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聚合酶链反应在血液筛选中的应用进展
输血或输血制品导致相关疾病的传染已越来越受到人们的重视.酶联免疫吸咐试验(ELISA)是血液筛选的经典的方法,已得到了普遍应用.但在窗口期内,已受病毒感染的献血者体内还没有产生足够数量的抗体,ELISA检测结果为阴性.这是输血或输血制品导致病毒感染的主要原因.
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隐匿性丙型肝炎病毒与输血后丙型肝炎的相关性
通过血液或血液制品感染的输血后丙型肝炎(PTHC)在抗-HCV EIA检测方法运用于血液筛选后发病率已明显下降.但由于多方面的原因,PTHC至今仍不能完全杜绝其感染危险性.隐匿性丙型肝炎病毒(OHCV)的发现和确定,为PTHC的发生提供了新证据,也将为进一步的防治工作提出策略.
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血红蛋白试纸条在无偿献血者血红蛋白初筛中的应用
无偿献血者献血前必须检测血红蛋白,目前在采供血机构检测血红蛋白的方法主要有CuSO4比重法和血细胞计数仪法.采供血机构现在大多采用CuSO4比重法筛选献血者,该方法虽然操作简单,但存在的一定的误差[1～3].血球计数仪虽然测定结果准确,但携带不方便,不适合于流动献血车的工作模式,往往应用于单采成分献血者的筛选.笔者采用血红蛋白试纸条对献血者进行了血红蛋白分析,为献血者血液筛选提供了一种可选择的方法,现将结果报告如下.
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HCV包被抗原与检测灵敏度关系的研究
我国各血站检验室于1993年起应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测HCV抗体对献血员进行筛选.为了选择优质试剂用于血液筛选,保障安全输血,笔者研究了HCV包被抗原与ELISA试验检测灵敏度的关系.
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五种不同厂家抗-HIV试剂的质量评价
目的选择一种优质、高效和实用的抗-HIV ELISA血液筛选试剂.方法采用五种不同厂家的抗-HIV ELISA试剂(其中三种国产试剂,两种进口试剂)分别对国家参比品、卫生部质控品和无偿献血者标本进行检测,分析比较五种试剂的符合率、阳性检出率、假阳性率、低检测限、稳定性和前带效应.结果五种试剂盒用于检测抗-HIV国家参比品的总符合率都达到100%;常规标本的阳性检出率均达到100%;21 658份无偿献血标本抗-HIV阳性率为0.01%;进口试剂C假阳性率低于进口试剂D和国产A、B、E试剂(P＜0.05);C试剂的精密度和批间稳定性分别为5.985%和5.93%,明显低于A、B、D、E试剂(P＜0.05);国产试剂A、B、E试剂的低检测限降低至0.125 NCU,但其假阳性率较高;C试剂也不存在前带效应.结论五种试剂的总符合率均达到国家要求,阳性率均为0.01%;国产试剂的假阳性率高于进口试剂,低检测限低于进口试剂;C试剂的稳定性优,也不存在前带效应.选择C试剂进行抗-HIV血液筛选效果佳.
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HIV血液筛选试剂的评价
目的:选择一组优质、高效和实用的HIV ELISA血液筛选试剂组合.方法:采用4种不同厂家的HIV ELISA试剂(其中两种国产试剂,两种进口试剂)分别对国家参比品、卫生部质控制品和无偿献血者标本进行检测,分析比较4种试剂的符合率、阳性检出率、假阳性率、低检测限、稳定性和前带效应.结果:4种试剂的符合率均达到国家要求;阳性检出率均为0.01%;国产试剂的假阳性率高于进口试剂,低检测限低于进口试剂;C试剂的稳定性优,也不存在前带效应.结论:本文提示采用B和C组合进行HIV血液筛选效果较好.
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核酸检测方法在献血员肝炎筛查中的初步应用
目的将核酸检测方法应用于献血员肝炎筛查,了解某地区血液安全水平和常规血液筛检中两次酶免检测方式的可靠性.方法 44份Murex-abbott抗-HCV阳性标本经科华酶免试剂复检后,使用罗氏COBAS AmpliScreen单独检测HCV RNA;486份来自某地区的合格献血标本采用24份标本混合检测的方法,用罗氏COBAS AmpliScreen检测HBV DNA和HCV RNA. 结果 44份标本用科华酶免试剂复检,结果只有13份标本呈抗-HCV阳性;3份HCV RNA阳性标本中1份为科华试剂检测抗-HCV阴性.486份合格献血标本进行罗氏COBAS AmpliScreen 24份混合形式筛检后,发现3例HBV DNA阳性标本,阳性率为0.62%,未发现其他核酸标记物阳性的标本.结论我国血液筛查的HBsAg检测存在漏检的现象,在常规血液筛检中,NAT检测只能作为酶免抗体检测的一种补充手段,如果NAT能取代我国血液二次酶免筛检中的一次,则能在大程度上保障血液安全.
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核酸扩增技术在上海血液筛检中的初步应用
目的为正确评估目前酶免抗体筛检方法的血液安全性,探讨在我国血液筛检中引进核酸扩增技术(NAT),防止酶免抗体筛检方法窗口期漏检的可行性.方法使用ProcleixTMTMA HIV-1/HCV检测方法,分2个阶段,分别以8份样品和24份样品混合的形式,总共筛选了103539份上海市区的献血标本.结果发现5份第2次酶免检测(EIA-2)HCV抗体和NAT同时阳性的标本,同时也发现275份(0.27%)EIA-2 HCV抗体阳性但NAT阴性标本和107份(0.10%)EIA-2 HIV抗体阳性但NAT阴性的标本,未发现血清抗体转换窗口期标本.结论上海市的血液安全水平目前已接近发达国家水平,HCV和HIV的感染危险性已经小于1∶100000,ProcleixTMTMA HIV-1/HCV检测技术具有较高的敏感性和特异性,适合在中国血液筛检中应用.
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核酸检测技术与酶联免疫检测技术在血液筛检中的初步应用比较
目的 了解山东地区献血者的乙肝病毒感染状况并为今后开展常规核酸检测技术(NAT)检测提供实验依据.方法 使用ELISA和NAT检测法筛选无偿献血者血液样本11334份,应用实时荧光定量PCR仪检测样本的HBV DNA含量.结果 在11334份血液样本中发现HBsAg EIA和NAT同时阳性的样本237份,HBsAg EIA阴性但NAT阳性的样本7份和HBsAg EIA阳性但NAT阴性的样本23份.结论 核酸检测能够提高HBV的检测灵敏度,荧光定量PCR仪可以应用于献血者的大规模筛选.
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全国血站系统检验室室间质控调查分析
血站系统供血者的血液筛选是安全输血的重要措施.为了提高全国血站检验室的检验水平,确保供血及各类血液制品的质量,笔者与中国医学科学院输血研究所及卫生部临床检验中心合作,从1992年起开展了全国血站和单采浆点检验室室间质控的调查.调查内容为血液常规筛选中的ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV和梅毒等5项检测.现将7年来共15次调查结果报告如下.
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核酸扩增检测技术和酶联免疫吸附在人类免疫缺陷病毒检测中的应用价值
血站是无偿献血的主要场所,也是临床急救和疾病预防血液的主要来源,因此加强血站血液筛选对预防血液途径传染性疾病的发生具有重要的意义[1].近年来,艾滋病的发病率呈现明显的上升趋势,人免疫缺陷性病毒(HIV)携带者的比例也显著增加,导致无偿献血志愿者中HIV感染比例有所上升,因此加强血站HIV携带者血液的筛查对有效预防HIV交叉感染意义重大[2].血清学检测是血站HIV检测的主要手段,但是对于HIV感染"窗口期"患者血清学方法很难检测到,但其仍然是威胁血液安全的主要原因[3,4].近年来,随着核酸扩增检验技术(NAT)的发展,其被迅速应用于血站HIV的检测,并体现了显著的优势[5,6].本研究就NAT和ELISA筛选血液中HIV的价值进行探讨,旨在为血站HIV检测提供指导和参考价值.
