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成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者CD4+CD25+T细胞的变化研究
目的:通过观察成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA)患者CD4+CD25+T细胞的变化并与速发性1型糖尿病(T1DM)比较,了解成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者T细胞免疫功能的变化及与1型糖尿病的异同点.方法:LADA组24例,速发性T1DM 18例,对照组20例,应用流式细胞技术测定3组入选者T细胞表面分子CD4、CD8、CD25、CD4+CD25+、CD8+CD25+、CD4+CD25+CD62L+,以百分比表示各表面分子阳性T细胞占外周血淋巴细胞的比例.结果:LADA与T1DM组CD4+T细胞、CD4/CD8比值明显高于健康对照组(P＜0.01),LADA与T1DM对比无差异.LADA组CD25+、CD4+CD25+、CD4+CD25+CD62L+T细胞高于健康对照组(P＜0.05),明显高于T1DM组(P＜0.01).T1DM组CD25+、CD4+CD25+、CD4+CD25+CD62L+T细胞略低于健康对照组,但无统计学意义(P＞0.05).结论:LADA患者外周血中诱导免疫耐受的CD4+CD25+、CD4+CD25+CD62L+T细胞较对照组升高并明显高于T1DM患者.LADA患者胰岛β细胞功能下降较速发性T1DM患者相对缓慢可能与CD4+CD25+T细胞的免疫保护有关.
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CD4+CD25+T细胞在系统性红斑狼疮中的表达及意义
目的:探讨CD4+CD25+T细胞、IL-10在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血的表达及临床意义.方法:人组30例SLE患者和20例正常对照者,其中活动性SLE患者17人,非活动性SLE患者13人.用流式细胞仪检测SLE患者和正常对照者的外周血CD4+CD25+T细胞阳性率,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IL-10浓度.结果:活动性和非活动性SLE患者CD4+T细胞总数均低于正常对照者;活动性和非活动性SLE患者CD4+CD25+T细胞阳性率高于正常对照者;活动性SLE患者IL-10浓度显著高于非活动性SLE患者和正常对照者.SLE患者CD4+CD25+T细胞阳性率和血清IL-10浓度与补体C3、抗DNA抗体水平及SLEDAI积分均无相关性.结论:SLE患者外周血CD4+CD25+T细胞是活化T细胞的标志,IL-10分泌异常与SLE的发病有关.
关键词： CD4+CD25+T细胞 IL-10 系统性红斑狼疮 -
胃肠肿瘤患者外周血树突状细胞功能失调与CD4+CD25+T细胞失衡的临床意义
目的:探讨胃肠肿瘤(GIC)患者外周血单个核细胞(PBMCs)来源树突状细胞(DCs)和CD4+CD25+T细胞(Tregs)的免疫功能状态,以及其与肿瘤临床病理分期和手术的关系.方法:收集早期胃肠癌(Ⅰ/Ⅱ期)患者术前、术后第7天以及晚期癌(Ⅲ/Ⅳ期)患者外周血,以健康成人外周血为对照.提取单个核细胞(PBMCs),流式细胞术(FACS)分别检测Tregs占CD4+T细胞的比例.PBMCs经贴壁法分离提取DCs,经rhGM-CSF、rhIL-4体外扩增培养至第5天,获得未成熟DCs (imDCs),FACS检测表型;imDCs经rhTNF-α诱导培养至第7天,获得成熟DCs (mDCs),MTT法和ELISA法分别检测mDCs与自体T细胞混合培养时mDCs刺激T细胞增殖能力以及上清液中IFN-γ的含量.结果:晚期胃肠癌患者imDCs表型HLA-DR、CD80及CD86均显著低于健康成人和早期癌患者(P＜0.01);早期胃肠癌术后第7天患者imDCs表型HLA-DR及CD86表达显著低于健康成人(P＜0.05).晚期胃肠癌患者mDCs刺激自体T细胞增殖及分泌IFN-γ的能力与健康成人相比均有所减弱(P=0.073,P= 0.182)CD4+T细胞中Tregs的比例显著低于健康成人和早期癌患者(P＜0.001);早期胃肠癌患者术后Tregs比例略低于术前(P=0.148)及健康成人(P=0.068).HLA-DR、CD86表达与Tregs比例呈负相关性.结论:胃肠肿瘤患者尤其晚期和术后患者外周血DCs功能失调以及Tregs失衡可能和机体抗肿瘤细胞免疫耐受密切相关.
关键词： 胃肠肿瘤 树突状细胞 CD4+CD25+T细胞 表型 免疫耐受 -
CIK治疗前后肿瘤患者外周血CD4+CD25+调节型T细胞变化研究
目的 探讨细胞因子诱导的杀伤 (Cytokine-induced killer cells,CIK)细胞治疗后肿瘤患者的免疫功能改变.方法 采用流式细胞术检测28例肿瘤患者经CIK细胞治疗前后外周血CD4+CD25+T细胞比例.结果 肿瘤患者CD4+CD25+T细胞比例明显高于对照组(P＜0.05).经CIK细胞治疗后,CD4+CD25+T细胞比例降低,与治疗前比较有统计学意义(P＜0.05),但治疗后CD4+CD25+T细胞比例仍高于对照组,且差异有统计学意义(P＜0.05).结论 肿瘤患者免疫功能处于抑制状态,CIK细胞治疗能在一定程度上提高患者机体的免疫功能.利用流式细胞术监测患者外周血CD4+CD25+T细胞的变化,对于评价疗效与判断预后具有一定的价值.
关键词： CD4+CD25+T细胞 肿瘤 细胞因子诱导的杀伤细胞 -
慢性乙肝患者体内HDL和HBV DNA水平相互关系的研究
目的 检测慢性乙肝患者血清HBV DNA和HDL水平变化的相互关系,检测不同HDL水平的乙肝患者其体内IL-10及CD4+CD25+T细胞的水平,以期进一步揭示HDL对HBV DNA水平的影响以及影响机制.方法 荧光定量PCR方法检测我院152例慢性乙肝患者血清HBV-DNA的水平,全自动生化分析仪检测血清HDL水平,ELISA法检测患者血清中IL-10的水平,流式细胞法检测患者外周血中CD4+CD25+T细胞的水平.结果 血清HBV DNA与HDL、IL-10及CD4+CD25+T细胞的水平均呈负相关,HDL的水平和IL-10、CD4+CD25+T细胞的水平呈正相关.结论 在慢性乙肝患者体内,HDL具有抑制HBV DNA复制的作用,HDL的抗病毒作用很可能是通过诱导T细胞分化为CD4+CD25+T细胞,并通过该细胞产生大量IL-10来达到其抗病毒的作用.
关键词： 慢性乙型肝炎 HBV-DNA HDL IL-10 CD4+CD25+T细胞 -
肺癌和乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞及foxp3 mRNA的变化特点及临床意义
目的:探讨肺癌、乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平的变化及临床意义.方法:应用流式细胞术检测9例肺癌、9例乳腺癌患者及10例非肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例,应用RT-PCR技术检测人外周血PBMC foxp3基因的表达.结果:流式细胞术检测显示,肺癌及乳腺癌患者外周血PBMC中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例[(21.30±11.26)%]高于非肿瘤患者[(14.19±8.56)%](P＜0.05),肺癌及乳腺癌患者外周血PBMC中foxp3 mRNA的表达水平高于非肿瘤患者表达水平(P＜0.05),肺癌和乳腺癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞比例增加.结论:CD4+CD25+调节性T细胞在维持自身免疫稳定的同时对肿瘤免疫具有抑制作用,该细胞群比例的增加可能参与肿瘤的发生.
关键词： CD4+CD25+T细胞 FOXP3 肺肿瘤 乳腺肿瘤 -
不同剂量雷公藤多甙对老年复发免疫性血小板减少性紫癜患者CD4+/CD8+比值CD4+CD25+T细胞水平的影响
目的:探讨不同剂量雷公藤多甙对老年复发免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者CD4+/CD8+比值、CD4 CD225T细胞水平的影响,以便寻求更合适治疗剂量理论依据.方法:96例病例随机分为对照组(支持治疗)30例、雷公藤低剂量组(支持治疗+雷公藤多甙片1.0 mg/kg· d-1)34例、雷公藤高剂量组(支持治疗+雷公藤多甙片1.5 mg/kg·d)32例,连续治疗8周,用流式细胞仪分别检测治疗前1周、治疗后4、8周时CD4+/CD8+比值、CD4+CD25+T细胞水平及常规监测血小板计数,并进行组内、组间比较.结果:1)对照组治疗前后CD4+/CD8+比值、CD4+CD25+T细胞水平、血小板计数比较,无显著性差异(P＞0.05);与本组治疗前比较,雷公藤低、高剂量组治疗后CD4+/CD8+比值、CD4+CD25+T细胞水平、血小板计数明显升高,均有显著差异 (P＜0.05).2)与同期对照组相比,治疗后4周、8周后雷公藤低、高剂量组CD4+/CD8+比值、CD4+CD25+T细胞水平、血小板计数升高,均有显著差异(P＜0.05);雷公藤低剂量组与高剂量组CD4+/CD8+比值、CD4+CD25+T细胞水平、血小板计数,均无显著性差异(P＞0.05);雷公藤组副作用轻微.结论:雷公藤多甙片可提高老年复发ITP患者的CD4+/CD8+比值和CD4+CD25+T细胞水平,提高血小板计数,副作用轻微,低、高剂量组间无显著差异,可选择低剂量应用.
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CD4+CD25+调节性T细胞与自身免疫耐受
Cd4+CD25+T细胞是一具有免疫调节(或免疫抑制)作用的细胞群.是健康个体T细胞库的组成成分,约占CD4+T细胞5%～15%.它可以通过细胞接触依赖机制和抑制性细胞因子依赖机制主动抑制自身免疫T细胞的活化,维持自身免疫耐受,防止自身免疫病的发生.对这一细胞群生物学作用的揭示,对自身免疫病、移植排斥、肿瘤、感染等方面的研究都具有重要意义.本文综述了CD4+CD25+T细胞群的产生、维持、效应机制及其在自身免疫耐受中的作用.
关键词： CD4+CD25+T细胞 自身耐受 自身免疫病 -
CD4+CD25+T细胞与移植免疫耐受
调节性T细胞是机体维持自身耐受的重要组成部分.CD4+CD25+T细胞以持续高表达CD25为特征,可通过细胞间直接接触或分泌TGF-β、IL-10来发挥抑制功能.它广泛参与自身免疫耐受、肿瘤免疫、移植免疫.现就其发育、特性、发挥功能的机制以及在移植免疫耐受中的作用和应用前景作一综述.
关键词： CD4+CD25+T细胞 移植免疫耐受 -
重症肌无力特异性细胞免疫应答与鼻黏膜耐受疗效的分析
目的探讨重症肌无力(MG)的特异性细胞免疫异常应答及双类似物鼻黏膜免疫耐受疗效.方法检测MG患者和健康对照者的外周血中单个核细胞中CD4+及CD4+CD25+T细胞;检测IFN-γ、IL-4及IL-10分泌细胞含量,并对病情的严重程度和转归进行评定.结果MG组鼻黏膜耐受治疗前IFN-γ、IL-4及IL-10阳性细胞含量均明显高于各自健康对照组(P均＜0.01),治疗后明显低于治疗前,但与各自的对照组无明显差异(P均＞0.05);CD4+T淋巴细胞与对照组比较无明显差异,耐受治疗后较治疗前降低,但无显著差异(P均＞0.05);其亚群CD4+CD25+T细胞耐受治疗前明显低于对照组,治疗后明显高于治疗前及对照组(P均＜0.01);而CD4+CD25-T细胞治疗前明显高于对照组,耐受治疗后明显低于治疗前(P＜0.01).结论MG患者体内存在特异性细胞免疫活化和细胞因子网络的失衡,外周血中单个核细胞的免疫参数可反映MG患者的免疫学改变,提示MG存在免疫功能的紊乱,符合自身免疫病的特点;双类似物鼻黏膜耐受治疗有效.
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肺结核患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测及意义
[目的]通过对肺结核患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的分析,探讨其在肺结核患者中的临床意义.[方法]采用流式细胞技术多色荧光分析法,对84例肺结核患者及29例健康体检者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞测定,观察肺结核患者与健康对照者之间、各型肺结核之间及结核杆菌阳性与阴性之间的差别.[结果]肺结核患者CD4+CD25+所占比例为(10.81±2.65)%,与健康对照组差异有统计学意义(P<0.05);各型结核之间、抗酸杆菌阳性与阴性的差异有统计学意义(P<0.05);初治与复治也有一定的差异,但无统计学意义(P>0.05).[结论]CD4+CD25+调节性T细胞可作为判断肺结核患者免疫功能的指标,它对肺结核患者的免疫状态、指导用药、疗效观察有一定的临床意义.
关键词： 肺结核 调节性T淋巴细胞 CD4+CD25+T细胞 -
儿童过敏性哮喘特异性免疫治疗过程中IL-10、TGF-β1和CD4+CD25+T细胞的变化
在儿童过敏性哮喘特异性免疫治疗前后,检测IL-10、TGF-β1以及CD4+CD25+T细胞的变化情况,观察其疗效,初步探讨儿童过敏性哮喘特异性免疫治疗的机制.采集进行特异性免疫治疗的哮喘患者外周静脉血,根据其治疗时间分为特异性免疫治疗前组、治疗1年后组和治疗2年后组三组.利用SYBR Green I荧光定量PCR的方法检测每组标本外周血单个核细胞中IL-10和TGF-β1 mRNA的表达情况; 利用流式细胞技术检测每组标本CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25highT细胞分别占CD4+T细胞的百分比.同时,记录患儿治疗前后皮试风团面积及峰流速的变化,观察治疗前后的临床疗效.结果显示,随着特异性免疫治疗的进行,哮喘患者外周血单个核细胞中IL-10 mRNA表达水平在治疗1年后组显著增加,治疗2年后组又显著降低,TGF-β1 mRNA表达水平变化不明显; CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的百分比变化不明显(P0.05),CD4+CD25highT细胞占CD4+T细胞的百分比在治疗1年后组显著升高(P<0.05),治疗2年后组仍维持高水平; 患儿临床症状明显减轻.从而进一步证实了哮喘患者特异性免疫治疗有效,并提示IL-10和CD4+CD25highT细胞可能在儿童过敏性哮喘特异性免疫治疗中起主要作用.
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小鼠脾细胞CD4+CD25+调节性T细胞的表型特征
观察CD4+CD25+ T和CD4+CD25-T细胞的表型和细胞因子的表达.自小鼠脾脏制备单个细胞悬液,分离CD4+ T细胞、CD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞,进行细胞表面标记,激活后进行细胞内细胞因子染色,利用流式细胞仪在单个细胞水平上分析细胞表面分子、转录因子和细胞因子表达之间的关系.结果:在CD4+ T细胞中,约有7.8%的细胞同时表达CD25分子.与CD4+CD25-T细胞相比,CD4+CD25+ T细胞CD44的表达略有增加,CD45RB的表达明显下降,CTLA-4和Foxp3明显增加.以同时表达CTLA-4和 Foxp3的细胞为主,其次为单独表达Foxp3的细胞.细胞因子的研究结果表明,与CD4+CD25-T细胞相比,CD4+CD25+ T细胞IL-2、IFN-γ明显减少,而只产生IL-10的细胞略有增加.CD4+CD25+调节性T细胞无论在表型、转录因子的表达以及细胞因子表达方面均于非调节性T细胞不同.
关键词： CD4+CD25+T细胞 调节性T细胞 细胞表型 FOXP3 细胞因子 -
环孢霉素A对小鼠自然流产模型外周CD4+CD25+T细胞及妊娠结局的影响
为探讨着床期应用环孢霉素A(CsA)对小鼠自然流产模型外周CD4+CD25+T细胞及其妊娠结局的影响,以CBA/J♀×DBA/2♂为自然流产模型,在孕第4天给孕鼠单次口服不同剂量的CsA.孕第14天计数胚胎吸收率;并采用流式细胞术分析孕鼠脾脏CD4+CD25+T细胞比例.结果表明:与自然流产模型孕鼠比较,于着床期给予0.1 mg/kg、1 mg/kg、10 mg/kg CSA,可显著降低自然流产模型胚胎吸收率(P＜0.05).在应用CsA后,自然流产模型孕鼠脾脏CD4+CD25+细胞占CD4+T细胞的比例显著增加(P＜0.05).表明CsA可通过上调外周CD4+CD25+T细胞,从而诱导母胎免疫耐受,改善妊娠预后.
关键词： 环孢霉素A CD4+CD25+T细胞 胚胎吸收率 -
CD4+CD25+T细胞在CD8+T细胞抗肿瘤免疫中的调节作用
实验旨在研究CD4+CD25+T细胞在CD8+T细胞抗肿瘤免疫中的调节作用.将小鼠脾脏中分离的单个核细胞分为两组,即去除CD4+CD25+T细胞组和未去除CD4+CD25+T细胞组,测定树突状细胞提呈的肿瘤抗原多肽刺激不同T细胞增殖活性、细胞因子IFN-γ分泌,以及多肽特异性CD8+T细胞对同源性胃癌细胞株MFC的杀伤活性.结果显示预先去除未致敏T细胞中的CD4+CD25+T细胞,所诱导的特异性CD8+CTL对肿瘤细胞免疫应答增强,表现为反应性T细胞对树突状细胞提呈的肿瘤抗原多肽增殖反应增强,IFN-γ分泌量提高及CD8+T细胞对MFC杀伤活性增强.这些结果表明,预先去除未致敏T细胞中的CD4+CD25+T细胞,肿瘤抗原多肽修饰的树突状细胞肿瘤疫苗效能可明显增加.CD4+CD25+T细胞在CD8+T细胞抗肿瘤免疫中起下调作用.
关键词： CD4+CD25+T细胞 多肽表位 树突状细胞 肿瘤 免疫治疗 -
CD4+CD25+T细胞在ITP发病中的作用
CD4+CD25+T细胞是一群具有免疫抑制功能的T细胞,动物和人类实验均证实,该细胞能抑制自身反应性T、B细胞的活化增殖,以及免疫球蛋白的产生[1].近的研究表明[2～6],CD4+CD25+T细胞在自身免疫性疾病中发挥着重要的作用.特发性血小板减少性紫癜(ITP)是一种自身免疫性血液病.为研究CD4+CD25+T细胞在ITP发病中的作用,现设计实验如下.
关键词： CD4+CD25+T细胞 特发性血小板减少性紫癜 -
原发性胆汁性肝硬化患者临床及外周CD4+CD25+T细胞变化的研究
本研究对我院收治的29例原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者临床特征以及外周血CD4+CD25+T细胞的变化进行分析,旨在探索其发病机制和提高对该病的诊治水平.
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日本血吸虫感染诱导产生的CD4+CD25+调节性T细胞免疫抑制功能的观察
目的 观察日本血吸虫感染小鼠CD4+CD25+T细胞的免疫抑制功能及特征.方法 日本血吸虫尾蚴(10±2条)感染BALB/c小鼠,在感染后6周(急性期,10只)和13周(慢性期,10只)取脾脏,制成脾单个核细胞,用免疫磁珠分选出CD4+CD25+T细胞.体外实验,将急性期和慢性期来源的CD4+CD25+T细胞与CD4+CD25-T细胞共培养,3H-TdR掺入法检测细胞增殖情况,ELISA检测细胞培养上清中的细胞因子.体内实验,将CD4+CD25+T细胞被动转移到日本血吸虫辐照致弱尾蚴免疫的小鼠体内,2周后剖杀取脾,用流式细胞仪检测脾组织中白细胞介素4+(IL-4+)、IL-10+和干扰素γ+(IFN-γ+)CD4+T细胞比例,ELISA检测血清抗辐照致弱尾蚴抗原IgG1和IgG2a水平.结果 体外实验显示,在血吸虫虫卵可溶性抗原(SEA)刺激下,与单纯CD4+CD25-T细胞培养组(脉冲指数即cpm值为7 615±1 058)相比,CD4+cD25+T细胞对CD4+CD25-T细胞增殖具明显的抑制作用(P<0.01),并且感染慢性期来源的CD4+CD25+T细胞抑制作用(cpm值为2 336±490)强于急性期来源的CD4+CD25+T细胞(cpm值为4467±144)(P<0.05);并对IL-4、IFN-γ和IL-2等细胞因子分泌也具有抑制作用,其中急性期来源的CD4+CD25+T细胞对各细胞因子的抑制率分别为32.0%(P<0.05)、66.3%(P<0.01)和63.2%(P<0.01);慢性期来源的CD4+CD25+T细胞对各细胞因子的抑制率分别为28.4%(P<0.05)、60.1%(P<0.01)和58.3%(P<0.01).体内实验显示,在辐照致弱尾蚴诱导的免疫应答中,转移慢性期血吸虫感染小鼠的CD4+CD25+T细胞对IFN-γ和IgG2a抗体的产生明显抑制作用(P<0.05).结论 日本血吸虫感染诱导的CD4+CD25+T细胞具明显免疫抑制作用.并呈现优势抑制Th1应答的特征.
关键词： 日本血吸虫 CD4+CD25+T细胞 免疫抑制 -
小鼠淋巴细胞减少症模型的建立及其免疫学意义
目的:以放射线处理建立小鼠淋巴细胞减少症模型并探讨其免疫学意义.方法:1.25 Gy放射剂量照射C57BL/6小鼠,不同时间点计数外周血、脾脏和淋巴结中免疫细胞数,FACS动态分析各淋巴细胞亚群比例改变,RT-PCR检测淋巴细胞中转录因子T-bet、GATA-3的表达.进一步以DC-gp100瘤苗免疫放射处理小鼠,B16F10黑素瘤细胞攻击,观察肿瘤生长的大小.结果:放射线处理后小鼠淋巴细胞数显著减少,CD4+CD25+T细胞比例明显降低;CD44highCD62low记忆样T淋巴细胞形成;T-bet表达明显上调,GATA-3表达无明显改变.与未照射组比较,放射处理小鼠经DC-gp100瘤苗免疫后具有增强抵抗B16F10黑素瘤细胞攻击的效应,肿瘤生长明显减缓.结论:以放射线处理成功建立淋巴细胞减少症模型,并具有增强免疫保护的效应.
关键词： 淋巴细胞减少症模型 CD4+CD25+T细胞 放射线 免疫重建 -
RA患者外周血CD8+CD28-和CD4+CD25+调节性T细胞的表达及疾病活动性指标相关性分析
目的:检测类风湿性关节炎(RA)患者外周血CD8+CD28-、CD4+CD25+调节性T细胞亚群,探讨其与临床活动性指标的关系.方法:采用流式细胞术检测台州医院RA患者外周血CD8+CD28+、CD4+CD25+T细胞亚群比例,探讨调节性T细胞与RA活动性、类风湿因子(RF)、免疫球蛋白(Ig)、C反应蛋白(CRP)、补体C3、抗CCP抗体、抗核抗体(ANA)、血小板(PLT)及血沉(ESR)的关系.结果:活动期RA患者外周血CIM+CD25+调节性T细胞亚群比例显著低于正常对照组(P<0.01),但稳定期RA患者与正常对照组结果差异无统计学意义(P>0.05).活动期和稳定期RA患者CD8+CD28-与正常对照组相比较,结果无统计学意义(P>0.05);CD4+CD25+与CRP密切相关(r=-0.593,P<0.05),CD8+CD28-与ESR相关系数呈弱相关.CD4+CD25+和CD8+CD28-细胞与RF、IGG、C3、ANA、anti-CCP和PLT未见明显相关性.结论:活动期RA患者外周血CD4+CD25+T细胞亚群比例减少,CD4+CD25+T细胞可能与类风湿性关节炎疾病进展有关.
