1-溴丙烷短期暴露对大鼠生殖系统的影响及其生物标志物的探讨

目的 1-溴丙烷(1-bromopropane,1-BP)作为氟利昂类替代溶剂,用于金属,精密仪器,光学仪器和电子元件的清洗,以及作为粘合剂的溶剂.研究发现:1-BP暴露损害神经系统并引起大鼠脑组织中γ-烯醇酶的降低.为了了解1-BP短期暴露对生殖系统的影响,我们进行了雄性大鼠的1-BP短期吸入暴露实验.同时,测定睾丸和附睾的一些蛋白指标并探讨其作为1-BP生殖毒性生物标志物的可能性.

念珠菌病免疫学检测

系由念珠菌(以白念珠菌为主)所致急性、亚急性或慢性真菌病，可侵犯皮肤、粘膜、指甲等表浅组织，也可经血行播散至各脏器引起深部感染，但后者的致病菌较难以培养法检出而常藉免疫测定来确诊。本菌一旦入侵内脏，常致严重后果，血型播散所致侵袭型的病情尤为闪险而常致死亡后果。与新生隐球菌病相似以检测患者特异抗原(念珠菌特异抗原及其代谢物如甘露聚糖、烯醇酶、HSP-90抗原等)阳性率为高，如患者免疫功能正常也可测定其特异抗体。

寄生虫烯醇酶的功能研究进展

烯醇酶不仅是糖酵解的关键酶,还具有其他多种功能,不仅存在于细胞质中,还在细胞膜、细胞核中存在.它在真核细胞和原核细胞表面具有纤溶酶原受体的功能.参与病原体与宿主纤溶酶原的结合,与病原体对宿主的侵袭和感染有关,是一个潜在的保护性抗原;它在细胞核内参与了基因转录的凋榨过程,具备热激蛋白(heat shock protein)的功能.该文着重对烯醇酶在寄生虫感染宿主、寄生虫与宿主相互作用的研究进展作简要综述,介绍烯醇酶在一系列生物学和疾病过程中结构与功能的相互关系.

两种刚地弓形虫复制相关的期特异性烯醇酶同工酶的胞核定位

新生儿缺氧缺血性脑病神经元特异性烯醇酶的测定及临床意义

新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)的发病率和病死率仍较高,部分存活的患儿可智力下降或遗留严重神经系统后遗症.早期确定HIE所致的缺氧缺血性脑损伤的程度,对判断患儿的远期预后有重要价值,并能针对性地进行早期积极干预.为探讨HIE患儿神经元特异性烯醇酶(NSE)水平的变化及临床意义,1998年8月～1999年12月对本院住院的40例HIE患儿血清NSE含量进行测定,现报告如下.

细粒棘球绦虫烯醇酶(EgEnolase)基因的克隆和序列分析

目的 细粒棘球绦虫烯醇酶基因(EgEnolase)的克隆和所编码的蛋白质的结构、功能以及应用前景分析.方法 利用美国国家生物技术信息中心(NCBI,http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)的在线分析工具BLASTx和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPaSy.http://ca.expasy.org/),以及CBS Prediction Servers提供的蛋白序列在线分析工具,结合Vector NTI suite生物信息学分析软件,从GenBank中细粒棘球绦虫的表达序列标签(EST)数据库中发现烯醇酶的5'端和3'端的EST序列,根据预测的编码区两端序列设计引物,从细粒棘球绦虫青海绵羊分离株中用多聚酶链式反应(PCR)方法扩增其基凶组序列,PCR产物克隆到T载体,测序并分析序列中的内含子,以内含子两侧序列的合并序列为引物.采用不对称PCR方法去除其中的内含子序列,预测编码蛋白的结构和功能特征,并分析其应用前景.结果 细粒棘球绦虫青海绵羊株烯醇酶基因的基因组序列长为1 449 bp,含有两个长度分别为78 bp和69 bp的小内含子.该基因编码433个氨基酸;预测其氨基酸序列中含有一段跨膜区(aa104-124),N端在膜外,C端在膜内,恰好分为两个不同的功能域,膜内区是执行酶催化功能的主体,Swiss-Model模建的3D结构显示,膜内区由α螺旋和β折叠相间排列形成桶样结构,底物结合位点、催化中心、Mg2+结合位点等关键位点在空间上紧密靠近,位于桶形结构的中心.该蛋白还有一个潜在的核定位序列aa190-199 .该蛋白含有多个T、B细胞表位,且膜外的aa49-57.和膜内的aa228-236兼性的T、B细胞表位,线性B细胞表位aa206-213中包含了催化位点Glu210.结论 细粒棘球绦虫烯醇酶可能是一个位于虫体皮层表膜具有较好的免疫诊断和疫苗应用前景的膜蛋白,同时还可能进入细胞核调节基因表达.

亚洲带绦虫烯醇酶基因及其蛋白质的结构与功能

[目的]分析和预测亚洲带绦虫烯醇酶基因及其编码蛋白的结构和特性,用于指导其生物学功能的实验研究.[方法]利用美国国家生物技术信息中心和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统中有关基因和蛋白的序列和结构信息分析的各种工具,结合其他生物信息学分析软件包,如Pegene和Vector NTIsuite,从亚洲带绦虫全长eDNA质粒文库中识别烯醇酶基凶及其编码区,分析、预测该基因编码的蛋白质的理化特性、翻译后的修饰位点、功能域、亚细胞定位、拓扑结构、二级结构、三维空间构象等.[结果]该基因全长1737 bp,编码区为第205～1503 bp,编码433个氨基酸,为全长基因.CenBank中与棘口吸虫烯醇酶氨基酸序列同源性高,达78%.相对分子量理论预测值为46653.5 Ku.没有质体、线粒体定位序列.预测编码蛋白有1个跨膜区,3个亲水性部位.与吸虫属的烯醇酶进化关系近.[结论]应用生物信息方法从亚洲带绦虫成虫eDNA文库中筛选出了亚洲带绦虫烯醇酶eDNA全长序列并预测得到其结构与功能方面信息.

镁对局灶脑缺血神经保护作用的实验研究

目的：观察MgSO4、Mg2＋-ATP对局灶脑缺血的治疗作用。方法：线栓法制备SD大鼠可逆性右侧大脑中动脉缺血模型(MCAO)，缺血2h后再灌流，72小时后处死大鼠。观察神经功能缺损评分，用图象分析技术测定脑梗死体积(比)、脑水肿体积(比)；并原位标记DNA片断，检测TUNEL法染色阳性细胞数；测定血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平；动态观察血清镁和血糖浓度。结果：MgSO4组、Mg2＋-ATP组较对照组再灌注后2小时神经功能缺损评分无差异，而72小时评分有显著差异(P＜0.001)，且脑梗死体积(比)、脑水肿体积(比)、TUNEL阳性细胞数，血清NSE水平均低于对照组(P＜0.05)；但MgSO4组、Mg2＋-ATP组两组之间各项指标无显著性差异(P＜0.05)。结论：镁能减轻局灶脑缺血后脑损伤，这种保护作用可能与镁减少迟发性神经元损伤有关；Mg2＋-ATP未能加强镁的作用。

猪带绦虫成虫烯醇酶基因的生物信息学分析

目的 分析猪带绦虫成虫烯醇酶(enolase,Ts ENO)基因结构并预测其编码蛋白的结构和功能.方法 利用生物信息网站如美国国家生物技术信息中心(NCBI)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPASY)中生物信息学分析工具,并结合其它分析软件,从获得猪带绦虫成虫全长cDNA质粒文库的表达序列标签(expression sequence tag,EST)中识别Ts ENO基因,分析该基因的结构并预测其编码的蛋白质的结构和功能特征.结果 该基因与亚洲带绦虫烯醇酶基因的一致性为98%,相似性为99%;全长1725bp.编码区为202～1162bp,编码320个氨基酸,为全长基因.无各种亚细胞定位序列,预测该蛋白为跨膜蛋白,与吸虫属的进化关系较近.结论 从猪带绦虫成虫cDNA文库中筛选出烯醇酶基因,预测为跨膜蛋白,可能具有较好的免疫诊断抗原应用前景.