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高效液相色谱—串联质谱法在葡萄中的吡效隆和赤霉素测定中的应用
分析在对葡萄进行吡效隆、赤霉素的测定中,将高效液相色谱—串联质谱法应用所取得的效果,希望能为食品安全的鉴定提供帮助.将样品体积为4︰1的乙腈和浓度为0.5％的甲酸水溶液进行混合,混合后对混合溶剂进行提取,通过SPE小柱进行净化,之后通过AGILENT SB-C18色谱柱分离,其流速为每分钟0.3 mL,后应用高效液相色谱—串联质谱法展开检测.检测结果显示:在良好的检测条件之下,两种化合物的检测范围为2.0～100μg/L,其内线性关系好,(相关系数>0.999).其中,吡效隆检出限为0.5μg/L,定量限为2.0μg/L,回收率为91.9％～95.4％;相对标准差为4.0％～7.2％;而赤霉素检出限为0.3μg/L,定量限为1.0μg/L,回收率为90.5％～94.3％;相对标准差为3.1％～7.0％,达到了检测所需的要求.在对葡萄进行吡效隆、赤霉素的测定之中,高效液相色谱—串联质谱法能够取得较佳的临床检验效果,可应用于食品的检测中.
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赤霉素对雌性大鼠早期生长发育及胰岛素样生长因子表达水平的影响
目的 探讨植物生长调节剂赤霉素对雌性SD大鼠生长发育及胰岛素样生长因子(IGF-1)表达水平的影响.方法 选择刚断乳雌性SD大鼠40只,随机分为4组,即对照组,低、中、高赤霉素剂量组,分别按照0、2、100和200mg/kg赤霉素剂量经口灌胃,连续15天,每天记录身长、体重、阴道开口情况.染毒结束,剖杀受试动物,获得肝脏、卵巢、子宫,计算脏器系数.提取肝组织RNA进行RT-PCR,检测肝内IGF-1、胰岛素样生长因子捆绑蛋白(IGFBP-1)基因的表达水平.结果 各组间大鼠的身长、体重,阴道开口时间,子宫、卵巢的脏器系数差异无显著性(P＞0.05),肝组织内IGF-1、IGFBP-1平均表达水平差异亦无显著性(P＞0.05),但高剂量组部分样本出现IGF-1、IGFBP-1表达强度倒置的现象.高剂量组动物的肝脏系数小于对照组(P＜0.05).结论 在0 ～ 200mg/kg剂量范围赤霉素接触对雌性SD大鼠生长发育、肝脏内IGF-1及其捆绑蛋白的表达影响不明显,但200mg/kg剂量的赤霉素摄入可能对其肝脏产生损伤.
关键词： 赤霉素 生长发育 脏器系数 胰岛素样生长因子 胰岛素样生长因子捆绑蛋白 -
固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法同时测定豆芽中6-苄基腺嘌呤、赤霉素和4-氯苯氧乙酸的残留量
目的 建立固相萃取-超高效液相色谱串联质谱同时测定豆芽中6-苄基腺嘌呤、赤霉素和4-氯苯氧乙酸残留的分析方法.方法 以乙腈提取目标物,HLB固相萃取柱(3 ml/600 mg)净化提取液,以0.1％甲酸水和乙腈为流动相,采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100mm×2.1 mm,1.7 μm)分离,液相色谱串联质谱采用正负离子同时扫描、多反应监测模式测定.结果 3种分析物在0.1 ～ 20μg/L浓度范围内呈线性,线性相关系数(r)＞0.99.方法定量限(LOQ)为0.5μg/kg.方法在3个水平的添加回收率在70.1％ ～93.5％之间,RSD在5.01％ ～9.34％之间.结论 本方法具有快速、灵敏、简便、准确等优点,能满足实际工作需要.
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低温层积及赤霉素处理对太子参种子萌发与幼苗生长的影响
目的:研究赤霉素浓度、赤霉素浸种时间对太子参种子解除休眠及其幼苗生长的影响.方法:考察10个赤霉素浓度、5个赤霉素浸种时间结合低温层积的方法破除太子参种子休眠,测定不同条件下种子的发芽率、发芽势、幼苗株高、主根长、鲜重和干重.结果:500～600 mg·L-1的赤霉素浸种24 h后层积至45 d,发芽率均达80％,其他浓度组之间差异不显著,但均显著高于对照组；600 mg·L-1的赤霉素浸种6h后层积至40 d,发芽率达84.17％,幼苗鲜重和干重显著高于其他浸种时间及对照组,其他浸种时间组之间差异不显著,但均显著高于对照组.结论:500～ 600 mg·L-1的赤霉素浸种6h结合-2～3℃砂藏层积可明显缩短太子参种子打破休眠的时间.
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赤霉素及其合成抑制剂对丹参酮类活性物质含量的影响
目的:研究赤霉素及其合成抑制剂对丹参毛状根中丹参酮类活性物质含量的影响.方法:分别将不同浓度的赤霉素和多效唑加入到丹参毛状根的液体培养基中,培养25 d后对毛状根中的隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮Ⅱ.含量进行测定.结果:赤霉素可以促进丹参毛状根中丹参酮类活性物质的积累,而多效唑则抑制了它们的积累.结论:推测多效唑是丹参毛状根中丹参酮ⅡA等化合物的合成抑制剂,且赤霉素可以作为一种有效的丹参酮类活性成分的诱导子.
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青海暗紫贝母种子休眠解除的初步研究
目的:研究温度、生长素和赤霉素对暗紫贝母形态休眠和生理休眠解除的影响.方法:暗紫贝母形态休眠解除的研究方法为分别用25、50、100、200ppm4个浓度生长素溶液浸泡暗紫贝母种子,在5、15、25℃温度条件下沙埋层积诱导贝母种子形态后熟.用挤压法统计胚率.生理休眠解除方法为分别用浓度为50、150、250、350、450ppm 赤霉素溶液处理胚成熟的贝母种子24h后置于5、10、15、20、25℃温度下进行发芽试验.结果:生长素对暗紫贝母种子胚的成熟有促进作用,200ppm为佳浓度;5、15 ℃时早期原胚都能生长,在25℃条件下原胚基本不生长;处理85d 后,78.5％种子的原胚分化成成熟胚,平均胚率达到74％;200ppm生长素处理、15℃下沙埋层积可使胚的成熟期缩短到60d.赤霉素处理能显著提高成熟种子的发芽率,经250ppm赤霉素处理后的贝母种子发芽率可达80％.在5-25℃之间,经处理后的暗紫贝母种子发芽时间随发芽温度升高而缩短,温度在25℃以上时,发芽时间反而延长.结论:适宜浓度的生长素和赤霉素可促进暗紫贝母种子的形态休眠和生理休眠的解除.生长素和赤霉素的佳浓度分别为200、250ppm.5-25℃范围内,随着温度的升高,暗紫贝母种子发芽的时间会被缩短.
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氟啶酮、赤霉素和发芽温度对巫山淫羊藿种子休眠解除的影响
以经变温层积90d的巫山淫羊藿种子为材料,用不同配比的氟啶酮、赤霉素混合溶液浸种,并转入10/20℃变温和4℃低温中发芽,比较了各处理种子发芽势、发芽率及烂种率,旨在了解氟啶酮、赤霉素、发芽温度对巫山淫羊藿种子休眠解除的影响.结果表明:①赤霉素、氟啶酮、发芽温度可显著影响种子休眠解除效果,其中,氟啶酮效应强,温度其次,赤霉素弱.低温中,10 mg·L-1氟啶酮+300 mg·L-1赤霉素处理发芽率高,为79.3％,20mg· L-1氟啶酮+200 mg·L-1赤霉素处理发芽势高,为52.7％;变温中,20 mg·L-1氟啶酮+ 200 mg·L-1赤霉素处理发芽率、发芽势高,分别为72.0％,56.0％.②巫山淫羊藿种子只能在低温中萌发,不能在变温中萌发,但氟啶酮可使其于变温中萌发;③赤霉素、浸种具有增加烂种率的风险.研究表明,一定浓度配比的氟啶酮、赤霉素混合溶液,能显著提高种子休眠解除率,增加种子发芽速度和成苗率,但是赤霉素也有增加烂种率的风险,实际应用中应合理规避.
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滇龙胆种子萌发特性研究
目的:研究不同温度、不同光照、不同贮藏方式和贮藏时间以及不同赤霉素浓度处理对滇龙胆种子萌发的影响.方法:观测滇龙胆种子在不同处理条件下的发芽率.结果和结论:25℃为种子适宜萌发温度,发芽率可达76.33%.光照对种子萌发影响显著,黑暗条件下种子发芽率极低.在自然条件下,干藏为种子佳贮藏方式,可促进种子后熟作用,保持种子活力,但不能超过6个月.100～1000mg·L-1赤霉素处理可明显缩短滇龙胆种子萌发时间,其中500mg·L-1赤霉素处理可使种子发芽率提高至95.00%.
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层积和赤霉素协同作用对解除滇重楼种子休眠的影响
目的 探讨层积及赤霉素协同作用对滇重楼种子无菌萌发及植株形态发生的影响.方法 采用不同层积处理及赤霉素协同作用的方法对滇重楼种子无菌萌发及植株形态发生的影响,并对培养过程中种子内过氧化物酶和过氧化氢酶活性进行测定.结果 50 mg·L-1赤霉素浸种不能解除滇重楼种子休眠;层积能解除滇重楼种子形态学休眠,但是不能解除种子生理学休眠,种子不能萌发;层积和赤霉素协同作用不仅能解除滇重楼种子形态学休眠,还能解除种子生理休眠,湿沙层积和赤霉素协同作用种子萌发率、胚根长(P＜0.05)显著高于干沙层积和赤霉素协同作用,种子萌发率高达68.67％,胚根长(3.80±0.200) cm;滇重楼种子无菌培养过程中随着休眠被解除,种子内过氧化物酶活性和过氧化氢酶活性与种子的萌动、萌发和生长发育呈正相关.结论 初步探明层积及赤霉素协同作用对滇重楼种子无菌萌发及植株形态发生的影响,建立无菌培养系,为进一步研究无菌条件下滇重楼生长发育、生理生化变化奠定基础.
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赤霉素对球等鞭金藻3011生物量、细胞形态与不同生长时期群体细胞活性的影响
目的 观察赤霉素(gibberellins,GA)的添加量对球等鞭金藻3011(Isochrysis galbana 3011)生物量、细胞形态与不同生长时期群体细胞活性的影响.方法 取处于指数生长期的球等鞭金藻3011藻液,分别添加终浓度为0(溶剂对照)、0.001、0.003、0.005、0.007、0.01、0.03、0.05、0.07、0.1 mg/L的赤霉素溶液,测定球等鞭金藻3011的密度和细胞形态;采用流式细胞技术对指数生长期(第8天)、相对生长下降期(第13天)和静止期(第18天)的球等鞭金藻3011群体细胞活性进行测定.结果 添加0.005 mg/L赤霉素可使球等鞭金藻3011的生物量达到高(1.76×108/ml);且与溶剂对照组比较,球等鞭金藻3011细胞面积增大,亮度提高(P＜0.05或P＜0.01).0.07mg/L赤霉素可使相对生长下降期群体细胞的活性高(99.73%),引起指数生长期延长.结论0.005 mg/L赤霉素可促进球等鞭金藻3011生物量和细胞形态指数的增加;0.07 mg/L赤霉素可提高群体细胞活性,延长了指数生长期.
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单叶蔓荆种子休眠特性研究
目的 研究单叶蔓荆种子休眠的原因及解除休眠的方法.方法 以单叶蔓荆的果实(蔓荆子)为材料,用石蜡切片法研究单叶蔓荆种子形态解剖学特点,通过种子吸胀和抑制物测试研究其休眠原因,采用浓硫酸和赤霉素(GA3)处理打破种子休眠.结果 打破单叶蔓荆种子休眠的方法为GA3处理,解除休眠的佳方法为浓硫酸处理15 min,1.0 mg/mL GA3浸种18h,蛭石培养床30℃恒温培养能够达到发芽率78.7％.结论 蔓荆具有坚硬厚实的果皮,机械束缚是休眠的主要原因;果皮中含有萌发抑制物质,GA3处理可有效解除单叶蔓荆种子的生理休眠.
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不同处理对鱼香草种子萌发的影响
目的 研究鱼香草的种子形态和不同处理对种子萌发的影响,为鱼香草人工栽培种苗培育提供科学依据.方法 测定种子长宽、千粒质量,对种子设置不同温度、不同光质以及不同浓度的赤霉素(GA3)和KNO3浸种处理,观察记录种子发芽数,计算发芽率、发芽指数和活力指数.结果 鱼香草种子椭圆形,长( 1.77±0.01) mm,宽(1.13±0.01 )mm,千粒质量(1 175.5±21.02) mg,吸水量为其风干种子质量的8.8倍；种子发芽适宜温度为30℃；白色光照有利于种子萌发,全黑暗不利于种子萌发:GA3、0.25％ KNO3浸种可显著提高种子发芽率、发芽指数及活力指数.结论 得到鱼香草种子萌发适宜的处理条件,对鱼香草人工栽培种苗培育具有重要指导作用.
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三七种子后熟过程中内源激素的动态变化
目的 通过对三七种子后熟过程中内源激素变化规律的研究,探索内源激素在种胚发育进程和休眠解除中的作用机制,为三七种子的处理和种源保存奠定基础.方法 采用酶联免疫法(ELISA)对三七种子后熟过程中的内源激素赤霉素(GA)、吲哚乙酸(IAA)、玉米索核苷(ZR)和脱落酸(ABA)进行动态测定.结果 三七种子后熟过程中,内源GA、IAA和ZR的量随种胚的发育进程而增加,而ABA的量则减少.结论 激素平衡的变化是解除三七种子休眠、促进萌发的决定因素之一.
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滇重楼种子层积后脱落酸和赤霉素相关基因表达水平的研究
目的 研究脱落酸(ABA)和赤霉素(GA)相关的6个基因(NCED、CYP707A、ABI2、PP2C、GA20ox2、GA20ox3)在滇重楼种子休眠解除过程中的表达特点.方法 分别选取20℃层积和20℃转4℃层积处理后处于不同休眠解除阶段的滇重楼种子为材料,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析不同层积处理后6个基因在胚和胚乳中的表达水平.结果 在滇重楼种子层积过程中CYP707A、NCED、GA20ox2、GA20ox3和ABI2基因在胚和胚乳中表达有差异,而PP2C表达水平无明显变化规律；CYP707A在低温层积后表达水平显著高于高温层积,尤其是在胚中,而NCED、GA20ox2、GA20ox3和ABI2在高温和低温层积后均有较高的表达水平,且在胚中的表达水平高于胚乳中.结论 所筛选出的NCED、CYP707A、ABI2、GA20ox2、GA20ox3基因参与滇重楼种子休眠解除过程,可以作为研究滇重楼种子休眠过程的重要基因.
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植物外源激素对丹参生长和丹参酮类物质积累的影响
目的 研究植物外源激素赤霉素(GA3)和吲哚乙酸(IAA)对丹参生长和丹参酮类物质积累的影响.方法 采用温室石英砂盆栽试验与室内分析相结合的方法.结果 单独施用GA3有利于丹参地上部分生物量的增加,但对地下部分生物量表现一定抑制作用;施用低浓度和高浓度GA3均有利于3种丹参酮(隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA)的累积,施用中等浓度GA3则不利于3种丹参酮的累积.单独施用IAA对丹参地上部分和地下部分生物量的影响呈现先升后降趋势,但统计学差异不显著,且对株高、根长的影响亦不显著;总体来看,施用低质量浓度IAA(0.5 mg/L)有利于丹参根中3种丹参酮的累积,但随着IAA处理浓度增加.仅隐丹参酮量有所增加,而丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA量反而下降.两种激素配施时,低浓度GA3与低浓度IAA组合处理对丹参的生长表现出显著促进作用,并能显著提高丹参根中3种丹参酮的量.结论 施用适量的植物外源激素GA3和IAA能够促进丹参的生长和丹参根中3种丹参酮类物质的积累.
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茉莉酸甲酯对艾纳香活性成分、抗氧化酶活力以及内源激素含量的影响
目的 研究艾纳香植株不同叶位叶片中4种内源激素含量和3种抗氧化酶活性以及L-龙脑的含量与诱导剂的浓度、采样时间之间的规律.方法 以0.01、0.10、1.00、10.00 mmol/L的茉莉酸甲酯(MeJA)作为外源诱导剂,艾纳香不同叶位的叶片(嫩叶、成熟叶、老叶)为实验对象,以生长素(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZT)4种内源激素含量和过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)3种抗氧化酶的活力以及活性成分L-龙脑的含量作为检测指标.结果 1.00 mmol/L的MeJA对L-龙脑的积累效果较好;不同浓度的MeJA诱导下,抗氧化酶的变化比较复杂.对于POD来说,除了10.00 mmol/L MeJA浓度处理下的艾纳香3个叶位的叶片中其含量低于对照外,其他浓度处理下,POD在72 h均显著高于对照(P＜0.05).对于CAT来说,10.00 mmol/L MeJA诱导下,艾纳香3个叶位叶片其含量在24 h时达到高,之后随着时间的推移,CAT活力极速下降.在其他浓度处理下,嫩叶和老叶中的CAT酶活力在72 h,显著低于对照,而在成熟叶中除了0.10 mmol/L MeJA处理,均在72 h时高于对照.对于SOD来说,除了1.00 mmol/L MeJA处理的3个叶位的叶片在48 h之后,SOD含量均高于对照,且与对照组有显著差异(P＜0.05)外,其余浓度处理下的SOD均低于对照.低浓度的MeJA(≤0.10 mmol/L)可以促进艾纳香叶片中的IAA、GA3和ZT的积累,而高浓度的MeJA(≥10.00 mmol/L)促进ABA的积累.结论 艾纳香植株在外源MeJA(1.00 mmol/L)诱导下可以促进活性成分积累,为其栽培生产提供理论依据.
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单性结实的分子研究进展
单性结实是人们获得无籽果实的有效途径之一,刺激性单性结实和单性结实品种的获得是目前行之有效的方法.基因单性结实植株具有可稳定遗传、结实率高、品质高、无畸形果、无籽果实等优势.针对单性结实的相关基因和蛋白进行综述,为转基因工程提供参考依据.
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秦艽种子发芽特性的研究
目的研究秦艽种子的发芽特性.方法用热水浸泡,不同温度,不同浓度赤霉素处理秦艽种子,测定种子贮存条件.结果秦艽种子发芽适温为20 ℃,用500×10-6赤霉素浸种1天,发芽率可达90.1%.低温(0～4 ℃)保存可延长种子寿命,春季解冻后播种出苗整齐健壮.结论秦艽种子属于中温萌发型.
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光、赤霉素和乙烯利对贯叶连翘种子萌发的影响
目的研究光、赤霉素和乙烯利对贯叶连翘Hypericum perforatum种子萌发的影响,为贯叶连翘的人工栽培提供理论依据.方法直接发芽法.结果贯叶连翘种子光下萌发率达79%,而暗中不萌发.赤霉素和乙烯利不仅能促进种子光下萌发,而且能诱导种子暗萌发.但乙烯利处理对幼苗胚根生长有明显的抑制作用.结论贯叶连翘种子为需光种子,其需光性与赤霉素和乙烯利有关.
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赤霉素发酵前体的筛选与发酵工艺优化
为提高藤仓赤霉菌(Gibberella fujikuroi)液体深层发酵生产赤霉素的水平,采用Plackett-Burman法筛选赤霉素合成过程中的8个代谢物,结果显示草酰乙酸、葡萄糖酸钙和维生素B2为影响赤霉素发酵水平的重要因素.通过陡爬坡试验逐步逼近佳产素前体补加量的组成.采用中心组合设计及响应面分析,得到上述3因素的佳补加量:草酰乙酸0.208 6 g/L、葡萄糖酸钙0.048 2 g/L和维生素B2 0.041 0 mg/L.在此条件下,赤霉素摇瓶发酵产量为2 396 mg/L,较添加单一前体(甲羟戊酸)工艺提高了11.6％.
