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表皮细胞生长因子对培养表皮角朊细胞DNA合成的影响
目的:选择培养表皮角朊细胞时添加表皮细胞生长因子(EGF)及小牛血清的适浓度.方法:添加不同浓度的EGF及小牛血清,测定3H-TdR掺入量.结果:添加20 μgL-1EGF时3H-TdR掺入量明显高于添加5和10 μg*L-1EGF时.结论:20μg*L-1EGF、20%小牛血清为培养表皮角朊细胞的适浓度.
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EGF和bFGF诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化后对Tau和神经元特异性烯醇化酶表达的影响
目的:观察表皮细胞生长因子(EGF)、碱性成纤维生长因子(bFGF)体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经细胞后,神经元微管相关蛋白Tau和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达.方法:取P4代MSCs分为EGF、bFGF和EGF+bFGF及对照组;免疫细胞化学法检测Tau蛋白和NSE表达,ELISA法分析各组细胞Tau蛋白含量.结果:免疫细胞化学检测显示EGF+bFGF组Tau蛋白和神经元特异性烯醇化酶NSE阳性细胞率高,bFGF组、EGF组和对照组依序递减;各组Tau蛋白含量结果与Tau蛋白阳性细胞率一致.结论:EGF和bFGF均可促进MSCs向神经细胞分化,并表达Tau蛋白和NSE,二者具有协同作用.
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小鼠表皮细胞生长因子放射免疫分析的建立及初步应用
目的:建立高特异性和高灵敏度的小鼠表皮细胞生长因子(EGF)放射免疫分析,用于测定小鼠和大鼠血清中EGF水平.方法:用人工重组的小鼠EGF多次免疫兔子获取高效价、高特异的小鼠EGF抗体.用氯氨T法制备<'125>I标记的EGF,经Sephadex G-25纯化.抗原抗体反应采用平衡一步法,4℃温浴24h后经PR试剂分离结合和游离的标记抗原.用该法测定缺血/再灌注大鼠血清和肠组织匀浆液54例.结果:该法测定范围为(0.03～8.10)ng/ml,低检出值<0.03ng/ml,批内和批间误差<3.4%和12.1%.瘦素(leptin)保护组在360min血清EGF水平(0.356±0.061)ng/ml明显高于生理盐水组(0.240 ±0.103)ng/ml,P＜0.05;leptin保护组肠组织匀浆液在360min时EGF水平(0.228±0.05)ng/ml明显低于生理盐水组(0.318±0.03)ng/ml,P＜0.01.结论:该法稳定、简便、特异、灵敏,适于检出小鼠和大鼠血清中的EGF水平.
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关节软骨细胞的分离、培养及表皮细胞生长因子对其影响
目的:研究关节软骨细胞的原代分离及体外培养,了解表皮细胞生长因子(EGF)对其生长和去分化趋势的影响.方法:(1)用自制消化瓶分离原代软骨细胞并培养、传代;(2)锥虫蓝染色测定细胞存活率,测定克隆率;(3)比较EGF对软骨细胞增殖以及去分化趋势的影响.结果:(1)自制消化瓶能在3 h内将软骨碎块消化完毕;(2)细胞存活率为88.4%,克隆率为29.4%;(3)EGF 显著促进软骨细胞增殖(P<0.05);(4)软骨细胞经过8～10次传代以后出现去分化趋势,与培养液中是否含EGF无关.结论:自制消化瓶能提高消化软骨的效率.EGF 能显著促进软骨细胞增殖,但不能阻止软骨细胞的去分化趋势.
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表皮细胞生长因子对烧伤合并吸入性损伤的治疗作用
目的:观察表皮细胞生长因子对烧伤吸入性损伤的治疗效果.方法:随机将合并吸入性损伤后入院行气管切开术的烧伤患者分为对照组和治疗组,其中对照组18例,治疗组21例.对照组与治疗组均常规治疗,每6 h行超声雾化治疗1次,治疗组每1 ml超声雾化液中加入表皮细胞生长因子30 000 U,分别比较伤后气管切开前、气管切开后第3、5、7、14 天的PO2,记录气道血性分泌物持续时间、气管导管拔除时间.结果:治疗组在治疗后第5天开始,PO2明显高于对照组(P<0.05),治疗组血性分泌物持续时间明显缩短(P<0.05),拔管时间提前(P<0.05).结论:表皮细胞生长因子可用于吸入性损伤的治疗,有助于肺组织的修复,缩短愈合时间.
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胚胎大鼠脑和脊髓神经干细胞的分离和培养
研究采用显微解剖、无血清细胞培养和免疫荧光细胞化学染色等实验技术, 成功地建立了胚胎大鼠脑和脊髓神经干细胞(NSCs)的分离和培养方法.结果显示, (1)在含成纤维细胞生长因子-2 (FGF-2)和表皮生长因子(EGF)的无血清培养液中, 两种来源的NSCs经体外培养8-10代后, 其细胞数呈指数级增加, 其中脑来源的NSCs数由原代培养时的1×106增加至1×1012, 脊髓来源的NSCs数从1×106增加至1×1011.增殖的细胞表达神经上皮干细胞蛋白(nestin); (2)在含1%胎牛血清(FBS)的培养条件下, 它们都能被诱导分化为神经元、少突胶质细胞和星型胶质细胞.但其分化比例可随细胞传代次数的增加而改变, 其中, 大脑来源的NSCs分化为神经元的比例从第二代(P2)的11.95±2.5%下降至第五代(P5)的1.97±1.16% (P<0.01), 而少突胶质细胞的分化比例则基本保持不变, 这一分化格局同样可在脊髓来源的NSCs中发现.结果表明, 我们所分离和培养的细胞在体外经多次传代后仍具有很强的增殖能力和多向分化潜能, 它们都表达nestin, 属于中枢神经系统的干细胞.
关键词： 中枢神经系统 神经干细胞 胚胎 成纤维细胞生长因子-2 表皮细胞生长因子 -
表皮细胞生长因子在重度烧伤伴吸入性损伤患者中的应用效果
近年来,随着医疗水平的进步,重度烧伤因感染及休克死亡的患者明显减少,而吸人性损伤仍是导致重度烧伤患者死亡的主要原因[1].对于烧伤伴吸人性损伤的治疗,关键在于加快创面愈合、促进气道黏膜与肺泡上皮修复[2].表皮细胞生长因子(EGF)对促进创伤修复及组织再生的作用已得到临床证实[3].本研究对92例重度烧伤伴吸人性损伤患者分别给予常规治疗及联合EGF治疗,现报告如下.
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表皮细胞生长因子联合复方多粘菌素B对老年深Ⅱ度烧伤病人创面瘢痕的疗效分析
目的 探讨表皮细胞生长因子(EGF)联合复方多粘菌素B治疗老年深Ⅱ度烧伤病人创面瘢痕的疗效.方法 选取120例老年深Ⅱ度烧伤病人,随机分为观察组和对照组,每组60例.对照组采用复方多粘菌素B治疗,观察组采用复方多粘菌素B联合EGF治疗.比较2组老年病人的创面愈合时间、愈合率、瘢痕发生率、创面细菌清除率以及疼痛视觉模拟评分(VAS).结果 观察组创面愈合时间显著低于对照组,7、14、21 d创面愈合率均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).观察组瘢痕发生率、瘢痕量表评分均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),2组间创面细菌清除率差异无统计学意义.观察组7、14、21 d VAS疼痛评分均低于对照组(P<0.05).结论 复方多粘菌素B与EGF联合治疗老年深Ⅱ度烧伤病人,具有促进创面愈合、降低创面感染风险、减少疼痛的优势,适用于临床.
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慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜中Hp阳性对表皮生长因子表达的影响
目的:探讨慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜中Hp阳性对表皮生长因子表达的影响.方法:将60只成年雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和实验组,各20只.其中对照组大鼠用生理盐水2 ml灌胃,1次·d-1,共14周.模型组大鼠灌胃前禁食12 h,给予配制好的抗生素(灭滴灵、四环素和丽珠得乐混合液2 ml·只-1·d-1)连续3d灌胃清除胃内杂菌,第4天起给予吲哚美辛溶液(2 ml·只-1·d-1)进行连续2d灌胃破坏胃黏膜屏障,再给予大鼠水杨酸钠和乙醇混合溶液(2 ml·只-1·d-1)灌胃,连续8周,制作慢性萎缩性胃炎模型.实验组大鼠在模型组基础上,给予大鼠Hp菌悬液2 ml灌胃,1次·d-1,连续6d.采用HE染色法和Hp检测观察大鼠胃部炎症和Hp阳性情况,采用免疫组化和蛋白质印迹法检测表皮细胞生长因子蛋白表达.结果:与对照组相比,模型组和实验组大鼠胃黏膜腺体减少或消失、细胞萎缩破裂或空泡.与模型组相比,实验组中大鼠胃黏膜中腺体减少及损伤更为严重;大鼠Hp阳性率明显升高(P＜0.05);实验组大鼠表皮细胞生长因子的蛋白表达和平均光密度明显升高(P＜0.05).结论:Hp阳性明显加重胃黏膜的损伤程度,表皮细胞生长因子在Hp阳性胃黏膜损伤的慢性萎缩性胃炎中表达明显升高.
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大鼠急性β射线皮肤损伤创面愈合过程中基质金属蛋白酶2的表达
目的 研究急性β射线皮肤损伤创面愈合过程中基质金属蛋白酶2(MMP-2)mRNA和蛋白表达的变化,探讨表皮细胞生长因子(EGF)在急性β射线皮肤损伤创面愈合过程中的作用.方法 雄性SD大鼠60只,随机均分为3组.A组:15Gy β射线照射组;B组:45Gy β射线照射EGF治疗组;C组:45Gy β射线照射生理盐水对照组.采用直线加速器产生的β射线照射大鼠臀部皮肤,面积20mm×40 mm.观察创面出现及愈合的时间;光镜观查创面愈合过程中组织学改变;以RT-PCR法和Western blot法检测创面愈合过程中MMP-2 mRNA和蛋白表达的变化.结果 A组未形成创面,B组和C组出现深Ⅱ度烧伤创面.B组创面愈合速度明显比C组快(P＜0.05).A组5、6、8周时MMP-2的表达逐步减弱,B组和C组5、6、8、10周时MMP-2的表达由强到弱,而后由弱到强;B组在6、8周时MMP-2的表达均高于C组.结论 EGF在β射线皮肤损伤创面愈合过程中起重要作用,EGF可促进MMP-2的表达与合成,从而促进创面愈合.
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表皮细胞生长因子治疗慢性难愈合创面
烧伤及其它原因所致的慢性难愈合创面的修复是临床创面治疗的难题.近年来发现各种生长因子在创面修复与再生方面有重要的调节作用[1,2].我院自2001年1月～2002年5月应用杭州天目北斗生物制药有限公司研制的冻干鼠表皮细胞生长因子(mEGF)治疗慢性难愈合创面,疗效满意,现报道如下.
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分化抗原表达与肺癌异质性
肺癌是常见的恶性肿瘤,近年发生率明显增加.肺癌的治疗效果在近数十年中未有明显提高,总的5年生存率为10%左右,虽然手术治疗和辅助治疗取得很大进展,但多数患者仍死于转移.目前已认识到对肿瘤及其转移治疗的大障碍是肿瘤的细胞异质性.肺癌的异质性既有肿瘤内各亚群(subpopulation)在生长速度、侵袭力、转移能力及对药物敏感性等生物行为的差异,也包括在细胞形态、表面电荷、核型(karyotype)、退行性酶、细胞因子及受体、表面抗原(糖蛋白、糖脂)、分泌产物与代谢等方面的差异;可表现为原发灶和转移灶之间的差别,也可以表现为原发或转移瘤内部组成的多样性.目前癌症研究的主要方向是针对瘤细胞亚群的广泛表型异质性,肿瘤细胞亚群的产生及其变化的表型,包括转移力等.利用肺癌抗原观察肿瘤细胞表型变化,突破单纯形态学观察的局限性,从分子水平解释肿瘤在起源、分化、亚群体间相互作用、非随机性转移等多方面的重要问题.部分抗原
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重组人表皮细胞生长因子凝胶治疗鼻中隔黏膜糜烂性鼻出血
目的 观察重组人表皮细胞生长因子凝胶治疗鼻中隔黏膜糜烂性鼻出血的疗效.方法 将患者随机分为治疗和对照组各52例,治疗组用重组人表皮细胞生长因子凝胶涂在鼻中隔的糜烂面上,2次/d,7 d为1个疗程.对照组用红霉素软膏涂抹,2次/d,7 d为1疗程.结果 治疗组治愈率86.5%,对照组治愈率44.2%(P<0.01),未见不良反应发生.结论 重组人表皮细胞生长因子凝胶治疗鼻中隔黏膜糜烂性鼻出血方便,疗效显著.
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高位肛周脓肿患者负压封闭引流前后血清TGF-β、EGF水平变化及意义
目的 观察高位肛周脓肿患者负压封闭引流(VSD)前后血清转化生长因子β(TGF-β)和表皮细胞生长因子(EGF)水平变化,并探讨其意义.方法 收集高位肛周脓肿患者40例,采用随机数字表法分为2组各20例.观察组行肛周脓肿VSD+内口封闭法,对照组行肛周脓肿传统低位切开高位挂线术.分别在术前1d及术后1d、7d,抽取两组患者静脉血,蛋白质免疫印迹法检测血清TGF-β、EGF.结果 两组组内血清TGF-β、EGF术后1d与术前1d比较差异无统计学意义(P均＞0.05),术后7d较术前1d、术后1d血清TGF-β、EGF均上升(P均＜0.05).两组组间血清TGF-β、EGF术前1d及术后1d比较差异无统计学意义(P均＞0.05),观察组术后7d血清TGF-β、EGF均高于对照组(P均＜0.05).结论 高位肛周脓肿治疗中应用VSD技术,患者血清TGF-β、EGF水平升高,从而调控创面血管生成,促进创面愈合.
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消化性溃疡及其相关细胞因子的关系探讨
溃疡的愈合是一个非常复杂的过程,需要黏膜缺失的填充和黏膜下组织结构的重建,涉及坏死物质清除、上皮重构等,是多种细胞、生长因子和细胞外基质相互作用的复杂过程.国内外研究发现,许多细胞因子与消化性溃疡的发生、发展、胃黏膜保护、溃疡愈合及溃疡的愈合质量密切相关[1].现将与消化性溃疡及其复发相关的细胞因子的关系探讨如下.
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复方田七胶囊对骨折术后体内氧自由基和表皮细胞生长因子的影响
为观察复方田七胶囊对骨折术后体内氧自由基(SOD、LPO)和表皮细胞生长因子(EGF)的影响,将150例骨折患者按数字表随机分为复方田七胶囊治疗组、VitC治疗对照组、空白对照组三组,每组50例,采用放射免疫方法对各组术后SOD、LPO、EGF值进行监测.结果显示在术后第5、8天,复方田七胶囊治疗组的SOD值为352.28±74.21ng.ml-1、369.35±75.77ng.ml-1、EGF值为112.43±15.68pg.ml-1、98.27±14.31pg.ml-1,高于两对照组;LPO值为7.62±2.73nm.ml-1、6.12±2.11nm.ml-1,低于两对照组.提示复方田七胶囊治疗组在清除氧自由基、促进创伤恢复方面优于两对照组.表明复方田七胶囊不但能够清除氧自由基,而且能使机体内源性EGF处于高水平状态,从而对创伤的机体起到保护和修复的作用.
关键词： 骨折/中医药疗法 复方田七胶囊/治疗应用 氧自由基 表皮细胞生长因子 临床研究 -
EGF61A/G基因多态性与结肠癌易感性的Meta分析
目的 探讨表皮细胞生长因子(epidermal growth factor,EGF)基因61A/G多态性与结肠癌风险的相关性.方法 计算机检索Pubmed、EMABSE、CJFD、CBM、CNKI、VIP及WanFang Data,检索时间截止至2013年2月28日,收集关于EGF 61A/G基因多态性与结肠癌易感性的病例-对照研究.由2位评价者按照纳入标准和排除标准独立选择文献、提取资料、评价质量,采用RevMan 5.1和Stata 12.0软件进行Meta分析.结果 共纳入5个病例-对照研究,839例患者和844例对照者.Meta分析结果 显示,3个遗传模型中EGF基因61A/G多态性与结肠癌风险的相关性差异均有统计学意义[GG+AG vs AA:OR=1.43,95%CI:1.10~1.84;GG vs AG+AA:OR=1.67,67%CI:1.10~2.53;GG vs AA:OR=2.17,95%CI:1.54~3.06],而在AG vs AA遗传模型中,两者差异无统计学意义(OR=1.16,95%CI:0.89~1.53).结论 EGF 61A/G基因多态性与结肠癌易感性相关,基因型GG和AG+GG可增加罹患结肠癌的风险.
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半四左方对胃溃疡大鼠表皮细胞生长因子和转化生长因子的影响
目的 根据半四左方对实验性胃溃疡大鼠胃粘膜组织EGF和TGF-α的影响,观察半四左方的抗溃疡作用并探讨其作用机制.方法 采用束缚水浸应激法和醋酸法,建立大鼠胃溃疡模型.经半四左方干预后,测定大鼠溃疡指数、溃疡面积、胃粘膜组织EGF和TGF-α含量.结果 半四左方可显著降低胃溃疡大鼠溃疡指数和溃疡面积(P＜0.01),可显著提高胃溃疡大鼠胃粘膜组织EGF和TGF-α水平(P＜0.01).结论 提高大鼠胃粘膜组织EGF和TGF-α含量水平可能是半四左方抗胃溃疡的作用机制之一.
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碱性成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子联合诱导培养肌源性干细胞
我们通过本实验用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮细胞生长因子(EGF)诱导、无血清悬浮培养技术进行培养,获得的细胞具有多向分化潜能、表达干细胞抗原、能自我复制,也具备干细胞的特征.
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碱性成纤维细胞生长因子基因敲除肝细胞与结肠癌细胞的关系
我们通过建立一个全新的三维细胞共培养模型观察肿瘤细胞与宿主细胞之间的关系.同时观察来源于野生型及碱性成纤维细胞生长因子(FGF)-2基因敲除的小鼠的肝细胞对结肠癌细胞的移行、增殖的影响,以及共孵育一段时间后培养液内表皮细胞生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)浓度的变化.
