来氟米特对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化模型的影响/利用蛋白质组学技术研究Z24对大鼠给药肝脏蛋白质表达的改变/氯化钆保护细菌脂多糖引发肝脏损伤及其可能机制

银杏叶提取物对肺纤维化模型大鼠肺组织MMP-2mRNA表达的影响

目的 观察银杏叶提取物对肺纤维化大鼠不同时间点肺组织MMP-2mRNA表达的影响.方法 96只健康Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、强的松组(C组)和银杏叶提取物干预组(D组),每组各24只,除A组外,其余各组采用博莱霉素复制大鼠肺纤维化模型.造模第2天起,D组用银杏叶提取物灌胃,C组用醋酸强的松混悬液灌胃,A、B组用生理盐水灌胃.每组分别于造模后第7、14、28天随机取8只大鼠,处死后采集肺组织,抽提RNA,采用RT-PCR法得到MMP-2mRNA产物,用琼脂糖凝胶电泳和图像分析方法观察MMP-2 mRNA的表达.结果 各实验组在各时间点均有MMP-2mRNA的表达,与A组相比,B组第7天含量显著升高(P＜0.01),第14天时达到高峰,第28天虽较第7、14天时有所降低,但仍明显高于同期A组(P＜0.01).与B组比较,C、D组各时间点含量均明显降低(P＜0.01).结论 造模后各组MMP-2mRNA表达增强,银杏叶提取物能够有效抑制MMP-2mRNA的过度表达,从而对肺损伤和肺纤维化起到一定的防治作用.

银杏叶提取物对肺纤维化大鼠模型肺组织MMP-9及TIMP-1表达的影响

目的 观察银杏叶提取物对肺纤维化大鼠模型肺组织基质金属蛋白酶-9( MMP-9)及其组织抑制物-1 (TIMP-1)表达的影响.方法 将96只健康Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、强的松组和银杏叶提取物干预组,每组各24只,除正常对照组外,其余各组采用博莱霉素复制大鼠肺纤维化模型,造模第2天起,银杏叶提取物干预组用银杏叶提取物灌胃,强的松组用强的松混悬液灌胃,其余2组用生理盐水灌胃.每组分别于造模后第7、14、28天随机取8只大鼠,采集肺组织,采用免疫组织化学分析法分别检测MMP-9和TIMP-1的表达及含量.结果 与模型对照组比较,强的松组、银杏叶提取物组大鼠第7、14、28天时肺组织MMP-9及TIMP-1表达减少.结论 银杏叶提取物对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化不同时间点肺组织中MMP-9及TIMP-1的表达均有一定程度的降低作用,有可能通过调整MMP-9及TIMP-1的相对平衡关系,对肺纤维化起到一定的防治作用.

黄芪甲苷对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的干预作用

目的 探讨黄芪甲苷对肺纤维化(PF)小鼠肺组织氧化应激损伤的保护作用.方法 120只C57BL/6J小鼠采用气管内穿刺注入博莱霉素(BLM)法建立PF小鼠模型,随机分为假手术组、模型组、N-乙酰半胱氨酸组[250 mg/(kg·d)],以及黄芪甲苷高[100 mg/(kg·d)]、中[50 mg/(kg·d)]、低[25 mg/(kg·d)]剂量组,每组20只,分别给予相应药物灌胃,假手术组与模型组予等量生理盐水灌胃,连续21天.于造模后第3、7、14和21天处死动物,观察各组肺组织病理学变化,检测肺组织羟脯氨酸(HYP)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量及支气管肺泡灌洗液(BALF)中转化生长因子(TGF-β1)的水平.结果 与假手术组比较,模型组小鼠术后不同时间点体重明显下降,肺泡炎分级和肺纤维化程度均明显增加,肺组织HYP、MDA含量明显增加(P＜0.05),GSH含量明显降低(P＜0.05),且随术后时间延长不断增加,而BALF中TGF-β1含量也明显高于假手术组(P＜0.05).与模型组比较,黄芪甲苷各组与N-乙酰半胱氨酸组的肺泡炎分级和肺纤维化程度均明显减轻,肺组织HYP、MDA含量和BALF中TGF-β1均降低,GSH含量明显增加(P＜0.05).黄芪甲苷高剂量组上述各指标与N-乙酰半胱氨酸组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 高剂量黄芪甲苷能明显抑制BLM诱导的小鼠氧化应激状态,延缓PF进程.

肺纤方对博莱霉素致肺间质纤维化大鼠整体状态的影响

目的:观察肺纤方(Feixian Formula)对博来霉素致肺间质纤维化大鼠生存状态的影响.方法:85只雄性Wistar大鼠经气管插管灌注博莱霉素(1mg/kg体质量)复制大鼠肺间质纤维化模型,随机分入模型组29只,泼尼松组28只、肺纤方组28只;15只雄性Wistar大鼠经气管插管灌注等体积生理盐水作为假手术组.造模后24时开始常规每日一次灌胃给药,泼尼松组给予醋酸泼尼松5mg/kg体质量,肺纤方组给予肺纤方颗粒1.25g/kg体质量(相当于生药4.475g/kg体质量),模型组和假手术组给予等体积生理盐水.实验全程观察大鼠生活状态如活泼程度、毛发、饮水量、进食量的变化,有无出血、腹泻、死亡、有无其它异常情况;同时监测大鼠体质量变化.结果:实验全过程中,肺纤方组和假手术组没有死亡大鼠,模型组死亡4只大鼠,泼尼松组死亡2只,P=0.1304;大鼠体质量变化显示模型组体质量增长更快,从第21天开始,模型组大鼠体质量与假手术组比较没有统计学意义,P＞0.05;综合评价认为肺纤方组大鼠的整体状态好于模型组和泼尼松组.结论:肺纤方能够改善大鼠的整体状态.

丹参酮对肺纤维化大鼠的干预作用及其机制研究

目的：观察丹参酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化的影响及其作用机制。方法：SD 大鼠随机分为5组：空白对照组、模型组、地塞米松阳性对照组、丹参酮组、丹参酮加地塞米松组。大鼠气管内注射博莱霉素复制肺纤维化模型后，各给药组腹腔注射相应药物，给药1次／d。28 d 后处死动物，取固定部位肺组织分别行 HE、Masson 染色及电镜进行病理组织学检查；RT-PCR 法检测丹参酮对大鼠肺组织中 uPA、PAI-1 mRNA 表达的影响。结果：与模型组相比，丹参酮组大鼠肺泡炎和肺纤维化程度明显减轻（P ＜0.05，0.01）；uPA 显著升高而 PAI-1表达明显降低（P ＜0.05，0.01）；在与地塞米松联合时以上作用更加明显。结论：丹参酮对博莱霉素所致大鼠肺纤维化具有一定的治疗作用且与地塞米松有协同作用，其机制可能与抑制炎性反应细胞的浸润活化、细胞外基质沉积及调控 UPA 及 PAI-1之间平衡有关。

蜂毒素抑制博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的机制研究

目的:观察蜂毒素对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的干预作用.方法:70只SPF级C57BL/6小鼠被随机分为正常组10只和模型组、地塞米松组、蜂毒素低剂量组、蜂毒素中剂量组、蜂毒素高剂量组各12只.除正常组外,均采用气管穿刺注入博莱霉素(BLM)制备肺纤维化小鼠模型.从术后第1天开始,地塞米松组按3 mg/kg的剂量腹腔注射,蜂毒素低、中、高剂量组分别给予5μg/(kg·d)、10μg/(kg·d)、20μg/(kg·d),对照组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续2周.分别于第7、第14天处死动物,收集小鼠外周血样本,通过ELISA方法检测血清转化生长因子(TGF-β1)、胶原蛋白I(CollagenI)、胶原蛋白III(CollagenIII)、基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的水平.取肺组织进行苏木精-伊红(HE)分析,Masson染色和羟脯氨酸(HYP)评估以观察组织病理学变化和胶原沉积.采用实时荧光定量(Real-ime PCR)法和蛋白兔疫印迹法(Western blot)观察各组大鼠肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3等蛋白和基因的表达变化.结果:与对照组比较,模型组大鼠肺纤维化明显,HYP、TGF-β1、CollagenI、CollagenI的含量升高(P<0.05),肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白和基因表达升高(P<0.05);与模型组比较,蜂毒素中高剂量组血清HYP、TGF-β1、CollagenI、CollagenI的含量下降(P<0.05),肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白和基因表达降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论:蜂毒素可以减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化的程度,其机制可能与抑制TGF-β1/Smads通路有关.

右归饮对肺纤维化大鼠的疗效评价及作用机制

目的:探讨温补肾阳的代表方剂右归饮对博莱霉素致肺纤维化大鼠的药效作用和相关机制.方法:SPF级雄性SD大鼠25只,采用随机数字法,将SD大鼠分为正常组、模型组、右归饮高、中、低剂量组,每组各5只.气管内注射博莱霉素(5 mg·kg-1)建立实验性肺纤维化模型,并于造模后第15天开始灌胃高、中、低剂量(20,10,5 g·kg-1)右归饮,连续给14 d.用动物肺功能仪检测大鼠吸气阻力(Ri),呼气阻力(Re),肺顺应性(Cdyn),用力肺活量(FVC),0.4s率(FEV04/FVC％),呼气峰值流速(PEF),大呼气中期流速(MMF),计算质量FVC;称量脏器质量和大鼠体质量,计算脏器系数;用血气分析仪检测腹主动脉酸碱度(pH),氧分压(PO2),二氧化碳分压(PCO2),氧饱和度(SO2);用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中肾素,前列腺素E2(PGE2),基质金属蛋白酶-1(MMP-1)含量;取左肺进行马松(Masson)染色观察肺组织的病理变化.结果:与正常组比较,气管内注射5 mg·kg-1博莱霉素能够明显增加SD大鼠肺脏质量和肺脏系数(P＜0.05),降低Cydn,FVC和质量FVC(P ＜0.05),增加Ri(P＜0.05),升高FEV04/FVC％(P＜0.05),升高腹主动脉血中PCO2水平(P＜0.05),明显降低PO2,SO2水平(P＜0.05),升高血清中PGE2水平(P＜0.05),病理显示模型大鼠肺组织形成大量实变区,发生实变的肺组织以细胞异常增殖为主的非纤维化区和伴有大量细胞外基质沉积的纤维化区为主.与模型组相比,右归饮中剂量组肺脏质量明显回落(P＜0.05),Cydn,FVC和质量FVC回升(P＜0.05),Ri,FEV0.4/FVC％下降(P＜0.05),血清中PGE2水平下降(P＜0.05);右归饮高剂量组能够明显升高动脉血中PO2,SO2水平(P＜0.05).病理显示右归饮中剂量组能够抑制肺组织实变区向非实变区的炎性浸润.结论:右归饮能够改善实验性肺纤维化SD大鼠的肺功能,与右归饮降低血清中PGE2水平,抑制炎性浸润区的扩散,延缓纤维化进程有关.

灯盏生脉胶囊对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的干预作用

目的:研究灯盏生脉胶囊对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的干预作用.方法:将40只C57BL/6雌性小鼠随机分为盐水对照组(NS)、模型组(Model)、灯盏生脉组(DZSM)和N-乙酰半胱氨酸阳性对照组(N-AC),NS组气管滴注0.1 mL生理盐水,其余3组按5 mg·kg-1剂量滴注博莱霉素溶液复制肺纤维化模型,以后每天分别给予生理盐水、灯盏生脉溶液(222mg· kg-1·d-1)、N-乙酰半胱氨酸溶液(489.6 mg·kg-1)ig治疗,连续给药21 d.实验过程中隔天记录小鼠的生存状态及体重变化,在完成给药后观察肺顺应性和肺阻力的改变状况.留取肺泡灌洗液检测细胞转化生长因子-β(TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)含量,观察博莱霉素引起的肺炎症改变；留取肺组织,测定肺组织中羟脯氨酸含量,并分别行HE染色和Masson's染色,观察肺组织的炎症变化和纤维化程度.结果:给予博莱霉素后,各组小鼠体重显著下降,进食减少,肺阻力升高(P＜0.05),肺泡灌洗液中TGF-β,TNF-α,IL-1β含量显著升高(P＜0.05)；灯盏生脉胶囊干预组小鼠体重下降减缓,肺阻力显著下降(P＜0.05),肺泡灌洗液中TGF-β,TNF-α,IL-1β含量明显降低(P＜0.05)；肺组织的病理切片显示肺部炎症及肺纤维化程度均有不同程度的减轻.结论:灯盏生脉胶囊能改善博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠的虚弱状态,增强小鼠肺顺应性,降低肺阻力,抑制小鼠的肺组织炎症反应,减轻肺纤维化程度.

艾灸"肺俞""膏肓"对BLMA5诱导大鼠肺纤维化的影响

目的:研究艾灸"肺俞""膏肓"对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的阻抑作用,为针灸介入肺纤维化防治提供实验依据.方法:实验用SD大鼠分为4组:对照组、模型组、艾灸组、泼尼松组.对照组气管内注入生理盐水,其余3组气管内注入博莱霉素制作大鼠肺纤维化模型.测定分析各组治疗后第7、14、28 d肺组织病理学变化以及比较各组第28 d肺系数.结果:艾灸组及泼尼松组肺系数明显减少(P<0.01),肺组织病理学显示肺泡炎及肺纤维化程度均明显减轻.结论:艾灸"肺俞""膏肓"对肺间质纤维化具有一定的防治作用.

当归对肺间质纤维化大鼠的保护作用

目的:观察当归对博莱霉素(Bleomycin,BLM)致大鼠肺间质纤维化模型的保护作用,并与氢化可的松相比较,探讨其作用机制.方法:72只大鼠随机分为盐水对照组、模型组、当归组、氢化可的松组.按BLM 5mg*kg-1体重复制大鼠肺间质纤维化模型,24h后给药,以上动物于7、14、28d处死后观察肺间质纤维化形成的病理变化,并进行细胞外基质透明质酸及胶原的检测.结果:当归治疗后肺泡炎和肺纤维化明显减轻,与模型组比较,透明质酸及胶原含量明显降低(P<0.01),与激素相比疗效相近.结论:当归能减慢肺间质纤维化的进程,对肺间质纤维化有保护作用.

复方鳖甲方对博莱霉素致大鼠肺纤维化的防治作用

目的:探讨复方鳖甲方对气管内一次性注入博莱霉素(BLM)诱发大鼠肺纤维化的防治作用及作用机理.方法:SD大鼠气管内一次性注入BLM,复制肺纤维化模型,对照组注入生理盐水.中药大、中、小剂量组于造模后第1天灌胃方式给予复方鳖甲方,各组于造模后第7,14,28天腹主动脉抽血4 mL,进行动脉血气分析.左肺行组织固定,右肺支气管肺泡灌洗,膜天平法进行肺泡灌洗液表面物质(PS)活性测定.灌洗后右肺液氮速冻,进行羟脯氨酸(HYP)测定.结果:7 d模型组动物出现明显体重下降、低氧血症、PS系统活性异常,中药中剂量组一定程度上缓解低氧血症(P<0.05)及PS系统活性.大剂量及小剂量组无明显缓解趋势(P>0.05).结论:①博莱霉素通过损伤肺泡Ⅱ型细胞(AT Ⅱ),使PS系统功能异常,从而导致低氧血症的发生,复方鳖甲方中剂量组通过缓解AT Ⅱ细胞损伤,一定程度上改善低氧血症.②复方鳖甲方有效抑制肺泡灌洗液中的炎性渗出,从而改善肺纤维化程度.

蒿甲醚、双氢青蒿素对小鼠硬皮病模型的影响

目的:研究蒿甲醚及双氢青蒿素对小鼠硬皮病模型的影响.方法:随机将60只Balb/c小鼠分为正常组,模型组,溶媒组,阳性药组(青霉胺200mg·kg~(-1)),蒿甲醚低,高剂量组(5,20mg·kg~(-1)),双氢青蒿素低,高剂量组(5,25 mg·kg~(-1)).以0.1 mL 200 mg·L~(-1)博莱霉素对小鼠进行皮下注射,持续3周,制备硬皮病模型.造模同时灌胃给予不同剂量药物4周.给药完成后次日取皮肤和肺进行分析.观察HE染色后小鼠皮肤厚度和真皮纤维化程度,对皮肤羟脯氨酸含量,胶原含量进行测定.结果:与模型组相比,各药高剂量组皮肤厚度,胶原含量显著减少,其他各治疗组小鼠皮肤硬化程度也得到一定的改善.结论:蒿甲醚、双氢青蒿素对预防性治疗硬皮病小鼠有一定的疗效.

人工冬虫夏草菌液对博莱霉素致小鼠肺纤维化的保护作用

目的:研究人工冬虫夏草菌液(cordyceps sinensi)对博莱霉素(BLM)致肺纤维化小鼠的保护作用.方法:小鼠随机分为4组,模型组经鼻滴入博莱霉素5 mg·kg-1建立肺间质纤维化模型,人工冬虫夏草菌液预防治疗组于滴入BLM前48 h予人工冬虫夏草菌液灌胃,人工冬虫夏草菌液治疗组于滴入BLM后第14天给人工冬虫夏草菌液灌胃,并与正常小鼠进行对照.第28天收获其支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,右肺行苏木精-伊红(HE)和Masson三色染色,并观察电镜下细胞超微结构的改变,左肺经酸解法检测肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中转化生长因子-β(transforming growth factor-β1,TGF-β1),干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ),白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)的浓度.结果:虫草菌液干预组与模型组比较,小鼠肺系数明显下降(P＜0.05);肺泡炎、纤维化程度均有改善(P＜0.05),其中人工冬虫夏草菌液防治组改善明显;肺HYP含量下降(P＜0.05);BALF中TGF-β,IL-4含量亦明显下降(P＜0.05);防治组可使IFN-γ含量升高(P＜0.05).结论:人工冬虫夏草菌液可以在某种程度上减轻BLM诱导的肺泡炎及肺纤维化程度,对肺纤维化有一定预防作用;其作用机制可能是通过抑制TGF-β1在肺组织中的表达,并调整Ⅰ型/Ⅱ型细胞因子平衡达到的.

人工冬虫夏草联合糖皮质激素对大鼠肺纤维化的干预作用

目的:探讨人工冬虫夏草(虫草菌液)联合糖皮质激素对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的干预作用.方法:50只SD大鼠,随机分为5组:正常对照组、模型组、虫草菌液组、强的松组、虫草菌液联合强的松组(联合组).采用气管内注射博莱霉素建立模型,次日起分别给药灌胃治疗,正常组和模型组给予生理盐水.第28天处死动物,肺组织标本行HE染色及MASSON染色进行病理形态学观察、Ashcroft纤维化评分,碱水解法检测肺组织HYP含量,免疫组化检测肺组织CTGF蛋白表达,酶联免疫法检测肺泡灌洗液上清TGF-β1含量.结果:与模型组相比,虫草菌液、强的松组能够降低肺组织纤维化评分,减少肺组织胶原沉积、HYP含量,下调肺组织CTGF蛋白表达,降低BLAF中TGF-的含量；联合组分别与虫草菌液组、强的松组比较,能够进一步减少肺纤维化评分、胶原面积、HYP含量,进一步下调CTGF蛋白、TGF-蛋白表达.结论:虫草菌液、强的松对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化有治疗作用,且虫草菌液联合强的松能产生协同治疗效果.

槌果藤对硬皮病小鼠模型皮肤硬化抑制作用的实验研究

系统性硬化症(PSS)是以真皮层胶原过度沉积为特征的结缔组织病,至今病因未明,治疗困难.Yamamoto等用博莱霉素皮下注射的方法成功诱导出C3H小鼠的硬皮病样改变,该小鼠模型在组织学、生物化学、细胞因子表达等方面与硬皮病十分相似[1],因此,研究者常以此为模型进行硬皮病病理、治疗方面的研究.

化纤汤治疗博莱霉素致小鼠肺纤维化实验研究

目的 研究中药化纤汤对博莱霉素致肺纤维化小鼠的防治作用,并与丹参及地塞米松治疗进行对照,从而探讨中药治疗肺纤维化的临床价值及可能的作用机制.方法 6～8周龄雄性ICR小鼠分8组,模型组(BM组)经鼻滴入博莱霉素(BLM)5 mg/kg建立肺间质纤维化模型,化纤汤预防治疗组(PHT组)于滴入BLM前48 h予化纤汤灌胃,化纤汤治疗组(HT组)于滴入BLM后第14天用化纤汤灌胃,同时设立丹参预防治疗组(PDST组)及丹参治疗组(DST组),地塞米松预防治疗组(PDT组)及地塞米松治疗组(DT组),并与正常小鼠(NC组)进行对照.第28天收获其支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,右肺行苏木精-伊红(HE)和Masson三色染色,并观察电镜下细胞超微结构的改变,左肺经酸解法检测肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中转化生长因子β1(TGF-β1)的浓度.结果 各药物干预组与BM组比较,小鼠肺系数明显下降(P＜0.05);肺泡炎、纤维化程度均有改善(P＜0.05),其中化纤汤预防治疗组改善明显;肺HYP含量下降(P＜0.05);BALF中TGF-β1含量亦明显下降.结论 早期应用化纤汤可以在某种程度上减轻BLM诱导的肺泡炎及肺纤维化程度,提示益气活血中药对肺纤维化有一定预防作用;抑制TGF-β1在肺组织中的表达可能是其作用机制之一.

中医药治疗博莱霉素致肺纤维化1例

博莱霉素为治疗恶性淋巴瘤的常用药物,但治疗其所致肺纤维化较为困难.我们曾采用中医药治疗博莱霉素致肺纤维化1例,取得良效,现报告如下.

阿托伐他汀减轻博莱霉素诱导大鼠实验性肺纤维化

目的 评价阿托伐他汀对大鼠实验性肺纤维化的作用.方法 大鼠随机分为对照(C)组,模型2、4和6周(M2、M4、M6)组及阿托伐他汀干预2、4和6周(A2、A4、A6)组,博莱霉素制备肺纤维化模型.评价大体标本、病理、肺系数、肺组织羟脯胺酸含量、动脉血气分析、肺泡炎、肺纤维化程度.结果 M2、M4、A2、A4组肺系数较C组显著增高(P＜0.05).各M、A组肺泡炎积分均较C组显著升高(P＜0.05).A4、A6组肺纤维化程度较同期M组显著减轻(P＜0.01).各M、A组肺组织羟脯氨酸显著高于C组(P＜0.05),A4组低于M4组(P＜0.05).各M组PaO_2较C组下降,以M2组明显(P＜0.01),各A组较M组PaO_2均有不同程度的升高(P＜0.01或0.05).结论 阿托伐他汀可减轻大鼠实验性肺纤维化,保护作用可能与疗程有关.

阿托伐他汀对肺纤维化大鼠MMP-9和TIMP-1表达的影响

有文献表明,他汀类药物可通过抑制基质金属蛋白酶、干预成纤维细胞增殖、胶原合成、参与调节细胞外基质(ex-tracelluar matrix,ECM)的降解,可能具有抗纤维化作用[1],但目前直接进行体内观察其抗肺纤维化作用的研究并不多.我们已证实阿托伐他汀可抑制博莱霉素所致的大鼠肺纤维化[2].