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灵芝的液体培养
灵芝是一种名贵中药,属担子菌纲、多孔菌目、多孔菌科、灵芝菌属.近年研究表明灵芝含有能提高人体免疫能力、具有抗肿瘤活性的灵芝多糖,所以灵芝具有抗癌、延缓衰老、镇静止痛和护肝等功效[1],且毒性极低[2].灵芝的子实体和菌丝体在药用价值方面相同,目前我国主要从灵芝子实体中提取灵芝多糖,人工栽培子实体生产周期长,生产力低下,而采用液体发酵法,工业化生产灵芝菌丝体和灵芝多糖可缩短生产周期,大大提高灵芝多糖的生产能力.因此,要发展灵芝生产,提高灵芝液体培养的生物学产量有重要意义.为了提高灵芝菌丝体液体发酵的生产能力,为工业化生产灵芝菌丝体及多糖提供经济实用的培养基,我们对灵芝菌丝体液体生长的营养条件进行了研究.
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灵芝水提取物对人免疫细胞及IL-6的调节作用
目的:观察灵芝水提取物对人免疫细胞及细胞因子的调节作用.方法:灵芝水提取物(GL-W)作用于人外周血淋巴细胞(PBL),用MTT法及流式细胞仪技术检测.结果:1.GL-W对经植物凝集素(PHA)活化的和未经PHA活化的人PBL均有促增殖效应,其中经PHA活化的增殖反应显著(P＜0.05),细胞周期检测发现其主要促进细胞进入S期,表明GL-W可促进人PBL的DNA合成.2.选择大促进增殖效应浓度的GL-W对经PHA活化的T细胞亚群进行双标记检测,结果发现,GL-W可导致CD4+细胞比例增加,表现出免疫促进效应.3.GL-W对活化的人PBL具有促诱生IL-6作用.结论:GL-W能增强正常机体的免疫功能.
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多指标评价微乳提取灵芝有效组分的实验研究
目的 探索以微乳为溶剂同时提取灵芝中灵芝三萜和多糖的可行性.方法 以灵芝酸A、灵芝三萜、灵芝多糖及固形物含有量为指标,比较微乳回流、微乳温浸、微乳超声、乙醇回流及水煎煮对于灵芝中灵芝三萜和灵芝多糖的提取效率.结果 用微乳作为溶剂提取灵芝,可同时提取灵芝中的脂溶性三萜组分及水溶性多糖组分,且微乳温浸法及微乳超声法较佳.微乳超声提取液中三萜的含有量相当于乙醇回流液的96.43％,多糖的含有量相当于水煎煮液的77.63％；微乳温浸提取液中三萜的含有量相当于乙醇回流液的80.96％,多糖的含有量相当于水煎煮液的85.36％.结论 微乳可同时提取灵芝中脂溶性和水溶性组分.
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灵芝孢子粉中多糖提取工艺的研究
目的:优化灵芝孢子粉中多糖提取的工艺过程.方法:采用正交试验法,得出不同因素对提取灵芝多糖的影响程度.结果:水提醇沉法提取灵芝多糖的佳工艺条件是提取时间3 h,提取次数4次,提取温度80℃,料液比1:5.结论:此方法可行有效.
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灵芝有效成份的研究概况
灵芝为灵芝科灵芝属(Ganoderma Karst)真菌,我国现有已知灵芝属真菌66种,分布于国内23个省市,主要有灵芝(Ganoderma lucidum)(又名红芝、赤芝),紫芝(G.Japonicum)即中国灵芝,薄盖灵芝(G.Capense),树舌芝(G.Applanatum),云芝(G.Polystictus)等.
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灵芝片对肺癌的临床疗效观察
目的:研究日本产灵芝片对肺癌患者的临床效应.方法:29例主要为Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者随机分组用灵芝片和安慰剂.观察灵芝对肺癌患者免疫调节、血液流变学、临床治疗效果等方面影响.结果:灵芝组血清肿瘤坏死因子(TNF)水平由17.7±4.3升至28.7±6.6 pg/ml,明显提高;对照组血清可溶性白介素-2受体(sIL-2R)水平随病程发展明显增高,而灵芝组保持稳定;灵芝组部分血液流变学指标下降.本临床实验病例不能说明灵芝能直接缩小肺癌病灶,但能够改善患者的全身状况.常规剂量下,未观察到肝、肾功能损害等严重毒副作用.结论:灵芝对肺癌患者有免疫调节和改善血液高凝状态的作用.
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超临界CO2萃取法和醇回流法提取灵芝中三萜类成分的比较
目的:比较超临界CO2流体萃取法(CO2-SFE)和醇回流提取法提取灵芝中三萜类成分的优劣.方法:通过HPLC图谱、RP-HPLC法测定的灵芝酸B含量、可见分光光度法测定的灵芝三萜含量、固形物含量等4个指标综合评价这两种提取方法.结果:超临界CO2流体萃取法和醇回流提取法这两种方法得到的三萜类成分的色谱图具有相似的峰形,灵芝三萜和灵芝酸B含量相近,固形物含量以醇回流法较高.结论:超临界CO2流体萃取法与传统的醇回流提取法提取效果相似,可以取代醇回流提取法提取灵芝子实体中三萜类成分.
关键词： 灵芝 CO2超临界流体萃取法 醇回流提取法 灵芝三萜 灵芝酸B -
灵芝孢子的研究进展
灵芝是担子菌纲多孔菌科(Polyproraceae)灵芝属(Ganoderma)真菌赤芝[Ganoderma lucidium (Leyss.ex Fr.)Karst.]和紫芝[Ganoderma japonicum (Fr.)Lloyd.]的总称,具有扶正固本等功效,被《本经》称为上品.灵芝孢子(Ganoderma lucidium spore)是灵芝生长成熟期从菌盖弹射出来极其细小的孢子,为灵芝的生殖细胞,具有灵芝的全部遗传活性物质,其药用价值也正日益受到重视.本文就灵芝孢子的研究近况作一综述.
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灵芪菌质发酵工艺初报
目的:探讨灵芪菌质发酵的工艺,验证药用真菌新型固体发酵的优越性.方法:将灵芝分别在普通基质、药性基质(含黄芪)、富硒药性基质中发酵,对三种基质中菌质的有效部位多糖的含量进行测定及动态研究,比较其变化.结果:三种基质中菌质有效部位多糖含量及其相对标准差分别为4.65%、1.61%,3.76%、1.99%,4.50%、1.86%;对灵芝和黄芪发酵组合的有效成分多糖、蛋白质及总皂苷进行动态变化研究,发现第28天是发生次生代谢旺盛的时候,确定为发酵终点.结论:灵芝和黄芪发酵组合是可行的.
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口服灵芝茶保健品误诊中华分支睾吸虫病一例
目前,为健康而自服灵芝茶等保健品的老年人为数不少.本例因服用灵芝茶而误诊为肝吸虫病的教训提醒临床检验人员尤其是在基层工作经验不足的临床检验人员应特别注意鉴别虫卵形态.同时告诫人们应慎用保健品,服用保健品后如有不适,应找准原因,及时恰当治疗.
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灵芝的药理作用与临床应用进展
灵芝为多孔菌科真菌赤芝或紫芝的干燥子实体,性平味甘,归心、肺、肝、肾经,能益气血、安心神、健脾胃,主治虚劳、心悸、失眠、头晕、神疲乏力、久咳久喘、冠心病、矽肺、肿瘤等.在我国,灵芝作为药用已有2 000多年的历史,早的药物学专著<神农本草经>将其列为上品收录于书中,并根据颜色不同将芝分为"赤芝、紫芝、黒芝、青芝、白芝、黄芝"六类,而目前我们已知的灵芝约有100余种,为常见的为赤芝,其次为紫芝.
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灵芝真菌免疫调节蛋白在体外对不同胃癌细胞的抑制作用
目的 通过体外试验测定了3种灵芝免疫调节蛋白(FIP-glu、FIP-gat和FIP-SN15)对26株人胃癌细胞抑制增殖的影响.方法 采用M T S比色法检测了3种灵芝免疫调节蛋白对26株胃癌细胞的抑制作用,计算出每种灵芝免疫调节蛋白对不同胃癌细胞50%生长抑制所需的药物浓度值(GI50).结果 灵芝免疫调节蛋白加入72 h后,发现3种真菌免疫调节蛋白分别对7株胃癌细胞株NUGC-3、GTL-16、HGC-27、IM95m、SNU-638、SNU-216和SNU-5表现出较强的抑制作用,其GI50<50μg/ml.只对2株胃癌细胞NUGC-4和OCUM-1没有抑制作用.结论 灵芝免疫调节蛋白在体外对大多数人胃癌细胞株有较强的抑制作用,3种灵芝免疫调节蛋白的作用趋势相同,有进一步开发成抗胃癌药物的潜力.
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芝类提取物改善Walker-256腹水大鼠免疫功能
目的 探讨芝类提取物(GLE)对Walker-256腹水大鼠免疫功能的影响及其机制.方法 根据不同处理方法将60只Wistar大鼠随机分为6组:对照组、模型组、低剂量GLE组、中剂量GLE组、高剂量GLE组和顺铂组,每组10只.采用Walker-256大鼠腹水癌细胞接种法造模后,高、中、低剂量GLE组大鼠分别给予GLE 0.84、1.68、3.36 g/(kg·d)灌胃,每天2次,每次2mL,连续14 d;顺铂组大鼠给予0.004 g/(kg·d)顺铂(溶于生理盐水)腹腔注射,每周1次.对照组(未造模大鼠)和模型组均给予生理盐水灌胃,每天2次,每次2mL,连续14 d.观察各组大鼠的一般情况,测定腹水质量,称量计算大鼠脾、胸腺和肾脏器指数,检测肾功能;流式细胞术检测各组大鼠胸腺和骨髓的细胞周期、外周血T淋巴细胞亚群分布和自然杀伤(NK)细胞数;血清免疫因子蛋白芯片检测对照组、模型组和中剂量GLE组大鼠血清免疫细胞因子的水平.结果 GLE可有效减少大鼠腹水质量(P＜0.05).与对照组相比,模型组和顺铂组均出现胸腺、脾和肾损伤,给予中、高剂量GLE干预后大鼠胸腺指数、肾指数提高,血肌酐和尿素氮值降低(P＜0.05);模型组和顺铂组大鼠胸腺和骨髓细胞发生G0/G1期阻滞,给予GLE干预后G0/G1期阻滞减少、G2/M和S期细胞比例升高(P＜0.05).与模型组相比,给予GLE干预使大鼠外周血中CD4+细胞比例、CD4+/CD8+细胞比值和NK细胞比例均增加,CD8+细胞比例降低(P＜0.05).中剂量GLE组大鼠血清中干扰素γ(IFN-γ)、白介素(IL)-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-10和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达与模型组相比均升高(P＜0.05).结论 GLE可有效减少Walker-256腹水大鼠腹水生成,改善大鼠免疫功能,且与顺铂相比无肾脏损害.
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灵芝锰过氧化物酶毕赤酵母工程菌培养条件的优化
目的 研究毕赤酵母生产重组灵芝锰过氧化物酶(recombinant Ganoderma lucidum manganese peroxidase,rG1MnP)的优培养条件.方法 在单因素实验基础上,采用中心组合设计和响应曲面法对rGlMnP工程酵母产rGlMnP的发酵条件进行优化,探讨初始pH、温度、甲醇浓度和血红素浓度对重组毕赤酵母生产的rGlMnP的酶活力的影响,分析上述4个因子的交互作用及其佳水平范围,并验证模型的有效性.结果 初始pH、温度、甲醇浓度和血红素浓度对毕赤酵母生产rGlMnP的酶活力有显著影响;毕赤酵母生产rGlMnP优的培养条件为:初始pH5.5、诱导温度30℃、甲醇浓度1.5％以及血红素浓度1.0 mmol/L.结论 本研究为利用毕赤酵母工程菌大规模生产rGlMnP奠定了基础.
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灵芝对结核分枝杆菌体外抑菌作用的研究
目的 研究灵芝对结核分枝杆菌的抑菌作用及其抑菌有效成分分析.方法 应用PhaB法检测灵芝水提取物、灵芝总多糖、灵芝总三萜以及4种三萜成分对结核分枝杆菌(mycobacte rium tuberculosis,MTB)标准菌株和2株耐药菌株的抑菌作用.结果 灵芝水提取物对标准菌株和耐药菌株在高浓度时具有明显的抑菌作用;灵芝总多糖对MTB不仅没有抑菌作用,且随着多糖浓度的增加,表现出一定的促菌作用;灵芝总三萜浓度500 μg/ml时,对MTB的标准菌株和耐药菌株表现出明显的抑菌作用;CM119、fj6、Pa59、Sd164 4种三萜成分对标准菌株的MIC值为480 μg/ml,对药多耐菌株的MIC值分别是240～480 μg/ml、240～480 μg/ml、480 μg/ml、240～480 μg/ml.结论 灵芝对MTB具有抑菌作用,有效成分是灵芝三萜酸,不同的三萜成分不仅对敏感菌株有明显的抑菌活性,对多耐药菌株也具有同样的抑菌能力.
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灵芝提取物通过抑制小胶质细胞激活保护多巴胺能神经元
近来的研究表明,神经炎症在帕金森病(Parkinson's disease,PD)的发病过程中起着重要的作用,因此通过抑制神经炎症而保护黑质多巴胺能神经元可能是一种具有潜力的治疗策略.本研究组前期的临床试验表明,灵芝(Ganoderma lucidum,GL)具有潜在的神经保护作用,可能通过抗炎及免疫调节机制发挥其保护作用.本研究在神经元-小胶质细胞共培养的模型中观察了GL的神经保护作用,并探讨其可能的保护机制.小胶质细胞单独或与MES23.5多巴胺能神经细胞共培养,脂多糖(lipopolysaccharide,LPS,0.25 μg/mL)孵育24 h作为阳性对照,试验组分别加入GL提取物(50～400 μg/mL)和,或MPP+处理的MES23.5细胞膜碎片(150 μg/mL);检测小胶质细胞激活情况及其产生的有害因子和MES23.5细胞[3H]DA摄取能力.结果显示,LPS或MPP+损伤的MES23.5膜碎片均可激活小胶质细胞.同时,GL提取物可以显著降低小胶质细胞源性炎症因子和细胞毒性因子(NO、TNF-α、L-1β)的产生,并呈一定的浓度依赖性;并同样可以下调TNF-α和L-1β mRNA水平的表达.此外,GL还可明显对抗由小胶质细胞激活和MPP+介导的多巴胺能神经细胞[3H]DA摄取抑制.以上结果提示,GL主要通过抑制小胶质细胞激活,减少其神经毒性因子的释放而保护多巴胺能神经细胞.GL可能成为治疗PD的潜在药物.
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灵芝牛初乳复合胶囊增强小鼠免疫功能的研究
目的:探讨灵芝牛初乳复合胶囊对小鼠免疫功能的影响.方法:200只雌性ICR小鼠随机分为4组,即低、中、高剂量组和溶剂对照组,分别给予75mg/kg、150mg/kg、450mg/kg的灵芝牛初乳复合胶囊,溶剂对照组给予蒸馏水,连续灌胃30 d后,分别检测以下指标,脏器/体重比值、24 h足跖肿胀度、脾淋巴细胞增殖能力,溶血空斑数、半数溶血值,碳廓清能力、鸡红细胞吞噬率与吞噬指数及NK细胞活性.结果:灵芝牛初乳复合胶囊可增强DNFB引起的小鼠迟发性变态反应和小鼠淋巴细胞增殖能力,提高小鼠B细胞抗体生成和血清溶血素能力,还可增强小鼠NK细胞活性;各剂量组灵芝牛初乳复合胶囊对小鼠体重、免疫器官/体重比值、小鼠碳廓清能力和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力均无明显影响(P＞0.05).结论: 灵芝牛初乳复合胶囊对正常小鼠免疫功能具有明显增强作用.
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灵芝口服液对辐射危害的辅助保护功能研究
目的:研究灵芝口服液的辐射保护功能.方法:以每日2.5、5.0、15.0 ml/kg b.wt./d灵芝口服液灌胃小鼠30 d后,给予一次性全身γ射线照射,观察小鼠辐照后外周血白细胞数、骨髓细胞微核数、血清溶血素值的变化.结果:灵芝口服液能增加辐照后小鼠外周血白细胞总数,降低小鼠的骨髓细胞微核率,增强小鼠产生血清溶血素的能力.结论:灵芝口服液对辐射危害具有辅助保护功能.
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某复合胶囊对移植性肿瘤的抑制作用及其机理
目的:通过肿瘤抑制试验和对几个相关免疫指标的测定,探讨某复合胶囊对移植性肿瘤的抑制作用和可能的机理.方法:小鼠移植性Heps、S180瘤株抑制实验及荷瘤小鼠NK细胞活性测定实验.结果:该胶囊在450、900和2700mg/kg.b.w.剂量下,对皮下移植的Heps及S180瘤株生长均有大于30%的抑瘤率,与阴性对照相比,差异有显著性或极显著性(P＜0.05,P＜0.01).相同剂量下该胶囊对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能有增强作用(P＜0.05),可增加NK细胞活性(P＜0.05),增强小鼠细胞免疫功能(P＜0.05,P＜0.01),增强小鼠的体液免疫功能(P＜0.01).结论:该胶囊能全面提高机体的免疫机能,具有抑瘤作用.
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灵芝对糖尿病大鼠肾组织MMP-2、MMP-9和Ⅳ型胶原表达的影响
目的:观察基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)在糖尿病大鼠肾组织中的表达及灵芝的干预作用.方法:40只雄性SD大鼠随机分为正常时照组(C组)、糖尿病未治疗组(DM组)、糖尿病灵芝(1.2g·k-1·d-1)治疗组(GL组),用免疫组化方法(SP法)检测治疗后各组大鼠肾皮质MMP-2、MMP-9及Ⅳ-C的表达,同时进行光镜、透射电镜观察各组大鼠肾皮质病理改变.结果:DM组大鼠肾小球MMP-2、MMF-9蛋白表达较C组明显降低,Ⅳ-C蛋白表达明显升高,出现糖尿病肾病典型的病理改变.GL组MMP-2、MMP-9蛋白较DM组表达明显升高,Ⅳ-C表达较DM组明显降低,病理改变好转.结论:灵芝通过上调MMP-2、MMF-9蛋白表达,减少细胞外基质Ⅳ-C积聚而对糖尿痛大鼠起到肾脏保护作用.
