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明日叶提取物的安全性评价
明日叶(Angelica keiskei),又称明日草、八丈草,属于伞形科当归属,是一种耐寒的多年生草本植物,原产于日本的太平洋沿岸,主要应用于传统医药和食品[1].近年来发现明日叶中富含具有生物活性的查尔酮、总黄酮和香豆素类化合物,能诱导癌细胞凋亡、抗氧化、抗血栓、抗炎和防糖尿病[2-5].目前,国内外对于明日叶功效的研究较多,而对于其使用安全性评价的研究相对不足.为了全面了解明日叶的使用安全性,本研究进行了急性毒性、遗传毒性和亚慢性毒性试验,以期为临床应用提供科学依据.本实验室依据GB 15193-2003《食品安全性毒理学评价程序和方法》对明日叶进行了急性经口毒性、遗传毒性和亚慢性毒性试验研究,为其安全使用提供一定的毒理学试验数据参考.
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明日叶的化学成分
目的:对明日叶中的化学成分进行研究.方法:利用硅胶柱色谱和葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱色谱进行分离纯化；利用IR,NMR和MS等波谱方法对各化合物进行结构鉴定.结果:从明日叶中分离得到7个化合物,分别鉴定为正二十六烷醇(1),胡萝卜苷(2),豆甾醇(3),槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(4),木犀草素-7-鼠李糖葡萄糖苷(5),木犀草素-7-O-α-D-葡萄糖苷(6)和steviol-13-O-β-glucopyranoside 19-β-glucopyranosyl ester octaacetate(7).结论:以上的7个化合物在明日叶中属首次发现.
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明日叶查尔酮对小鼠H22肝癌MVD水平的影响
目的:研究明日叶查尔嗣(AC)对小鼠H22肝癌微血管密度(MVD)表达水平和癌细胞增殖活性的影响.方法:将50只皮下接种肝癌H22细胞株的小鼠随机分为5组,每组10只.AC低、高剂量组分别每日经口灌胃5mg/kg和50mg/kg AC,恩度(Endostar)组(阳性对照组)给予等量生理盐水灌胃并腹腔注射4mg/kg恩度,空白对照组及肿瘤对照组则分别给予等量的生理盐水灌胃及腹腔注射,连续注射10d后处死小鼠,测定瘤重、体重和抑瘤率,取瘤组织,用免疫组化法检测各组小鼠肝癌组织MVD的表达水平,并用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组小鼠肝癌细胞增殖活性.结果:高剂量AC组与肿瘤对照组肝癌组织MVD计数分别为(4.5±1.286)与(9.9±1.175),差异有统计学意义(P＜0.05);高剂量AC组与肿瘤对照组的肝癌细胞增殖活性吸光度分别为(0.506±0.032)和(1.330±0.089),差异有统计学意义(P＜0.05).结论:AC可降低小鼠H22肝癌MVD表达水平及肿瘤细胞增殖活性水平,对小鼠H22肝癌组织新血管生成具有明显的抑制作用.
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明日叶中查尔酮诱导人胃癌细胞MGC-803凋亡的研究
目的:研究不同查耳酮成分对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用.方法:以人胃癌细胞株MGC-803为研究对象,通过MTT法观察不同时间点明日叶中查尔酮成分对细胞增殖的影响,经Hoechst33258和AO/EB染色,再通过荧光显微镜观察其细胞核形态变化.结果:MTT实验结果显示化合物1.2.6.7.9和10,对人肝癌细胞SMMC-7721均有较强的抑制作用,并且显示出明显的剂量依赖关系.随药物浓度的增加,细胞增殖抑制作用明显加强.结论:明日叶中查耳酮类成分有抑制SMMC-7721细胞增殖的作用.
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明日叶查尔酮对2型糖尿病大鼠肝细胞胰岛素受体与胰岛素受体底物-2mRNA表达的影响
目的 研究明日叶查尔酮(Ashitabe chalcone,AC)对糖尿病大鼠肝细胞胰岛素受体(insulin receptor,InsR)和胰岛素受体底物-2(insulin receptor substrate-2,IRS-2)mRNA表达的影响.方法 将用高脂饲料喂养加链尿佐菌素腹腔注射诱发的2型糖尿病大鼠随机分为糖尿病对照组和高、低剂量AC组,每组10只,均喂饲高脂饲料,分别每日经口灌胃给予明日叶查尔酮的剂量为0、30、10 mg/kg.另设一个正常对照组为正常大鼠喂饲普通饲料,实验周期4 w.用放射免疫分析法检测血清胰岛素水平、逆转录聚合酶链式反应方法检测肝细胞InsR和IRS-2 mRNA表达水平、免疫组化法测肝细胞InsR蛋白表达水平、葡萄糖氧化酶法测血糖含量.结果 与正常对照组比较,糖尿病对照组空腹血糖和血清胰岛素升高,而InsR和IRS-2 mRNA表达水平降低.与糖尿病组比较,高剂量AC组空腹血糖和血清胰岛素降低,而InsR和IRS-2mRNA表达水平升高,各项差异均有显著性意义(P＜ 0.05). 结论 明日叶查尔酮可上调2型糖尿病大鼠肝细胞InsR和IRS-2mRNA表达水平,改善胰岛素抵抗状况.
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查耳酮的化学防癌作用
一、应用碱草中所含查耳酮类进行防癌碱草是一种写作"明日叶"的野生芹科植物,以今日采摘其叶,明日犹能成活而形容其生命力之强韧.折其叶茎即可溢出黄色乳状液,已从中分离出4羟基德里辛(4-hydroxyderricin:4-HD)及黄色当归醇(xantho angelol:XAL)等查耳酮(chalcone),作者研究室分离出名谓明日叶查耳酮(ashitaba chalcone).
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明日叶总黄酮超声提取工艺优化及其DPPH清除能力
目的 优化明日叶总黄酮超声提取工艺,并测定其DPPH清除能力.方法 以提取时间、料液比和甲醇体积分数为影响因素,总黄酮得率为评价指标,在单因素试验基础上,Box-Behnken响应面法优化提取工艺.再测定总黄酮DPPH清除能力.结果 佳条件为提取时间28 min,料液比1:25,甲醇体积分数93％,总黄酮提取量17.28 mg/g,IC50为5.06 μg/mL,其DPPH清除能力明显高于乙醇提取物.结论 该方法可为明日叶总黄酮的提取和应用提供一定科学依据.
关键词： 明日叶 总黄酮 超声提取 Box-Behnken响应面法 DPPH清除能力 -
明日叶中5种成分同时测定和挥发性成分分析
目的 通过HPLC法测定明日叶Angelica keiskei Koidzumi中异补骨脂二氢黄酮、异补骨脂查尔酮、异虎耳草素、北美芹素和花椒毒素的含有量,固相微萃取(SPME)-GC-MS法分析其中挥发性成分.方法 该植物甲醇提取液的HPLC分析采用GL Sciences色谱柱(5μm,4.6 mm ×250 mm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;检测波长314 nm;体积流量1.0 mL/min;柱温28℃.GC-MS分析采用Agilent 19091S-433:93.92873 HP-5MS 5％ Phenyl Methyl silox-60℃-325℃(325℃)色谱柱(30 m×250 μm ×0.25 μm);柱温50℃;进样口温度250℃;载气体积流量1.0 mL/min;扫描范围15 ～500 amu.结果 5种成分在各自线性范围内线性关系良好(r≥0.997 2),平均加样回收率为97.78％～102.25％ (RSD＜2.25％).明日叶中有11种挥发性成分,9种是萜烯类,总相对含有量达96.45％.结论 该方法准确可靠,可为明日叶的质量控制提供参考.
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药食兼用植物明日叶的研究进展及应用
明日叶作为一种具有多种生理活性和药用价值的药食兼用蔬菜,有很大的开发潜力.本文综述了明日叶中主要活性成分的化学结构及生理活性的新研究进展,着重讨论了查尔酮类化合物的提取方法及生理功效,并简要介绍近年已开发的明日叶相关产品.
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明日叶化学成分研究
目的:研究明日叶的化学成分.方法:运用多种色谱技术分离纯化化合物,采用波谱技术和理化性质确定化合物的结构.结果:从明日叶中分离得到14个化合物,分别鉴定为:镰叶芹二醇(1)、丝立尼亭(2)、异补骨脂查尔酮(3)、北美芹素(4)、山柰酚-5-O-(6"-O-乙酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、乙酰-β-香树醇(6)、β-谷甾醇葡萄糖苷-6'-O-十七烷酸酯(7)、2,5-dimethyl-6,8-dihydroxyl-chromone(8)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖-3'-α-L-鼠李糖苷(9)、2-hydroxynaringenin-4'-O-glucopyranoside (10)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)β-D-吡喃葡萄糖酯苷(11)、金圣草黄素(12)、荭草苷(13)、1β,6α-dihydroxyeudesm-4(15)-ene (14).结论:以上化合物均为首次从该植物中分离得到.
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明日叶保健茶的毒性及致突变和致畸性
目的:评估明日叶保健茶的毒性及致突变性和致畸性.方法:采用急性毒性试验、Ames试验、微核试验、小鼠精子畸形试验、骨髓细胞染色体畸变试验、30d喂养试验和传统致畸试验等.结果:急性毒性试验为实际无毒级;致突变试验为阴性;在30d喂养试验中,未见引起大鼠的整体健康状况、生理生化功能和器官组织形态学各重要指标的异常变化;在传统致畸试验中未见发育毒性.结论:"明日叶保健茶"在推荐剂量[3g/(d@人)]下,食用是安全的.
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明日叶的研究进展
对明日叶的化学成分、活性成分提取方法、药理作用及应用等方面进行综述.明日叶化学成分主要为黄酮类、香豆素类、萜烯类等,活性成分的提取方法有超声提取法、微波提取法,其具有降血糖、降血脂、抗菌、增强免疫力、抗癌和治疗糖尿病等药理作用,在食品饮料及保健品的领域中应用范围广泛.具有进一步研究与开发利用价值.
