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扶正抗癌方通过PTEN/PI3K/Bad通路调控肺癌A549细胞增殖与凋亡
目的:观察扶正抗癌(FZKA)方对肺癌细胞A549增殖的调控作用,探讨其作用的分子机制.方法:以非小细胞肺癌细胞A549为研究对象,以FAKA方0.8,1.2,1.6,2.0,2.4,2.8,3.2 g·L-1干预,空白组,分别孵育24,48,72 h后,设立采用噻唑蓝(MTT)比色法检测FZKA方对A549细胞活力的影响;以FAKA方1.2,1.6,2.0 g·L-1干预,设立空白组,培养24 h后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测FZKA方对A549细胞人第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)mRNA水平的影响;孵育24 h后,采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)分析FZKA方对PTEN,磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K),磷酸化的促凋亡蛋白Bad(Phospho-Bad,p-Bad)表达的影响并探讨其相关性.结果:与空白组比较,FZKA方能明显抑制A549细胞增殖,处理24 h后,FZKA从0.8 g·L-1开始,处理48,72 h后,FZKA方从0.4 g·L-1开始,细胞存活率明显降低(P ＜0.05,P＜0.01);与空白组比较,处理24 h后,FZKA方从0.8 g·L-1开始以浓度依赖性上调PTEN mRNA和蛋白的表达(P ＜0.05,P＜0.01),FZKA方从1.6 g·L-1开始以浓度依赖性下调PI3K蛋白表达(P ＜0.05,P＜0.01),从2h开始以时间依赖性上调p-Bad蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01).结论:FZKA方可通过上调PTEN来调控下游PI3 K/Akt/Bad通路相关蛋白的表达进而抑制A549的增殖,促进肺癌细胞凋亡.
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LY294002和Rapamycin对柯萨奇病毒B3诱导的HeLa细胞Bim和Bax表达的调控作用
目的 探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导细胞凋亡中的作用.方法 体外培养的HeLa细胞通过CVB3感染建立病毒性心肌炎模型,根据细胞毒力实验筛选10 nmol/L的雷帕霉素(Rapamycin)和25 μmol/L的PI3K抑制剂(LY294002)干预CVB3感染的HeLa细胞,采用RT-PCR和Western blot免疫印迹法检测Bim和Bax的mRNA及蛋白质表达.结果 感染CVB3 12和24h后,LY294002和Rapamycin促进CVB3诱导的HeLa细胞产生CPE.与Sham组比较,CVB3可以诱导BimmRNA和蛋白的表达降低(P＜0.05),Bax mRNA表达早期降低而蛋白表达逐渐增强,而与对照组比较,LY294002和Rapamycin可以使Bim mRNA和蛋白的表达增强(P＜0.05);LY294002使Bax mRNA表达逐渐减弱而蛋白表达逐渐增强,Rapamycin则使Bax蛋白表达随感染时间延长呈3h增强(P＜0.05),6和12h减弱,24 h增强的动态改变(P＜0.05).结论 PI3K和mTOR信号通路可能通过调控Bim和Bax的表达,在CVB3感染诱导的VMC中扮演重要角色.
关键词： 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 磷脂酰肌醇3-激酶 柯萨奇病毒B3 细胞凋亡 -
蛋白激酶B及其在磷脂酰肌醇3-激酶介导的信号转导中的作用
蛋白激酶 B(PKB)是原癌基因 c-akt 的表达产物,它参与由生长因子激活的经磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)介导的信号转导过程.与许多蛋白激酶相似,PKB 分子具有一特殊的AH/PH 结构域(AH/PH domain),后者能介导信号分子间的相互作用.PKB是PI3K直接的靶蛋白.PI3K 产生的脂类第二信使PI-3,4,-P2和PI-3,4,5-P3等均能与PKB和磷酸肌醇依赖性蛋白激酶(PDK)的AH/PH 结构域结合,使二者转位于质膜上并活化.PDK 也能使PKB 磷酸化而激活,激活的 PKB 又进一步激活抗细胞凋亡机制、葡萄糖代谢(糖原合成、糖酵解及葡萄糖的摄取)及蛋白质合成等过程,从而促进细胞的生长和增殖.
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CD151对心肌梗死血流动力学的影响及其信号机制
目的 探讨CD151对大鼠心肌梗死模型血流动力学的影响及其分子学机制.方法 制作大鼠心肌梗死模型,将携带人CD151基因的重组腺病毒相关病毒(rAAV)载体注入缺血心肌.4周后,心导管测定心脏功能,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测外源性CD151 mRNA的表达,Western blot检测CD151、PI3K、Akt的表达.结果 心肌梗死后左室功能明显下降,CD151高表达能够明显改善左室功能,并可上调磷脂酰肌醇3-激酶和磷酸化的蛋白激酶B的表达.结论 CD151基因的导入能够改善心室功能,其分子机制与PI3K/Akt信号通路的激活有关.
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PI3K和VEGF在大肠癌中的表达及意义
目的 研究磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在大肠癌癌变过程中的表达及临床意义.方法 选取72例大肠癌患者的大肠癌组织和癌旁正常组织,应用免疫组化法和RT-PCR法检测PI3K和VEGF在大肠癌中的蛋白表达和基因表达水平,并进行统计学分析.结果 在大肠癌组织和癌旁正常黏膜组织中PI3K和VEGF的阳性表达率差异均有统计学意义(x2=60.66,x2=83.70,P均＜0.05),且两者在大肠癌组织中的表达呈正相关(r=-0.872,P＜ 0.05).大肠癌新鲜组织中PIK3R1和VEGFA基因的表达量显著高于癌旁正常黏膜组织中的表达量,且差异均具有统计学意义(t=-2.75,t=-2.61,P均＜0.05).结论 PI3K和VEGF在大肠癌的发生、发展过程中起重要作用.
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PI-3K、DGAT2、PKC-ε在大鼠非酒精性脂肪性肝病发病机制中的作用
目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI-3K)通路及其相关蛋白二酰甘油酰基转移酶2(DGAT2)、蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)的亚型PKC-ε在大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发病中的作用.方法:48只大鼠随机分为6组:正常对照组(N1组普通饮食喂养4wk,N2组普通饮食喂养8wk,N3组普通饮食喂养12wk);NAFLD模型组(H1组高脂喂养4wk,H2组高脂喂养8wk,H3组高脂喂养12wk);评价各组大鼠肝脂肪变程度、炎症活动和纤维化程度;免疫组织化学法观测各组PKC-ε蛋白表达量;RT-PCR法检测PI-3K(p85a)mRNA和DGAT2 mRNA的表达.结果:NAFLD模型组脂肪变性明显,纤维化和炎症活动度记分均显著高于正常对照组;H2,H3组脂肪变性分度及纤维化分期比H1组明显增高,气球样变也有显著的差异;H2,H3组PKC-ε蛋白表达量与正常对照组比较明显增多(7.68±1.32vs6.68±2.16,8.46±1.19vs5.52±1.05,P<0.05或0.01);PI-3KmRNA(△Ct)与正常对照组相比明显升高,且H2,H3组与H1组比较明显升高,PI-3KmRNA表达量在模型组中随脂肪肝程度的加重呈进行性降低.DGAT2mRNA(△Ct)与正常对照组比较显著降低,且H2,H3组与H1组比较明显降低,DGAT2mRNA表达量在NAFLD模型组中随脂肪肝程度的加重呈进行性升高.结论:PI-3K通路及其相关蛋白PKC-ε和DGAT2可能与NAFLD发病机制有关.
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PI3K p55γ N末端氨基酸过表达对胃癌MGC803细胞迁移的影响
目的:观察p55γ N末端24个氨基酸的过表达对胃癌MGC803细胞迁移的影响.方法:通过脂质体介导用pEGFPN24和空载体pEGFPC1质粒进行基因转染, 建立稳定表达融合蛋白GFP-N24和GFP的细胞系; 通过细胞划痕实验和迁移实验观察GFP-N24的过表达对细胞运动迁移的影响; 明胶酶谱实验观察其对肿瘤转移相关基因MMP9表达和分泌的影响; 免疫印迹实验检测GFP-N24的过表达对PI3K-Akt信号通路活性的影响.结果:建立了稳定表达融合蛋白GF P-N24的MGC803/GFP-N24细胞系和表达GFP的MGC803/GFP细胞系. 细胞划痕实验和细胞迁移实验发现表达GFP-N24的MGC803细胞运动迁移能力下降(t = 0.003, P <0.01). GFP-N24通过减少磷酸化Akt的表达而抑制PI3K-Akt信号的活性, 但其对MMP9的表达和分泌没有影响.结论:P I3K p55γ N末端24个氨基酸通过抑制PI3K-Ak t信号通路的活性而抑制胃癌MGC803细胞的迁移, 其在胃癌的治疗上可能具有潜在的应用前景.
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PI3K-Akt信号通路与肿瘤
磷脂酰肌醇3-激酶(PI3Ks)信号参与增殖、分化、凋亡和葡萄糖转运等多种细胞功能的调节.近年来发现,IA型PI3K和其下游分子蛋白激酶B(PKB或Akt)所组成的信号通路与人类肿瘤的发生发展密切相关.该通路调节肿瘤细胞的增殖和存活,其活性异常不仅能导致细胞恶性转化,而且与肿瘤细胞的迁移、黏附、肿瘤血管生成以及细胞外基质的降解等相关,目前以PI3K-Akt信号通路关键分子为靶点的肿瘤治疗策略正在发展中.
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PI-3K在非酒精性脂肪性肝病发病中作用的研究进展
随着生活水平的提高、饮食习惯的改变以及糖尿病和代谢综合征患病率的急速上升, 非酒精性脂肪性肝病的发病率不断的升高. 近的研究表明此病与胰岛素介导的磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI-3K)传导通路有着密切的关系, 他在非酒精性脂肪性肝病发病机制中起着关键的作. 本文就PI-3K在非酒精性脂肪性肝病中的作用机制研究现状作一综述.
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PI3K/Akt和COX-2信号通路阻断在胃癌治疗中的应用
磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB,PI3K/Akt)和环氧合酶-2(COX-2)信号通路的异常改变在肿瘤的发生、发展过程中起重要作用. 并且可以引起肿瘤的一系列生物学行为改变, 对肿瘤患者的治疗和预后产生很大影响. 本文研究PI3K/Akt和COX-2信号通路阻断及其机制, 为包括胃癌在内的多种肿瘤的分子靶向治疗提供新的方向.
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磷脂酰肌醇3-激酶P85α亚单位基因Met326Ile变异与2型糖尿病的相关关系
目的 探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)基因P85α调节亚单位Met326Ile突变及基因表达与2型糖尿病(T2DM)的关系. 方法 采用双引物竞争PCR法检测T2DM者240例及正常对照(NC)组150例Met326Ile突变,对部分受检者的外周血白细胞RNA进行RT-PCR扩增,观察PI3-K基因表达水平. 结果 T2DM患者与NC组相比,P85α基因Ile326等位基因频率分别为22.5%和22.4%(P＞0.05),三种基因型间BMI、FIns、HOMA-IR及基因表达水平差异均无统计学意义(P＞0.01),T2DM患者的基因表达水平明显低于NC组(P＜0.01). 结论 PI3-K P85α基因Met326Ile错义突变可能为一无功能性突变,其与T2DM及PI3-K基因表达无相关.
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心脏磷脂酰肌醇3激酶和染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物基因作用的研究进展
磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)信号通路,在调控心脏病理生理过程中发挥重要的作用.PI3K在调控生理及病理生理刺激细胞反应过程中起重要角色.PTEN直接调控、抑制PI3K的表达,心脏中多种细胞均有PTEN表达,并调控细胞的生存、肥厚、收缩力、代谢及其机械应力等.PI3K/PTEN信号通路参与了广泛而多样的心脏疾病,如心肌肥厚及收缩功能、心力衰竭、缺血再灌注损伤及其缺血预适应.
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网膜素对成骨细胞向钙化血管平滑肌细胞分化的影响及其机理
目的：探讨网膜素对成骨细胞向钙化血管平滑肌细胞（ CVSMCs）分化的影响。方法网膜素处理VSMCs细胞，用茜素红S染色确定基质矿化范围，用PCR探测碱性磷酸酶（ ALP）及骨钙素表达，免疫印迹分析MAPK和Akt活性。结果网膜素剂量依耐性抑制CVSMCs ALP及骨钙素mRNA转录（P＜0.05）；与对照组比较，100 ng／ml，500 ng／ml及1000 ng／ml网膜素分别降低茜素红染色22％、41％及85％（P＜0.05）；网膜素时间依耐性提高CVSMCs Akt活性（P＜0.05），对ERK、p38及JNK无影响；网膜素对VSMCs细胞内cAMP生成无明显影响。细胞用LY294002或HIMO处理后，网膜素对ALP活性及基质矿化的影响被消除了。结论本研究结果首次表明网膜素通过PI3K／Akt 途径抑制成骨细胞分化为CVSMCs，表明肥胖者网膜素降低会促进动脉钙化的发展，网膜素有抑制动脉钙化的作用。
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HSP70与PI3K/Akt 信号通路在肝细胞肝癌组织中的表达及意义
目的 探讨热休克蛋白(HSP)70、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和蛋白激酶B(Akt)在肝细胞肝癌(肝癌)组织中的表达及意义.方法 本组回顾性研究标本来源于2005 年3 月至2008 年12 月在中国医科大学附属盛京医院接受诊治,经病理学诊断为肝癌的98 例患者的手术切除标本.所有患者术前均签署知情同意书,符合医学伦理学规定.男69 例,女29 例,年龄31~70 岁,中位年龄57岁.应用免疫组织化学方法检测HSP70、PI3K、Akt 蛋白的特异性表达,用蛋白质印迹法检测肝癌组织中HSP70、PI3K、Akt 蛋白的含量.应用实时逆转录-聚合酶链反应(real-time RT-PCR)检测HSP70、PI3K、Akt 信使核糖核酸(mRNA).观察肝癌组织中HSP70、PI3K、Akt 蛋白和mRNA 表达情况,分析其与患者性别、年龄、病理组织学分化、淋巴结转移和肿瘤、淋巴、转移(TNM)分期等临床病理学参数的关系.采用x2 检验和Fisher 确切概率法比较HSP70、PI3K、Akt 表达与临床病理学参数关系,采用单因素方差分析和LSD-t 检验比较不同组织学分化程度的肝癌组织中HSP70、PI3K、Akt 蛋白和mRNA含量差异,采用Pearson 法分析HSP70、PI3K、Akt 蛋白表达与组织学分化程度之间的关系,采用Kaplan-Meier 法和Log-rank 检验进行生存分析.结果 98 例患者中,HSP70 蛋白阳性表达1 级26 例(27%),2 级41 例(42%),3 级31 例(32%);PI3K 蛋白低表达和高表达分别为40 例(41%)、58 例(59%),Akt 蛋白低表达和高表达分别为42 例(43%)、56 例(57%).HSP70、PI3K、Akt 蛋白表达与肝癌组织学分化程度有关(x2=49.99、24.675、32.521,均为P＜0.05),而与性别、年龄、淋巴结转移和TNM 分期无关(均为P跃0.05).高、中、低分化肝癌组织中HSP70 蛋白含量分别为0.5284±0.0056、0.8420±0.0260、0.9810±0.0020;PI3K 蛋白含量分别为0.6047±0.0558、0.7027±0.0064、0.9311±0.0019;Akt 蛋白含量分别为0.7139±0.0028、0.7756±0.0039、0.9701±0.0010,3 组比较差异有统计学意义(F=75.546、76.007、69.693,均为P＜0.05),低分化肝癌组织中HSP70、PI3K、Akt 蛋白的含量明显高于高分化肝癌组织(t=12.256、11.560、10.532,均为P＜0.05);HSP70、PI3K、Akt 蛋白含量与肝癌组织学分化程度有关(r=0.387、0.715、0.713,均为P＜0.01);以高分化肝癌组织中的mRNA 相对表达量为1,中、低分化组的肝癌组织中HSP70 mRNA 的相对表达量分别为1.674±0.008、2.234±0.006,PI3K 分别为2.676±0.006、3.449±0.045,Akt 分别为2.754±0.004、3.366±0.006,3 组比较差异有统计学意义(F=9.784、16.580、5.933,P＜0.05),低分化肝癌组织中HSP70、PI3K、Akt mRNA 的相对表达量明显高于高分化的肝癌组织(t=0.126、0.8202、6.497,均为P＜0.05);HSP70、PI3K 和Akt mRNA 的相对表达量与组织学分化程度有关(r=0.210、0.187、0.397,P=0.001、<0.01、<0.05).HSP70 蛋白的表达与PI3K 和Akt 蛋白(r=0.715、0.713,均为P=0.001)的表达呈正相关.HSP70 蛋白表达为1 级、2 级和3 级患者的术后平均无瘤生存时间分别为31、17 和11 个月,3 组比较差异有统计学意义(均为P=0.001).PI3K 蛋白高表达和低表达患者术后平均无瘤生存时间分别为12、25 个月,两组比较差异有统计学意义(P=0.003),Akt蛋白高表达和低表达的患者的术后平均无瘤生存时间分别为11、21 个月,两组比较差异统计学意义(P=0.001).结论 肝癌组织中存在不同程度的HSP70、PI3K 和Akt 蛋白和mRNA 表达,其表达与组织学分化程度有关;HSP70 与PI3K/AKT 信号传导通路之间可能具有协同促进肝癌细胞增殖的作用.肝癌组织中HSP70、PI3K 和Akt蛋白表达是影响患者无瘤生存期的重要因素,HSP70 蛋白表达量越高,患者预后越差.
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PI3K/Akt信号通路在胆管癌中的作用
胆管癌为胆管上皮来源的恶性肿瘤，根据其解剖位置分为肝内胆管癌、肝门部胆管癌和远端胆管癌三种类型。胆管癌是具有高度侵袭性的恶性肿瘤，预后极差，其5年生存率为5%～10%，根治手术切除是其目前唯一有效的治疗方法。然而绝大部分患者在发现胆管癌时已发生其他部位的侵袭和转移。因此，早期诊断并预防胆管癌的侵袭和转移是提高其疗效的关键环节。
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落新妇甙对心脏移植效应性T细胞磷脂酰肌醇信号通路的影响
目的 探讨落新妇甙对心脏移植效应性T细胞磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI-3K/PKB)信号传导通路的影响.方法 分离BALB/C小鼠心肌细胞(2×105 /ml)和C57BL/6小鼠的脾细胞(1×106/ml),前者作刺激细胞,后者作反应细胞,进行混合细胞培养,建立小鼠心脏移植急性排斥反应体外模型.实验分4组:对照组,心肌细胞与脾细胞混合培养;3个实验组在对照组基础上,落新妇甙组加入落新妇甙(15 μg/ml);落新妇甙加PI3K激动剂组加入落新妇甙(15 μg/ml)和PI3K激动剂IL-8(20μg/ml);落新妇甙加PI3K抑制剂组加入落新妇甙(15 μg/ml)和PI3K抑制剂LY294002(20 μmol/L).TUNEL法检测T淋巴细胞凋亡情况.Western blot法检测T细胞PI3K和Bcl-2蛋白表达情况.RT-PCR法检测T细胞PKB mRNA表达情况.结果 落新妇甙组T细胞凋亡指数明显高于对照组[(74.2±11.7)%对(34.2±9.6)%,P＜0.01],PI3K、PKB、Bcl-2表达显著低于对照组(P＜0.01).落新妇甙加PI3K抑制剂组T细胞凋亡指数显著高于落新妇甙组,PI3K、PKB、Bcl-2显著低于落新妇甙组(P＜0.01).落新妇甙加PI3K激动剂组T细胞凋亡指数和Bcl-2表达与对照组的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 落新妇甙诱导心脏移植效应性T细胞凋亡与其抑制PI-3K/PKB信号通路有关.
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胃肠道恶性肿瘤组织中磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶B和细胞外信号调节蛋白激酶l/2的表达及意义
目的 探讨胃肠道恶性肿瘤组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和细胞外信号调节蛋白激酶l/2(ERKl/2)的表达及意义.方法 回顾性分析2011年8月至2013年6月间收治的50例胃肠道恶性肿瘤组织标本的临床资料.结果 胃肠道恶性肿瘤组织中PI3K、Akt和ERKl/2的阳性表达率和免疫组化评分均明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.05);患者年龄、病理类型、淋巴结转移、病理分期和远处转移情况与PI3K、Akt和ERKl/2的表达无显著相关(P＞0.05).结论 胃肠道恶性肿瘤组织中PI3K、Akt和ERKl/2呈高表达,但与临床病理无关,可能参与肿瘤发生发展的早期事件.
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磷脂酰肌醇3-激酶在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义
目的 探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)在食管鳞状细胞癌(简称食管鳞癌)中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组化SP法检测91例食管鳞癌组织和10例正常食管黏膜组织中PI3K蛋白的表达,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测30例食管鳞癌组织和癌旁正常组织中PI3KmRNA的表达,并分析PI3K表达与患者临床病理指标及预后的关系.结果 PI3K蛋白在食管鳞癌及正常食管黏膜中的阳性表达率分别为86.8%和10.0%,差异有统计学意义(P＜0.001).PI3K蛋白的表达强度与肿瘤分化程度、侵袭深度及临床分期有关(P＜0.05),而与患者性别、年龄及有无淋巴结转移无关(P＞0.05).肿瘤分化越差,PI3K蛋白表达越强(r=0.351,P＜0.05);肿瘤侵袭程度越深,PI3K蛋白表达越强(r=0.210,P＜0.05);肿瘤临床分期越晚,PI3K蛋白表达率越高(r=0.240,P＜0.05).RT-PCR结果显示,PI3K mRNA在食管鳞癌和癌旁正常组织中的相对表达量分别为0.675±0.029和0.349±0.073,差异有统计学意义(P＜0.05).PI3K mRNA的表达与肿瘤分化程度、侵袭深度和临床分期有关(P＜0.05).单因素回归分析显示,PI3K蛋白表达、分化程度、侵袭深度、有无淋巴结转移、临床分期、有无脉管瘤栓、残端是否阳性与预后相关(均P＜0.05).Cox多因素回归模型分析显示,肿瘤临床分期、侵袭深度、残端是否阳性与患者预后相关(均P＜0.05),PI3K蛋白表达与患者预后无关(x2=1.235,P=0.266).结论 PI3K蛋白和mRNA在食管鳞癌组织中的表达水平明显增高,PI3K基因在食管鳞癌发生及发展中起促进作用.PI3K蛋白表达增强提示食管鳞癌患者预后差,可以作为判断食管鳞癌预后的辅助指标.
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PI3K/Akt/mdm2信号通路活化对胃癌细胞阿霉素敏感性的影响
目的 研究PI3K/Akt/mdm2信号通路活化对胃癌细胞阿霉素(DOX)敏感性的影响.方法 分别用DOX和PI3K特异性抑制剂wortmannin处理胃癌细胞株SGC7901,采用流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡,免疫沉淀法检测PI3K活性,Western blot法检测PI3K-p85、phospho-Akt(S473)、phospho-mdm2(S166)、Akt和p53的表达.结果 DOX能诱导胃癌细胞SGC7901凋亡,且凋亡率与作用时间密切相关,联合应用wortmannin后,可促进胃癌细胞凋亡.DOX作用SGC7901细胞3、6、12和24 h后, PI3K活性逐渐增强,分别为(8.4±1.7)%、(12.7±2.1)%、(17.4±3.2)%和(16.8±2.4)%;同时,还促进Akt、mdm2磷酸化和p53表达.wortmannin可以抑制mdm2磷酸化,进一步增强p53的表达.结论 DOX可以诱导PI3K/Akt通路异常激活,并通过促进mdm2磷酸化降低胃癌细胞化疗敏感性.
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内皮素受体拮抗剂BQ-123经PI3-K/Akt信号通路改善蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤的效果
目的：探讨内皮素受体拮抗剂BQ-123对蛛网膜下腔出血（SAH）后早期脑损伤的治疗作用及其机制。方法按随机数字表法将120只SD大鼠分为假手术组、SAH组、低剂量BQ-123组（50μg／ kg）和高剂量BQ-123组（75μg／ kg），每组30只。采用枕大池二次注血法制作SAH 大鼠模型，每组造模后进一步分为6、24、72、144 h 4个时间点亚组。采用光镜和电镜观察海马区形态结构变化，免疫组化和逆转录聚合酶链反应检测海马区磷脂酰肌醇3-激酶（PI3-K）、蛋白激酶B（PKB／Akt）和雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的表达。结果（1）模型制作过程中，SAH组死亡7只，1只模型不符合标准被剔除；BQ-123高、低剂量组分别死亡6只，各组有1只模型不符合标准被剔除。终纳入统计学分析：假手术组30只，SAH组22只，BQ-123高、低剂量组均为23只大鼠。（2）与假手术组比较，SAH组各时间点PI3-K、AKt、mTOR的表达增高（均P ＜0.05）。与SAH 组比较，BQ-123低剂量组海马区神经元形态结构损伤减轻，各时间点存活神经元数量增加[（132±18），（110±16），（84±13），（92±10）个／高倍视野]（均P ＜0.05），大鼠抓力值有所升高，学习记忆功能改善；PI3-K和Akt表达进一步升高（均P ＜0.05），mTOR的表达下降（均P ＜0.05）。（3）与BQ-123低剂量组各时间点存活神经元比较，BQ-123高剂量组海马区神经元形态结构损伤减轻，各时间点[存活神经元数量（153±20）、（131±18）、（137±19）、（135±17）个／高倍视野]增加（均P ＜0.05），大鼠抓力值有所升高，动物学习记忆功能改善；PI3-K（3.8±0.8、8.9±2.4、8.6±2.4、6.2±2.0）、Akt（4.86±1.74、8.64±1.62、7.94±1.70、6.48±1.58）表达进一步增多（均P ＜0.05），mTOR（2.89±0.26、2.14±0.18、1.94±0.17、1.62±0.12）的表达下降（均P ＜0.05）。结论BQ-123对SAH 后早期脑损伤有较好的治疗作用，其机制可能与调控PI3-K／Akt信号途径有关。
