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贝氏柯克斯体34×103重组外膜蛋白的免疫保护性的研究
原核细胞表达贝氏柯克斯体34×103外膜蛋白基因,评价34×103重组外膜蛋白的免疫保护性.用PCR从我国贝氏柯克斯体分离株的基因组中扩增34×103外膜蛋白基因,用该基因与原核表达质粒重组,构建重组表达质粒;用IPTG诱导重组质粒在大肠杆菌细胞内表达重组蛋白.用重组蛋白皮下接种免疫BALB/c小鼠2次,在加强免疫后的第28天,用ELISA法检测小鼠的血清特异性抗体水平以及作体外脾淋巴细胞增殖试验检查小鼠的特异性细胞免疫水平;用10ID50贝氏柯克斯体腹腔注射攻击免疫小鼠,攻击后第7天病理学检查小鼠脏器的组织病变和染色镜检脾脏的贝氏柯克斯体量.SDS-PAGE和免疫印迹分析证明重组质粒转化的大肠杆菌产生了34×103重组蛋白,重组蛋白能与贝氏柯克斯体感染小鼠血清发生特异性反应.ELISA法检测出免疫小鼠血清中有高滴度的抗重组蛋白抗体,免疫小鼠的体外淋巴细胞增殖水平显著高于非免疫小鼠.组织病理学检查发现免疫小鼠的肺、肝、脾无明显病变,仅个别小鼠脾脏存在少量柯克斯体,而非免疫小鼠的肺、肝、脾病变十分明显,脾脏肿大并含有大量的柯克斯体.重组34×103外膜蛋白具有的免疫保护性,能够诱导机体产生有效的抗贝氏柯克斯体的体液和细胞免疫应答.
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病毒性心肌炎小鼠血清cTnI水平检测与分析
本研究通过CVB3感染BALB/C小鼠建立病毒性心肌炎的动物模型.检测感染后不同时期血清cTnI的变化,与心肌病理改变和心肌细胞坏死率进行对照研究,并与目前临床常用的指标CK-MB作对比,为临床应用该指标诊断心肌损伤提供了实验依据.
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手机电磁辐射对小鼠自由基影响的研究
随着我国移动通信技术的发展,人们对手机的依赖程度越来越大.种种研究表明,手机电磁辐射对人体的危害是存在的,它可能会引起神经、心血管、免疫系统、生殖系统及眼睛的病理改变[1~3].收稿日期通过对手机辐射前后小鼠血清中超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase SOD)、丙二醛(MDA)水平变化的检测及对大脑组织的电镜观察,探讨氧自由基变化与手机辐射对人体造成早期损伤的关系.
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白介素18的研究进展
在内毒素休克小鼠血清中,除有肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素1表达外,还发现γ-干扰素(IFN-γ)有高水平表达.Okamura等[1]对感染疮疱棒状杆菌(P.acnes)小鼠肝脏提取物用脂多糖(LPS)加强刺激,可诱导出使IFN-γ高水平表达的因子.
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抗自身免疫血清对NOD小鼠糖尿病的治疗作用及其机制研究
目的:I型糖尿病的发病与自身免疫反应有关,本研究旨在制备一种抗自身抗体的抗血清,用以验证对I型糖尿病小鼠的治疗作用。方法和结果:我们用亲和层析方法提取纯化6~8周龄I型糖尿病( NOD)小鼠血清中的总IgG。以此总IgG作为抗原与免疫佐剂混合,免疫BALB/c小鼠,制备出抗总IgG的抗血清,我们将它命名为NIgG抗血清。将此抗血清一次性注入发病前的6~8周龄的NOD小鼠体内,观察至32周,发现此抗血清能有效地控制NOD小鼠血糖的增高,降低发病率和死亡率,延迟糖尿病的发生以及控制胰腺中胰岛体积的萎缩。 NIgG治疗的NOD小鼠,32周龄时胰岛体积、胰岛周围炎症浸润和血糖浓度与未经治疗的6~8周龄的NOD小鼠相比,均无显著差异,说明NIgG治疗阻止了NOD小鼠的病情进展。 NIgG抗血清治疗组和对照组脾脏中分泌自身抗体的B淋巴细胞占总B淋巴细胞的百分比在治疗组中下降。结论:NIgG抗血清一次性静脉注射治疗能有效防治NOD小鼠的糖尿病。
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雷公藤多甙对aGVHD小鼠T细胞及相关细胞因子的影响
目的:探讨雷公藤多甙对小鼠移植物抗宿主病的作用.方法:供鼠BALB/C,雌性,受鼠C57BL/6,雄性.无菌取供鼠脾脏及双侧股骨骨髓,制成混合细胞悬液.受鼠在骨髓移植前24 h内应用直线加速器全身照射,总剂量为1 800 cGy,剂量率为200 Gy/min,将制成的混合细胞悬液经尾静脉输给受鼠0.5 mL,含骨髓细胞1×106个,脾淋巴细胞1×107个,制成小鼠aGVHD模型.随机分成5组:同基因移植组,异基因移植组,CsA+MTX组,GTT组,GTT+CsA组.CsA+MTX组受鼠骨髓移植后第1-10 d,每日腹腔注射CsA2.5 mg*kg-1*d-1, 第1、3、5、9 d腹腔注射氨甲蝶呤(7 mg/M2).GTT组受鼠骨髓移植后第1-10 d,每日腹腔注射GTT 5 mg*kg-1*d-1.GTT+CsA组受鼠骨髓移植后第1-10 d,每日腹腔注射GTT2.5 mg*kg-1*d-1、CsA2.5 mg*kg-1*d-1,第11 d处死各组受鼠,用ELISA法检测血清中细胞因子IL-2、TNF-α、IL-4、IL-10的浓度.用流式细胞仪检测脾T淋巴细胞及表面粘附分子的阳性表达率.结果:(1)雷公藤多甙组小鼠11 d生存率明显高于异基因移植组、CsA+MTX组.(2)雷公藤多甙组小鼠CD+3、CD+4、CD+8、CD+4CD11a+、CD+4CD18+、CD+8CD11a+、CD+8CD18+细胞的百分率明显低于异基因移植组.(3)雷公藤多甙组小鼠血清TNFα、IL-2浓度低于、IL-10高于异基因移植组.结论:(1)雷公藤多甙可明显提高aGVHD小鼠的生存率.(2)其机制与:①雷公藤多甙可降低T细胞及亚群数量及其相关粘附分子的表达有关.②雷公藤多甙降低促进aGVHD的细胞因子-TNFα、IL-2的表达,提高抑制aGVHD的细胞因子-IL-10的表达有关.
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两种HCV不同结构基因重组质粒DNA诱导免疫应答的比较研究
目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)包膜基因E1E2,对核心基因C DNA疫苗诱生的免疫应答有无增强作用. 方法 构建包含HCV C或CE1E2基因片段的真核表达载体pHCV-C和pHCV-CE1E2,分别接种于BALB/c小鼠股四头肌(以空载体pcDNA3作为对照),每间 隔2 wk加强免疫1次. 用ELISA法检测免疫小鼠血清中抗HCV C特异性抗体的产生. 以pHCV-C转染并表达HCcAg的Sp2/0细胞为靶细胞,采用51Cr释放试验检测特异性CTL的杀伤作用. 结果 两个实验组免疫的20只小鼠均产生抗HCV C特异性抗体,当效/靶细胞比例为100∶1时,CTL的杀伤率均明显高于对照组(P<0.01);而pHCV-CE1E2与pHCV-C组之间,无论是抗HCV C抗体的滴度还是CTL的杀伤率均无显著性差异(P>0.05). 结论 E1E2基因的加入,并没有增加HCV C基因DNA疫苗诱导的抗HCcAg特异性抗体的滴度和CTL的杀伤作用.(潘伯荣)
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辽东本草牌灵芝提取物孢子粉片增强免疫力功能实验研究
依据卫生部2003年版《保健食品检验与评价技术规范》,辽宁祥云药业研制的“辽东本草牌灵芝提取物孢子粉片”在辽宁省疾病预防控制中心进行了增强免疫力功能实验.在实验室条件下,对送检样品(辽东本草牌灵芝提取物孢子粉片)进行了增强免疫力功能试验,结果表明:送检样品对实验动物体重,体重增重胸腺重/体重比重值无明显影响.1.40 g/kgBW,0.93g/kgBW,实验组能促进二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应形成,各实验组均未能增强ConA诱导小鼠淋巴细胞增殖能力,各实验组均未能提高小鼠抗体生成细胞数量,1.40 g/kgBW实验组能提高小鼠血清的抗体积数,0.93 g/kgBW、0.47 g/kgBW实验组能增强小鼠碳廊清能力,各实验组均未能增强小鼠腹腔巨嗜细胞吞噬鸡红细胞的能力,0.98 g/kgBW实验组能增强小鼠NK细胞活性.
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辽东本草牌人参片增强免疫力功能实验研究
依据卫生部2003年版 《保健食品检验与评价技术规范》,辽宁祥云药业研制的"辽东本草牌人参片"在辽宁省疾病预防控制中心进行了增强免疫力功能实验. 结果表明:送检样品对实验动物体重、体重增重、胸腺重/体重比值、脾重/体重比值无明显影响. 各实验组均能促进二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应形成,各实验组均未能增强ConA诱导小鼠脾淋巴细胞增殖能力,各实验组均未能提高小鼠抗体生成细胞数量,0.50g/kgBW、0.25/kgBW实验组能提高小鼠血清的抗体积数, 各实验组均未能增强小鼠碳廓清能力,各实验组均未能增强小鼠碳廓清能力,各实验组均未能增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力, 0.50g/kgBW、0.25/kgBW 实验组能增强小鼠NK 细胞活性.