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CA125、p185、M-CSF在卵巢肿瘤诊断中的临床意义
目的:探讨CA125、P185和M-CSF在卵巢癌诊断中的价值.方法:用免疫分析方法检测卵巢癌患者和正常对照组血清中的CA125、P185和M-CSF.结果:卵巢癌组的CA125、p185和M-CSF水平显著高于正常对照组和卵巢囊肿对照组,血清中CA125、p185和M-CSF水平变化无相关性.且在卵巢癌的诊断阳性率上,CA125
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原发性胆囊癌中P185和PTEN的表达及其与临床病理的相关性研究
目的 探讨P185和PTEN蛋白在原发性胆囊癌组织中的表达与癌组织类型、病理分级和转移状况的关系,以及P185与PTEN表达之间的相关性.方法 应用免疫组化方法检测胆囊腺癌52例、胆囊腺瘤20例和慢性胆囊炎20例组织中P185和PTEN表达水平.结果 在胆囊腺癌、胆囊腺瘤和慢性胆囊炎中,P185表达阳性率分别为61.5 %(32/52)、20%(4/20)和0(0/20),PTEN表达阳性率分别为42.3%(22/52)、80.0%(16/20)和100%(20/20),组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).P185高表达和PTEN低表达与胆囊腺癌的分化程度、浆膜浸润和转移密切相关(P<0.05).P185表达与PTEN蛋白表达呈负相关(P<0.05).结论 P185和PTEN表达与胆囊腺癌浸润转移密切相关.检测P185和PTEN蛋白表达可作为判断胆囊腺癌预后的客观指标.
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P185和YKL-40在卵巢癌诊断中的应用分析
P185是癌基因HER-2/neu或c-ethB-2编码的185KD跨膜生长因子受体的糖蛋白,可以释放人血中.血清中可溶性P185蛋白的检测已用于乳腺肿瘤及肝癌的检测[1,2],但对于卵巢癌的检测报道很少.
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表面表位包埋法制备肿瘤表面抗原P185neu/c-erbB-2单克隆抗体及其性质研究
目的:细胞表面表位包埋法(SEM)是一种选择细胞表面特定的表达分子制备单克隆抗体的新途径.由于P185neu/c-erbB-2是乳腺癌及其他肿瘤的一个重要表面标志,这个研究旨在应用SEM法制备特异性好,灵敏度高的P185单克隆抗体并分析其特性以便于临床.方法:采用细胞表面表位包埋法免疫BALB/C小鼠,常规杂交瘤技术进行细胞融合,ELISA法测定,有限稀释法克隆化.结果:筛选得到3株能稳定分泌抗人癌基因erbB-2产物P185蛋白的McAb杂交瘤细胞.经间接免疫过氧化物酶染色和流式细胞术分析证明该McAb特异性与P185阳性细胞膜结合,而不与结构类似的EGFR膜阳性细胞结合.免疫印迹实验证明这些McAb特异地与P185蛋白结合,病理切片免疫组化结果证明该单抗对乳腺癌组织呈特异膜阳性反应.结论:SEM法制备的肿瘤表面抗原P185的McAb杂交瘤具有很好的用于临床诊断肿瘤抗原P185的价值及工程化改造的前景.
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抗人p185单克隆抗体的体外直接抗癌效应
目的:对使用"表面表位包埋法"构建成功的抗人肿瘤抗原p185的单克隆抗体(mAb)的抑癌活性进行研究.方法:采用免疫荧光染色法、MTT法、软琼脂培养法及细胞长期增殖法等,测定3株mAb对高表达p185的乳腺癌细胞及转染p185基因的成纤维细胞的抑制活性,以及mAb对提高癌细胞的化疗药物敏感性的效应.结果:这3株mAb均可特异性地明显抑制癌变细胞的生长,并不同程度上提高癌细胞对化疗药物的敏感性.结论:这几株mAb具有治疗p185高表达肿瘤的应用前景.
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ICAM-1、C-erbB-2蛋白表达产物p185和喉癌相关性研究
目的研究喉癌组织中细胞间粘附因子-1(ICAM-1)、C-erbB-2基因的蛋白产物p185的表达情况及其在肿瘤发展过程中的作用.方法采用免疫组化方法检测ICAM-1、p185在喉癌(52例),喉息肉(10例)及正常人喉粘膜组织(10例)中的表达.结果 ICAM-1、p185在喉癌中阳性表达率为69.2%,51.9%,其阳性表达率在有无淋巴结转移、复发、临床分期、5年生存率等方面差异有显著性(P＜0.05).结论 ICAM-1、p185在喉癌中的表达与肿瘤的自然发展过程有关,同时可作为判断肿瘤恶性程度及预后的有效指标.
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P185基因在喉鳞癌中的表达及其临床意义
目的 探讨P185基因在喉鳞癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用原位杂交方法检测49例喉鳞癌组织、19例声带息肉、12例癌旁增生组织及8例非典型增生组织中P185基因的表达情况.结果 喉鳞癌组织中44例P185基因呈阳性表达,定位于胞浆.在声带息肉、癌旁增生组织及非典型增生组织中P185基因的阳性表达例数分别为0,4,5例,经统计学分析,喉鳞癌组织中P185基因的表达显著高于声带息肉、癌旁增生组织及非典型增生组织(P均＜0.01),与喉鳞癌的临床分型分期,性别无相关性(P均＞0.05).结论 喉鳞癌组织中P185基因呈高表达,提示P185基因可能参与调控了喉鳞癌的发生过程,且与喉癌的临床分期分型无关.
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消痰散结方对胃癌组织中P21ras及P185蛋白表达的影响
目的:探讨消痰散结方对胃癌组织中P21ras及P185蛋白表达的影响.方法:30只BALB/c无胸腺裸鼠,建立人胃腺癌SGC-7901原位移植模型,在模型建立次日随机分为对照组(生理盐水腹腔注射)、化疗组(5-Fu腹腔注射)、中药组(消痰散结方腹腔注射),共给药3周,12周左右脱颈椎处死.应用Envision免疫组织化学方法检测各组胃癌组织中P21ras及P185蛋白的表达情况.结果:P21ras在中药组肿瘤组织细胞膜上的阳性表达率为26.7%,与对照组(52.0%)相比具有显著性差异(P<0.05);化疗组的阳性表达率为27.5%,与对照组比较具有显著性差异(P<0.05);中药组与化疗组相比,差异不显著.P185在中药组肿瘤组织细胞膜上的阳性表达率为31.1%,与对照组(56.0%)相比具有显著性差异(P<0.05);化疗组的阳性表达率为30.0%,与对照组比较具有显著性差异(P<0.05);中药组与化疗组相比,差异不显著.结论:消痰散结方对SGC-7901胃癌组织中P21ras及P185蛋白表达有明显的下调作用,这可能是消痰散结方抑瘤抗转移作用的一个重要环节.
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子宫内膜癌中抑癌基因P27kiPl与癌基因P185的表达及意义
目的:探讨抑癌基因P27kipl蛋白与癌基因P185蛋白联合标记在子宫内膜癌早期诊断中的价值.方法:采用S-P免疫组化方法对2008.1-2010.3月间我院收治的子宫内膜癌患者66例(癌症组),子宫非典型增生病变患者29例(增生组),并设立子宫内膜正常组织31例为对照组织进行检测.结果:癌症组P27kipl表达阳性率低,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05)；而对照组与增生组比较差异无统计学意义(P＞0.05).癌症组P185的表达与增生组比较差异有统计学意义(P＜0.05)；对照组与癌症组及增生组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论:P27kipl蛋白与P185蛋白对肿瘤的发生和调控有重要作用,临床联合检测,对子宫内膜癌的诊断有积极意义.
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子宫内膜癌中抑癌基因P27蛋白与癌基因P185蛋白的表达及临床意义
目的 探讨抑癌基因P27蛋白与癌基因P185蛋白联合标记在子宫内膜癌早期诊断中的价值.方法 采用S-P免疫组化方法对2008年1月至2010年3月间该院收治的子宫内膜癌患者66例(癌症组),子宫非典型增生病变患者29例(增生组),并设立子宫内膜正常组织31例为对照组织进行检测.结果 癌症组P27表达阳性率低,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05)；而对照组与增生组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).癌症组P185的表达与增生组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；对照组与癌症组及增生组比较,差异显著有统计学意义(P＜0.01).结论 该研究表明子宫内膜癌中P185蛋白与P27蛋白表达表达呈负相关,P27蛋白与P185蛋白对肿瘤的发生和调控有重要作用,临床联合检测,对子宫内膜癌的诊断有积极意义.
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抗人P185erbB2单克隆抗体的制备及特性分析
目的制备可特异识别P185erbB2胞外区的单抗,选出亲和力较高并具有抑瘤作用的克隆.方法以高表达erbB2的人乳腺癌细胞系SKBR3免疫BABL/c小鼠,用纯化的重组DNA表达的P185胞外区蛋白作为抗原,以间接ELISA方法筛选阳性克隆.结果获得10株稳定分泌抗P185胞外区单抗的杂交瘤细胞株.4株为IgG1、1株为IgG3、5株为IgM,分别可识别P185胞外区3个不同表位,且只与天然形式的P185胞外区特异结合.其中4株IgG1类抗体可明显抑制SKBR3及SKOV3细胞增殖.免疫组化实验可使SKBR 3及SKOV3细胞膜特异性染色,且可检出乳腺癌、卵巢癌等石蜡切片标本中erbB2高表达的阳性细胞.结论所获单抗可特异识别P185胞外区抗原,具有肿瘤诊断、判断预后及人源化改造后用于治疗的应用潜力.
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125 I标记的抗p185抗体的体外代谢与体内生物学分布
目的: 研究 125I标记的抗p185抗体(鼠mAb A21、人鼠嵌合抗体A21 scFv-Fc及单链抗体A21scFv)在体外的细胞代谢和在体内的生物学分布,为其在诊断和治疗高表达p185肿瘤的临床应用提供依据.方法:通过FACS检测抗体是否与高表达膜表面抗原p185的SKOV3特异结合.采用氯胺T法进行碘标记抗体,用细胞放射免疫分析实验,检测抗体在SKOV3细胞中的代谢.建立荷SKOV3裸鼠模型,以观察抗体的体内生物学分布.结果: 体外细胞代谢实验表明,抗体在与细胞膜表面结合后,进而被内吞入细胞,在细胞内降解和脱碘,后被分泌出细胞外.体内药物代谢实验表明,抗体在动物体内肿瘤部位出现选择性放射性浓聚,而无关抗体未出现放射性浓聚,呈全身分布.结论: mAb A21,A21 scFv-Fc和A21scFv对于高表达p185的卵巢癌在体内和体外都具有亲和力,可望用作高表达p185肿瘤的诊断和治疗.
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免疫PCR检测乳腺癌患者血清p185蛋白抗体
目的 为乳腺癌诊断提供血清学新标志.方法 免疫PCR方法检测血清抗p185蛋白抗体,酶免疫组化方法检测组织p185蛋白表达.结果 乳腺癌患者血清抗p185蛋白抗体阳性率为30%,而非癌患者和正常人血清抗p185蛋白抗体均为阴性,乳腺癌患者血清中抗p185蛋白抗体显著高于非癌患者和正常人(P<0.01).p185蛋白阳性表达的乳腺癌患者抗p185蛋白抗体阳性率为69.2%,明显高于p185蛋白阴性表达组,血清p185抗体测定与p185蛋白表达密切相关(P<0.01).结论 检测血清抗p185蛋白抗体是检测组织p185蛋白理想的替代工具.抗p53蛋白抗体可以作为乳腺癌血清学诊断新标志,用于乳腺癌的普查和早期诊断.
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p185胞外区基因表达载体的构建
目的获得p185胞外区基因并与载体相连接，构建重组质粒。方法从过度表达p185的NIH3T3-erbB2细胞中提取总RNA，以特异性引物逆转录合成cDNA，再通过PCR扩增出目的基因片断，经酶切后与质粒载体组成重组质粒。用此重组质粒转化大肠杆菌XL1-Blue，在含氨苄青霉素的LB培养基上培养，挑取阳性克隆并鉴定。结果得到了带有p185胞外区基因的重组质粒。结论通过逆转录PCR扩增和基因重组到载体pQE40而成功地得到p185胞外区基因表达载体。
