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富含半胱氨酸蛋白61对缺氧后肾小管上皮细胞氧化应激的影响
目的 观察富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)对缺氧后人肾小管上皮细胞(HK-2)氧化应激的影响,探讨Cyr61对HK-2的保护机制.方法 将HK-2细胞分为5组:空白组、Cyr61处理组、MAPK抑制剂组(Cyr61+ PD98059预处理)、p38抑制剂组(Cyr61 +SB203580预处理)、PI3K抑制剂组[Cyr61+渥曼青霉素(Wortmannin)预处理].各组细胞预处理12h后进行缺氧培养.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测缺氧前后细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,双氯荧光黄乙酸乙酯(DCFH-DA)染色检测细胞内活性氧簇(ROS)的生成量,比色法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性,Western印迹法检测细胞磷酸化(p)Akt及细胞核内Nrf2蛋白表达水平. 结果 缺氧培养后空白组HK-2细胞内ROS含量和Nrf2蛋白表达增加,SOD、CAT活性下降,同时细胞存活率下降,凋亡率增高(均P＜0.05).Cyr61处理组缺氧后存活率、细胞内SOD、CAT活性和p-Akt、Nrf2蛋白显著高于空白组,同时其凋亡率及ROS含量明显低于空白组(均P＜ 0.05).与Cyr61处理组相比,缺氧后PI3K抑制剂组HK-2细胞存活率、细胞内SOD、CAT活性和p-Akt、Nrf2蛋白显著下降,凋亡率及ROS含量显著增加(均P＜0.05);而MAPK抑制剂组和p38抑制剂组HK-2细胞的各项指标同Cyr61处理组相比差异无统计学意义(均P＞ 0.05).结论 Cyr61可通过PI3K途径促进Nrf2表达,增强抗氧化物质SOD、CAT产生,减少ROS生成,在缺氧诱导的HK-2细胞氧化应激损伤中发挥保护作用.
关键词： 肾小管 上皮细胞 氧化性应激 NF-E2相关因子2 磷脂酰肌醇3-激酶 -
自体原位肝移植术后早期胃氧化损伤及其与NF-E2相关因子2的关系
[目的]探讨SD大鼠自体原位肝移植后16 h内胃病理学变化特点,胃黏膜氧化损伤及NF-E2相关因子2(Nrf2)表达的变化.[方法]将24只SPF级SD大鼠随机均分为假手术组(Sham,n=6)、自体原位肝移植再灌注后4h组(R4h)、自体原位肝移植再灌注后8h组(R8h)和16h组(R16h).假手术组在麻醉后只进行开腹和血管的分离,不进行肝脏的阻断和灌注;其余各自体原位肝移植组则进行自体肝移植手术,观察胃组织病理学变化特点、羟自由基(·OH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及Nrf2蛋白表达的变化.[结果]自体原位肝移植引起了各组大鼠明显的胃黏膜损害,其中R4h组损伤严重.与假手术组相比,自体原位肝移植后4h和8h胃黏膜的·OH及MDA水平均明显升高,伴随SOD、CAT活性的明显降低.Nrf2蛋白在自体原位肝移植再灌注后4h表达下调,在8h和16h逐渐恢复至假手术组水平.相关分析显示,胃黏膜损伤评分与·OH和MDA含量呈正相关,与SOD和CAT活性呈负相关(P＜0.05);Nrf2蛋白表达含量与胃黏膜损伤评分、·OH含量和MDA含量呈负相关,与CAT活性呈正相关(P＜0.05).[结论]大鼠自体原位肝移植引起胃损伤,胃损伤与修复与氧化和抗氧化能力变化一致;胃黏膜Nrf2表达增强可能有利于胃的自我修复.
关键词： 自体原位肝移植 胃损伤 氧化损伤 抗氧化酶 NF-E2相关因子2 -
干扰Nrf2基因后骨髓间充质干细胞移植对大鼠心肌梗死后心肌凋亡的影响
目的 观察干扰核因子相关因子2(Nrf2)的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)注射大鼠心肌梗死局部后细胞凋亡情况及对心功能的影响.方法 建立心肌梗死大鼠模型,随机分为:①干扰Nrf2基因的MSCs移植(Nrf2干扰组)组;②空载慢病毒修饰的MSCs移植(Nrf2正常组);③生理盐水注射对照组(对照组,n=12).心肌梗死细胞移植后7d,细胞免疫荧光法检测心肌局部caspase3蛋白的表达;移植后28 dHE染色评价梗死后心肌组织病理变化,TTC染色评估梗死面积;采用蛋白印迹法(Western blot)检测心肌梗死区Nrf2和凋亡蛋白Bcl2、Bax的蛋白表达水平.结果 心梗细胞移植后7d,心肌梗死区域有EGFP标记的MSCs,部分EGFP表达位置检测到Caspase3表达阳性,Nrf2干扰组凋亡蛋白Caspase3的荧光强度强,Nrf2正常组Caspase3的荧光强度弱,对照组无EGFP表达;细胞移植后28 d,HE染色结果显示,与Nrf2正常组比较,Nrf2干扰组心肌组织肌纤维排列紊乱,炎性细胞浸润明显,而Nrf2正常组细胞排列整齐,炎性细胞浸润减少;心肌TTC染色结果显示,Nrf2干扰组的心肌梗死面积为(35.30±0.41)％,较Nrf2正常组[(25.07±0.15)％]明显增加(P＜0.05),与对照组[(35.40±0.70)％]比较无差异(P＞ 0.05);Western blot结果显示,与Nrf2正常组比较,Nrf2干扰组心肌中Nrf2蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2表达下降,而促凋亡蛋白Bax表达增加,差异有统计学意义(P＜0.05),Nrf2干扰组与对照组比较,各蛋白表达无差异性(P＞0.05);心功能改善方面,Nrf2干扰组EF[(40.83±2.67)％]较Nrf2正常组[(52.35±1.58)％]降低(P＜0.050而心室容积较[(LVDd,(1.090±0.061),LVDs (0.750±0.062)]较Nrf2正常组[(LVDd,(0.790 0±0.024 5),LVDs(0.610±0.026)]增加.结论 移植干扰Nrf2的MSCs后,心肌梗死区凋亡相关蛋白表达增加,降低了外源性MSCs对梗死心脏的修复能力.
关键词： NF-E2相关因子2 siRNA 心肌梗死 骨髓间充质干细胞 凋亡 -
肺癌细胞系中KEAP1与NRF2相互作用区域基因突变的检测
目的 检测非小细胞肺癌细胞系中KEAP1及NF-E2相关因子2(NRF2)相互作用结构域基因的突变情况.方法 以6个非小细胞肺癌细胞系为材料,检测KEAP1基因的第2至第6外显子及NRF2的DLG和ETGE基序编码序列的碱基序列突变情况,推测相应的氨基酸序列变异.同时检测供试细胞系的细胞内活性氧浓度,分析目标序列突变对肺癌细胞抗氧化系统的影响.结果 在KEAP1基因第4外显子区域发现4个所有癌细胞系共有的突变,部分细胞系的第3外显子区域还存在错义突变,所有NRF2-ETGE基序编码序列均存在多重遗传变异.活性氧检测发现供试细胞系活性氧浓度均高于肺胚细胞.结论 KEAP1和NRF2基因相互作用结构域的基因突变在供试细胞系内普遍存在,非小细胞肺癌细胞系对细胞内活性氧浓度失去调控能力是普遍现象.
关键词： NF-E2相关因子2 非小细胞肺癌 Keap1 -
Nrf2及其靶基因在人肺腺癌A549顺铂耐药细胞株中的表达和意义
背景与目的 NF-E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)是细胞调节抗氧化应激反应的重要转录因子,已有研究表明Nrf2及其信号传导通路与卵巢癌顺铂耐药密切相关,但Nrf2与肺腺癌耐药相关性的研究罕见报道,本研究的目的是测定转录因子Nrf2及其靶基因在人肺腺癌A549顺铂耐药细胞株(A549/DDP)及其亲本细胞(A549)中的定量表达,探讨肺腺癌顺铂耐约机制.方法 采用MTT法测定A549/DDP及A549细胞对DDP的敏感性;实时荧光定量PCR检测两株细胞中转录因子Nrf2及其靶基因定量表达.结果 A549/DDP对DDP的耐药指数为12.12,属于中度耐药;与亲本细胞比较,A549/DDP细胞Keap1、Nrf2、NQO1、GSTP1、GCL、HO-1、MRP4的mRNA表达增加(P＜0.01),MRP1、MRP2及MRP3的表达降低(P＜0.01).结论 Nrf2信号传导通路可能参与了人肺腺癌A549顺铂耐药现象的产生,这一发现对从基因水平开发新的耐药拮抗剂用于肿瘤耐药的辅助治疗,避免和克服耐药具有重要意义.
关键词： NF-E2相关因子2 耐药性 顺铂 肺肿瘤 -
普罗布考对高糖培养人视网膜Müller细胞特化蛋白1/细胞骨架相关蛋白/核因子E2相关因子2/半胱氨酸连接酶催化亚基表达的影响
目的 观察普罗布考对高糖环境下人视网膜Müller细胞中特化蛋白1(SP1)/细胞骨架相关蛋白(Keap1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)表达的影响;初步探讨普罗布考的抗氧化作用.方法 体外培养的人Müller胞分为正常糖组(5.5 mmol/L)、高糖组(25.0 mmol/L)、正常糖+普罗布考组、高糖+普罗布考组;后两组中加入100 μmol/L普罗布考.免疫荧光染色法鉴定Müller细胞;免疫荧光染色法和实时RP-PCR(qRT-PCR)检测各组Müller细胞中SP1、Keapl、Nrf2、GCLC蛋白、mRNA的表达.两组间数据比较采用独立样本t检验.结果 体外培养的人Müller细胞谷氨酰胺合成酶染色阳性率＞95％.免疫荧光染色结果显示,Müller细胞中SP1、Keap1、Nrf2、GCLC蛋白均呈阳性表达.qRT-PCR结果显示,与正常糖组比较,高糖组Müller细胞中SP1(t=28.30,P＜0.000)、Keap1(t=5.369,P=0.006)、Nrf2(t=10.59,P=0.001)mRNA表达显著上调,GCLC显著下调(t=4.633,P=0.010),差异均有统计学意义.与高糖组比较,高糖+普罗布考组Müller细胞中SP1(t=12.60,P=0.000)、Keap1(t=4.076,P=0.015)mRNA表达显著下调,Nrf2(t=12.90,P=0.000)、GCLC(t=15.96,P＜0.000)mRNA表达显著上调,差异均有统计学意义.结论 普罗布考通过抑制高糖诱导Müller细胞中SP1、Keapl的表达,上调Müller细胞中Nrf2、GCLC的表达,发挥抗氧化作用.
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叔丁基对苯二酚对高糖培养视网膜Müller细胞核因子E2相关因子2、血红素氧合酶1和磷脂酰肌醇-3激酶表达的影响
目的 观察叔丁基对苯二酚(tBHQ)对高糖环境下视网膜Müller细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)的表达影响;初步探讨tBHQ的抗氧化及抗凋亡作用.方法 大鼠视网膜Müller细胞分为正常糖组(5.5 mmol/L)(N组)、高糖组(45.0 mmol/L)(HG组)、tBHQ干预组(HG+tBHQ组).HG+tBHQ组Müller细胞培养48h后,加入tBHQ 20 μmol/L预处理剂诱导Nrf2和HO-1的表达.免疫荧光染色法鉴定Müller细胞;蛋白免疫印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应检测各组Müller细胞中Nrf2、HO-1、PI3K、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bax蛋白和基因的表达;流式细胞仪检测各组Müller细胞的凋亡.结果 培养的Müller细胞细胞体大,细胞浆丰富;细胞核呈圆形或卵圆形,边界清晰.HG组Müller细胞中Nrf2 (t=4.114)、HO-1(t=9.275)蛋白表达较N组升高,差异有统计学意义(P=0.006、0.000).HG+tBHQ组Müller细胞中Nrf2(t=7.847)、HO-1(t=7.947)、PI3K(t=5.397)、Bcl-2(t=6.825)蛋白表达较HG组升高,差异有统计学意义(P=0.000、0.000、0.002、0.000);Bax蛋白表达较HG组降低,差异有统计学意义(t=14.998、P=0.000).HG组Müller细胞中Nrf2(t=7.292)、HO-1(t=15.014) mRNA较N组升高,差异有统计学意义(P=0.000、o.ooo).HG+tBHQ组Müller细胞中Nrf2(t=18.046)、HO-1(t=39.458)、PI3K(t=4.979)、Bcl-2(t=9.535) mRNA较HG组升高,差异有统计学意义(P=0.000、0.000、0.003、0.000);Bax mRNA较HG组降低,差异有统计学意义(t=16.520、P=0.000).HG组Müller细胞凋亡率较N组增高,差异有统计学意义(t=39.905、P=0.000);HG+tBHQ组Müller细胞凋亡率较HG组降低,差异有统计学意义(t=21.083、P=0.000).结论 tBHQ通过上调视网膜Müller细胞中Nrf2、HO-1、PI3K的表达,抑制Müller细胞的凋亡.
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褪黑素对视网膜缺血再灌注损伤大鼠视网膜细胞凋亡的影响及机制探讨
目的 观察褪黑素对视网膜缺血再灌注损伤(RIRI)大鼠视网膜细胞凋亡的影响,并探讨其可能机制.方法 健康无眼疾雄性Sprague-Dawley成年大鼠54只,采用随机数字表法随机分为正常对照组、RIRI组及褪黑素组,分别为6、24、24只.RIRI组及褪黑素组大鼠采用线栓法建立RIRI模型.褪黑素组大鼠按1.25 ml/kg剂量注射4 mg/ml褪黑素,RIRI组大鼠注射等量生理盐水.正常对照组大鼠不作干预.建模后6、24 h及3、7 d,RIRI组及褪黑素组分别取6只大鼠用于实验.制作视网膜切片,苏木精伊红(HE)染色观察各组大鼠视网膜组织形态变化;免疫组织化学染色计数活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、核转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶(HO)-1阳性细胞数量.采用一般线性回归分析法分析建模后不同时间点褪黑素组与RIRI组活性Caspase-3阳性细胞数差值与Nrf2、HO-1阳性细胞数差值的相关性.结果 HE染色观察发现,正常对照组大鼠视网膜各层结构清晰完整,细胞排列整齐规则.RIRI组大鼠视网膜水肿明显,视网膜内层变厚,视网膜神经节细胞(RGC)数量减少.褪黑素组大鼠视网膜各层细胞排列较整齐,形态较规则.建模后6、24 h及3、7 d,与RIRI组比较,褪黑素组大鼠视网膜内层厚度增厚(F=16.710、62.303、68.389、57.132,P<0.01),RGC数量增加(F=24.250、11.624、14.155、32.442,P<0.05),差异均有统计学意义.免疫组织化学染色观察发现,建模后6、24 h及3、7 d,与RIRI组比较,褪黑素组大鼠视网膜活性Caspase-3阳性细胞数量明显减少(F=49.118、134.173、76.225、18.385,P<0.01),Nrf2(F=11.041、31.480、59.246、6.740,P<0.05)、HO-1(F=128.993、21.606、51.349、8.244,P<0.05)阳性细胞数量明显增加,差异均有统计学意义.相关性分析结果显示,建模后不同时间点褪黑素组与RIRI组活性Caspase-3阳性细胞数差值与Nrf2、HO-1阳性细胞数差值均呈直线相关(r2=0.810、0.730,P<0.01).结论 褪黑素可减轻RIRI大鼠视网膜细胞凋亡;其机制可能与促进Nrf2、HO-1蛋白表达,抑制活性Caspase-3蛋白表达有关.
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5,6-二氢环戊烯1,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮对高糖环境下大鼠视网膜Müller细胞的影响
目的 观察5,6-二氢环戊烯1,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮(CPDT)对高糖环境下大鼠视网膜Müller细胞活性及其线粒体活性氧(ROS)生成量的影响,初步探讨CPDT对高糖环境下Müller细胞的保护作用及其机制.方法 Sprague Dawley大鼠Müller细胞分为25 mmol/L对照组(A组)、65 mmol/L高糖(B糖)组、高糖+45 μmol/L CPDT组(C组)、高糖+60 μmol/L CPDT组(D组)、高糖+70 μmol/L CPDT组(E组).培养72 h后,水溶性四唑盐(WST)-8法检测各组Müller细胞的细胞相对增生率;流式细胞仪测定各组Müller细胞ROS生成量及细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定Müller细胞中核因子-E2相关因子2(Nrf2)、血红素合晦-1 (HO-1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl相关X蛋白(Bax蛋白)表达的变化.结果 WST-8法检测结果显示,与A组比较,B组Müller细胞活性明显下降,差异有统计学意义(t=39.59,P＜0.05).与B组比较,C组Müller细胞活性无明显提高,差异无统计学意义(t=0.97,P＞0.05);D、E组Müller细胞活性恢复,差异有统计学意义(t=-4.67、-7.52,P＜0.05).流式细胞仪检测结果显示,与A组比较,B组Müller细胞中ROS生成量增加,差异有统计学意义(t=-30.99,P＜0.05);与B组比较,D组Müller细胞中ROS含量明显下降,差异有统计学意义(t=27.68,P＜0.05).Western blot检测结果显示,与A组比较,B组Müller细胞Bax、Nrf2、HO-1蛋白表达显著上调,差异有统计学意义(t=-1 1.03、-63.17、-11.44,P＜0.05);Bcl-2蛋白表达明显下调,差异有统计学意义(t=7.861,P＜0.05).与B组比较,D组Müller细胞Nrf2、HO-1、Bax蛋白表达均下调,差异有统计学意义(t=15.11、26.59、6.27,均P＜0.05);Bcl-2蛋白表达上调,差异有统计学意义(t=-6.53,P＜0.05). 结论 CPDT降低高糖环境下Müller细胞中ROS含量,下调Nrf2、HO-1、Bax蛋白表达;其机制与激活Nrf2/HO-1氧化应激通路,改变Bcl-2蛋白之间的平衡性,影响线粒体氧自由基量生成,从而抑制细胞凋亡有关.
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叔丁基对苯二酚对2型糖尿病大鼠视网膜核因子E2相关因子、血红素氧合酶1表达的影响
目的 观察叔丁基对苯二酚(tBHQ)对2型糖尿病(DM)大鼠视网膜组织中核因子E2相关因子(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)表达的影响.方法 健康雄性Sprague Dawley大鼠60只,随机抽取20只大鼠为正常对照组(NC组),其余40只大鼠为造模组.造模组大鼠腹腔注射30 mg/kg剂量链脲佐菌素诱导2型DM模型.剔除血糖恢复鼠5只,造模组随机分成DM组、tBHQ组,分别为17、18只大鼠.tBHQ组大鼠给予添加1％tBHQ的高脂高糖饲料喂养.tBHQ喂养后4、12周,苏木精-伊红染色观察大鼠视网膜组织结构;免疫组织化学染色法检测大鼠视网膜组织中Nrf2、HO-1蛋白表达;荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定大鼠视网膜组织中Nrf2、HO-1mRNA表达.结果 光学显微镜观察,4周时,tBHQ组大鼠视网膜细胞排列较整齐,个别细胞可见轻度水肿;12周时,视网膜组织结构较清晰,部分细胞水肿.免疫组织化学染色结果显示,4、12周时,DM组大鼠视网膜组织中Nrf2(t=3.115、3.781)、HO-1(f=3.485、3.785)蛋白表达较NC组增多,差异均有统计学意义(P＜0.01).tBHQ组大鼠视网膜组织中Nrf2(t=2.473、2.576)、HO-1(t=2.785、2.879)蛋白表达较DM组增多,差异有统计学意义(P＜0.05).DM组组内比较,12周大鼠视网膜中Nrf2蛋白表达较4周时增高,差异有统计学意义(t=0.276,P＜0.05);tBHQ组组内比较,12周大鼠视网膜中Nrf2(t=2.516)、HO-1(t=2.776)蛋白表达较4周时增高,差异有统计学意义(P＜0.05).荧光定量PCR检测结果显示,4、12同时,DM组大鼠视网膜组织中Nrf2(t=4.758、4.285)、HO-1 mRNA(t=5.114、4.514)表达较NC组增多,差异有统计学意义(P＜0.05);tBHQ组大鼠视网膜组织中Nrf2(t=5.133、4.976)、HO 1 mRNA(t=4.758、4.251)表达较DM组增多,差异有统计学意义(P＜0.05).DM组组内比较,12周时视网膜组织中Nrf2 mRNA表达高于4周,差异有统计学意义(t=5.114,P＜0.05);tBHQ组组内比较,12周时视网膜组织中Nrf2、HO-1 mRNA表达高于4周,差异有统计学意义(t=4.292、4.974,P＜0.05).结论 tBHQ干预可以有效诱导2型DM大鼠视网膜组织中Nrf2、HO-1的表达.
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5,6-二氢环戊烯并1,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮对2型糖尿病大鼠视网膜核因子NF-E2相关因子及血红素氧合酶-1表达的影响
目的 观察Ⅱ相酶诱导剂5,6-二氢环戊烯并1,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮(CPDT)对2型糖尿病大鼠视网膜核因子NF-E2相关因子/抗氧化反应元件(Nrf2/ARE)信号通路及氧化应激的影响,探讨CPDT保护糖尿病大鼠视网膜的机制.方法 35只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、造模组2个组,造模组中造模成功者再随机分为糖尿病组、CPDT干预组2个组.正常组、造模组分别有8、27只大鼠.糖尿病组和CPDT干预组给予高脂高糖饲料饲养2个月,大鼠空腹12 h后按体重35 mg/kg腹腔注射链脲佐菌素诱导2型糖尿病大鼠模型.CPDT干预组成模后1周开始在高脂高糖饲料中添加CPDT.8周后检测3组大鼠血糖、血清丙二醛(MDA)含量,检测正常组和糖尿病组大鼠血脂含量.逆转录聚合酶链反应检测3组大鼠视网膜Nrf2、血红素氧合酶-1(HO-1)mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测Nrf2、HO-1蛋白表达,免疫组织化学法检测Nrf2、HO-1在视网膜的表达.结果 25只大鼠成功建立2型糖尿病大鼠模型,成功率为92.6％.糖尿病组大鼠血脂水平较正常组显著升高(F总胆固醇=65.866,F甘油三酯=25.441,F低密度脂蛋白=38.889,P=0.000).各组间大鼠血糖值比较,差异有统计学意义(x2=25.812,P=0.000),且糖尿病组大鼠血糖显著高于正常组和CPDT干预组.各组间大鼠血清MDA含量比较,差异有统计学意义(F=59.545,P=0.000),糖尿病组大鼠血清MDA高于正常组(t=10.523,P=0.000)和CPDT干预组(t=7.766,P=0.000).各组大鼠视网膜Nrf2、HO-1 mRNA比较,差异有统计学意义(FNrf2=19.503,PNrf2=0.000;FHO-1 =9.737,PHO-1 =0.001).与糖尿病组相比,CPDT干预组大鼠视网膜Nrf2、HO-1 mRNA表达明显增高(tNrf2 =3.399,PNrf2=0.002;tHo-1=2.167,PHO-1=0.039).各组大鼠视网膜Nrf2、HO-1蛋白比较,差异有统计学意义(FNrf2=112.823,FHO-1 =119.361,P=0.000).与糖尿病组相比,CPDT干预组大鼠视网膜Nrf2、HO-1蛋白表达明显增高(tNrf2=6.203,tHO-1=6.388,P=0.000).免疫组织化学检测结果显示,Nrf2、HO-1蛋白主要表达于视网膜神经节细胞层、内丛状层、内核层,各组大鼠视网膜Nrf2、HO-1蛋白表达量比较,差异有统计学意义(FNrf2=16.206,FHO-1=46.790,P=0.000).CPDT干预组大鼠视网膜Nrf2、HO-1蛋白的表达量高于糖尿病组(tNrf2 =3.172,PNrf2 =0.003;tHO-1 =6.321,PHO-1=0.000),糖尿病组高于正常组(tNrf2=2.679,PNrf2=0.011; tHO-1=3.482,PHO1=0.001).结论 CPDT可能通过激活Nrf2/ARE信号通路,诱导Nrf2和HO-1的表达,降低血糖、血清MDA含量,从而减轻2型糖尿病大鼠视网膜的氧化应激损伤.
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Nrf2激活对新生大鼠高氧致肺损伤的保护作用
目的 观察NF-E2相关因子2(Nrf2)激动剂对高氧致新生大鼠肺组织细胞凋亡的影响,探讨Nrf2激活是否对高氧致新生大鼠肺损伤具有保护作用.方法 将足月顺产SD新生大鼠90只随机分为空气对照组(N组)、高氧组(O组)和Nrf2组,每组各30只.O组和Nrf2组新生鼠于出生后第1d、第2d分别腹腔注射生理盐水0.2 mL或Nrf2激动剂莱菔硫烷0.2 mL(30 mg/kg),N组不予任何干预.O组和Nrf2组新生大鼠于第1次注射后置入氧体积分数＞95％的高氧环境中持续饲养4d,N组则持续于空气中饲养.3组新生大鼠麻醉后取肺组织,采用TUNEL染色比较3组新生大鼠肺泡细胞的凋亡指数(AI),采用免疫组化染色检测Nfr2在肺组织中的表达.结果 O组新生大鼠肺泡细胞AI值[(28.8±3.0)％]高于N组[(0.7±0.6)％]和Nrf2组[(7.2±0.8)％],差异有统计学意义(P＜0.01).O组(926.80±130.51)和Nrf2组(1 038.40±151.12)肺组织Nrf2表达差异无统计学意义(P＞0.05),但与N组(30.03±9.99)比较均明显增高,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 Nrf2激动剂可减少高氧致新生大鼠肺泡细胞凋亡,对高氧引起的肺损伤具有一定的保护作用.
关键词： 高氧肺损伤 NF-E2相关因子2 新生大鼠 -
高氧致新生大鼠急性肝损伤及对肝组织中Nrf2表达的影响
目的 研究持续吸入高浓度氧气对新生大鼠的肝损伤,探讨转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)在损伤肝组织中的动态表达及意义.方法 足月SD新生大鼠100只随机分为空气组(N组)和高氧组(O组),每组50只.高氧组出生后立即置入氧体积分数＞95％的持续高氧环境中饲养,正常对照组则持续空气中饲养.两组分别于暴露高氧或空气中4、7、14d随机抽取8只,麻醉后取肝组织,比较两组肝细胞凋亡指数,检测Nfr2在肝组织中的表达.结果 肝细胞凋亡指数及Nrf2的表达于各时点高氧组均高于正常组(P＜0.01).高氧组7、14 d与高氧组4d比肝细胞凋亡指数及Nrf2的表达差异有统计学意义(P＜0.01).结论 持续高浓度氧气吸入可致新生大鼠肝损伤,Nrf2表达增加,启动机体自身抗氧化机制.
关键词： 高氧 肝损伤 NF-E2相关因子2 大鼠
