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多管发酵与滤膜法测定桶装水粪大肠菌群比较
粪大肠菌群是总大肠菌群的一部分,是水质污染的生物学指标之一.本文通过多管发酵法与滤膜法两种方法对桶装水中粪大肠菌群进行检测,并对两种方法进行比较和分析,同时,对桶装饮用水的饮用卫生提出建议.
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桶装天然矿泉水铜绿假单胞菌污染原因调查
铜绿假单胞菌属于条件致病菌,其分布极其广泛且含有多种致病因子,对不良环境的适应能力和抵抗能力较强,是重要的水源和食源性致病菌.铜绿假单胞菌污染对人体有害,本文深入分析桶装天然矿泉水铜绿假单胞菌污染产生的原因与检测时的注意事项,并提出防范桶装天然矿泉水铜绿假单胞菌污染的具体措施.
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不同检测方法对粪大肠菌群检测的敏感性探讨
目的 比较酶底物法、多管发酵法和滤膜法对粪大肠菌群检测的敏感性.方法 分别采用多管发酵法、酶底物法和滤膜法对待测水样进行检测,通过精密度试验和结果一致性试验比较三种方法的利弊.结果 精密度试验表明,酶底物法精密度高,滤膜法次之,多管发酵法精密度差.结果一致性试验表明,三种方法对粪大肠菌群的检测一致性较高.结论 对粪大肠菌群检测时,实际操作中可根据水样污染程度、精密度要求、经费等方面对三种检测方法进行权衡.
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前处理方式对滤膜法检测海水中大肠杆菌的影响
目的 了解滤膜法检测海水中大肠杆菌适宜的过滤冲洗液和前处理方式.方法 采用不同灭菌水样基质和过滤前处理方式,进行滤膜法检测海水中大肠杆菌实验.结果 采用生理盐水冲洗滤器的检测效果好；少量生理盐水冲洗滤器内壁的大肠杆菌计数结果高,高于采用量筒量取20-30ml生理盐水1次快速冲洗滤器内壁的大肠杆菌计数结果；实验出现水质样品过滤后,冲洗滤器内壁的大肠杆菌计数结果低于不冲洗滤器的情况.结论 宜选用生理盐水为过滤冲洗液；应注意冲洗液量和冲洗力度的控制；实际检测过滤过程中,建议对滤器内壁冲洗和不冲洗2种方法分别进行,采纳大肠杆菌计数较高的结果报告.
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酶底物培养法在水消毒效果鉴定试验中的应用
目的 研究酶底物培养法在水消毒效果鉴定中的应用,以简化试验操作程序.方法 采用酶底物培养法进行了应用验证试验.结果 MMO-MUG培养基和品红亚硫酸钠琼脂培养基的细菌生长率无显著性差异,MMO-MUG培养基能满足水消毒效果鉴定试验要求.应用验证酶底物培养法和滤膜法确定二氧化氯消毒剂对饮用水消毒低有效剂量均为含量1.0 mg/L作用15 min,两者结果完全一致.结论 酶底物培养法可用于生活饮用水消毒鉴定试验.
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葡萄糖修饰脑靶向紫杉醇脂质体包封率测定方法的比较
目的:建立葡萄糖修饰脑靶向紫杉醇脂质体的包封率测定方法,为该制剂的质量控制提供参考.方法:采用薄膜分散法制备脂质体.采用RP-HPLC测定紫杉醇的含量,流动相甲醇-水(70:30),检测波长228 nm,流速0.8 mL·min-.利用RP-HPLC测定胆固醇的含量,流动相甲醇,检测波长210 nm,流速1 mL· min-.采用凝胶柱色谱法、鱼精蛋白沉淀法、滤膜法、透析法分离脂质体与游离药物,比较4种方法测定包封率的可行性.结果:紫杉醇与胆固醇含量测定方法的专属性、精密度、稳定性和回收率试验均符合测定要求,线性范围分别为0.4 ～ 100,1 ～500 mg·L-1.4种方法紫杉醇与脂质体回收率均介于95％ ～105％,满足脂质体包封率测定的要求;包封率分别为74.68％,92.91％,95.14％,95.08％.结论:鱼精蛋白沉淀法操作简单、快捷,几乎不受脂质体粒径的影响,适用于紫杉醇脂质体包封率的测定.
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二级处理出水中沙门菌的改良多管发酵大可能数定量检测方法
目的 建立二级处理出水中沙门菌的改良多管发酵大可能数(most probable number,MPN)定量检测方法.方法 以某污水处理厂二沉池出水为水样,比较了滤膜法和改进的MPN法对沙门菌定量计数的结果.以滤膜法比较了木糖赖氨酸去氧胆酸盐琼脂(XLD)培养基、Hekton Enteric Agar(HE)培养基、亚硫酸铋琼脂(BS)培养基对水样中沙门菌的选择分离效果.采用改进的MPN法并以PCR法作为后的鉴定手段,考察了四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液、亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液、氯化镁孔雀绿(MM)增菌液在37、42℃培养24、48 h的选择性增菌效果.结果 滤膜法中三种选择性培养基都无法对沙门菌进行准确计数.采用改进的MPN法,选用MM增菌液在42℃培养24 h后的选择性增菌效果好.结论 改进的MPN法不仅具有良好的准确性和灵敏度,而且显著缩短检测时间,提高检测效率,适用于城市污水二级处理出水中沙门菌的监测.
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饮用水中霉菌、酵母菌计数滤膜测定法
目前瓶装纯净水等饮用水的市场很广泛,对其卫生检测已显非常重要,饮用水中霉菌、酵母菌的测定还没有国标方法,通常参照饮料的国标方法检测[1],取样1 mL,检出率低.滤膜法是通过已知孔径大小的滤膜,采用过滤方式,从流体中去除或浓缩颗粒物[2].本文采用滤膜法对饮用水中霉菌、酵母菌进行预浓缩检测,现将结果报告如下:
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生活饮用水中总大肠菌群的两种方法比较
目的 比较多管发酵法和滤膜法在检测生活饮用水中总大肠菌群时的优缺点.方法 本实验参考国标《生活饮用水标准检验方法》(GB/T 5750.12-2006)的检测方法,分别用多管发酵法和滤膜法对103份生活饮用水水样中的总大肠菌群进行检验.并根据国标《生活饮用水卫生标准》(GB 5749-2006)对结果进行分析比较.结果 在103份生活饮用水水样中,用多管发酵法和滤膜法检测合格的水样数分别为99份和98份,合格率分别为96.12％和95.15％,差异无统计学意义(x2=0.116,P＞0.05).结论 两种检验方法对于生活饮用水中总大肠菌群的检验具有一致性,但因其适用范围不同,应根据实际情况选用.
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生活饮用水微生物检验方法和评价标准分析
生活饮用水是社会发展的重大民生问题，国家也对它的卫生标准规范进行过多次修改与调整。利用多种检测方法对生活饮用水中的总大肠菌群进行了检测实验，并对检测方法及检测结果进行了对比与讨论。
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多管发酵法测定大肠菌群中倒管的改进
大肠菌群测定是判断食品、饮用水、环境等是否受到粪便污染以及污染程度、评价其卫生质量的重要指标之一.目前大肠菌群的测定方法有很多,主要有发酵法、滤膜法、纸片法等.而发酵法则为许多实验室普遍采用的传统方法,因其操作简单,结果准确,被列入国家标准检验方法第一法.目前市售的倒管均为开口平整的规则倒管,因其结构不合理增加了检验人员判断结果的难度.作者以改进后的倒管(附图)按国标GB4789.3-94进行测定.经过多次试验,其结果准确,无假阳性,并且产气易于观察、判断.现将结果报告如下.
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检测生活饮用水中总大肠菌群的酶底物法与滤膜法探讨
生活饮用水水质卫生要求生活饮用水中不得含有病原微生物[1],常规检测微生物指标为总大肠菌群、耐热大肠菌群等,这些指标作为检验肠道致病菌的指示菌,是生活饮用水、水源水进行卫生学评价的重要内容.目前检测水中总大肠菌群有3种方法,即多管发酵法(MTF)、滤膜法(MF)、酶底物法[2](enzyme substrate technique).多管发酵法需要3部分,即乳糖发酵试验、分离培养、证实试验,该方法步骤繁琐,实验需要无菌条件下,检测时间长,需2～5d,在实际应用中难以改进,有时会低估水样中总大肠菌群数目甚至漏检[3],制约了其对生活饮用水卫生学状况作出快速评价的应用.因此,采用快速简便、比较灵敏的酶底物法、滤膜法尤为重要,笔者现对这两种方法进行探讨.
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滤膜法测定多西紫杉醇脂质体的包封率
目的 建立多西紫杉醇脂质体包封率测定方法.方法 多西紫杉醇的含量测定采用HPLC,色谱柱为Lichrospher-RP C18柱(150 mm×6.0 mm,5 μm),流相为乙腈-水(60∶40),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为231 nm,柱温为35 ℃.利用0 22 μm微孔滤膜分离脂质体与游离药物,考察滤膜法测定脂质体包封率的可行性.结果 该色谱条件下,多西紫杉醇得到良好分离,辅料不干扰药物的测定,各指标均符合测定要求.0 22 μm微孔滤膜截留作用明显,能有效分离游离药物与载药脂质体.结论 滤膜法简便、快捷,非常适合于多西紫杉醇脂质体的包封率测定.
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水环境中微生物的分析进展
细菌总数和大肠菌群作为水质受到污染指标已经得到广泛运用,已在历史上形成了公共卫生防护的概念,目前饮水中微生物的传统检测方法主要是多管发酵法(MTF)、滤膜法(MF).在制水工业中,实际上需要更加快速、灵敏、特异的方法,在近的研究进展中,有些方法已经是常规和可以广泛接受的技术[1].随着分子生物学和分析化学技术的发展,饮水中微生物的检测技术也日新月异.
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东乡县城污水中耐热大肠菌群的耐药性检测与分析
目的 检测和分析城区污水中耐热大肠菌群对抗生素的耐药性情况.方法 采集东乡县城污水处理厂二沉池中的水样,用滤膜法分离其中的耐热大肠菌群,随机挑取50株用纸片扩散法(Kirby-Bauer法)检测其对15种常用抗生素的耐药性.结果 50株耐热大肠菌群除对亚胺培南全部敏感外,对其余14种抗生素均表现了不同程度的耐药,其中对氨苄西林耐药率高为78％.结论 城区污水环境中耐热大肠菌群对常用抗生素存在一定程度的耐药性.
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滤膜法测定水中粪大肠菌群
粪大肠菌群系指一群需氧或兼性厌氧的G-无芽胞杆菌,在44.5℃培养(24±2)h能发酵乳糖,并产酸产气的一组微生物.2001年颁布实行的<生活饮用水水质卫生规范>将粪大肠菌群的检测列入了常规必检项目.部队平战时,饮用水水源一旦受到人、畜粪便的污染,将导致腹泻等肠道传染病的暴发流行.为此,我们试用滤膜法对我区部分水源水中粪大肠菌群进行了检测.
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水中粪链球菌显色培养基-滤膜法快速检测初步研究
目的:建立一种水中粪链球菌的快速检测方法.方法:在筛选粪链球菌特异性酶和显色底物的基础上设计了一种显色培养基HKCE,同时结合微孔滤膜和高压真空过滤装置,研制了一种便携式快速检测系统,用于城市供水、水源水和饮用水中粪链球菌的快速检测.参考ISO7899-2-2000和sN-T-2007水质检测标准,通过模拟水样和实际水样检测,分析其检测效果.结果:显色培养基HKCE灵敏度和传统的KF链球菌培养基相当,且具有较高特异性,所建立的便携式快速检测系统具有较高的检测效率,可在24~48h内完成水中粪链球菌的检测,特别适用于大批量水样的快速检测.
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三种选择性培养基在滤膜法检测染菌海水中大肠杆菌的效果比较
目的:比较滤膜法使用的三种选择性培养基在染菌海水中检测大肠杆菌的效果.方法:通过染菌海水,使用滤膜法对海水样品进行相应处理后,分别把滤膜放置三种选择性培养基进行培养和菌落计数.结果:滤膜法实验中,mTEC培养基、品红亚硫酸钠培养基和改良品红亚硫酸钠培养基的阳性检出率分别为83％、96％和92％；三种选择性培养基在检测染菌海水样品中,品红亚硫酸钠培养基的回收检出率高,其次是改良品红亚硫酸钠培养基,低是mTEC培养基.结论:品红亚硫酸钠培养基和改良品红亚硫酸钠培养基比mTEC培养基更有利于过滤后大肠杆菌的生长；改良品红亚硫酸钠培养基比mTEC培养基更适合用于海水中大肠杆菌的检测.
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滤膜法与倾注法两种方法检测内镜消毒效果的结果比较
目的 比较滤膜法与倾注法检测内镜的消毒效果.方法 选择某院所有科室的全部内镜,采用滤膜法与倾注法对内镜的消毒效果进行检测和评价.结果 共采集消毒后内镜192条,其中滤膜法与倾注法各检测96条,按消毒后内镜检出菌落数0、1～10、11～20、21～300、＞300 CFU/件进行分组,经秩和检验结果显示,鼻咽镜、支气管镜、胃镜和肠镜倾注法和滤膜法检测内镜消毒后菌落数分布,差异均有统计学意义(均P＜0.05),滤膜法检出的菌落数高于倾注法.倾注法检测内镜消毒效果合格率为91.67％,滤膜法为88.54％,两种方法的合格率比较,差异无统计学意义(x2 =0.53,P=0.630).结论 滤膜法比倾注法更能检出消毒后内镜残留细菌菌落数,值得推广.
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两种剂型二氧化氯消毒剂对水消毒效果的比较
含氯消毒剂能与水中的有机物反应产生三氯甲烷[1～4],而二氧化氯因不会产生三氯甲烷而被广泛应用于水消毒[1],为比较同一厂家生产的二氧化氯(含量分别为4.48%、3.23%)的固态和液态稳定性消毒剂对水消毒效果,在实验室分别用两种剂型二氧化氯活化后的消毒液进行悬液定量杀大肠杆菌试验,并用滤膜法检测其杀灭人工染菌水样中大肠杆菌和天然水样中大肠菌群效果,现将结果报告如下.
