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ELISA试剂检测抗HCV反应性结果分析
目的 探讨丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)进口酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂在血液筛查中的效果及与国产试剂、重组免疫印迹试验(RIBA)确证检测的相关性.方法 用RIBA确证试剂及国内销量前2名的国产抗HCV ELISA试剂对56例进口抗HCV ELISA试剂检测呈反应性的标本进行检测分析.结果 56例标本经RIBA确证结果为阳性12例,不确定18例,阴性26例.3种试剂均为反应性的9例标本中,确证阳性7例,不确定1例,阴性1例.结论 目前市售的丙型肝炎ELISA试剂均存在较大的生物学假阳性,不同试剂间检测结果仍存在一定差异.为确保输血安全,建议有条件的采供血机构实验室抗HCV检测时以国产和进口试剂联合检测为佳.
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合肥地区无偿献血者丙型肝炎病毒区段抗体表达模式分析
目的：探讨无偿献血者丙型肝炎病毒（HCV）各区段抗体表达规律及模式，为明确各区段抗体在疾病诊断及预后分析中的可能价值提供依据。方法采用一种国产HCV抗体酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂对34609例无偿献血者的187份HCV抗体阳性反应标本进行复检，复检阳性标本均进行重组免疫印迹（RIBA）确证试验，并对结果进行统计学分析。结果无偿献血者中HCV抗体ELISA初筛阳性反应率为5．40‰，RIBA复检结果显示阳性率为0．69‰，不确定比率为0．78‰，ELISA假阳性率为3．92‰，S/Co比值与RIBA试验结果呈正相关性；阳性结果中以抗Core阴性、抗NS3-1阴性、抗NS3-2阳性、抗NS4阳性、抗NS5阴性模式出现频率高，NS4区段抗体检出率高，为95．8％，而NS3-2区段抗体检出率则为87．5％；不确定结果中，以抗NS3-2出现频率高，为66．7％，其次为抗NS4区段，不确定结果中仅见2份抗Core抗体阳性，未见NS5区段抗体的检出。结论采用RIBA试验作为HCV感染的诊断标准，本地区献血者人群中HCV 感染率为0．69‰。抗NS3-2和NS4抗体可以作为早期诊断指标，证实NS5区段抗体在无偿献血的感染HCV患者的标本中检出频率较低。
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自制抗-HCV 诊断试剂评价体系的建立
目的：建立 ELISA 法抗-HCV 诊断试剂评价体系，筛选出适合本地区丙肝流行特征的的献血员抗-HCV 检测策略。方法采用重组免疫印迹试验（RIBA）对献血员中抗-HCV 筛查阳性或处于检测高值阴性的441份血清标本进行确认，选取部分阳性、高值阴性血清，建立抗-HCV ELISA 试剂评价体系，并评价8种试剂的灵敏度、特异度和一致率等。结果构建了抗-HCV 诊断试剂参考评价体系，其中24份阳性系列血清包含多种RIBA 试验阳性条带组合；24份阴性系列血清中有8份属于含干扰物质的高值阴性标本；并建立浓度梯度稀释系列标本用于灵敏度评价。在评价体系中8种抗-HCV ELISA 试剂检测一致率分别为83．33％、85．42％、87．50％、87．50％、89．58％、93．75％、89．58％和79．17％，应用双抗原夹心法的6号试剂灵敏度检测值明显高于其他试剂（P ＜0．05）。结论自制抗-HCV ELISA 诊断试剂评价体系适用于实验室日常工作，在制定本地区筛选策略时应充分考虑试剂间的互补性，以保障血液安全。
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多厂家ELISA试剂检测抗-HCV结果不一致的确证
笔者在应用国产ELISA试剂对血液进行抗-HCV复检时,曾检出78例复检结果与初检结果不符合的"阳性"样品,从78例"阳性"样品中随机抽取17例样品用进口重组免疫印迹试验(RIBA)检测,结果有4例确证为阳性;7例为可疑;6例为阴性.现将结果报告如下.
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国产和进口化学发光仪在梅毒螺旋体抗体检测中的应用比较
目的:探讨希森美康化学发光酶免疫分析仪(HISCL5000)和安图化学发光仪(LUMO A2000)在梅毒螺旋体抗体(TPAb)检测中的应用比较.方法:选取我院经过HISCL5000(临界值指数COI≥1)检测的200例和(LUMOA2000(S/CO≥1)检测阳性标本202例,之后使用TPPA进行比对检测,后选择两者结果不符的标本进行重组免疫印迹验证.结果:安图化学发光仪(Auto1umo A2000)和希森美康化学发光酶免疫测定仪(HISCL5000)两类仪器与TPPA比较,梅毒阳性检出率差异无统计学意义(x 2=2.202,P＞0.05).TPPA阴性而重组免疫印迹验证结果为单个IgG抗体片段,分别为TmpA和Tp15,终判定TP抗体结果为不确定;TPPA和Autolumo LUMO A2000检测阳性,而HISCL5000检测阴性标本,重组免疫印迹验证结果为单个IgG抗体片段Tp453,终判定TP抗体结果为不确定,TPPA、Autolumo LUMO A2000和HISCL5000检测阳性标本,验证结果为2个以上IgG抗体片段,终结果为阳性.结论:安图化学发光仪(Autolumo A2000)检测梅毒的结果与希森美康化学发光酶免疫测定仪(HISCL5000)一样准确,完全可以作为日常筛查方法,满足检验科的临床应用.
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无偿献血人群抗-HCV筛查及确认情况分析
目的 评估献血人群抗-HCV筛查反应性、抗-HCV重组免疫印迹试验(RIBA)确认和HCV核酸检测情况,以探索献血人群HCV筛检效果.方法 对2010年9月15日-2012年8月15日采集的无偿献血者血液标本,采用2个不同厂家的抗-HCV酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂和核酸试剂对其进行HCV筛检,对抗-HCV反应性标本用RIBA方法进行确认.结果 共检测无偿献血者标本316 965例,其中抗-HCV筛查反应性率为0.19％.在609例有反应性标本中,抗-HCV RIBA确认阳性为96例(15.76％),不确定为158例(25.94％),阴性为355例(58.29％).统计分析显示2种筛查试剂标本反应性率和RIBA检测结果差异有统计学意义(P＜0.05).检测出HCV核酸阳性标本为57例,经RIBA方法确认抗-HCV阳性为55例(96.49％),不确定为1例(1.75％),阴性为1例(1.75％).结论 在献血人群中抗-HCV ELISA试剂检测存在生物学假阳性,一定程度上造成血液资源的不必要浪费,宜制定相应的归队策略.在血液筛查中应注重试剂质量的选择,以有效保障血液安全.
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抗-HCV的ELISA阳性结果与RIBA确证结果比较
目的:比较分析抗丙型肝炎病毒(抗-HCV)酶联免疫吸附试验(ELISA)阳性结果与重组免疫印迹试验(RIBA)确证结果之间的关系.方法:采用2个不同产家ELISA试剂对36 283份无偿献血者血清标本作抗-HCV检测,并收集104份抗-HCV检测不合格血清标本进一步作RIBA确证试验.结果:104份抗-HCV ELISA检测不合格标本中,双试剂呈阳性反应标本32例,RIBA确证阳性15例,不确定12例,阴性5例;单试剂呈阳性反应标本72例,RIBA确证阳性1例,不确定35例,阴性36例.S/CO≥1标本81例,RIBA确证阳性16例,不确定40例,阴性25例;0.7≤S/CO＜1.0标本23例,RIBA确证不确定7例,阴性16例.结论:简单以ELISA检测S/CO值大于等于或小于1作为判定抗-HCV是否阳性容易产生较多的假阳性甚至假阴性结果,我们在对献血员反馈检测结果信息和进行永久屏蔽时应慎重考虑.
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化学发光微粒子免疫测定技术对低风险人群HCV感染确证的应用价值
目的 应用化学发光微粒子免疫测定(CMIA)技术检测一种酶联免疫吸附试验(ELISA1)反应性样本,通过HCV核酸和蛋白检测参考标准分析CMIA在献血者HCV感染确证中的应用价值.方法 102例ELISA1反应性献血者血液样本补充核酸3项联检、另一种酶联免疫吸附试验(ELISA2)、丙型肝炎病毒抗体补充试验(Western Blot法)和CMIA试验.结果 102例抗-HCV阳性献血者中,32例(31.37%,32/102)HCV RNA反应性样本,50例(49.02%,50/102)ELISA2及Western Blot均为反应性.以HCV核酸检测结果为参考标准,CMIA与之低度相关(Spearman相关系数rs=0.395,P<0.01),Kappa检验两者一致性弱(Kappa=0.270,P<0.01).以ELISA2及Western Blot蛋白检测结果为参考标准,CMIA与之结果高度相关(Spearman相关系数rs=0.713,P<0.01),Kappa检验两者高度一致性(Kappa=0.674,P<0.01).结论 CMIA作为HCV感染后蛋白标记物的检测方法,对低风险人群HCV病毒感染的确证有较大的应用价值.
关键词： 化学发光微粒子免疫测定 重组免疫印迹试验 免疫吸附试验 丙型肝炎病毒 确证感染 -
血液筛查中丙型肝炎病毒检测方法的应用评价
目的 比较血液筛查中丙型肝炎病毒的检测方法,并探讨其应用价值.方法 收集2011年8～12月血液筛查中酶联免疫吸附试验(ELISA)、丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)阳性标本共41例,使用重组免疫印迹试验进行确证；同时用新创、Ortho两种抗-HCV ELISA试剂以及Architect Anti HCV Reagent化学发光试剂进行检测,比较三者结果的差异.结果 统计学分析显示.3种检测方法的检测结果差异有统计学意义.重组免疫印迹试验检测HCV阳性35例,阴性6例,与Architect化学发光法结果相符,新创ELISA法检测41例全为阳性,Ortho ELISA法检测阳性33例,阴性8例.结论 Ortho试剂对HCV检测的特异性高于新创试剂,化学发光法对HCV检测的特异性高于ELISA法,化学发光法与ELISA法联合检测能提高血液筛查中HCV的阳性检出率,对可疑标本再做重组免疫印迹试验分析.
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化学发光免疫分析检测丙型肝炎病毒抗体与重组免疫印迹试验确证阳性的关联研究
目的：探讨化学发光免疫分析（CLIA）检测丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）与重组免疫印迹试验（RI-BA）确证结果的关系。方法对10309例在山东大学附属省立医院就诊的门诊及住院患者采用 CLIA 法进行抗-HCV 检测，对检测为有反应性的标本通过 RIBA 作进一步确证。结果CLIA 初筛抗-HCV 抗体有反应性的标本共计106例，采用 RIBA 试剂对106例反应性标本进行检测，确认阳性37例、不确定28例、阴性41例，确认阳性比例为34．91％，且确认阳性标本比例与 S/CO 比值呈正相关。确证阳性标本条带检出率有差别，Core 检出率高，其次依次为 NS3、NS4、NS5。结论确证结果与确证的条带分布有关，可根据 CLIA 法 S/CO 比值预测确证结果，有利于对结果进行正确和合理解释。
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深圳地区抗-HCV RIBA结果不确定献血者的随访研究
目的 追踪随访深圳地区抗-HCV ELISA结果呈反应性、RIBA结果为不确定的献血者,研究分析其HCV转归情况,为抗-HCV ELISA呈反应性结果的无偿献血者召回提供理论基础和科学依据.方法 追踪随访2年前32名抗-HCV RIBA结果为不确定的献血者,对其血液标本进行抗-HCV ELISA、HCV-RNA(NAT)、ALT以及HCV病毒载量检测,若HCV-RNA阴性则加做RIBA确证试验.结果 32例随访者血液标本中6例抗-HCV ELISA呈反应性,包含1例ALT升高同时HCV-RNA和病毒载量测定阳性;3例RIBA确证阳性.结论 抗-HCV RIBA结果为不确定的献血者仍属于献血高危人群,存在一定的HCV输血传播风险.
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ORTHO抗-HCV酶联免疫试剂2种孵育试验程序在血液筛查中的比较研究
目的 确定1种3代抗-HCV酶免试剂(ORTHO HCV 3.0 ELISA试剂)2种孵育试验过程在血液筛查中是否存在差异.方法 随机留取常规献血者血液筛查中检出的抗-HCV反应性的血液标本180(人)份作HCVRNA检测,并用RIBA和不同于血站常规抗-HCV筛查的酶免试剂作抗-HCV复测；依据ORTHO HCV 3.0 ELISA检测试剂说明书中的长、短2种孵育检测程序,同时作对比检测.结果 180份初筛抗-HCV阳性标本中,有16份ORTHO HCV 3.0 ELISA 2种检测程序的检测结果不一致,其中5份为短孵育试验反应性、11份为长孵育试验反应性,短孵育试验漏检2份被确证抗-HCV阳性标本.ORTHO HCV 3.0 ELISA试剂的长孵育检测程序灵敏度高于短孵育试验程序,2种试验程序的S/CO值分布没有差别,但RIBA不确定标本其S/CO值分布在一定的灰区范围内.结论 在献血人群血液筛查中,采用具有更高灵敏度的长孵育酶免程序和设定合理的结果判定灰区,有助于预防输血传播 HCV,提高血液的安全.
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丙型肝炎病毒抗体筛查阳性结果确证方案的探讨
目的 明确抗-HCV酶免检测结果 与确证阳性结果 之间的相互关系,以期楚立简便、经济的血液筛查实验室抗.HCV确证试验方案.方法使用重组免疫印迹试验结合核酸检测方法对134份酶免抗-HCV阳性样本确证,初步探讨2或3种抗.HCV酶免试剂(Ortho、Murex和科华联合复检的S/Co值与阳性预期值的关系及不同试剂组合检测的阳性预期值.结果 134份样本中,92份真阳性,5份可疑,其余均为阴性.Ortho和Murex试剂的S/Co与阳性预期值呈正相关.当S/Co≥3.8时,阳性预期值分别可达98.33%和97.78%.Murex联合科华、Ortho联合科华以及3种试剂同时检测为阳性时的阳性预期值为100%;Ortho联合Murex的阳性预期值为98.48%,与上述其它2或3种试剂组合比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 2种或3种酶免试剂联合复检的确证方案优于美国CDC推荐的S/Co≥3.8方案.在常规血液筛查实验室.可以选择3种抗-HCV试剂中的任2种同时复检,先行对抗-HCV阳性标本确证,对无法确证的样本再作重组免疫印迹试验分析.
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重组免疫印迹试验对3种进口抗-HCV ELISA试剂组合应用的探讨
目的 探讨3种进口抗-HCV ELISA试剂两两组合的应用价值.方法 采用3种进口抗-HCV ELISA试剂同时筛查51例抗-HCV结果 不一致的弱阳性标本,并用抗-HCV分段确证试剂进行确证.结果 51例抗-HCVELISA弱阳性标本,抗-HCV分段确证试剂阳性35例,可疑16例,16例可疑标本经NAT检测分析:HCV RNA阳性7例,确认为阳性;9例为阴性,判定为抗-HCV可疑.单一ELISA试剂假阴性率19.24%～72.41%,试剂组合后假阴性率4.76%～30.95%.结论 选择抗-HCV检测试剂的佳组合对保证输血安全意义重大.
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无偿献血者抗-HCV筛查与RIBA补充实验情况的综合分析
目的 评估献血人群抗-HCV ELISA试剂的初筛效果、重组免疫印迹试验(RIBA补充实验)和HCV RNA核酸检测的情况,以探索无偿献血人群抗-HCV的筛查效果.方法 收集2013年5月31日-2015年1月20日118 350例标本,采用2个不同厂家抗-HCV ELISA初筛试剂检测,初筛有反应性的标本(S/CO≥0.75)采用RIBA的方法进行补充实验,RIBA补充实验不确定结果的标本进行核酸检测.结果 2种初筛酶免试剂检测结果的阳性符合率为64.6％,阴性符合率为99.9％,总符合率为99.9％.北京万泰抗-HCV抗体诊断试剂盒检测阳性标本93.3％分布于S/CO≥10.0以上,上海科华抗-HCV抗体诊断试剂盒检测阳性标本91.3％分布于S/CO≥7.0以上.2种初筛试剂单边阳性的结果中,RIBA补充实验总阳性结果的比例为2.7％,不确定结果的比例为18.4％,阴性结果的比例为78.9％,北京万泰试剂单边阳性对应有2例RIBA阳性结果,上海科华试剂单边阳性对应有1例RIBA阳性结果,2种试剂检测性能具有一定的互补性.初筛单边阳性及RIBA补充实验结果为不确定的标本核酸检测均为阴性.RIBA阳性标本条带分析结果中,Core、NS3、NS4.1、NS4.2、NS5条带所占的比例分别为35.4％、33.9％、14.9％、2.4％、13.4％;RIBA不确定结果中,仅有Core、NS3 2种条带,比例为49.2％、50.8％.结论 在献血人群中抗-HCVELISA试剂检测存在生物学上的假阳性,一定程度上造成血液资源的浪费,选择灵敏度高、特异性好的初筛试剂,辅以RIBA补充实验,对于保证输血安全具有非常重要的意义.
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追踪分析化学发光在低风险人群HCV感染确证中的应用
目的 通过追踪分析化学发光在低风险人群HCV感染确证中的应用.方法 收集102例ELISA1抗-HCV反应性献血者及5例追踪血液样本、100例多次献血者阴性对照样本,补充另一种酶联免疫吸附试验(ELISA2)、重组免疫印迹试验(WB)、化学发光试验(CMIA)和HCV RNA定性检测,分析CMIA检测结果与HCV感染确证的关联.结果 以ELISA2及WB法检测结果为参考标准,CMIA与参考标准结果高度相关(Spearman相关系数m=0.866,P＜0.01),Kappa检验两者一致性极强(Kappa=0.857,P＜0.01).追踪5例CMIA与参考标准不一致样本,5例ELISA2、WB、HCV RNA均为阴性,2例CMIA阳性,3例ELISA1阳性.结论 CMIA可以较好检出低风险人群确证HCV感染样本,但也存在一些假阳性.
关键词： 化学发光微粒子免疫测定 重组免疫印迹试验 丙型肝炎病毒 确证感染 追踪研究
