首页 > 文献资料
-
用单水相发酵体系生产4-雄烯二酮的新技术研究
本实验研究了应用不同的乳化剂、种子培养周期、接种量、发酵周期及溶氧量对耻垢分枝杆菌Mycobacterium smegmatis ZS3进行发酵生产4-雄烯二酮的影响，并对从摇瓶发酵到200 L发酵罐发酵的效价及进行200 L发酵罐菌种发酵的流加补糖方案进行了研究。研究结果显示，在进行200 L发酵罐菌种发酵的过程中，将溶氧量控制为25%-30%，在发酵60 h后进行流加补葡萄糖且将残糖的浓度维持在1 g/L时，终植物甾醇转化为4-雄烯二酮的效价高于9.5 g/L。
关键词： 耻垢分枝杆菌 4-雄烯二酮 溶氧 摇瓶发酵 200 L发酵罐流加发酵 -
溶氧对L-天冬酰胺酶发酵的影响及其控制
目的探索溶氧对L-天冬酰胺酶发酵过程的影响及其控制方法.方法通过装液量试验、接种量试验、葡萄糖试验和氧载体试验,考察摇瓶发酵过程中溶氧对L-天冬酰胺酶合成的影响,采用通纯氧自控pH的发酵工艺进行溶氧控制和pH控制.结果采用通纯氧自控pH的发酵工艺,可延长发酵周期,有效防止菌体过早自溶,大大促进L-天冬酰胺酶的合成,较分批发酵提高产酶83%,达到110 u/ml.发酵动力学特性分析表明,该发酵方式L-天冬酰胺酶的合成与菌体生长不相关,控制比生长速率μ为0.15～0.301/h,均有利于L-天冬酰胺酶的合成,可使QPmax达到3922 mmol/g.h.结论溶氧对大肠杆菌L-天冬酰胺酶的合成有严重影响,已建立了控制溶氧的发酵工艺.
-
重组大肠杆菌高密度发酵生产L一色氨酸
为提高重组大肠杆菌生产L-色氨酸的产量,减少乙酸和色素的生成,考察了比生长速率的梯度控制和溶氧的分阶段控制对生产L-色氨酸的影响.在确定了合适的工艺控制后,L-色氨酸的产量提高为41.8g/L,比工艺优化前提高了30％.
-
溶氧浓度对rhG-CSF工程菌高密度发酵的影响
目的 确定rhG-CSF工程菌高密度发酵的佳溶氧浓度.方法 通过通入纯氧,高密度发酵的溶氧值可以精确控制.考察不同溶氧浓度对工程菌的生长、质粒丢失率、乙酸积累情况以及rhG-CSF表达的影响,来确定溶氧的佳控制范围.结果 工程菌生长阶段溶氧控制在25%,诱导后控制在35%,有利于菌体生长和外源蛋白表达,终菌体密度为(79.6±2.1)g/L,表达量为(40.2±1.2)%.结论 溶氧对工程菌rhG-CSF高密度发酵有显著影响.
-
搅拌桨组合的构型对螺旋霉素发酵合成的影响
通过对三种不同构型的搅拌桨在70 m3发酵罐螺旋霉素发酵过程的应用设计研究,发现不同的搅拌构型对螺旋霉素发酵的影响作用不同.混合式搅拌桨传质能力强、混合效果好、搅拌剪切温和,有利于螺旋霉素产生菌的生长和产物的合成,螺旋霉素平均放罐效价较径向流组合搅拌桨提高了11.1%.
-
轴芯通气喷气助力式搅拌发酵罐简析
通过分析传统发酵罐存在的问题及原因,针对性地研究了解决的方法,并成功设计出一种新型发酵罐--轴芯通气喷气助力式搅拌发酵罐.
-
在吸水链霉菌中表达透明颤菌血红蛋白基因提高子囊霉素产量
为了解决子囊霉素(1)发酵过程低溶氧的问题,本研究将透明颤菌(Vitreoscilla)血红蛋白基因(vgb)整合至1生产菌株吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)中,构建工程菌SIPI-FK520-2,通过RT-PCR分析检测到了vgb基因的转录表达,进一步利用CO结合差光谱分析也证实了工程菌中透明颤菌血红蛋白(VHb)具有生物活性.后在发酵罐进行该工程菌的发酵培养研究,结果表明,与野生菌相比,工程菌发酵过程溶氧水平明显改善,1产量提高了38％,达到1 269.7 mg/L.
-
搅拌调整对L-色氨酸发酵的影响
本试验采用25 L自动发酵罐,在保持其他因素不变的前提下,通过调整发酵罐搅拌来控制发酵液的溶氧浓度.通过测定发酵过程中的溶氧浓度、菌体浓度、乙酸生成量、质粒稳定性及L-色氨酸(1)合成量等指标,确定了适搅拌速度和搅拌桨大小.通过优化发酵搅拌条件,使得1的产量提高到了61.0 g/L.本研究为1的工业化生产优化提供了依据.
-
泰勒涡柱对肌苷发酵过程的影响
在50 m3通气搅拌发酵罐中采用新型进气装置构建了泰勒涡柱流,以缓解肌苷发酵过程中的溶氧限制.结果表明,泰勒涡柱有助于减轻气泡聚并,减小气泡尺寸,提高发酵罐的供氧能力.发酵前期菌体的大摄氧率(OUR)由85 mol·m-3·h-1提高到100mol·m-3·h-1,肌苷产率由32 g/L提高到36 g/L.进一步降低搅拌电流,可节电54％.
-
溶氧对生物转化泰乐菌素为其酰化物的影响
研究了溶氧对耐热链霉菌A80生物转化泰乐菌素为其酰化物的影响,确定该生物转化反应是显著的需氧过程.生长细胞培养转化过程具有与一般抗生素发酵不同的2个摄氧率高峰.初步建立了分阶段溶氧控制的生物转化过程,终转化率达到85%.
-
分段控制溶氧提高裂殖壶菌生产DHA效率
为提高裂殖壶菌发酵生产DHA的水平,研究发酵溶氧水平对菌体生长,油脂含量及组成和DHA积累的影响,在摇瓶水平上,通过控制装液量和转速的相对定性的方法研究相对溶氧对裂殖壶菌发酵培养的影响,在此基础上,发酵罐中利用搅拌和通气控制溶氧对裂殖壶菌代谢进行调控.结果表明,在摇瓶发酵中,装液量为50 mL/250 mL时裂殖壶菌油脂含量、DHA产量及生物量均为较佳水准,分别为15.77,7.70,39.50 g/L.当溶氧水平太高或者太低的时候,对DHA的积累都会产生不利影响.转速为200 r/min时裂殖壶菌油脂含量、DHA产量及生物量为高,分别为15.68,7.49,38.66 g/L.在发酵罐发酵水平上考察相对低溶氧和相对高溶氧对裂殖壶菌发酵的影响,发现随着搅拌转速的提高,油脂积累量、DHA产量和菌体生物量均得到很大提高,但过高的转速(600 r/min)剪切力较大,不利于细胞积累.通过实验发现过高或过低的溶氧水平对DHA的积累会产生不利的影响,这与摇瓶培养裂殖壶菌所得结果相符,而分段控氧策略利于菌体生长和油脂积累,下一步将继续优化分段调控策略,对裂殖壶菌的工业化发酵生产DHA奠定理论与实践基础.
-
重组Pichia pastori高密度培养和表达过程的溶氧调控
在重组人血清白蛋白(recombinant human serum albumin,rHSA)Pichia pastori表达系统中,研究了高密度培养时细胞生长、改变碳源和诱导表达时溶氧的变化和调控规律,溶氧与细胞生长和重组蛋白表达密切相关.发酵前期的细胞生长阶段,细胞需氧降低表明碳源甘油的消耗,根据溶氧水平适时流加碳源甘油;改变碳源前,应停止流加甘油碳源,并以溶氧指标判断甘油是否消耗完全;重组蛋白诱导时流加甲醇的速度应缓慢增大,并保持细胞一定的需氧水平.高密度培养时通过流加底物速度、搅拌转速、通气量和富氧培养来关联控制发酵液溶氧水平.
关键词： 溶氧 重组Pichia pastori 高密度培养 -
高密度发酵解脂假丝酵母生产RNA的工艺研究
为进一步优化RNA生产工艺,通过对解脂假丝酵母发酵培养,研究了pH、溶氧、还原糖浓度、高密度补料分批发酵和高密度连续发酵等因素对RNA产量及还原糖转化成菌体的转化率(g-DCW/g-reducing sugar)的影响.实验结果表明,佳培养条件为pH 4,溶氧30％.在分批发酵中,培养基糖浓度为40 g/L时,高DCW (dry cell weight)可达19.5 g/L,培养时间为8h,RNA高含量达到14.3％ (g-RNA/g-DCW),转化率为48.2％.在佳pH和溶氧条件下进行pH-stat补糖分批发酵,控制罐内培养基糖浓度始终维持在15 g/L以下,高核酸含量达到14.2％,转化率达到43.5％,高菌体浓度35.6 g/L,比40 g/L糖浓度条件下分批发酵时的菌体浓度提高了75％.在此基础上进行高密度连续发酵,终结果与高密度分批发酵相似.首次实现了高密度发酵解脂假丝酵母制备RNA.
-
高氧液用于肿瘤病人开胸术后缺氧的疗效观察及护理
氧疗是治疗机体缺氧的重要方法,舒氧康(蓝孚生物医学工程技术有限公司生产)通过基液溶氧活化,可使液体中物理氧溶解的量增加10倍,使氧分压由1 kPa提高到90～100kPa.静脉输入高氧液,可使人体组织缺氧得到明显改善,本组通过对56例开胸术后病人使用舒氧康的疗效进行观察.介绍如下:
-
溶氧对重组毕赤酵母高密度发酵生产腺苷蛋氨酸的影响
目的 考察发酵液中不同的溶氧浓度对重组毕赤酵母高密度发酵生产腺苷蛋氨酸的影响.方法 通过改变通气量、搅拌转速和辅助通入纯氧的方式将发酵液中溶氧浓度控制到试验设定值.结果 当控制发酵液中溶氧浓度在30%时,SAMe产量高.结论 通过控制发酵液中溶氧浓度有助于提高重组毕赤酵母高密度发酵高表达腺苷蛋氨酸.
-
基因工程菌发酵表达 rhG - CSF 的条件优化
目的：通过优化基因工程菌 Escherichia coli BL21（DE3）Plys 表达重组人粒细胞集落刺激因子（ rhG -CSF）蛋白的发酵工艺，提高蛋白产量。方法以100 L 规模发酵为例，从不同的接种量（1%~10%）、加入 IPTG 进行诱导时的不同 OD600nm值，诱导表达后的不同溶氧可控制范围（20%~80%）等方面进行优化。用 SDS - PAGE 对蛋白表达量进行检测。结果优化后的方案为：采用5%的接种量，在 OD600nm达到10~15时加入诱导剂 IPTG，诱导起始后前20 min 控制溶氧在80%以下，20 min 后通过补加氨水控制 pH 在7.0左右，补料调节控制溶氧在20%~40%的范围内，诱导表达5 h 后收集菌体。优化后的发酵方案极大提高了蛋白表达量。结论 rhG - CSF 蛋白发酵方案的优化对大规模生产具有重要的指导意义。
关键词： 重组人粒细胞集落刺激因子 发酵 溶氧 基因工程菌 -
高氧液在缺血性脑血管病中的应用
氧疗是治疗机体缺氧的重要方法,基液通过高氧医用液体治疗仪的溶氧活化,使液体中物理溶解的氧含量增加10倍.氧分压由21kPa提高到80kPa～100kPa.静脉输入高氧液体可迅速提高患者的血氧饱和度,改善脑组织的缺氧症状,对缺血性脑血管病的治疗具有重要作用.
-
自制高氧液治疗矽肺并慢性呼吸衰竭60例疗效观察
氧疗是治疗有机体缺氧的重要方法.高氧液治疗是通过基液溶氧活化,使液体中物理溶解的氧含量增加10倍,氧分压由21kPa提高到100kPa,使机体缺血缺氧得到改善.我们通过对60例矽肺并慢性呼吸衰竭(简称呼衰)患者输注高氧液,取得了较好的疗效.1资料与方法
-
必特螺旋霉素基因工程菌发酵参数的研究
曾利用同源重组技术构建了稳定的必特螺旋霉素基因工程菌.本研究在30L全自动发酵罐从菌体生长,糖、氮源利用及发酵效价增长情况考察了必特螺旋霉素基因工程菌的发酵过程,研究了发酵过程摄氧率(OUR)、二氧化碳释放率(CER)、溶解氧(DO)等在线参数的变化,着重研究了不同溶氧水平对必特螺旋霉素发酵的影响.结果表明溶氧水平尤其是发酵前期溶氧水平对必特螺旋霉素发酵影响至关重要,前期临界氧浓度应控制在25%左右.本研究为必特螺旋霉素发酵放大工艺研究提供了依据.
-
溶氧水平和磷酸盐对庆大霉素合成与分泌的影响
研究了溶氧与磷酸盐对庆大霉素合成与分泌的影响.在摇瓶实验中不同的装液量对庆大霉素的效价与分泌率都有显著的影响,在发酵罐上控制溶氧水平在40%左右有利于庆大霉素合成与分泌.添加一定浓度的磷酸盐对菌体生长有利,但却抑制庆大霉素的合成与分泌,当磷酸盐浓度高于0.05%时,次级代谢基本被抑制.
