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石榴皮对非酒精性脂肪肝病的基因表达调控数据分析
目的:应用生物信息学分析方法,阐述石榴皮对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的基因表达调控机制.方法:运用生物信息学分析工具QOE、DAVID和STRING,对NCBI的GEO数据库中石榴皮对NAFLD可能治疗作用的相关数据进行挖掘分析.结果:分析喂养与未喂养石榴皮的高脂饮食大鼠基因芯片数据,筛选出8个差异表达基因.其中包括7个高表达基因:CAD、C1QBP、RPL10、RPS7、NHP2、CARM1、LPL;1个低表达基因:NR3C1.这些基因主要涉及的功能包括:嘧啶核酸的生物合成、RNA的修复与加工、核糖体的生物合成、核糖核蛋白复合体、细胞质和细胞器重要物质、脂蛋白生物功能相关基因等.结论:石榴皮可能通过上调LPL、CARM1、C1QBP、NHP2、RPL10、RPS7、CAD和下调NR3C1基因表达的分子机制,促进甘油三酯(TG)的水解,降低血液中游离脂肪酸的含量,缓解胰岛素抵抗,增强肝细胞的抗氧化应激能力及维持线粒体功能的稳定,进而维持肝细胞的正常生物代谢,从而对NAFLD具有一定的疗效.
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石榴皮超临界CO2萃取物化学成分的GC-MS分析
采用GC-MS联用技术分析了石榴皮超临界CO2萃取物化学成分,共分离了79个峰,鉴定了其中58种成分,用峰面积归一化法确定诸成分的相对百分含量.
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超声提取石榴皮多酚的传质动力学模型研究
目的:基于Fick第二定律传统理论,建立超声提取石榴皮多酚的传质动力学模型.方法:选择球形模型,以石榴皮多酚的质量浓度为考察指标,50％乙醇为提取溶剂进行超声提取,在不同的料液比、提取温度和提取时间下,对提取过程中的速率常数(k)、相对萃余率、表面扩散系数(DS)、半衰期(t1/2)和表观活化能(Ea)等动力学参数进行求解.结果:动力学参数中,随着提取温度的升高,k和DS逐渐增大,而t1/2逐渐减小,表明升高温度有利于石榴皮多酚的提取;相对萃余率指数方程求解表明,建立的石榴皮多酚提取动力学模型与实际测定的真实数值拟合良好,该模型能够很好的反映工艺条件与石榴皮多酚质量浓度之间的函数关系.结论:在实验基础上,建立超声提取石榴皮多酚的传质动力学模型可行、可靠,可用于工程放大生产中的优化控制.
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Plackett-Burman和Central Composite Design试验设计法优化石榴皮中熊果酸的SFE-CO2萃取工艺
目的:探讨应用SFE-CO2萃取石榴皮中熊果酸的佳工艺.方法:以熊果酸得率为考察指标,通过Plackett-Burman (PB)试验设计筛选影响熊果酸得率的显著性因素,陡爬坡试验逼近熊果酸得率大区域,CentralComposite Design(CCD)试验设计对显著性因素进行响应面优化得到影响熊果酸得率的二阶数学模型,进而得出佳工艺条件.结果:SFE-CO2萃取石榴皮中熊果酸的佳工艺条件为:萃取温度46.29℃,萃取时间91.6 min,萃取压力34.49 MPa,在此条件下,验证试验测得熊果酸得率为12.508 mg/g,与模型预测值12.645 mg/g接近.结论:将PB试验和CCD试验设计联合应用于优化石榴皮中熊果酸SFE-CO2萃取工艺,筛选结果具有统计学意义,工艺操作具有可行性.
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正交设计筛选抗幽门螺杆菌甲硝唑耐药株天然药物的佳组合方案
目的筛选天然药物治疗幽门螺杆菌(Hp)甲硝唑耐药株的佳组合方案.方法运用正交设计方法筛选臭灵丹、石榴皮、蒲公英三种天然药物抗Hp甲硝唑耐药株的佳组合.结果三种天然药物对Hp甲硝唑耐药株的佳组合方案为:臭灵丹(MIC90,77.9mg/ml),石榴皮(MIC90,131.1 mg/ml),蒲公英(MIC75,117.27 mg/ml).结论正交设计方法有效的筛选出了三种天然药物的佳组合方案,提高了实验效率,节约科研资源.
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高效液相色谱法测定石榴皮中鞣花酸的含量
目的建立石榴皮提取物中鞣花酸含量的HPLC测定方法.方法色谱条件Zobax SB C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,用CH3OH-EtOAc-KH2PO4/H3PO4(0.05 mol/L)(体积比34:2:64)作为流动相,检测波长为254 nm.结果鞣花酸在0.3184～7.96μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999.平均加样回收率为98.12%,RSD为1.13%.结论本方法精确可靠,可作为石榴皮药材质量控制的方法.
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石榴皮鞣质体外抑精活性部位的筛选
目的 筛选石榴皮中鞣质的抑精活性部位.方法 按照世界卫生组织(WHO)标准方法,将新鲜精液与石榴皮鞣质各组分提取液直接混合后镜检.结果 石榴皮鞣质组分中20% CH3OH洗脱部抑精作用强,其低抑精浓度为1.25 mg/mL.结论 石榴皮中的鞣质具有体外抑精作用,为从石榴皮中筛选出新的外用避孕药提供了科学依据.
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具有研发前景的治疗炎症性肠病的中草药述评
炎症性肠病治疗难度大,服药周期长,药物不良反应较多,临床缓解后易复发,有癌变倾向,不少患者难以坚持西药治疗;中药治疗炎症性肠病显示了一定的优势.本研究在古代中医文献基础上,分析了几种有研发前景的治疗炎症性肠病的中草药,这几种中草药为姜黄、乳香、石榴皮、乌梅、黄蜀葵花、木香.并分别从古代中医文献论述、现代药理研究、名老中医经验及近年来相关专利申报情况等方面进行简要阐述,以期为进一步研究中医药治疗炎症性肠病提供依据.
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高效毛细管电泳法测定石榴皮中鞣花酸的含量
目的:建立以高效毛细管电泳法测定石榴皮提取物中鞣花酸含量的方法.方法:毛细管柱为未涂层毛细管,缓冲液为30mmol/L氨基丁三醇-30mmol/L磷酸二氢钾(20:9),分离电压为20kV,检测波长为254nm,柱温为25℃,进样条件为25mbar、5.0s.结果:鞣花酸检测浓度在0.0 398～0.3 184mg/ml范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=0.9 993);平均加样回收率为97.42%(RSD=1.84%).结论:本方法准确、可靠,可用于石榴皮药材的质量控制.
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RP-HPLC法同时测定石榴皮中4种多酚类成分的含量
目的:建立同时检测石榴皮中没食子酸、石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸含量的方法.方法:采用反相高效液相色谱法.色谱柱为Arcus EP-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.1％三氟乙酸(梯度洗脱),流速为1.0 ml/min,检测波长为254 nm(没食子酸)、377 nm(石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸).结果:没食子酸、石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸的进样量分别在0.020～0.320、0.038～0.608、0.074～1.184、0.039～0.624 μg范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r分别为0.999 7、0.997 1、0.997 8、0.999 4);平均加样回收率分别为93.22％、95.35％、98.00％、99.84％,RSD分别为2.75％、2.28％、2.11％、1.82％(n均为6).结论:本方法精密、可靠,可作为检测石榴皮中没食子酸、石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸4种有效成分的方法.
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石榴皮药材HPLC指纹图谱研究
目的:建立石榴皮药材的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,考察不同产地石榴皮药材的质量.方法:色谱柱为KromasilC18,流动相为乙腈-磷酸缓冲盐(含0.1%三乙胺)-水,流速为1 mL·min-1柱温为25℃,检测波长为240 nm;不同样品之间的相似度根据<中药色谱指纹图谱相似度评价系统研究版(2004A)计算.结果:确定由12个峰构成石榴皮药材的指纹特征,不同产地的药材均具有这些特征,但是特征峰的相对含量分布差异使指纹图谱的概貌存在一定的差异.药材指纹图谱的相似度大小与产地有一定的关系.结论:本方法精密度高、重现性好,可为石榴皮药材的质量评价提供参考.
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石榴皮鞣质降低尿毒素作用的研究
目的:研究石榴皮鞣质降低尿毒症毒素的作用.方法:用200mg·kg-1腺嘌呤溶液连续灌胃致Wistar大鼠产生类似慢性肾衰的症状.2wk后,分别用石榴皮鞣质(30、20、10 mg·kg-1·d-1)灌胃,4wk后处死大鼠,取血、留取肾组织,测定血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、甲基胍(MG)、胍基琥珀酸(GSA)、钙离子(Ca2+)和磷离子(P3+),进行统计学处理,并进行形态学观察.结果:石榴皮鞣质可降低慢性肾衰竭大鼠的血Scr、BUN、MG、GSA和P3+水平,升高Ca2+水平,疗效显著优于模型组,且石榴皮鞣质可使慢性肾衰竭大鼠肾结构基本恢复正常.结论:石榴皮鞣质有一定的降低尿毒症毒素作用.
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维吾尔药木吒栓中石榴皮和石榴花水提取工艺的优化
目的:优化维药木吒栓中石榴花与石榴皮的水提取工艺.方法:以总鞣质和鞣花酸含量为评价指标,以提取时间、提取次数和溶剂用量为考察因素,采用L9(34)正交试验优化石榴花、石榴皮的水提取工艺并进行验证试验.结果:石榴花与石榴皮中总鞣质和鞣花酸的优提取工艺为将2味药材用10倍量水回流提取3次,每次0.5 h;验证试验中3批药材提取出的总鞣质与鞣花酸平均含量分别为151.69、24.59 mg/g(RSD分别为1.15%、1.41%,n=3).结论:优化的提取工艺稳定、可行,可用于木吒栓中石榴花、石榴皮中总鞣质和鞣花酸的提取.
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高效液相色谱法测定石榴皮中熊果酸的含量
[目的]建立石榴皮中熊果酸高效液相色谱测定方法.[方法]采用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),甲醇-0.1%乙酸水溶液(pH 3.4)(94:6)为流动相,流速为0.8 ml·min-1,检测波长210 nm,柱温为室温.[结果]熊果酸在10.4 μg·ml-1～104 μg·ml-1范围内线性良好,回归方程为Y=16 315X+55.119,r=0.999 8,平均回收率为99.2%.[结论]该方法简便、准确、重复性好,适用于石榴皮药材中熊果酸的含量测定.
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石榴皮对抗STZ诱导的小鼠血糖升高作用研究
目的:观察石榴皮提取物对链脲佐菌素诱导小鼠糖尿病的预防作用.方法:KM小鼠灌胃石榴皮乙酸乙酯提取物(Pomegranate Acetic ether Extract,PAE)3周后连续4次小剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导小鼠糖尿病,尾静脉取血测血糖,放免法检测血清胰岛素水平,制备石蜡切片光学显微镜观察胰腺组织病理学变化.结果:30 mg/kg PAE预防给药能对抗STZ引起的胰岛面积萎缩、空泡变,促进胰岛素分泌,显著对抗STZ诱导的血糖升高.结论:石榴皮乙酸乙酯提取物能预防STZ诱发的小鼠糖尿病.
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石榴皮对2型糖尿病大鼠的影响
目的:观察石榴皮醇提物(EEOPP)对2型糖尿病模型大鼠的治疗作用.方法:SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、石榴皮低(0.4 g/kg)、中(0.8 g/kg)、高(1.6 g/kg)剂量组、乙酸乙酯组(0.8 g/kg)、除去乙酸乙酯组(0.8g/kg)、阳性对照二甲双胍组(0.4 g/kg).在用高脂饮食和链脲佐菌素(streptozotic,STZ)制造2型糖尿病大鼠模型后,给药组大鼠分别灌服石榴皮醇提物或二甲双胍,连续4周,取血测定大鼠空腹血糖(FBG)、血脂、脂联素(Adiponectin)、瘦素(Leptin)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量.结果:石榴皮醇提物中(0.8g/kg)、高(1.6g/kg)剂量组以及乙酸乙酯组(0.8 g/kg)可显著降低实验大鼠的血糖水平、总胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、瘦素(Leptin)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的水平,升高高密度脂蛋白(HDL-C)和脂联素(Adiponectin)水平,与模型组比较存在显著性差异.结论:石榴皮醇提物有较好的降血糖作用.
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石榴皮的体外抗脂质过氧化作用
目的:研究石榴皮水提液对正常小鼠肝组织匀浆脂质过氧化的保护作用.方法:小鼠肝匀浆与石榴皮水提液共浴后,以自发产生脂质过氧化或者分别以自由基诱导剂CCl_4、H_2O_2和铁离子-抗坏血酸(Fe~(2+)-Vitc)激发脂质过氧化作用,以MDA产生量作为脂质过氧化作用程度指标.结果:石榴皮水提液可明显降低小鼠肝组织自发性MDA的生成,减轻CCl_4、H_2O_2、Fe~(2+)-Vitc所致的肝匀浆脂质过氧化反应.结论:石榴皮水提液具有良好的抗脂质过氧化作用.
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石榴皮对实验性胃损伤及相关机制的研究
目的:研究石榴皮丙酮提取物对实验性胃损伤的防治作用及其与胃粘膜前列腺素E2的关系.方法:采用大鼠幽门结扎型胃溃疡模型和乙醇诱导的胃粘膜损伤模型,观察石榴皮丙酮提取物灌胃对实验性胃损伤及胃液、胃酸、胃黏液和胃蛋白酶分泌的影响;采用放射免疫方法研究了石榴皮提取物对幽门结扎所致胃损伤大鼠胃粘膜前列腺素E(PCE2)含量的影响.结果:石榴皮提取物(50 mg/kg,150 mg/kg和50 mg/kg)灌胃呈剂量依赖性明显抑制大鼠幽门结扎型胃溃疡的形成和无水乙醇致胃粘膜损伤的发生,促进胃黏液的分泌且能增加PGE2水平,但对胃液分泌、游离酸度、总酸度和总酸排出量及胃蛋白酶活性无明显影响.结论:石榴皮提取物对实验性胃溃疡具有良好的防治疗作用,这种作用可能与促进胃黏液分泌,维护粘膜屏障的完整性和增加胃粘膜PGE2合成有关.
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紫外分光光度法测定石榴皮中微量元素硒
采用紫外分光光度法,以邻苯二胺盐酸盐做显色剂,检测波长为335 nm,测定石榴皮中微量硒元素的含量.结果表明,吸收度与浓度之间呈良好线性方程(r=0.9993),9种不同产地来源石榴皮中的微量硒元素含量在2.11～8.65μg/g之间,加标平均回收率98.4%,RSD为0.31%.该方法具有操作简便、测定快速、灵敏度高、稳定性好等显著优点,适用于测定石榴皮样品中微量硒含量.
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紫外分光光度法测定石榴皮中总鞣质含量
目的:建立测定了石榴皮中总鞣质定量方法.方法:采用紫外分光光度比色法测定了总鞣质含量,以没食子酸为对照品制备标准曲线,在760nm波长处测定吸收度.结果:没食子酸浓度在0.0502～0.2526μg范围内吸收度与浓度呈良好的线性关系,r=0.9996.结论:通过6批不同产地石榴皮鞣质含量测定,结果稳定,方法灵敏准确可靠,重线性好,作为20005年版药典鞣质含量测定修改方法依据.
