基质金属蛋白酶-2在成釉细胞瘤的表达及相关性研究
目的 探讨RECK和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达与成釉细胞瘤(AB)临床生物学行为的关系及相关性.方法 应用免疫组化EliVisionTM plus法检测69例AB(原发45例,复发24例)、6例成釉细胞癌和16例牙源性角化囊性瘤(KCOT)中RECK、MMP-2蛋白的表达,同时采用RT-PCR方法 检测22例AB(原发12例,复发10例)、2例成釉细胞癌和16例KCOT中RECK、MMP-2 mRNA的表达水平.所有数据采用SPSS 13.0统计软件包进行统计学分析.结果 RECK蛋白的阳性表达率在KCOT、AB和成釉细胞癌中依次明显降低(P ＜ 0.05),且复发AB显著低于原发AB(P ＜ 0.01);AB和成釉细胞癌的MMP-2蛋白阳性表达率均显著高于KCOT(P ＜ 0.05);RECK 蛋白与MMP-2蛋白在AB中的表达呈负相关(r＝-0.431,P ＜ 0.001).RECK mRNA在AB、KCOT中均见表达,但在AB的表达较KCOT显著降低(P ＜ 0.001),成釉细胞癌中则无表达;MMP-2 mRNA在KCOT、AB和成釉细胞癌中均见表达,但在AB的表达水平较KCOT显著增高(P ＜ 0.001),在成釉细胞癌中均呈高水平表达;复发AB的RECK mRNA表达水平较原发AB显著降低(P ＜ 0.05),但复发与原发AB的MMP-2 mRNA 表达之间差异无统计学意义;RECK mRNA与MMP-2 mRNA在AB中的表达水平无相关性(P ＞ 0.05).结论 RECK表达降低或缺失及MMP-2表达增高与AB的临床生物学行为密切相关.RECK可能通过转录后水平调控MMP-2参与AB的侵润、复发和恶性转化过程.
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MMP-2 mRNA在内毒素致兔急性肺损伤中的作用及美洛昔康的影响
目的 观察内毒素(ET)致兔急性肺损伤(ALI)时肺组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA的表达变化及美洛昔康对兔急性肺损伤干预的机制.方法 将24只大耳白兔随机分为生理盐水对照组(A组)、内毒素致伤组(B组)、内毒素致伤及美洛昔康干预组(C组),每组8只.B组用ET(700μg/kg)一次性静脉注射方法复制兔ALI模型,C组在B组的基础上用美洛昔康(2.5mg/kg)进行干预,观测兔动脉血气、肺组织湿重/干重比(W/D)、肺水含量、肺组织病理学改变、肺组织中MMP-2 mRNA的表达变化.结果 与A组比较,B组氧合指数明显降低,肺组织出现水肿、出血、炎性细胞浸润,W/D比值、肺水含量及肺组织MMP-2 mRNA表达明显增加;C组氧合指数未见明显下降,W/D比值、肺水含量、肺组织中MMP-2 mRNA表达较B组减少,病理改变亦较B组轻.结论在ALI时,MMP-2 mRNA表达上调,美洛昔康可抑制MMP-2 mRNA的表达,在一定程度上对内毒素性ALI产生保护作用.
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高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞MMP-2,TIMP-2,MT1-MMP和CTGF的表达及意义
目的 观察高糖刺激的大鼠肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制物-2(TIMP-2)、膜型基质金属蛋白酶-1 (MT1-MMP)和结缔组织生长因子(CTGF)的动态变化以探讨糖尿病肾病(DN)的发病机制.方法 体外培养的大鼠HBZY-1肾小球系膜细胞分为低糖(5.5mmol/L葡萄糖)组、高糖(30mmol/L葡萄糖)组和渗透压对照(5.5mmol/L葡萄糖+24.5mmol/L甘露醇)组,24、48、72、96h后采用RT-PCR及Western blotting法分别检测MMP-2、TIMP-2、MT1-MMP及CTGF的mRNA及蛋白表达情况,酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清中Ⅳ型胶原的含量.结果 Western blotting结果显示,与低糖组相比,高糖组MMP-2的表达在24h时略有升高,较低糖组增加10％±4％(P＜0.05),至48h时则较低糖组减少42％±2％,其后随时间延长表达持续降低,至96h时较低糖组减少78％±2％; MT1-MMP表达在24h开始下降并随时间呈下降趋势,与低糖组相比较,在刺激的24h,高糖组MT1-MMP表达下降了29％±3％,随后持续下降,至96h则下降了78％±9％(p＜0.01).高糖组各时间点TIMP-2和CTGF表达均较低糖组增高,其中CTGF的表达在高糖刺激的24h即显著增高,为低糖组的201％±24％,随后持续增高,至培养96h为低糖组的484％±51％(P＜0.01); TIMP-2的表达在24h时较低糖组增加55％±3％,且随时间延长呈增高趋势(P＜0.01).MMP-2、TIMP-2、MT1-MMP和CTGF的mRNA表达与相应蛋白的表达趋势基本一致.与低糖组相比,高糖组细胞上清中的Ⅳ型胶原于24h即有增加,且持续增高至96h(P＜0.05).低糖组和渗透压对照组组内、组间的各指标差异均无统计学意义.结论 尽管高糖刺激早期可小幅诱导MMP-2的表达增强,但长期高糖刺激则可抑制MMP-2和MT1-MMP的表达及活化,同时促进系膜细胞TIMP-2和CTGF的表达.DN中肾小球细胞外基质的积聚可能是由于上述细胞因子和蛋白酶引起细胞外基质代谢失衡所致.
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miR-17靶向调控 MMP-2基因对人脑胶质瘤 U87细胞侵袭性的影响
目的：探讨人脑胶质瘤 U87细胞中微小 RNA-17（microRNA-17，miR-17）和基质金属蛋白酶（matriv metal-loproteinase，MMP）-2基因的表达，阐明 miR-17对 MMP-2基因的靶向调控作用以及对 U87细胞侵袭性的影响。方法培养 U87细胞并应用免疫荧光化学技术检测 MMP-2基因的表达；采用生物信息学方法对 miR-17和 MMP-2基因的匹配关系进行预测并应用双荧光素酶报告基因系统鉴定；转染 miR-17模拟物后，行实时 PCR 检测 miR-17和MMP-2基因的表达，Western 印迹检测 MMP-2蛋白的表达，Transwell 小室检测癌细胞体外的侵袭性。结果倒置相差显微镜下可见 U87细胞分布均匀，多样性明显；细胞免疫荧光表明胞质内有 MMP-2蛋白的表达，显示绿色荧光。靶基因预测软件 miRanda 和 TargetScan 显示 miR-17和 MMP-2基因匹配良好，双荧光素酶报告基因系统鉴定发现 miR-17可结合 MMP-2 mRNA 3′UTR 并有效抑制其表达。实时 PCR 和 Western 印迹检测结果均表明 miR-17的过表达可下调 MMP-2基因表达。Transwell 实验表明 miR-17的过表达可抑制 U87细胞的侵袭。结论miR-17通过靶向作用于 MMP-2 mRNA 3′UTR 负性调控人脑胶质瘤 U87细胞中 MMP-2的表达并可抑制其侵袭作用。
关键词： 微小 RNA 基质金属蛋白酶-2 人脑胶质瘤 U87 细胞 -
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