首页 > 文献资料
-
地黄饮子对海马神经元缺氧损伤的保护机制
目的 观察地黄饮子(熟地黄、巴戟天、山茱萸、石斛、肉苁蓉等)对缺血缺氧损伤海马神经细胞的保护作用并探讨机制.方法 将培养细胞分为对照组,模型组及药物保护组；其中,损伤组采用Na2S2O4 I mmol/L加低糖作用3h；药物保护组在加入损伤因素同时加入不同浓度含地黄饮子血清.通过比色法测定培养液中乳酸脱氢酶含有量(LDH),采用MTT法测定脑海马神经细胞存活率,利用线粒体内琥珀酸脱氢酶(SDH)含有量来分析地黄饮子的保护作用及其作用的有效浓度；测定缺血缺氧损伤下海马神经细胞内超氧化物歧化酶(SOD) 与丙二醛(MDA)含有量.结果 含地黄饮子血清与空白血清比例在1∶3～3∶1之间,均对缺氧神经细胞具有保护作用.降低损伤细胞LDH释放,细胞膜损伤程度减轻.MTT值不同程度升高,提示细胞活力状态提高、细胞能量代谢过程有所改善；地黄饮子可以保护缺血缺氧环境中海马神经细胞内SOD的活力,降低MDA的含有量,而且随剂量的增加而增加.结论 地黄饮子对缺氧损伤脑海马神经细胞有明显保护作用；其作用机制可能与降低氧自由基损伤有关.
-
睫状神经营养因子对谷氨酸引起海马神经细胞内游离Ca2+浓和P53蛋白表达的作用
目的:通过探讨睫状神经营养因子对谷氨酸引起海马神经细胞内游离Ca2+浓度和P53蛋白表达的作用,提供睫状神经营养因子存在非基因组快速作用途径,并对基因组信号转导产生影响的证据.方法:用活细胞内荧光探针Fura2/AM实时检测睫状神经营养因子对谷氨酸引起海马神经细胞内游离Ca2+浓度的影响,并用免疫组化方法观察睫状神经营养因子对谷氨酸引起海马神经细胞内P53蛋白表达的作用.结果:谷氨酸可引起海马神经细胞内游离Ca2+浓度快速升高,并在500μm0l/L-1范围内呈剂量依赖性.200μm0l/L-1的谷氨酸可上调P53蛋白表达.睫状神经营养因子对静息条件下海马神经细胞内的游离Ca2+浓度无显著改变.用睫状神经营养因子孵育5 min后,可快速压抑谷氨酸引起的胞内游离Ca2+浓度升高,并下调P53蛋白表达.结论:睫状神经营养因子可能通过Ca2+信号的快捷途径,启动基因组的信号转导.
-
皮质酮对体外培养的大鼠海马神经元膜电位的影响
为探讨应激激素--皮质酮对海马神经细胞膜电位的影响,采用膜片钳全细胞记录的方法,测量了原代培养的大鼠海马神经细胞膜的静息电位.结果发现,在皮质酮的作用下,海马神经细胞膜静息电位幅值明显降低,细胞膜呈去极化.推测,皮质酮可能通过抑制海马细胞的能量代谢,使细胞能量匮乏,导致膜去极化.
-
高压氧对沙土鼠脑缺血再灌注海马神经细胞NMDA受体的作用研究
显,但显著高于假手术组(P<0.01).结论 脑缺血后,海马区神经细胞NMDA受体的Bmax显著增加,氯胺酮、氯胺酮+高压氧治疗可使Bmax降低.可能通过此途径减少细胞外Ca2+内流,恢复细胞内游离Ca2+浓度,从而起到高压氧治疗脑缺血的作用.
关键词： 高压氧 脑缺血 N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA) 海马神经细胞 -
高压氧对沙鼠脑缺血海马神经细胞Ca2+-ATP酶活力的影响
目的探讨高压氧(HBO)作用后对脑缺血海马神经细胞Ca2+-ATP酶活力的影响.方法用蒙古种沙土鼠,采用双侧颈总动脉结扎制作前脑缺血模型,动物随机分为正常对照组、缺血再灌注组(夹闭双侧颈总动脉30 min制作全脑缺血模型,随后放开动脉夹使再灌流80 min)、0.1 MPa纯氧组、0.25 MPa高压氧组、0.25 MPa常氧高氮组共5个组.采用定磷法测定海马神经细胞Ca2+-ATP酶活力.结果急性脑缺血再灌注后,Ca2+-ATP酶活力显著下降(P＜0.01),经0.1 MPa纯氧和0.25 MPa高压氧作用后,Ca2+-ATP酶活力均明显恢复,与急性脑缺血再灌注组相比,差异有统计学意义(P＜0.01),而且以0.25 MPa高压氧组作用更为显著,0.25 MPa常氧高氮组Ca2+-ATP酶活力无明显改变,结论高压氧可通过恢复Ca2+-ATP酶活力以恢复细胞内游离Ca2+浓度.
关键词： 高压氧 脑缺血 Ca2+-ATP酶活力 海马神经细胞 -
3种苯二氮(卓)类药物在海马神经细胞模型中的吸收及利用度比较
目的 建立测定海马神经细胞内外地西泮、氟硝西泮和劳拉西泮含量的方法,并比较海马神经细胞模型对这3种药物的吸收利用差异.方法 采用HPLC-CAD法测定含量.色谱柱:Capcell C18(250 mmx4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水(44:56),柱温30℃,流速1.0 mL· min-1,CAD检测器,检测波长254 nm,采用外标法定量.结果 3种苯二氮(卓)类药物与培养基及细胞中的其他成分能很好分离.地西泮、氯硝西泮与劳拉西泮分别在质量浓度1.83 ～ 183.16、1.81 ～190.04、1.74 ～173.56 mg·L-1时呈线性关系(r ＞0.999 0),方法平均加样回收率分别为99.99％、100.42％和99.98％.给药培养24 h的海马神经细胞对地西泮、氟硝西泮和劳拉西泮的平均吸收率:正常组分别为45.11％、32.60％和29.73％,模型组分别为31.30％、25.98％和21.81％;平均转化利用率:正常组分别为72.98％、73.16％和74.90％,模型组分别为78.89％、83.04％和85.01％.结论 正常组对3种药物的吸收效率比模型组更高,而模型组对吸收的药物转化利用率比正常组更高.HPLC-CAD法同时测定海马神经细胞内外液中3种苯二氮(卓)药物浓度的方法准确、快速、简便,可为苯二氮(卓)类药物在海马神经细胞内的药物动力学研究提供检测方法.
-
Munc-18蛋白抗体在大鼠癫痫性脑病发病机制中的作用
目的 通过研究神经突触前膜胞内蛋白(Munc-18蛋白)抗体对癫痫大鼠海马神经细胞的影响,探讨Munc-18蛋白抗体在癫痫性脑病发病机制中的作用.方法 选择10只SD大鼠,构建大鼠癫痫模型.造模成功后取脑,将海马皮质组织利用胰酶消化分离培养海马细胞,培养后的海马细胞分为Munc-18抗体干扰组和空白对照组,Munc-18抗体干扰组均滴入不同浓度(稀释×200,×400,×1 000)的Munc-18抗体与同容积的培养液,作用20 h或40h;空白对照组只加入同容积的培养液.采用酶标仪测定细胞存活率,采用乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒检测LDH释放量、采用脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡并计算凋亡指数,以研究Munc-18抗体对海马神经细胞的损害情况.结果 Munc-18抗体干扰(20 h或40h)组三个浓度间比较,LDH释放量、凋亡指数、细胞存活率差异均有统计学意义(P均＜0.01);与空白对照组比较,Munc-18抗体干扰组作用20 h及40 h的LDH释放量、凋亡指数增加,细胞存活率减低,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 Munc-18抗体诱导神经细胞凋亡,损害神经元,可能是引发癫痫脑病的重要原因.
关键词： 癫痫性脑病 神经突触前膜胞内蛋白 海马神经细胞 乳酸脱氢酶释放 凋亡 -
高渗氯化钠溶液对原代培养海马神经细胞容积的影响
目的:观察海马神经细胞的容积在不同浓度高渗NaCl溶液中7天内的变化.方法 :原代培养妊娠大白鼠胚胎的海马神经细胞,用细胞内水分含量的测定方法测量其暴露于高渗NaCl溶液15分钟后的细胞容积.结果:细胞暴露于不同浓度的NaCl溶液15分钟,细胞容积与同一实验时间的对照值相比无显著性差异(P＞0.05).60分钟后, 所有细胞明显肿胀.1天后至第7天,各组细胞容积基本恢复至对照组细胞容积水平(P＞ 0.05).结论:海马神经细胞在暴露于高渗溶液后具有细胞容积调节功能.尽管当细胞重新置入等渗培养液后肿胀,但1天后直到第7天,细胞容积能够重新恢复至原来的水平.
-
脑益康含药血清对D-半乳糖诱导海马神经细胞损伤的保护作用
目的:研究脑益康对D-半乳糖(D-gal)诱导新生大鼠海马神经细胞损伤的保护作用.方法:运用血清药理学方法采集脑益康含药血清,D-gal复制海马神经细胞损伤模型,通过倒置显微镜观察海马神经细胞形态,MTT法测定海马神经细胞的活性.结果:脑益康保护组海马神经细胞数显著高于D-gal损伤组,受损的细胞数较少.结论:脑益康对D-gal损伤的海马神经细胞具有保护作用.
-
三种人参皂苷在海马神经细胞中的吸收利用度比较研究
海马神经元具备中枢神经元的典型特征.通过模拟相关疾病发病机制,建立体外海马细胞病理模型,进行神经药物的筛选及药效机制研究是目前常用的药理研究手段[1].中医学认为,人参具有安神益智之功效,故临床常用于神经衰弱等中枢性神经疾病的治疗.人参皂苷是人参的主要活性成分,有广泛的药理作用[2],常用的有人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rbl三种.目前未见海马神经细胞对人参中不同人参皂苷的吸收及利用程度相关报道.本文对三种常用人参皂苷在海马细胞内外含量进行比较,从细胞内外药物浓度变化的角度阐述不同人参皂苷对海马细胞的作用差异,为临床上使用人参治疗相关神经性疾病提供一定的科学依据.
-
脱氢表雄酮及其衍生物对谷氨酸致海马神经细胞损伤的保护作用
目的观察脱氢表雄酮(DHEA)及其衍生物7-羰基-脱氢表雄酮(7-oxo-DHEA)对谷氨酸诱导的海马神经损伤的保护作用.方法原代培养的SD大鼠海马神经细胞,MTT比色法检测细胞存活率;激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内Ca2+及自由基随时间变化曲线;比色法测定细胞内谷胱甘肽(GSH)水平.结果 DHEA(0.1 μmol·L-1)及7-oxo-DHEA(0.1 μmol·L-1)预保护后的谷氨酸损伤海马神经细胞胞内Ca2+及自由基变化曲线均明显低于无预保护组,GSH水平明显高于无预保护组(P＜0.01).结论 DHEA及7-oxo-DHEA对谷氨酸诱导海马神经细胞损伤有保护作用.
关键词： DHEA 7-oxo-DHEA 海马神经细胞 谷氨酸 细胞内Ca2+ -
内源性内皮衍生超极化因子对缺氧/再给氧致大鼠海马神经细胞凋亡的抑制作用
目的研究乙酰胆碱( ACh)诱导内源性内皮衍生超极化因子( EDHF)对缺氧/再给氧大鼠海马神经细胞凋亡的影响。方法取原代培养的大鼠海马神经细胞制备缺氧/再给氧损伤模型；大鼠大脑中动脉( MCA)血管段用一氧化氮合酶抑制剂NG-nitro-L-argininemethyl ester ( L-NAME)和前列环素抑制剂indomethacin ( Indo)预处理，用ACh诱导血管内皮细胞合成释放内源性EDHF；分别用流式细胞仪法和Ho-echst荧光法检测海马神经元凋亡。结果流式细胞仪法和Hoechst荧光法检测均表明假缺氧组海马神经细胞的凋亡率很低，分别为3.1%和2.2%左右，而缺氧/再给氧的模型组细胞凋亡率有显著升高；与缺氧/再给氧模型组相比，内皮完整血管段合用1μmol/L ACh 或合用1μmol/L ACh、30μmol/L L-NAME及10μmol/L Indo均可明显抑制缺氧/再给氧所致的细胞凋亡，而单用ACh或内皮完整的血管或ACh合用去内皮的血管段对细胞凋亡无明显影响。结论 ACh诱导大鼠脑血管内皮细胞释放的内源性EDHF对缺氧/再给氧海马神经细胞凋亡有明显的抑制作用。
关键词： 内皮依赖性超极化因子 海马神经细胞 细胞凋亡 缺氧/再复氧 -
虾青素促进丙烯酰胺所致大鼠海马神经细胞损伤的恢复
目的 从细胞水平上研究虾青素对丙烯酰胺所致海马神经细胞损伤恢复的影响.方法 通过B27无血清培养法进行SD乳鼠的大脑海马神经细胞的分离、培养及其鉴定;MTT法检测细胞存活率,比色法测定细胞内抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px的活性,线粒体的MDA及NO的含量.结果 虾青素能提高丙烯酰胺损伤过的海马神经细胞的存活率,提高了丙烯酰胺损伤后细胞SOD、CAT活性、GSH-Px的活力,并降低了细胞线粒体中的MDA和NO的含量.结论 虾青素对丙烯酰胺造成的高海马神经细胞损伤有促进恢复的作用.
-
虾青素对活性氧所致海马神经细胞氧化损伤的保护作用
目的 从细胞水平上研究了虾青素对活性氧所致海马神经细胞损伤的保护作用.方法 通过B27无血清培养法进行SD乳鼠的大脑海马神经细胞的分离、培养及其鉴定；MTT法检测细胞存活率,比色法测定细胞LDH的释放量,SOD、CAT活性、GSH-Px的活力及MDA的含量.结果 虾青素能提高活性氧损伤过的海马神经细胞的存活率,减少细胞LDH的释放量,并增加细胞SOD、CAT活性、GSH-Px的活力,降低MDA的含量.结论 虾青素对活性氧诱导的海马神经细胞损伤具有保护作用.
-
Orexin-A对大鼠海马神经细胞凋亡的影响及机制
目的 探讨Orexin-A对大鼠海马神经细胞凋亡的影响及作用机制.方法 提取36只Wistar大鼠的海马神经细胞,培养后随机分为空病毒组、PLCβ1组、PLCβ4组,分别用空病毒和携带目的基因PLCβ1、PLCβ4的慢病毒转染沉默目的基因,各组各自取一半细胞加入Orexin-A(100 nmol/L)培养8 h,用流式细胞术测算各组细胞凋亡指数,Western blotting法检测海马神经细胞外信号调节激酶(ERK)1/2的表达.结果 与不加Orexin-A比较,加Orexin-A后空病毒组、PLCβ4组海马神经细胞凋亡率降低、ERK1/2表达升高(P均<0.05),而PLCβ1组海马神经细胞凋亡率、ERK1/2表达无明显变化(P均>0.05).结论 Orexin-A可减少大鼠海马神经细胞的凋亡,该作用可能与OX1R/OX2R-Gq-PLCβ1信号通路有关.
关键词： Orexin-A 海马神经细胞 细胞凋亡 细胞外信号调节激酶1/2 大鼠 -
酸性肽对硝普钠诱导体外培养SD大鼠海马神经细胞凋亡的保护作用
目的:观察不同剂量酸性肽(AP)对NO供体硝普钠(SNP)诱导的大鼠海马神经细胞凋亡的影响.方法:分离培养新生SD大鼠海马神经细胞,用终浓度为50 μmol/L的SNP诱导海马神经细胞凋亡.实验共设空白对照组、SNP处理组和AP实验组,AP实验组分别加入浓度为0.037 5、0.075 0、0.150 0 g/L的AP与SNP共培养24 h后,通过细胞形态学观察、MTT测定、吖啶橙荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳等方法检测细胞凋亡情况及细胞存活率.结果:SNP处理组海马神经细胞存活率降低至58.9%±4.5%,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).3个AP实验组海马神经细胞存活率均高于SNP处理组(P<0.05或0.01).SNP组凋亡细胞的形态学改变及细胞核固缩、核碎裂现象明显,DNA琼脂糖凝胶电泳图谱具有DNA ladder;各AP实验组凋亡细胞形态学改变不明显,DNA琼脂糖凝胶电泳图谱没有DNA ladder出现.结论:AP对SNP诱导的海马神经细胞凋亡具有保护作用.
-
刺五加多糖对过氧化氢诱导海马神经元氧化应激损伤及细胞凋亡相关基因-2家族的影响
目的 观察刺五加多糖(ASPS)对H2O2诱导海马神经元氧化应激损伤及细胞凋亡相关基因-2(Bcl-2)家族的影响,并探讨其可能机制.方法 运用海马神经细胞原代培养技术,采用H2O2诱导建立细胞氧化损伤模型.观察细胞形态学变化;MTT法测定细胞活性;TUNEL法,检测H2O2诱导大鼠海马神经元凋亡;免疫组化法检测细胞中Bcl-2,Bax蛋白表达;化学比色法检测细胞匀浆液中一氧化氮合酶(NOS),过氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)含量.结果 形态学观察显示:与模型组比较,ASPS组细胞损伤程度明显减轻;ASPS组细胞活性比模型组细胞活性高:TUNEL法显示ASPS预处理组细胞阳性率明显高于模型组细胞;ASPS组Bcl-2表达量较高而Bax表达量较低;NOS活力及MDA生成量ASPS组明显低于模型组,但SOD活力ASPS组显著高于模型组.结论 ASPS能提高海马神经细胞的抗氧化应激损伤能力并上调Bcl-2基因表达,下调Bax表达.
关键词： 刺五加多糖 海马神经细胞 氧化应急损伤 细胞凋亡相关基因-2家族 -
西红花苷干预对急性低氧条件大鼠脑海马FOXO3α表达的影响
目的 探讨西红花苷干预对急性低氧72小时大鼠脑海马FOXO3α表达的影响.方法 90只健康雄性SD大鼠随机分为5个组:正常对照组,低氧模型组,西红花苷低(25 mg/kg)、中(50mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量组.采用RT-PCR技术检测脑海马FOXO3αmRNA表达,免疫组化与Western blot蛋白免疫印迹法检测脑海马FOXO3α蛋白表达.结果 RT-PCR、免疫组化及Western blot结果均显示:大鼠脑海马FOXO3αmRNA及蛋白表达量在低氧模型组高于正常对照组(P＜0.05),西红花苷干预各剂量组均低于低氧模型组,其中以中、高剂量组作用显著(P＜0.05).结论 急性低氧刺激后大鼠海马FOXO3α表达增强,西红花苷干预对其表达有明显的抑制作用,并发挥神经保护作用.
-
盐酸法舒地尔对慢性脑低灌注损伤大鼠海马细胞的保护作用
目的：观察 Rho 激酶抑制剂盐酸法舒地尔(hydroxy fasudil,HF)对慢性低灌注脑缺血所致大鼠海马神经细胞损伤的保护作用。方法采用永久性结扎大鼠双侧颈总动脉(permanent occlusion of the bi-lateral CCA,2VO)制备大鼠慢性不完全性全脑缺血模型,将 SD 大鼠随机分为假手术组、脑缺血模型组和 HF治疗组,运用 Morris 水迷宫行为学方法检测大鼠空间学习记忆能力；用 HE 染色观察海马组织形态学改变。结果Morris 水迷宫检测发现模型组大鼠学习记忆能力受损,与假手术组比较逃避潜伏期延长、空间辨别能力下降；组织学观察模型组大鼠海马 CA1细胞发生丢失,组织结构异常。连续给予盐酸法舒地尔30 d能改善大鼠学习记忆功能,减少脑缺血所致的大鼠海马神经细胞丢失。结论盐酸法舒地尔可减少慢性脑缺血所致的大鼠海马神经元的丢失,改善学习记忆功能。
-
刺五加多糖对海马神经元抗氧化酶系统的影响
目的 研究刺五加多(Acanthopanacis senticosi polysaccharides, ASPS)对大鼠海马神经元抗氧化酶系统的影响.方法 运用海马神经细胞原代培养技术,采用过氧化氢(H2O2)诱导建立细胞氧化损伤模型.实验共分为6组:阴性对照组、模型组和4个ASPS组(终浓度为10.00,5.00,2.50,1.25 μg·mL-1).观察细胞形态学变化;MTT法测定细胞活性;免疫组化法鉴定海马神经元,化学比色法测定细胞内超歧物过氧化物酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力和丙二醛(MDA)含量.结果 形态学现察显示:与模型组比较,ASPS组细胞损伤程度明显减轻;ASPS组细胞活性比模型组细胞活性高(P<0.01),SOD、CAT、GSH-Px活力ASPS组明显高于模型组,但MDA的含量ASPS组显著低于模型组.结论 ASPS能提高海马神经元的抗氧化酶的活力,并对海马神经元氧化损伤有保护作用.
