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洋葱抑藻效应及其化感物质分离鉴定
目的 研究洋葱不同部位的抑藻效应及洋葱化感抑藻物质的分离鉴定.方法 采用不同浓度洋葱鳞茎和洋葱叶水浸提液作用于铜绿微囊藻(M icrocystis aeruginosa);通过有机溶剂萃取以及GC-MS联用鉴定洋葱鳞茎中化感抑藻物质.结果 洋葱鳞茎和洋葱叶浸提液均有很好的抑藻效应,且具有明显的剂量-效应及一定范围内的时间-效应关系;鳞茎浸提液在第5d,除5 ml/L浓度组尚有少量藻细胞存在,其余各组藻细胞全部死亡,抑制率为100％;洋葱叶浸提液的抑藻效果较其鳞茎浸提液差,但在第6d,其高浓度组抑制率也达到了97.4％.洋葱鳞茎中主要化感物质为三(羟甲基)硝基甲烷、壬酸、正癸酸、甲基磺酸酐等.结论 洋葱鳞茎浸提液具有非常好的抑藻作用且明显好于其叶浸提液抑藻效果.
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医用胶原膜浸提液对CHL细胞染色体畸变作用的研究
目的:研究医用胶原膜用于医学领域的遗传毒性.方法:在代谢活化和非代谢活化测试系统下对胶原膜浸提液进行中国仓鼠肺(CHL)细胞的染色体畸变试验.结果:胶原膜浸提液终浓度在31.25～250μl/ml时,观察24h和48h收集的染色体,畸变率均在正常范围(<5%).直接诱变剂丝裂霉素C(0.20μg/ml),在非代谢活化时染色体畸变率为31%～40%,间接诱变剂环磷酰胺(60μg/ml)在S9代谢活化时染色体畸变率为37%～46%,均使染色体畸变率增加.结论:在本实验条件下医用胶原膜浸提液未诱发CHL细胞染色体畸变率增加.
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一次使用性输液器与输液针细菌内毒素检测方法的改进
按标准方法(GB/T4233@2-93)检测一次使用性输液器与输液针上的细菌内毒素,系在无菌条件下将输液(血)器吸人10 ml或适量无热原水,将输液针或头皮针浸泡于10 ml或适量无热原水中,于37℃温箱中保温2 h,而后收集浸提液进行检测.该法制备浸提液所需时间较长,即使如此,输液针与头皮针因孔径小仍难以浸提充分.为此,对该法作如下改良:在无菌条件下,将输液器剪碎,输液针、头皮针截成小段,置于装有30～50 ml无热原水的三角瓶内,用力振荡5 min.取该液检测.
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浸提方法对药用卤化丁基橡胶塞体外细胞毒性评价的影响
目的:研究不同浸提方法对药用卤化丁基橡胶塞体外细胞毒性评价的影响.方法:采用不同的浸提方法制备了浸提液,以MTT 法评价药用卤化丁基橡胶塞浸提液对小鼠成纤维细胞L929活性与增殖的影响.结果:通过不同的浸提方法制备的浸提液,11批中的9批样品体外细胞毒性实验出现了有统计学意义的差异.结论:破坏原有样品的正常形态即改变表面积与体积比对于评价卤化丁基橡胶塞的体外细胞毒性实验(MTT)是有影响的.
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壳聚糖澄清剂精制中药水提液的应用前景
各种浸提方法得到的中药浸提液一般体积较大,往往含有多种成分及混有药渣、沉淀物、泥沙等固体杂质.为了去除杂质,提高有效成分含量,便于制剂成型,增加制剂稳定性,减少服用量,保证药剂疗效,必须对浸提液进一步分离和精制.这也是改变传统中药制剂"粗、大、黑”的关键.絮凝澄清法是在中药提取液或提取浓缩液中加入一种澄清剂以吸附架桥和电中和方式除去溶液中的粗粒子,以达分离纯化的目的一种方法,近年来逐步受到人们的重视.絮凝剂的种类很多,有鞣酸、明胶、蛋清、101果汁澄清剂、ZTC澄清剂、壳聚糖等.本文将对壳聚糖作为中药水提液澄清剂的可行性及应用前景作一些探讨.
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乌头块根浸提液对3种牧草的化感效应
乌头Aconitum carmichaeli是传统的大宗中药材之一,广泛种植于四川省江油市,所释放的化感物质严重影响周围和后茬作物的生长发育.试验以当地种植乌头的后茬牧草白三叶、黑麦草和紫花苜蓿为材料,研究了乌头块根浸提液(ETR)浸种对种子萌发和幼苗生长的化感效应.结果表明,牧草品种不同,种子发芽和幼苗生长对ETR浓度的响应也不一样.低浓度的ETR(0.01 g·L-1)促进紫花苜蓿种子发芽,ETR 1.00 9·L-对3种牧草的种子发芽率均有抑制作用.用高浓度的ETR(1.00 g·L-1)浸种,苗高的大降幅为:紫花苜蓿(42.05％)≥白三叶(40.21％)＞黑麦草(10.64％).因此,在乌头-牧草种植体系中,选择对ETR相对不敏感的黑麦草有益于减轻乌头产生的化感效应,提高土地整体生产力.随ETR浸种浓度提高,抑制牧草种子中的蛋白质、淀粉和肌醇磷酸盐水解,降低游离氨基酸、可溶性糖和可溶性磷含量,进而影响种子发芽.此外,高浓度的ETR还显著降低牧草幼苗的根系活力、硝酸还原酶活性和叶绿素含量,说明ETR中的化感成分可抑制养分吸收,硝酸盐同化和光合作用,妨碍幼苗生长.
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鼻通贴细胞毒性测定方法的确定
目的定鼻通贴细胞毒性的测定方法。方法采用小鼠成纤维细胞ATCC（L929），比较分别采用MTT法和琼脂覆盖法对鼻通贴进行细胞毒性试测定的结果。结果 MTT法检测细胞毒性方法简便、快速，结果比较稳定可靠，能进一步量化。结论 MTT试验方法更适合鼻通贴的细胞毒性测定。
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评价几种国产聚氨酯海绵的生物相容性
目的:评价A、B、C、D 4种国产聚氨酯海绵材料的体外生物相容性,为开发VAC治疗专用敷料提供实验室依据.方法:参照美国
试验方法,分别用上述4种海绵进行以下生物学测试:(1)细胞毒性试验(四唑盐比色法,即MTT法);(2)急性全身毒性试验;(3)热源试验;(4)眼结膜角膜刺激试验;(5)致敏试验.实验数据根据标准进行分析和评估.结果:4种海绵的细胞毒性级别均为0～1级;未见任何急性毒性反应和热源反应;无眼结膜角膜刺激性;无致敏性.结论:4种国产聚氨酯海绵具有良好的生物相容性. -
分光光度与HPLC法测定荷叶总黄酮的研究
荷叶Nemlumbo lotus用作中草药早就收载入传统医书中[1],现代医学研究证明荷叶浸提液有显著降低血脂的作用[2].
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荷叶中黄酮苷的微波提取研究
荷叶为睡莲科植物荷Nelumbo nucifera Gaertn.的干燥叶,有清热利湿、升发清阳、止血的作用.在荷叶的化学成分中具有明显生物活性的主要是黄酮苷和生物碱两大类物质.荷叶浸提液具有较好的降血脂、治疗动脉粥样硬化等功能[1].本实验通过正交试验设计优化提取荷叶中黄酮苷的方法,以便更好地开发利用荷叶这一丰富资源.
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煅烧鹿角松质骨浸提液对BMSCs成骨分化的影响
目的 观察煅烧鹿角松质骨(CACB)化学组成对大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)的增殖和成骨分化的影响.方法 利用无血清培养基制备CACB浸提液;电感耦合等离子体(ICP-OES)定量检测浸提液中的Ca、P、Mg的浓度;CCK-8试剂盒检测BMSCs增殖能力;碱性磷酸酶(ALP)试剂盒定性及定量评价ALP活性;Real-time PCR评价成骨相关基因表达.结果 CACB浸提液中Ca、P、Mg的浓度及pH值均高于普通培养基,CACB浸提液可抑制BMSCs的增殖能力,但ALP活性及成骨相关基因ALP、骨钙素(OCN)及骨桥蛋白(OPN)相对表达量均明显高于普通培养基组,与成骨诱导组相近.结论 CACB体外溶解产物可明显促进BMSCs的成骨向分化.
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辣木通便作用研究初探
目的:研究辣木的通便效果.方法:以辣木叶为原料,通过制成干叶浸提浓缩液鲜叶榨汁液对小白鼠进行灌胃试验,利用复方地酚诺酯建立小鼠便秘模型,研究辣木叶对小白鼠润肠通便功能的影响.结果:辣木干叶浸提浓缩液能显著缩短小白鼠首次排便时间,并能增加小白鼠的排便质量和粪便粒数.灌以辣木鲜叶榨汁液的小白鼠比灌以辣木干叶浸提浓缩液的小白鼠的通便功能增强.结论:辣木具有通便功能.
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东北油松花粉酶法提取液抗疲劳作用的实验
我国古代就用松花粉(松黄)养颜抗衰,去病延年[1].东北松花粉中含有丰富蛋白质、氨基酸、必需脂肪酸、维生素、微量元素、黄酮、有机酸、甙类和3%～4%未知物质[2].本实验制备了东北油松花粉浸提液,根据有关文献的方法[3～5]对其生物活性与药物作用进行研究,探讨了对动物疲劳状态、缺氧状态及SOD活性的影响.
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镁合金材料的溶血率及影响因素
背景:镁合金作为潜在的新型医用可降解生物金属材料受到越来越多的关注,体外纯镁合金浸提液具有溶血作用.目的:探讨镁合金浸提液与其溶血率的关系.方法:将镁合金浸提液稀释,按GBT 16175-2008<医用有机硅材料生物学评价实验方法>第13 部分<溶血试验>的改良方法进行溶血实验.测量A值,计算溶血率,各稀释度溶液钠、镁离子浓度及pH值.结果与结论:100%,50%,25%,10%,5%,2.5%和1%稀释度镁浸提液的溶血率分别为65.3%,66.7%,33.8%,11.8%,6.2%,0.3%和-0.3%.随着稀释度的加大,镁离子浓度呈下降趋势,而钠离子则无明显波动.100%,50%,25%,10%,5%和2.5%稀释度之间的pH值差异无显著性意义(P>0.05),均高于1%稀释度(P<0.05).提示镁合金浸提液的高pH值和离子浓度是影响其体外试验溶血的主要因素.
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新型纳米仿生骨植入材料的生物相容性
背景:新型生物材料的孔径形状、大小以及孔隙率对引导细胞的附着、浸润和生长具有重要作用.目的:初步评价新型纳米仿生骨植入材料3-羟基丁酸-co-3-羟基戊酸共聚物/溶胶-凝胶生物活性玻璃[poly(3-hydroxybutyrateco-3-hydroxyvalerate)/sol gel bioactive glass,PHBV/SGBG]的生物相容性.设计、时间及地点:细胞-材料学实验,于2006-03/09 在中山大学附属第三医院中心实验室完成.材料:PHBV/SGBG由华南理工大学材料学研究所提供,骨髓基质细胞为课题组前期制备.方法:确定PHBV/SGBG浸提液的标准浓度为培养液与材料表面积之比10 mL/cm2,将PHBV/SGBG浸入完全培养液中,于37℃、体积分数为5%的CO2饱和湿度培养箱中浸提两三天,吸出浸提液,无菌封存备用.同法制备8倍、4倍、2倍、1倍、0.5倍、0.25倍、0.125倍标准浓度的PHBV/SGBG浸提液.主要观察指标:扫描电镜观察PHBV/SGBG超微结构,采用常规称量法计算PHBV/SGBG孔隙率,MTT法评价材料的毒性分级,通过直接接触培养法观察骨髓基质细胞与PHBV/SGBG材料的生物相容性.结果:电镜下 PHBV/SGBG材料为疏松多孔结构,孔隙相互联通,其中可见纳米级的SGBG颗粒镶嵌或包裹在PHBV基体孔壁上,孔隙率＞90%.培养第1,3,5天各浓度PHBV/SGBG浸提液组毒性分级均在0～1级.骨髓基质细胞可紧密附着于PHBV/SGBG材料表面,黏附生长,并有突起向PHBV/SGBG材料的连通微孔内伸展.结论:新型纳米仿牛骨植入材料PHBV/SGBG对骨髓基质细胞无毒性作用,具有优良的细胞亲和性,可能与材料的泡沫多孔状结构有关.
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镁黄长石浸提液诱导多潜能干细胞的成骨分化
背景：镁黄长石属于硅酸盐生物活性陶瓷，在生物体内具有降解作用，降解溶出的离子产物能够诱导细胞成骨分化，是组织工程骨支架材料的良好选择。目的：通过研究不同浓度的镁黄长石浸提液对诱导性多潜能干细胞增殖和成骨分化的影响，确定镁黄长石浸提液促进诱导性多潜能干细胞成骨分化的佳浓度。方法：将诱导性多潜能干细胞培养于不同浓度的镁黄长石浸提液中，用MTT法检测细胞的增殖情况；在第7，14，21天时，分别收集培养上清液，检测其中碱性磷酸酶、骨钙素、Ⅰ型胶原蛋白含量。结果与结论：镁黄长石浸提液促进诱导性多潜能干细胞增殖的作用具有时间依赖性，第3天时，诱导性多潜能干细胞增殖明显，第5天与第3天相比差异无显著性意义，至第7天时则明显减弱。同时，1/4浓度浸提液组促进诱导性多潜能干细胞增殖作用强。作为细胞成骨分化标志的碱性磷酸酶和骨钙素含量随时间增加而增加，1/4浸提液浓度组含量高。作为细胞成骨分化早中期标志的Ⅰ型胶原蛋白在第7天时各组均未检出，第14，21天时，同样是1/4浓度浸提液组含量高，这些说明镁黄长石浸提液中的Ca、Mg、Si离子参与了诱导性多潜能干细胞的成骨分化，其中1/4浓度浸提液(Ca离子2.37 mmol/L、Mg离子1.12 mmol/L、Si离子1.05 mmol/L)促进诱导性多潜能干细胞体外成骨分化的效果好。
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牙科氧化锆氧化铝陶瓷复合材料的生物相容性
背景:口腔的生理环境十分复杂,口腔修复体材料长期接触弱酸性体液,处在物理、化学、生物、机械等因素的复杂影响之中.因此,对口腔材料进行生物相容性的评价是进入临床实验前的重点研究内容,也是保证临床安全的重要技术指标.目的:初步评价氧化锆氧化铝陶瓷复合材料的生物相容性.方法:实验分6组:氧化锆氧化铝(1∶1)1 00％浸提液组、氧化锆氧化铝(1∶1)50％浸提液组、氧化锆氧化铝(4∶1)100％浸提液组、氧化锆氧化铝(4∶1)50％浸提液组,以及体积分数0.64％苯酚的阳性对照组和100％新鲜培养液的阴性对照组.根据GB-T16886 15-2003医疗器械生物学评价标准和要求进行急性溶血实验、体外细胞毒实验,分别测试以上6组浸提液对兔血细胞、L-929小鼠成纤维细胞的影响.结果与结论:各浓度实验组吸光度值与阴性对照组间均差异无显著性意义(P＞0.05),所有实验组的细胞毒性评级均为0-1级;氧化锆氧化铝(1∶1)100％浸提液组、氧化锆氧化铝(4∶1)100％浸提液组溶血率分别为1.27％,2.4％,小于公认的5％的安全标准.结果表明,氧化锆氧化铝(1∶1),(4∶1)陶瓷复合材料急性溶血实验阴性,体外细胞毒实验阴性,均具有良好的细胞相容性和血液相容性.
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贻贝粘蛋白创面修复敷料体外细胞毒性的检测方法
背景：在贻贝粘蛋白创面修复敷料的体外细胞毒性检测中，由于蛋白分子表面带正电荷，1∶9的浸提比会使细胞聚团而导致测定产生误差，影响测定结果。
目的：在已有标准的基础上，根据贻贝粘蛋白特殊的性质及使用状态，改进贻贝粘蛋白创面修复敷料的浸提比例或前处理方法。
方法：①浸提液法：将贻贝粘蛋白创面修复敷料与细胞培养液分别以1∶9、1∶131浸提比例制备浸提液，分别以贻贝粘蛋白创面修复敷料浸提液、天然乳胶浸提液、高密度聚乙烯浸提液及细胞培养液培养L929小鼠成纤维细胞。②直接接触法：分别以蒸馏水、贻贝粘蛋白创面修复敷料溶液、二甲基亚砜及细胞培养液培养L929小鼠成纤维细胞。
结果与结论：采用浸提比1∶9测定样品体外细胞毒性时，细胞产生聚团作用，不适用于样品毒性的检测；调整浸提比为1∶131后，絮凝作用和细胞聚团现象明显降低，提高了检测结果的可信度，显示样品无细胞毒性。直接接触法显示样品无细胞毒性。采用经调整过的浸提液法或直接接触法均可适用于贻贝粘蛋白创面修复敷料体外细胞毒性的检测。 -
复合壳聚糖微球-丝素基载药α-磷酸三钙骨水泥的细胞相容性及毒性
背景：磷酸钙骨水泥具有良好的生物相容性和骨传导性，已被应用于临床，但其不良的力学性能和缺乏骨诱导性限制了其进一步发展和应用。目的：制备壳聚糖微球-丝素基载药α-磷酸三钙骨水泥，验证其细胞相容性及细胞毒性。方法：分别以含体积分数10%胎牛血清和1%双抗的α-MEM培养基、苯酚、100%及50%复合壳聚糖微球-丝素基载药α-磷酸三钙骨水泥材料的浸提液培养MC3T3-E1细胞，采用MTT法评估细胞生长增殖情况，采用乳酸脱氢酶活性检测法判断复合壳聚糖微球-丝素基载药α-磷酸三钙骨水泥材料的毒性。将MC3T3-E1细胞系与复合壳聚糖微球-丝素基载药α-磷酸三钙骨水泥材料共培养，扫描电镜观察细胞在材料表面的附着及生长。结果与结论：复合壳聚糖微球-丝素基载药α-磷酸三钙骨水泥材料浸提液对MC3T3-E1细胞的生长增殖无明显影响，无明显细胞毒性。MC3T3-E1细胞在复合壳聚糖微球-丝素基载药α-磷酸三钙骨水泥材料表面生长良好，伸展充分，在材料表面伸出伪足，与材料贴附紧密，表明壳聚糖微球-丝素基载药α-磷酸三钙骨水泥细胞相容性良好。
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以连续浸提法研究铜宫内节育器的大鼠致畸敏感期生殖毒性
背景：铜宫内节育器是目前中国常用的宫腔内植入避孕三类医疗器械，在长期植入后意外怀孕或停止使用后短期内怀孕的情况下，是否对胚胎或胎儿有影响尚无明确结论。
目的：通过观察大鼠致畸敏感期尾静脉注射铜宫内节育器浸提液对孕鼠和胎鼠的影响，评价铜宫内节育器的安全性。
方法：将60只雌性妊娠SD大鼠随机均分为对照组、高剂量组、中剂量组与低剂量组，高、中、低剂量组从妊娠的第1天开始分别尾静脉注射浸提比例为0.2，0.1，0.05 g/mL的铜宫内节育器浸提液，每日注射量是0.01 mL/g，对照组给予同体积的生理盐水，连续注射20 d。20 d后处死孕鼠，测量体质量，检查两侧子宫和内脏器官，分离胎鼠，记录子宫与胎鼠质量、黄体数、着床数、死胎、活胎和吸收胎等；记录胎鼠体质量、身长、尾长、枕骨骨化程度及外观、骨骼、内脏的异常情况。
结果与结论：高、中、低剂量组的窝数、着床数、活胎数、黄体数、活胎率、死胎率、子宫连胎质量、吸收胎数与对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)，各组孕鼠内脏无畸形及异常。高、中、低剂量组胎鼠身长、尾长、体质量、上枕骨骨化率与对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)，胎鼠外观、骨骼、内脏无畸形及异常。表明在致畸敏感期大鼠静脉注射铜宫内节育器浸提液后，未见母体毒性、胚胎生长发育异常及胎鼠畸形及其他胚胎毒性。
