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薄层扫描法测定关木通及其制剂中马兜铃酸A的含量
目的:测定关木通及其制剂中马兜铃酸A的含量.方法:薄层扫描反射锯齿法,λ=323nm,狭缝:0.4×0.4nm,Sx=3.结果:回收率99.86%,RSD 2.04%.结论:本法适用于多种含关木通的中成药制剂中马兜铃酸A的含量测定.
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六味地黄丸对关木通减毒作用的初步研究
目的:本实验通过研究六味地黄丸对关木通中马兜铃酸A含量的影响,以初步探讨关木通的解毒问题.方法:关木通与六味地黄丸共煎后用RP-HPLC法测定马兜铃酸A的吸收值,观测其含量的变化情况.结果:加入六味地黄丸后,关木通中马兜铃酸A的含量明显降低.结论:六味地黄丸可显著降低关木通中马兜铃酸A的含量.
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马兜铃酸致大鼠肾小管损伤及对肾组织骨形态发生蛋白7mRNA表达的影响
目的:观察关木通成分马兜铃酸(aristolochic acid,AA)引起的大鼠肾小管损伤,及肾组织骨形成蛋白7(bonemorphogenetic protein-7,BMP-7)Mrna表达水平的变化,探讨马兜铃酸肾病的发病机制.方法:46只Wistar大鼠随机分为正常对照组20只和AA组26只.AA组按AA 20 mg/(kg·d)灌胃关木通浸膏,正常对照组等容量饮用水灌胃.于第4、8和12周末用代谢笼分别留取24 h尿液,检测尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG)活性;腹主动脉取血检测血清肌酐(serum creatinine,SCr)含量;观察肾组织病理的改变及肾小管损伤程度;免疫组化检测肾小管增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达;半定量逆转录聚合酶链式反应法检测肾组织BMP-7 Mrna的表达.结果:与正常对照组比较,用药4、8和12周后AA组大鼠尿NAG活性增加,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),SCr/体质量比值升高(P<0.01).肾脏病理表现为肾小管浊肿、变性和脱落等急性小管间质损伤,随着用药时间延长,肾小管损伤程度进行性加重;AA组大鼠肾小管PCNA增殖指数在用药4周和8周后显著升高(P<0.01),12周后有所下降(P<0.05);用药4周后,AA组大鼠肾组织BMP-7 Mrna表达低于对照组(P<0.05),并随着用药时间延长减少更明显(P<0.01).结论:AA可引起大鼠肾小管损伤,使肾小管再生修复能力下降,抑制BMP-7 Mrna表达.这可能是马兜铃酸肾病发生发展的机制之一.
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温阳活血方上调慢性马兜铃酸肾病大鼠肾组织血管生成素1mRNA表达
目的:观察温阳活血方对慢性马兜铃酸肾病大鼠肾组织血管生成素(angiopoietin,Ang)表达的影响,并探讨其保护作用机制.方法:将28只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和温阳活血方组.模型组大鼠予关木通水煎液10 ml/(kg·d)灌胃,温阳活血方组于模型组基础上,再予温阳活血方30 g/(kg·d)灌胃.20周后,采用实时逆转录聚合酶链式反应方法检测3组大鼠肾组织中Ang-1和Ang-2 Mrna的表达.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠肾组织Ang-1 Mrna表达明显减少(P<0.01),Ang-2 Mrna表达明显升高(P<0.01);与模型组大鼠比较,温阳活血方组大鼠肾组织Ang-1 Mrna表达升高(P<0.01),Ang-2mRNA表达下降,但差异无统计学意义(P>0.05);肾脏病理显示温阳活血方组肾损害较模型组明显减轻.结论:温阳活血方通过上调Ang-1 Mrna的表达发挥对慢性马兜铃酸肾病大鼠肾脏保护作用.
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试论木通的品种毒性用量诸问题
我国药用木通是一味混乱药材,其混乱表现于:①科属品种混乱,有木通科木通,毛茛科木通及马兜铃科木通的多种不同科属的品种.②毒性混乱,木通科木通,毛莨科木通及马兜铃科木通,历来通作无毒认识.③用量混乱,历史上的木通用量以两计算,大用量一次二两不见有毒杀人,现代木通用量一次限在3～6克仍然可引起蓄积中毒.
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前列地尔防治大鼠马兜铃酸肾病纤维化
目的: 观察前列地尔对马兜铃酸肾病(AAN)纤维化的防治作用.方法: Wistar大鼠25只,随机分3组,对照组(n=5)予灌服饮用水10 mL·kg-1·d-1,模型组及治疗组(均n=10)均予关木通水煎剂20 g· kg-1·d-1,共计12 wk.治疗组8 wk后同时予尾静脉注射前列地尔4 μg·kg-1·d-1,共2 wk.12 wk时观察各组大鼠尿素氮(BUN)和肌酐(Cr) 、肾组织转化生长因子β1 (TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)和纤连蛋白(FN)的变化.结果: 模型组大鼠BUN,Cr较对照组和治疗组明显升高(P<0.01);模型组中TGF-β1,CTGF和FN光密度明显高于对照组和治疗组(P<0.05);治疗组大鼠肾脏病理显示肾损害较模型组明显减轻.结论: 前列地尔能使AAN大鼠肾组织TGF-β1,CTGF和FN表达下降,减轻马兜铃酸肾病纤维化程度.
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关木通、川木通和三叶木通的近红外漫反射光谱鉴别
结合近红外漫反射光谱技术与聚类分析法,建立了关木通、川木通和三叶木通的快速鉴别新方法.将39种木通药材样品粉碎后测定近红外漫反射光谱,经二阶导数处理后选取特征谱段,建立聚类分析模型.结果显示,鉴别正确率均在90％以上.
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肾病:发生在服中药之后
有位正值壮年的男子,因肾结石引发肾绞痛,服用了含有中药关木通成分的排石冲剂.20天后,他出现了恶心、呕吐、腹胀等症状.随后尿量日趋减少,双下肢浮肿.各项检查显示,病人出现了急性肾小管坏死.后经血液透析和对症治疗,才逐渐由少尿期进入多尿期,直到1年以后肾功能才基本恢复正常.经计算,他服用排石冲剂期间,累计摄入其中的关木通36克.
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马兜铃酸肾损害及药物干预的实验研究
目的:观察关木通所含马兜铃酸(AA)不同时间致大鼠肾损害及川芎嗪、泼尼松和贝那普利的干预作用. 方法:将雄性SD大鼠随机分为六组,每组24只.正常组(C组)予蒸馏水3 ml/d灌胃,模型组(M组)、泼尼松组(P组)、贝那普利组(B组)、川芎嗪Ⅰ组(LⅠ组)和川芎嗪Ⅱ组(LⅡ组)均予关木通水煎剂(含生药2 g/ml、AA 0.54 mg/ml、AAⅠ 0.46 mg/ml)5 g/(kg*d)灌胃.2h后C组与M组予NS,其余四组分别予泼尼松5 mg、贝那普利1.7 mg、川芎嗪各50 mg、150 mg/(kg*d)灌胃.120天和180天后检测肾功能及血常规,并观察组织病理和超微病理.120天时每组处死7只,180天时处死剩余大鼠. 结果:随着时间的延长,大鼠血肌酐与血尿素氮及尿NAG与24h尿蛋白定量逐渐升高,而血红蛋白(Hb)与红细胞比容(HCT)逐渐降低.M组与C组比差异非常显著(P＜0.001);其余四组与M组比较差异显著(P＜0.05),其中P组和LⅡ组降低或升高尤为明显.C组为正常肾组织表现.M组光镜: 120天可见肾小管上皮细胞片状空泡变性、肿胀,以近髓部小管病变较显著,刷状缘消失,大部分肾小管基膜(TBM)裸露和(或)断裂,部分肾间质有轻度灶性炎细胞浸润和部分肾小球可见轻度节段硬化;180天病变加重,小管上皮细胞呈大片状空泡变性,以皮质部小管病变较明显,部分小管萎缩,大部分肾间质有胶原纤维增生.电镜: 120天可见近曲小管上皮细胞空泡变性、坏死,核固缩,线粒体普遍肿胀、大小不等、脊紊乱,溶酶体增多,肾小球节段硬化;180天除上述病变加重外,近曲小管上皮细胞脂肪变性、TBM增厚,肾间质可见成纤维细胞增生、大量胶原纤维和大量淋巴细胞,肾小球基膜(GBM)增厚、节段硬化.其余四组病变均有减轻,P组和LⅡ组减轻更为明显. 结论:①关木通所含AA可导致大鼠急慢性肾损害,其病理特点为:120天时是急性肾小管坏死(ATN),180天时为早期肾小管间质纤维化(TIF);②川芎嗪、泼尼松和贝那普利均能减轻大鼠ATN和早期TIF模型的病变而具有肾脏保护作用.
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关木通在"龙胆泻肝丸"中的毒性见解
龙胆泻肝丸是中医常用的传统药物,在临床上主要用于肝胆湿热、头晕耳鸣等症.近期国内不断有报道患者因服用龙胆泻肝丸而造成马兜铃酸肾病,造成肾功能衰竭,引起了我院高度重视,并在中医科开展了龙胆泻肝丸临床合理应用的讨论.
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木通的品种、剂量与不良反应关系
木通为兜铃科植物东北马兜铃(Aris to lochia manshuriensis kon)的干燥藤茎,商品名关木通,有清心火、利小便、通经下乳之功效;毛茛科植物小木通(Clematis armadiiFranch)或绣球藤(Clematis montana Buch - Ham)的干燥藤茎,商品名为川木通,具清热利尿、通经下乳的功效.以前者应用广,后者次之.木通的来源较为复杂,除关木通、川木通外,尚有木通科植物互叶木通、三叶木通、白木通等.
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关木通药材中马兜铃酸A的药动学研究
目的采用高效液相色谱法测定血浆中马兜铃酸A的浓度,研究小鼠灌胃给予关木通提取液后体内马兜铃酸A的药动学特点.方法采用DiamonsilTMC18色谱柱(250mm ×4.6mm,5μm),以甲醇-水-冰乙酸(72:27:1)为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长315nm.小鼠按马兜铃酸A 4.0mg·kg-1灌胃给予关木通提取液后,经HPLC法测定血浆药物浓度.结果马兜铃酸A在0.1098～3.66mg·L-1的浓度范围内线性关系良好(r=0.9998,n=7),低检测浓度为0.0183mg·L-1.马兜铃酸A高、中、低3种不同浓度的平均回收率及相对标准偏差分别为97.07%(1.0%),97.10%(1.1%)和99.36%(0.8%),该法的日内和日间精密度RSD值均小于9.3%.小鼠给药后,药动学房室模型为一室模型,主要药动学参数T1/2(ka),T1/2(ke),Tmax,AUC,Cmax,CL/F(s),V/F(c)分别为:3.94,16.29,10.65min,188.88(mg/L)·min,2.84mg/L,0.038mg/kg/min/(mg/L),0.89(mg/kg)/(mg/L).结论本实验建立了关木通药材中马兜铃酸A血药浓度的HPLC测定方法,阐明了马兜铃酸A的药动学特征.
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与甘露消毒丸相关的泌尿系肿瘤十例分析
目的:探讨与服用甘露消毒丸相关的泌尿系肿瘤患者的临床病理特点.方法:分析长期服用甘露消毒丸并存在泌尿系恶性肿瘤的10例患者的临床病理特点,并比较服药导致的尿毒症患者与同期住院的其他尿毒症患者的肿瘤发生率.结果:10例患者主要表现为反复发作的全程均一性肉眼血尿,病理检查确诊为泌尿系移行上皮细胞癌:7例膀胱癌、2例肾盂癌及1例肾盂输尿管癌,都伴慢性间质性肾炎,9例患者处于尿毒症终末期,1例肾功能正常.服药人群的肿瘤发生率明显高于普通尿毒症组(分别为32.1%和2.6%),差别有高度统计意义(P＜0.001).结论:长期服用甘露消毒丸者泌尿系恶性肿瘤发生率高,可能与其中所含的马兜铃酸成分有关.对存在正常形态血尿的服药患者,尤其是合并慢性间质性肾炎患者,必须高度警惕肿瘤可能.
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关木通与木通的鉴别
关木通曾收载于<中国药典>2000年版一部,因其毒副作用大,为保证人体用药安全,同时也为纠正历史上木通品种的混用问题,国家药品监督管理局国药监注[2003]121号文决定取消关木通的药用标准,而用<中国药典>2000年版2002年增补本中收载的木通替换关木通.
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1例关木通致Ⅰ型肾小管酸中毒患者诊治分析
关木通中毒所致急性马兜铃酸肾病(aristolochic acid nephropathy,AAN)是服用大剂量关木通等马兜铃中草药后出现以肾小管-间质损害为主的一类继发性肾脏疾病,因其发病多与马兜铃酸有关,故称其为"ANN".按其临床表现及病理特点主要分3型,即急性AAN、慢性AAN、肾小管酸中毒ANN.笔者收治1例肾小管酸中毒ANN,报道如下.
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关木通减毒方法的研究进展
由关木通和广防己等含有马兜铃酸的马兜铃属植物引起的肾病受到了世界各国的关注,我国药品监督管理部门也将关木通等列为了禁用药.但关木通清心火、利小便、通经下乳的功效,经过中医临床长期实践,得到了广泛应用和认可.如何通过关木通的合理配伍或其它方法的减毒使用,让其在防治疾病中继续发挥作用,本文就此作一综述.
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关木通与其复方肾毒性比较及相关毒性成分测定
马兜铃属(Aristolochia)植物关木通,使用不当可以引起肾脏损害已有临床报道和实验证实,中医用药多复方配伍应用,单味关木通与其复方应用是否具有相同的毒性?选用龙胆泻肝丸和导赤散与单味药关木通进行肾毒性比较实验,观察单味及复方配伍对实验性大鼠肾损伤作用的功能、病理改变情况，并采用高效液相色谱法检测关木通毒性成分马兜铃酸Ⅰ(AA-Ⅰ)含量.
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木通及其类似品种辨析
木通是临床上常用的利水药之一,历史上曾与通草同称混用.根据<中药大辞典>中记载,木通应为木通科植物木通和同科植物白木通、三叶木通.以上三种植物的藤茎为药用木通.也有报道木通科木通应是传统药用木通[1].但是在2000年版的中国药典里,仅收载了马兜铃科植物木通马兜铃(关木通)和毛茛科植物小木通和绣球藤(川木通),未收载木通科木通.除以上几种以外,在我国不同地区的药材流通中还存在有很大的品种差异,如将与木通药材形态和功效相类似的药物女萎、大木通、山木通、淮通等都作为木通或通草用于临床,个别地区还有将海风藤误用为木通等等.由此不断有"木通"引起临床不良反应的报道.本文对木通及其类似品进行辨析,为临床合理用药提供参考.
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高效液相色谱法测定关木通药材中马兜铃酸A的含量
目的 建立关木通药材中马兜铃酸A含量的测定方法.方法 采用高效液相色谱(HPLC)法测定,色谱柱为Phenomenex C18柱,以甲醇:0.1%冰醋酸溶液(70∶30)为流动相,流速1.0ml·min-1,柱温为25℃,检测波长为257 nm.结果 马兜铃酸A在4～36μg·mL-1范围内峰面积与进样量呈良好线性关系(r=0.9999),回归方程为y=78.764x-30.909,平均回收率为100.59%,RSD=0.91%.日内稳定性RSD=1.3%.结论 本法简单,准确,快捷,可作为关木通药材中中马兜铃酸A的含量测定方法.
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中药关木通化学成分的研究
目的分离鉴定关木通石油醚提取物化学成分.方法采用硅胶柱色谱技术对化合物进行分离纯化,用光谱方法进行结构鉴定.结果分离鉴定了6个化合物:stearic acid(1),β-sitosterol(2),acetyl-β-sitosterol(3),Aristolochic acid Ⅰ(4),10-denitro-Aristolochic acid Ⅱ(5),daucosterol(6).结论 acetyl-β-sitosterol,10-denitro-Aristolochic acid Ⅱ为首次从关木通中分得.
